大黃素對(duì)大鼠牙周組織抗氧化作用

1、大黃素對(duì)大鼠牙周組織抗氧化作用    【摘要】  目的 探討大黃素對(duì)實(shí)驗(yàn)性牙周炎大鼠牙周組織的抗氧化作用。方法 將牙周炎大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、碘甘油治療組和大黃素治療組，均用大黃素局部涂抹(3次/d),共30d。治療結(jié)束后測(cè)定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽過(guò)氧化酶(GSHPx)活力。結(jié)果 大黃素能顯著提高SOD活力，降低血清中MDA含量，并增加GSHPx活力。結(jié)論 大黃素作為一種有效的抗氧化成分，對(duì)恢復(fù)牙周組織健康有明顯效果?！娟P(guān)鍵詞】  大黃素研究表明1，氧源性自由基(Oxygen derived

2、freeradival,ODFR)參與牙周病的病理過(guò)程，是牙周損傷的重要分子機(jī)制。大黃有效成分蒽醌衍生物主要有大黃素、大黃酸、蘆薈大黃素和大黃素甲醚等。其中，大黃素抗菌譜廣，抗菌活性強(qiáng)，對(duì)肺炎雙球菌、鏈球菌、白喉?xiàng)U菌、枯草桿菌、炭疽桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌、霍亂弧菌及多種常見(jiàn)的致病性真菌均有較強(qiáng)的抗菌作用，并具有抗炎活性2。本分文析了大黃素對(duì)大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽氧化酶(GSHPx)活力以及丙二醛(MDA)含量的影響，以期進(jìn)一步闡明大黃素預(yù)防和治療牙周炎的作用機(jī)制。1  材料與方法11  樣品來(lái)源及純度  大黃素(中國(guó)藥品生物制品檢定所)，純

3、度為98%，按參考文獻(xiàn)3配制成01mg/ml大黃素溶液。12  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及模型制備4  80只SD大鼠(黑龍江省藥品檢驗(yàn)所動(dòng)物室)，體重200230g，雌雄各半。隨機(jī)取出14只作為正常對(duì)照組，其余大鼠以2%戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔內(nèi)注射麻醉。直徑02mm結(jié)扎鋼絲結(jié)扎雙側(cè)第一磨牙一圈，每周復(fù)查2次。結(jié)扎7d后，于股四頭肌內(nèi)注射以045ml生理鹽水稀釋的125mg潑尼松龍，隔日1次，共8次。選取造模成功的42只SD大鼠隨機(jī)分3組，模型組、碘甘油治療組和大黃素治療組，每組14只。在鼠上頜第1，第2磨牙之間頰腭側(cè)病變處分別注射01mg/ml大黃素溶液各02ml,30d后均采用摘

4、除眼球法取血，自然凝固35h,3000r/min離心20min,吸取血清冷凍保存，待測(cè)SOD、MDA和GSH-Px含量。13  檢測(cè)方法  (1)血清SOD活力測(cè)定：采用亞硝酸鹽法；(2)血清過(guò)氧化脂質(zhì)的測(cè)定：采用硫代巴比妥酸(TBA)法；(3)血清GSH-Px活力測(cè)定：采用硫代二硝基苯甲酸(DTNB)直接法。14  統(tǒng)計(jì)分析  采用SPSS 120軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料的組間差異用T檢驗(yàn)。2  結(jié)果21  大黃素對(duì)血清中SOD活性的影響  各組SOD測(cè)定結(jié)果為，模型組(420±457)，碘甘油治療組(488&

5、#177;526)，大黃素治療組(476±486)，正常對(duì)照組(501±338)U/L。正常組、碘甘油治療組和大黃素治療組血清SOD活力與模型組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<005)，表明大黃素能顯著提高牙周炎大鼠血清SOD活力。血清SOD活力與碘甘油治療組和正常組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>005)。22  大黃素對(duì)血清MDA含量的影響  各組MDA測(cè)定結(jié)果為，模型組(71±11)，碘甘油治療組(483±065)，大黃治療組(512±067)，正常對(duì)照組(456±056)mmol/L。正常組、碘甘油治

