臨床檢驗(yàn)方法確認(rèn)與性能驗(yàn)證

1、精選ppt1臨床檢驗(yàn)方法確認(rèn)與性能驗(yàn)證臨床檢驗(yàn)方法確認(rèn)與性能驗(yàn)證貴陽(yáng)市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科貴陽(yáng)市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科張正君張正君精選ppt2臨床檢驗(yàn)方法確認(rèn)與性能驗(yàn)證臨床檢驗(yàn)方法確認(rèn)與性能驗(yàn)證o概念概念o目的目的o具體操作具體操作o其他其他精選ppt3一一.概念概念o確認(rèn)（確認(rèn)（validation）o驗(yàn)證（驗(yàn)證（verification）精選ppt4確認(rèn)（確認(rèn)（validation）o在實(shí)驗(yàn)室當(dāng)前條件下，證實(shí)所得檢驗(yàn)結(jié)果是否可以滿足臨床需要，能為患者提供可靠的的臨床結(jié)果過(guò)程。本質(zhì)上實(shí)際就是誤差評(píng)價(jià)（error assessment），如果誤差太大將會(huì)造成結(jié)果不正確的解釋！o確認(rèn)的手段應(yīng)是是實(shí)際的

2、或是模擬的！精選ppt5驗(yàn)證（驗(yàn)證（verification）o實(shí)驗(yàn)室按廠商說(shuō)明的方法能否得到預(yù)期結(jié)果o驗(yàn)證的手段可以是下述活動(dòng)，如：變換方法進(jìn)行計(jì)算；將新設(shè)計(jì)規(guī)范與已證實(shí)的類似設(shè)計(jì)規(guī)范進(jìn)行比較；進(jìn)行試驗(yàn)和演示；發(fā)布文件前的評(píng)審。精選ppt6確認(rèn)確認(rèn)（validation） 通過(guò)提供客觀證據(jù)對(duì)特定對(duì)特定的預(yù)期用途或應(yīng)用要求的預(yù)期用途或應(yīng)用要求已得到滿足的認(rèn)定。注：“已確認(rèn)”一詞用于表示相應(yīng)的狀態(tài)。確 認(rèn)所使用的條件可以是實(shí)際的或是模擬的。驗(yàn)證驗(yàn)證（verification） 通過(guò)提供客觀證據(jù)對(duì)規(guī)定規(guī)定要求要求已得到滿足的認(rèn)定注： “已驗(yàn)證”一詞用于表示相應(yīng)的狀態(tài)。認(rèn)定可包括下述活動(dòng)，如：變換方

3、法進(jìn)行計(jì)算；將新設(shè)計(jì)規(guī)范與已證實(shí)的類似設(shè)計(jì)規(guī)范進(jìn)行比較；進(jìn)行試驗(yàn)和演示；發(fā)布文件前的評(píng)審。精選ppt7ISO15189的概念的概念確認(rèn)確認(rèn)（validation） 通過(guò)提供客觀證據(jù)對(duì)特定對(duì)特定的預(yù)期用途或應(yīng)用要求的預(yù)期用途或應(yīng)用要求已得到滿足的認(rèn)定。注：“已確認(rèn)”一詞用于表示相應(yīng)的狀態(tài)。確 認(rèn)所使用的條件可以是實(shí)際的或是模擬的。驗(yàn)證驗(yàn)證（verification） 通過(guò)提供客觀證據(jù)對(duì)規(guī)定規(guī)定要求要求已得到滿足的認(rèn)定注： “已驗(yàn)證”一詞用于表示相應(yīng)的狀態(tài)。認(rèn)定可包括下述活動(dòng)，如：變換方法進(jìn)行計(jì)算；將新設(shè)計(jì)規(guī)范與已證實(shí)的類似設(shè)計(jì)規(guī)范進(jìn)行比較；進(jìn)行試驗(yàn)和演示；發(fā)布文件前的評(píng)審。精選ppt8二二.目的

