總糖實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告示范文本 | Excellent Model Text 資料編碼：CYKJ-FW-292編號(hào)：_總糖實(shí)驗(yàn)報(bào)告編輯：_日期：_單位：_總糖實(shí)驗(yàn)報(bào)告用戶指南：該報(bào)告資料適用于任務(wù)完成后進(jìn)行全面的總結(jié)，從中深入細(xì)致地回顧、檢查，找出成績(jī)與缺點(diǎn)、勝利與失敗、經(jīng)驗(yàn)與教訓(xùn)，并在此基礎(chǔ)上對(duì)前段工作作出客觀評(píng)價(jià)，使得所有人員對(duì)問(wèn)題的認(rèn)識(shí)更一致，思想更統(tǒng)一?？赏ㄟ^(guò)修改使用，也可以直接沿用本模板進(jìn)行快速編輯。糖在我們?nèi)粘Ｉ钪须S處可見(jiàn)，我們吃的米飯、水果、零食中或多或少都含有一些糖類(lèi)。同時(shí)，糖也是我們維持機(jī)體運(yùn)動(dòng)所必不可少的物質(zhì)，沒(méi)有了它，就沒(méi)有了能量的來(lái)源。我們這次便走進(jìn)實(shí)驗(yàn)室探索糖類(lèi)的奧秘。本次實(shí)驗(yàn)我

2、們將用3,5二硝基水楊酸法測(cè)定總糖和還原糖中的含糖量。本次實(shí)驗(yàn)中，我們除了要掌握還原糖和總糖的測(cè)定基本原理還要學(xué)習(xí)比色法測(cè)定還原糖的操作方法以及分光度法測(cè)定的原理和方法。首先，讓我們一起來(lái)了解一下它們的測(cè)定方法吧。還原糖的測(cè)定是糖定量測(cè)定的基本方法。還原糖是指含有自由醛基或酮基的糖類(lèi)，單糖都是還原糖，雙糖和多糖不一定是還原糖，其中乳糖和麥芽糖是還原糖，蔗糖和淀粉是非還原糖。利用糖的溶解度不同，可將植物樣品中的單糖、雙糖和多糖分別提取出來(lái)，對(duì)沒(méi)有還原性的雙糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有還原性的單糖進(jìn)行測(cè)定，再分別求出樣品中還原糖和總糖的含量（還原糖以葡萄糖含量計(jì)）。還原糖在堿性條件下加熱被氧

3、化成糖酸及其它產(chǎn)物，3,5二硝基水楊酸則被還原為棕紅色的3氨基5硝基水楊酸。在一定范圍內(nèi)，還原糖的量與棕紅色物質(zhì)顏色的深淺成正比關(guān)系，利用分光光度計(jì)，在540nm波長(zhǎng)下測(cè)定光密度值，查對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算，便可求出樣品中還原糖和總糖的含量。由于多糖水解為單糖時(shí)，每斷裂一個(gè)糖苷鍵需加入一分子水，所以在計(jì)算多糖含量時(shí)應(yīng)乘以0.9。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、掌握還原糖和總糖的測(cè)定的基本原理2、學(xué)習(xí)比色法測(cè)定還原糖的操作方法 3、學(xué)習(xí)分光光度法測(cè)定的原理和方法二、實(shí)驗(yàn)原理還原糖的測(cè)定是糖定量測(cè)定的基本方法。還原糖是指含有自由醛基或酮基的糖類(lèi)，單糖都是還原糖，雙糖和多糖不一定是還原糖，其中乳糖和麥芽糖是還原糖，蔗糖和

4、淀粉是非還原糖。利用糖的溶解度不同，可將植物樣品中的單糖、雙糖和多糖分別提取出來(lái)，對(duì)沒(méi)有還原性的雙糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有還原性的單糖進(jìn)行測(cè)定，再分別求出樣品中還原糖和總糖的含量（還原糖以葡萄糖含量計(jì)）。還原糖在堿性條件下加熱被氧化成糖酸及其它產(chǎn)物，3,5二硝基水楊酸則被還原為棕紅色的3氨基5硝基水楊酸。在一定范圍內(nèi)，還原糖的量與棕紅色物質(zhì)顏色的深淺成正比關(guān)系，利用分光光度計(jì)，在540nm波長(zhǎng)下測(cè)定光密度值，查對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算，便可求出樣品中還原糖和總糖的含量。由于多糖水解為單糖時(shí)，每斷裂一個(gè)糖苷鍵需加入一分子水，所以在計(jì)算多糖含量時(shí)應(yīng)乘以0.9。三、材料與器具的準(zhǔn)備。實(shí)驗(yàn)材料：面粉