6、療組和大黃素治療組血清MDA含量均與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<005)，大黃素能顯著降低牙周炎大鼠血清MDA含量，且血清MDA含量與碘甘油治療組和正常組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>005)。23  大黃素對(duì)血清中GSH-Px活力的影響  各組GSHPx測(cè)定結(jié)果為，模型組(487±54)，碘甘油治療組(785±855)，大黃治療組(732±83)，正常對(duì)照組(803±9.7)U/L。正常組、碘甘油治療組和大黃素治療組血清GXH-Px活力與模型組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<005)，表明大黃素能顯著提高牙周炎大

7、鼠血清GXH-Px活力，血清GXH-Px活力與碘甘油治療組和正常組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>005)。3  討論在牙周炎活動(dòng)期，局部毛細(xì)血管通透性升高，導(dǎo)致牙齦出血、腫痛，同時(shí)有大量吞噬細(xì)胞進(jìn)入局部組織，在吞噬細(xì)胞的膜結(jié)構(gòu)中存在產(chǎn)生氧自由基的酶系統(tǒng)，該酶可被細(xì)菌及骨毒素、抗原抗體復(fù)合物等激活，產(chǎn)生吞噬作用，使耗氧量激增。其增加的耗氧量基本上都用于生成超氧陰離子。通過(guò)自由基鏈反應(yīng)又生成其他自由基，引起脂質(zhì)過(guò)氧化，形成過(guò)多脂質(zhì)過(guò)氧化物，損傷生物膜。脂質(zhì)過(guò)氧化物分解產(chǎn)物MDA的量可反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的程度，間接反映出細(xì)胞損傷的程度。SOD能清除超氧陰離子，保護(hù)細(xì)胞免受損傷。在牙周

8、炎活動(dòng)期，局部組織產(chǎn)生大量自由基，由于強(qiáng)氧化作用損傷SOD活力或由于超氧陰離子生成增多，使SOD消耗增加，因而SOD活力下降。GSH-Px的主要功能是清除各種生物大分子的過(guò)氧化物，因此，在牙周炎癥期GSH-Pxr活力明顯下降5。大黃素作為一種傳統(tǒng)中藥，具有抗炎作用，同時(shí)還具有清除氧自由基的抗氧化作用。大黃素對(duì)大鼠的腦勻漿脂質(zhì)過(guò)氧化引起的極微弱化學(xué)發(fā)光均有猝滅作用，構(gòu)效關(guān)系提示大黃素臨位與中位羥基取代是該類(lèi)物質(zhì)抗氧化所必需的6。本實(shí)驗(yàn)除了證實(shí)牙周炎癥時(shí)，SOD、GSH-Px活力會(huì)下降，而MDA含量會(huì)升高。同時(shí)也證明大黃素除了具有抗菌作用外，還可能通過(guò)增加血清SOD和GSH-Px活力，減少M(fèi)DA含

9、量，對(duì)牙周組織起到雙重保護(hù)作用?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1 Waddington RJ,Moseley R,Embery G.Reactive oxygen species:a potential role in the pathogenesis of periodontal diseasesJ.Oral Dis,2000,6(3):138-151.2 Kuo YC,Tsai WJ,Meng HC,et al.Immune reponses in human measngial cells regulates by emodin from polygonum OhkwiJ.Life Sci,2001，68(11)：1271-1286.3 王文風(fēng)，陳聰敏，陳瓊?cè)A，等.大黃的生化學(xué)研究XXXIX.蒽醌衍生物抗厭氧菌實(shí)驗(yàn)研究J.中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，1990，21：354-537.4 章魁華，于世鳳.實(shí)驗(yàn)口腔病理學(xué)M.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：135-401.5 Stadtman ER.Protein oxidation and agingJ.Free Radic Res,2006,40(12):1250-1258.6 Huang SS,Yeh SF,Hon