4、目的o結(jié)果互認(rèn)結(jié)果互認(rèn)o醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室管理辦法醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室管理辦法oCLIA88oCNAS-CL02精選ppt9精選ppt10精選ppt11精選ppt12精選ppt13精選ppt14三.具體操作（一）統(tǒng)計(jì)學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)（二）檢驗(yàn)方法分類（三）方法的選擇（四）常用物質(zhì)（五）一些基本術(shù)語(yǔ)（六）質(zhì)量規(guī)范（七）具體操作精選ppt15（一）統(tǒng)計(jì)學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)o概述o臨床檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的分類o統(tǒng)計(jì)方法的分類o隨機(jī)變量及其分布o(jì)正態(tài)分布o(jì)抽樣分布o(jì)大數(shù)定律和中心極限定律o平均數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)差o均數(shù)的抽樣誤差與t分布o(jì)兩均數(shù)差別的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義檢驗(yàn)o方差分析o直線回歸與相關(guān)o觀察值一致性精選ppt16（二）檢驗(yàn)方法分類（二）檢

5、驗(yàn)方法分類o決定性方法決定性方法（ definitive method ）： 經(jīng)詳盡研究尚未發(fā)現(xiàn) 不準(zhǔn)確度不準(zhǔn)確度或不確定性不確定性原因的方法； o參考方法（ reference method ）： 經(jīng)詳盡研究證實(shí)其不準(zhǔn)確度與不 精密度可以忽略的方法； o常規(guī)方法常規(guī)方法（ routine method ）： 可滿足臨床或其他目的需要的日常使用的方法。 精選ppt17（三）方法的選擇（三）方法的選擇o足夠特異、靈敏、精密度好o校準(zhǔn)可溯源o有實(shí)驗(yàn)證據(jù)（雜志、自）o與其他檢驗(yàn)項(xiàng)目相比有點(diǎn)何在 精選ppt18（四）常用物質(zhì)（四）常用物質(zhì)o1.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/參考物質(zhì)（ reference material

6、 ） o2.校準(zhǔn)品（ calibrator ） o3.質(zhì)控物質(zhì)控物/控制品控制品（ control material ）精選ppt191.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)o概念：又稱參考物質(zhì)（ reference material ），是一類充分均勻，并具有一個(gè)（或多個(gè)）確定的特性值的材料或物質(zhì)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定值結(jié)果一般表示為：標(biāo)準(zhǔn)值 總不確定度。 “ 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書“是介紹標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的技術(shù)文件，是研制單位向用戶提出的質(zhì)量保證書和使用說(shuō)明。附有證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稱為有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（ certified reference material, CRM ），其特性值由建立了溯源性的程序確定，可溯源至準(zhǔn)確復(fù)現(xiàn)該特性值的計(jì)量單位，且每個(gè)

7、標(biāo)準(zhǔn)值都附有給定置信水平的不確定度。 o作用：校準(zhǔn)儀器設(shè)備、評(píng)價(jià)測(cè)量方法，或給其它物質(zhì)賦值o分類：一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（ primary reference material ）：穩(wěn)定、均一，采用高度準(zhǔn)確、可靠的若干方法定值，可用于校準(zhǔn)決定性方法及為二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值。在我國(guó)，一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是測(cè)量準(zhǔn)確度達(dá)到國(guó)內(nèi)最高水平的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，由國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)、頒布并授權(quán)生產(chǎn)。如： 人血清無(wú)機(jī)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（ GBW09135 ）和血清膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（ GBW 09138 ）。二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)（ secondary reference material ）：用一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)，參考方法定值

8、。如： 紅細(xì)胞微粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) GBW （ E ） 090001 、膽紅素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) GBW （ E ） 090002 、氰化高鐵血紅蛋白溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) GBW （ E ） 090004 和純化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) GBW （ E ） 090011 。 精選ppt202.校準(zhǔn)品校準(zhǔn)品精選ppt21精選ppt223.質(zhì)控品質(zhì)控品o概念：o分類：定值質(zhì)控品 非定值質(zhì)控品 檢測(cè)系統(tǒng)配套的控制品檢測(cè)系統(tǒng)配套的控制品 正確度控制品正確度控制品精選ppt23質(zhì)控品概念o具有與檢測(cè)過(guò)程相適應(yīng)的特性，其成份與檢測(cè)樣本的基質(zhì)相同或相似。應(yīng)使用充分均 一 和穩(wěn)定的質(zhì)控物， 其瓶間變異 必須小于監(jiān)測(cè)系統(tǒng)預(yù)期的變異，其常規(guī)檢測(cè)應(yīng)