5、。 實(shí)驗(yàn)試劑（1）、1mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液準(zhǔn)確稱(chēng)取80烘至恒重的分析純葡萄糖100mg，置于小燒杯中，加少量蒸餾水溶解后，轉(zhuǎn)移到100mL容量瓶中，用蒸餾水定容至100mL，混勻，4冰箱中保存?zhèn)溆?。?）、3,5二硝基水楊酸（DNS）試劑將6.3g DNS和262mL 2M NaOH溶液，加到500mL含有185g酒石酸鉀鈉的熱水溶液中，再加5g結(jié)晶酚和5g亞硫酸鈉，攪拌溶解，冷卻后加蒸餾水定容至1000mL，貯于棕色瓶中備用。（3）、碘碘化鉀溶液：稱(chēng)取5g碘和10g碘化鉀，溶于100mL蒸餾水中。 （4）、酚酞指示劑：稱(chēng)取0.1g酚酞，溶于250mL 70%乙醇中。 （5）、6M HCl和

6、6M NaOH各100mL。 實(shí)驗(yàn)器材（1）具塞玻璃刻度試管：20mL×11（2）大離心管：50mL×2（3）燒杯：100mL×1 （4）三角瓶：100mL×1 （5）容量瓶：100mL×3（6）刻度吸管：1mL×1；2mL×2；10mL×1 （7）恒溫水浴鍋 （8）沸水浴 （9）分光光度計(jì)分光光度計(jì)的基本原理是溶液中的物質(zhì)在光的照射下，產(chǎn)生了對(duì)光吸收的效應(yīng)，物質(zhì)對(duì)光的吸收是具有選擇性的。各種不同的物質(zhì)都具有其各自的吸收光譜，因此當(dāng)某單色光通過(guò)溶液時(shí)，其能量就會(huì)被吸收而減弱，光能量減弱的程度和物質(zhì)的濃度有一定的比例

7、關(guān)系，也即符合比色原理LambertBeer's law:數(shù)學(xué)表達(dá)式:A=lg(1/T)=KCLA為吸光度T為透射率,是投射光強(qiáng)度比上入射光強(qiáng)度C為吸光物質(zhì)的濃度 L為吸收層厚度 K為吸收系數(shù) 物理意義是當(dāng)一束平行單色光垂直通過(guò)某一均勻非散射的西光物質(zhì)時(shí),其吸光度A與吸光物質(zhì)的濃度C及吸收層厚度L成正比.四、實(shí)驗(yàn)步驟。器材與材料準(zhǔn)備完畢之后，便開(kāi)始按照以下步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。首先，制作葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線。取6支20mL 具塞刻度試管編號(hào)，按下表分別加入濃度為1mg/mL 的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液、蒸餾水和3,5二硝基水楊酸（DNS）試劑，配成不同葡萄糖含量的反應(yīng)液。接下來(lái)，提取還原糖。準(zhǔn)確稱(chēng)取2.00g

8、食用面粉，放入100mL 燒杯中，先用少量蒸餾水調(diào)成糊狀，然后加入50mL 蒸餾水，攪勻，置于50恒溫水浴中保溫20min，使還原糖浸出。過(guò)濾，將濾液收集在100ml容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，混勻，作為還原糖待測(cè)液。緊接著，提取總糖。準(zhǔn)確稱(chēng)取1.00g食用面粉，放入100mL三角瓶中，加15mL蒸餾水及10mL 6M HCl，置沸水浴中加熱水解30min（水解是否完全可用碘碘化鉀溶液檢查）。待三角瓶中的水解液冷卻后，加入1 滴酚酞指示劑，用6mol/LNaOH 中和至微紅色，用蒸餾水定容在100mL容量瓶中，混勻。將定容后的水解液過(guò)濾，取濾液10mL，移入另一100mL容量瓶中定容，混勻，作為總糖待測(cè)液。然后，取4支20mL 具塞刻度試管，編號(hào)，6、7、8、9，按下表所示分別加入待測(cè)液和顯色劑。最后，用分光光度計(jì)進(jìn)行比色。先將機(jī)