乙型肝炎的實驗室診斷

1、乙型肝炎的實驗室診斷血清標志物對于乙肝的病原學診斷最初、也是最常用的是乙肝病毒血清標志物（ HBVM ）檢測。 HBVM 主要包括：兩對半（HBsAg 、HBsAb 、HBeAg 、HBeAb 、HBcAb ）、 HBxAg 、 H BxAb 、前 S 抗原及抗體、DNA 多聚酶（DNA P）及抗體等。通過檢測HBVM 可以間接的多角度了解患者HB V 感染、復(fù)制以及病情恢復(fù)情況。常用血清標志物是兩對半，臨床意義如下：1.表面抗原（HBsAg ）：位于病毒外殼表面，由 HBV 基因組 S 區(qū)和前 S 區(qū)基因編碼，完整的大分子HBsAg 是完整病毒的必需條件。血清 HBsAg 的出現(xiàn)，意味著HB

2、V 的現(xiàn)癥感染，是乙肝血清學檢查最重要的指標。 H BsAg 雖然只是HBV 存在的間接指標，但診斷乙肝的最常用也是最重要的指標， 主要因它出現(xiàn)最早，一般在感染后3 周出現(xiàn)，有利于早期診斷。第二，它持續(xù)時間長，急性患者至少持續(xù)5 周，最長可持續(xù)5 個月，并且在血液中的釋放量大，非常容易檢測。前 S1 和前 S2 緊隨 HBsAg 而出現(xiàn)在血流中，并與 HBeAg和 HBV DNA 相關(guān)。2. 表面抗體（ HBsAt ） :由于病毒 HBsAg 抗原性誘發(fā)機 體產(chǎn)生的保護性抗體， HBsAb 是一種保護系抗體，在 HBsAg 消失后數(shù)周后出現(xiàn)，并可持續(xù)多年存在。 HBsAb 是所有乙肝要關(guān)抗體中

3、出現(xiàn)最晚的。常與HBcAb 同時存在，而很難與HBsAg 同時被檢出來?？骨癝1 抗體出現(xiàn)于潛伏期，是所有抗體中出現(xiàn)最早的?？筍3 抗體出現(xiàn)在急性期，處于HBV 復(fù)制 終止前后，提示有清除病毒的作用。3. e 抗原（ HBeA? : HBeAg 是一種可溶性蛋白抗原，一般僅見于 HBsAg 陽性血清中，陰性中偶見。HBeAg 出現(xiàn)在血中稍后于 HBsAg 同時消失很快，所以窗口期也不能出現(xiàn)。HBeAg 是由 HBV- DNA 開放讀碼框前C 區(qū)編碼，與 HBV 的活動性復(fù)制密切相關(guān)，是HBV 傳染性的重要指標。HBeAg 是 HBV 復(fù)制的標記，而HBeAg 是 HBV 正在復(fù)制的標記。4.

4、e 抗體（ HBeAb : 在病毒復(fù)制過程中， e 抗原暴露誘發(fā)機體產(chǎn)生。有一定保護作用。HBeAt 緊接著 HBeAg 消失而出現(xiàn)，表示HBV 復(fù)制已經(jīng)減少，傳染性降低。HBeAb 持續(xù)時間不長，幾月后逐漸消退。血清中HBeAb 的檢出意味著病毒復(fù)制中止或減少。5. 核心抗體（ HBeAb : 由病毒 C 區(qū)編碼的 HBeAg 誘導(dǎo)產(chǎn)生，沒有保護作用。由于HbcAg 位于病毒內(nèi)部，一般方法不能檢出，在血清中只能檢測到HbcAtx HbeAb可以作為 H BV感染的標志。血清中的檢出HBcAb 表明病毒正在或曾經(jīng)進行復(fù)制。常說的 HBcAb 般是指 HBcAb- IgG, 是最用的兩對半中最先

5、出現(xiàn)的抗體，一般在HBsAg 出現(xiàn)后 2- 4 周出現(xiàn)。當 HBsAg 消失，而 HBsAb 還沒有出現(xiàn)時，常只能檢出HBcAb 因此臨床將此階段稱為窗口期。HBcAb 和 HBsAb 樣也可以持續(xù)多年存在。 HBcAb- IgM 僅出現(xiàn)在急性期，具有鑒別診斷意義.乙型肝炎病毒DNA 聚合酶（ DNAP DNAP位于 HBV 核心部分，有逆轉(zhuǎn)錄酶活性，是HBV 復(fù)制的直接指標。潛伏期 h 急性期恢復(fù)期|HB 斶TIjLI1二 LI.II二 i二1臨尿癥狀V""如基因診斷隨著分子生物學技主的發(fā)展，應(yīng)用DNA分子雜交和 PCR 技術(shù)可以檢測出血清、體液和組織中HBV DNA 的

6、存在情況，是直接、準確的病原學診斷證據(jù)。使用PCR 及定量 PCR 技術(shù)檢測 HBV DNA 是乙肝診斷的重大進步。1. HBV DNA 僉測或定量檢測（病毒載量）：（ 1）靈敏度提高： WAN 等對 206 名 HBsAg 陰性、 ALT 陰性的健康供血者用PCR 方法檢測 HBV DNA 檢出陽性 9 例， 占4% 這說明 HBsAg 雖然是 HBV 的感染的標志，但由于S 基 因的變異或低水平表達，而常規(guī)方法難以檢出，會導(dǎo)致漏檢。而使用 PCR 能較好的彌補(2) 與 HBVM 吉合使用，可以對臨床提供更為有效、更有價值的信息：基因?qū)W診斷與HBVM 不是矛盾的，各有優(yōu)勢，在乙肝的診治過程

7、結(jié)合使用更具臨床價值。如：臨床有資料顯示，對于HBV DNA 陽性、 HBeAg 陽性的慢性乙肝病人病情較HBV DNA 陽性、 HbeAb 陰性的病人重，自然緩解率也較低。(3) 動態(tài)監(jiān)測病毒的載量是療效監(jiān)測的重要指標：乙肝療效監(jiān)測以前用的是指標血清學“兩對半”檢測，但由于血清學指標反應(yīng)相對滯后、靈敏度較差，并不是理想的療效監(jiān)測指標。近年隨著定量PCR 在臨床上的應(yīng)用，連續(xù)監(jiān)測H BV DNA 血清載量已經(jīng)成為療效監(jiān)測的理想指標。臨床上一般認為用藥后 HBV DNA 下降到 10 人 5 拷貝 /ml 以下為對藥物完全應(yīng)答；定量下降大于2 個數(shù)量級為對藥物部分應(yīng)答；未達上述標準為無應(yīng)答。常見的兩對半結(jié)果HBeAbbHBsAg HBsAb (j HBeAHBcA病程-未感染+-感染早期+-+-感染初期+-+-+急性或慢性乙型肝炎，高+-+-+-+-+-+ -+-傳染性急性、慢性乙型肝炎或+HbsAg 攜帶者急性乙肝趨向恢復(fù)或