9、有助于確認(rèn)報(bào)告范圍。精選ppt24定值質(zhì)控品精選ppt25定值質(zhì)控品精選ppt26o但是公司的定值是從保護(hù)自己利益出發(fā)的。它標(biāo)示的預(yù)期范圍只是想告訴用戶，只要你的測(cè)定值在范圍，說(shuō)明它的控制品是好的。因此不要將預(yù)期范圍認(rèn)為是控制的允許范圍！o不定值控制品質(zhì)量和定值的一樣，只是廠商沒(méi)有邀請(qǐng)實(shí)驗(yàn)室為控制品定值，在說(shuō)明書上除定值內(nèi)容外，其余都有，還告訴了用戶高值或低值，當(dāng)然更便宜！o但無(wú)論定值或不定值，用戶在使用時(shí)，須使用自己的檢測(cè)系統(tǒng)建立自但無(wú)論定值或不定值，用戶在使用時(shí)，須使用自己的檢測(cè)系統(tǒng)建立自己的均值和標(biāo)準(zhǔn)差！己的均值和標(biāo)準(zhǔn)差！只是定值控制品有一個(gè)預(yù)期的范圍便于用戶對(duì)照！但僅為對(duì)照，若兩者相似

10、不能說(shuō)明用戶結(jié)果準(zhǔn)確，不相似也不說(shuō)明結(jié)果有問(wèn)題。o國(guó)內(nèi)限于條件國(guó)產(chǎn)控制品很少，由經(jīng)銷商推出的國(guó)外控制品真正屬于定值的也不多，定值控制品因?yàn)閮r(jià)格貴，用戶不接受，但用戶又要求是定值的控制品，因此不少經(jīng)銷商要求生產(chǎn)廠商提供一個(gè)公司自己檢測(cè)的值，附在不定值控制品上，變成用戶可接受的“定值”控制品！至于定值所用的檢測(cè)系統(tǒng)，方法學(xué)原理、儀器、試劑盒來(lái)源、操作程序都無(wú)可奉告！此時(shí)如果用戶的靶值和“所為定值”相差甚遠(yuǎn)，我們應(yīng)該可以理解，并不是控制品質(zhì)量有問(wèn)題造成的！ 精選ppt27o檢測(cè)系統(tǒng)配套的控制品檢測(cè)系統(tǒng)配套的控制品o為了使用戶及時(shí)了解檢測(cè)系統(tǒng)的質(zhì)量狀況，大的診斷產(chǎn)品廠商（國(guó)際上六大），除提供儀器、試劑

11、、校準(zhǔn)品外，還提供檢測(cè)系統(tǒng)專用的控制品，必要時(shí)還為使用相同檢測(cè)系統(tǒng)的用戶提供相同批號(hào)的控制品，同時(shí)組織質(zhì)量服務(wù)！此類控制品專用性強(qiáng)。如羅氏的正常與病理控制品Precinorm/Precipath，它的控制品定值完全按照校準(zhǔn)品定值程序獲得！而且定值一旦發(fā)現(xiàn)中間環(huán)節(jié)出錯(cuò)，還在網(wǎng)上為用戶提供更新！o正確度控制品正確度控制品o為了隨時(shí)保證檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)病人樣本的檢測(cè)結(jié)果具有溯源性，此時(shí)引入了正確度控制品，ISO17511標(biāo)準(zhǔn)定義正確度控制品為：用于評(píng)估檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)偏倚的參考物質(zhì)。而且有專門的定值過(guò)程，該定制過(guò)程比校準(zhǔn)品定值還要嚴(yán)格，與定值控制品的定值與定值控制品的定值屬于相同檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定值的簡(jiǎn)單統(tǒng)計(jì)處理一

12、定要分開！屬于相同檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定值的簡(jiǎn)單統(tǒng)計(jì)處理一定要分開！精選ppt28（五）一些基本術(shù)語(yǔ)（五）一些基本術(shù)語(yǔ)o準(zhǔn)確度o正確度o精密度o溯源性精選ppt29oa.準(zhǔn)確度與誤差準(zhǔn)確度與誤差o準(zhǔn)確度（accuracy）的完整表達(dá)應(yīng)是檢測(cè)準(zhǔn)確度（accuracy of measurement）：檢測(cè)結(jié)果與被測(cè)量真值或約定真值（可接受參照值）之間的一致程度（GB/T3358.1、GB/T6379）.o可接受參照值：用來(lái)做比較的經(jīng)協(xié)商同意的值，它可以是理論值（真值），賦值，公認(rèn)值或由程序確定的值。準(zhǔn)確度不能直接得出，只能用偏離（偏離（deviation）也就是誤差從反面衡量o誤差：測(cè)量值與真值之間的偏離，

13、包括RE和SE。誤差是用來(lái)度量不準(zhǔn)確度的。o這樣對(duì)于檢測(cè)結(jié)果只做一次時(shí)，結(jié)果的偏離o即不準(zhǔn)確度=分析過(guò)程的不正確度+分析過(guò)程的不精密度o也即不準(zhǔn)確度=總誤差=分析過(guò)程的隨機(jī)誤差+分析過(guò)程的系統(tǒng)誤差ob.正確度與偏倚正確度與偏倚o正確度（trunees）即真實(shí)度，完整表達(dá)檢測(cè)真實(shí)度：大量檢測(cè)結(jié)果得到的均值大量檢測(cè)結(jié)果得到的均值與可接受參考值之間的一致程度（GB/T6379），用偏倚（bias）來(lái)表示,即測(cè)試結(jié)果的期望與真值（可接受參考值）之差。（GB/T6379）o系統(tǒng)誤差系統(tǒng)誤差：在可重復(fù)的條件下，大量檢測(cè)結(jié)果的均值與真值之差o偏倚表示的是一種系統(tǒng)誤差。oc.精密度和標(biāo)準(zhǔn)差精密度和標(biāo)準(zhǔn)差o精密

14、度（precision），完整表達(dá)檢測(cè)精密度：在規(guī)定條件下獨(dú)立測(cè)試結(jié)果之間一致程度（GB/T6379）。用標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)來(lái)表示。分為兩種，“重復(fù)性（repeatability）”相同條件下執(zhí)行連續(xù)測(cè)量結(jié)果之間的一致性程度，又稱為序列內(nèi)精密度和批內(nèi)精密度。“再現(xiàn)性（reproducibility）”在改變測(cè)量條件下執(zhí)行測(cè)量結(jié)果之間的一致性程度。o隨機(jī)誤差隨機(jī)誤差（random error）：在可重復(fù)的條件下，對(duì)相同的被測(cè)量無(wú)數(shù)次檢測(cè)結(jié)果的均值，與檢測(cè)結(jié)果的差異。用標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)差準(zhǔn)差和變異系數(shù)變異系數(shù)度量。od.總誤差總誤差o總誤差（total error,TE）:能影響分析準(zhǔn)確度的確定誤差的組合【C

15、LSI EP15-A2】,即偏倚和不精密度的和。o基于科學(xué)原理的理論或確定值o基于一些國(guó)家或組織的實(shí)驗(yàn)工作的指定值或認(rèn)證值o基于科學(xué)或工程組織贊助下合作實(shí)驗(yàn)工作中的同意值或認(rèn)證值。o以上三點(diǎn)不能獲得時(shí)，則用可獲得的期望，即規(guī)定測(cè)量總體的均值。精選ppt30溯源性 通過(guò)一條連續(xù)的比較連，使通過(guò)一條連續(xù)的比較連，使FPS檢測(cè)結(jié)果與檢測(cè)結(jié)果與國(guó)際或國(guó)家的參考系統(tǒng)（在參考實(shí)驗(yàn)室，使國(guó)際或國(guó)家的參考系統(tǒng)（在參考實(shí)驗(yàn)室，使用參考方法，參考品得到的結(jié)果）聯(lián)系起來(lái)用參考方法，參考品得到的結(jié)果）聯(lián)系起來(lái)的特性的特性精選ppt31（六）質(zhì)量規(guī)范（六）質(zhì)量規(guī)范o質(zhì)量規(guī)范簡(jiǎn)史質(zhì)量規(guī)范簡(jiǎn)史 1963年加拿大臨床化學(xué)家D

16、avid Tonks建議用參考區(qū)間的寬度1/4表示允許誤差。 1968年臨床化學(xué)家Roy Barnett博士提出標(biāo)準(zhǔn)差表示允許誤差。 1976年CAP舉辦的分析目標(biāo)討論會(huì)議，Westgard提出了以“允許總誤差”作為規(guī)定質(zhì)量的最佳形式，一直沿用至今。精選ppt32 1999年斯德哥爾摩協(xié)商大會(huì)匯集了臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域的許多專家協(xié)商一致的“建立全球分析質(zhì)量規(guī)范”，其結(jié)果提出了“質(zhì)量規(guī)范（quality specifications）”的層次結(jié)構(gòu)：o1.評(píng)價(jià)在特定情況下分析性能對(duì)臨床結(jié)果的影響o2.評(píng)價(jià)在一般情況下分析性能對(duì)臨床決策的影響o3.基于生物學(xué)變異的規(guī)范基于生物學(xué)變異的規(guī)范o4.基于臨床醫(yī)生觀

17、點(diǎn)的分析o5.已發(fā)表專業(yè)推薦n來(lái)自國(guó)家和國(guó)際的專家組n來(lái)自地方組織或某個(gè)國(guó)家o6.基于法規(guī)和EQA的質(zhì)量規(guī)范n法規(guī)機(jī)構(gòu)法規(guī)機(jī)構(gòu)n能力驗(yàn)證（PT）和（或）室間質(zhì)評(píng)計(jì)劃（EQAS）組織者o7.基于當(dāng)前分析技術(shù)的目標(biāo)n有時(shí)間質(zhì)量質(zhì)量評(píng)價(jià)或能力驗(yàn)證計(jì)劃數(shù)據(jù)證實(shí)n由當(dāng)前發(fā)表方法學(xué)性能文章精選ppt333.基于生物學(xué)變異的規(guī)范?；谏飳W(xué)變異的規(guī)范。精選ppt34用法用法oCVA1/2CVIoBA1/4（CVI2+CVG2）1/2oCV儀器之間儀器之間1/3CVIoTE1.65CVA+BA(0.05) TE2.33CVA+BA(0.01)o不精密度不精密度CV： 用于室內(nèi)質(zhì)控精密度分析用于室內(nèi)質(zhì)控精密度分

18、析 用于方法學(xué)性能驗(yàn)證：用于方法學(xué)性能驗(yàn)證：1.與客觀比較與客觀比較 2.與廠家比較與廠家比較o偏差偏差Bias：用于方法學(xué)比較，即考核真實(shí)度。：用于方法學(xué)比較，即考核真實(shí)度。o允許總誤差允許總誤差Tea：用于：用于EQA精選ppt35精選ppt365.已發(fā)表專業(yè)推薦已發(fā)表專業(yè)推薦精選ppt376.基于法規(guī)和基于法規(guī)和EQA的質(zhì)量規(guī)范的質(zhì)量規(guī)范精選ppt38精選ppt39（七）具體操作（七）具體操作o內(nèi)容o常用的方案o具體方案精選ppt40方法確認(rèn)方法確認(rèn)o內(nèi)容： 總是包括可報(bào)告范圍、精密度、準(zhǔn)確度和參考區(qū)間。某些研究還應(yīng)包括檢出限（或靈敏度）、特異度、干擾和回收以及校準(zhǔn)品確認(rèn)。CLIA規(guī)則規(guī)

19、定對(duì)不同復(fù)雜程度分類的方法不同復(fù)雜程度分類的方法需要確認(rèn)不同的特征需要確認(rèn)不同的特征。對(duì)不太復(fù)雜的方法，要求很少的研究。對(duì)于自建檢測(cè)系統(tǒng)或?qū)嶒?yàn)室修改的方法需要更多的實(shí)驗(yàn)。精選ppt41方法驗(yàn)證方法驗(yàn)證o除應(yīng)驗(yàn)證儀器的安裝和檢驗(yàn)程序的操作外o對(duì)于定量方法 應(yīng)驗(yàn)證：測(cè)量精密度：包括重復(fù)性和再現(xiàn)性、患者結(jié)果與以前方法或參考程序之間的一致性、在整個(gè)分析測(cè)量范圍內(nèi)被測(cè)量的回收、高濃度的攜帶污染、干擾或非特異性（溶血、脂血、黃疸、容器添加劑、藥物）、參考區(qū)間。o對(duì)于定性方法 應(yīng)驗(yàn)證陽(yáng)性和陰性及臨界值上和下標(biāo)本的再現(xiàn)性和重復(fù)性、患者結(jié)果的一致性、攜帶污染、干擾或非特異性。精選ppt42常用的方案常用的方案1

20、.相關(guān)機(jī)構(gòu)：NCCLA/CLSI、CLIA2.具體方案o定量實(shí)驗(yàn)室方法的初步評(píng)價(jià)定量實(shí)驗(yàn)室方法的初步評(píng)價(jià): CLSI EP10o定性測(cè)試性能評(píng)估定性測(cè)試性能評(píng)估：CLSI EP12o基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)：CLSI EP14o精密度和正確度性能的用戶驗(yàn)證：精密度和正確度性能的用戶驗(yàn)證：CLSI EP15-Ao使用使用ROC曲線實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)臨床準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)曲線實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)臨床準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)：CLSI GP10o總誤差估計(jì)總誤差估計(jì) :CLSI EP21-A：臨床實(shí)驗(yàn)方法總分析誤差的估計(jì)o精密度評(píng)價(jià)精密度評(píng)價(jià): EP5-A，臨床化學(xué)設(shè)備精密性能的評(píng)價(jià)，臨床化學(xué)設(shè)備精密性能的評(píng)價(jià)o準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)：準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)

21、：方法比較試驗(yàn)EP9-A，使用病人樣本進(jìn)行方法比較和偏倚估計(jì)，使用病人樣本進(jìn)行方法比較和偏倚估計(jì) 回收實(shí)驗(yàn) 干擾試驗(yàn)EP7-P，臨床化學(xué)干擾試驗(yàn)，臨床化學(xué)干擾試驗(yàn)o總誤差估計(jì)總誤差估計(jì) :CLSI EP21-A：臨床實(shí)驗(yàn)方法總分析誤差的估計(jì)o患者結(jié)果可報(bào)告范圍（即線性范圍）的驗(yàn)證：患者結(jié)果可報(bào)告范圍（即線性范圍）的驗(yàn)證：EP6-A：定量分析方法線性的評(píng)價(jià)：定量分析方法線性的評(píng)價(jià) o臨床可報(bào)告范圍的確立臨床可報(bào)告范圍的確立o參考范圍參考范圍 ：NCCLS/CLSI C28-A ：臨床實(shí)驗(yàn)室如何定義和確定參照區(qū)間o交叉污染交叉污染:NCCLS/CLSI EP10-A o分析靈敏度分析靈敏度:CLS

22、I EP17-A：檢出限和定量下限確定方案o分析特異性分析特異性:NCCLA/CLSI EP7-A: 臨床化學(xué)干擾試驗(yàn)臨床化學(xué)干擾試驗(yàn) 精選ppt43評(píng)價(jià)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度o除按ISO/IEC l7025對(duì)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系評(píng)價(jià)外，在實(shí)際工作中我們常用以下幾種方法來(lái)核驗(yàn)、評(píng)價(jià)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度。o用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)評(píng)價(jià)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度（t檢驗(yàn)）o用標(biāo)準(zhǔn)方法評(píng)價(jià)分析結(jié)果的準(zhǔn)確度o回收率試驗(yàn)精選ppt44Westgard確定不精密度的方法o考慮因素1.實(shí)驗(yàn)周期：20天以內(nèi)2.樣本基質(zhì)3.檢測(cè)材料數(shù)量和濃度水平：MDL4.檢測(cè)樣本個(gè)數(shù)：20次5.數(shù)據(jù)計(jì)算：CV/S6.可接受性能準(zhǔn)則 Sw-run

23、/Sw-day1/4TEa SI-run1/3TEa7.廠家聲明的驗(yàn)證8.推薦的最低程度研究9.基于未來(lái)的考慮精選ppt45廠家聲明的驗(yàn)證廠家聲明的驗(yàn)證 CLIA并沒(méi)有嚴(yán)格地要求實(shí)驗(yàn)室確定性能的可接受性。更確切地，CLIA主張實(shí)驗(yàn)室應(yīng)驗(yàn)證廠家精密度的聲明。這可由F檢驗(yàn)檢驗(yàn)完成，如下：o1.從廠家聲明材料（通常包括在儀器的文件中）中獲得用于o重復(fù)性實(shí)驗(yàn)的預(yù)期標(biāo)準(zhǔn)差和測(cè)量個(gè)數(shù)，如基于31次測(cè)量的標(biāo)o準(zhǔn)差（s）為3mg/dl。o2.從你的重復(fù)實(shí)驗(yàn)獲得的標(biāo)準(zhǔn)差和測(cè)量結(jié)果個(gè)數(shù)，如基于21o個(gè)測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)差為4mg/dl。o3.計(jì)算F值，較大s平方除較小s平方，即= 16/9 =o1.78。o4.查F值表，

24、查分子自由度為20，分母自由度為30的臨界Fo值，其值為1.93。o5.在這一實(shí)例中，計(jì)算的F值小于臨界F值，其表示實(shí)驗(yàn)室觀o測(cè)的s與廠家聲明的s之間沒(méi)有真正的差異。o6.結(jié)論已驗(yàn)證廠家的聲明。精選ppt46推薦的最低程度研究推薦的最低程度研究o選擇至少2個(gè)不同濃度控制物代表了研究項(xiàng)目的低和高的醫(yī) 學(xué)決定性濃度。每一個(gè)濃度在一批內(nèi)或一天內(nèi)對(duì)每一控制物 檢測(cè)20個(gè)樣本獲得短期的不精密度估計(jì)值。計(jì)算每一控制物 的均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。在進(jìn)行更進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)之前確定 短期不精密度是否可接受。o在20個(gè)不同天對(duì)兩個(gè)控制物的每一種分析1個(gè)樣本，確定長(zhǎng) 期的不精密度。計(jì)算每一材料的均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。

25、確定長(zhǎng)期不精密度是否可接受。精選ppt47基于未來(lái)的考慮基于未來(lái)的考慮 采用更為詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)提供關(guān)于短期和長(zhǎng)期變異量的信息。這些設(shè)計(jì)通常使用方差分析（analysis ofvariance , ANOVA)，如CLSI精密精密度方案所闡述度方案所闡述EP5方案預(yù)期用于廠家的精密度評(píng)價(jià)，方案預(yù)期用于廠家的精密度評(píng)價(jià)，而而EP15方案預(yù)期用于臨床實(shí)驗(yàn)室用戶進(jìn)行的評(píng)價(jià)。方案預(yù)期用于臨床實(shí)驗(yàn)室用戶進(jìn)行的評(píng)價(jià)。EP15明確指出在5天的時(shí)間內(nèi)每天最少是采用3個(gè)重復(fù)測(cè)量，給出總的15個(gè)測(cè)量值。為了估計(jì)總的不精密度，計(jì)算提供確定批內(nèi)和批間分量的方式，然后將其結(jié)合來(lái)提供總的不精密度。在EP15附錄中描述了所需

26、要的計(jì)算，以及一組數(shù)據(jù)實(shí)例顯示如何驗(yàn)證廠家的聲明。給出的EP15允許僅只有允許僅只有5天天的數(shù)據(jù)就可進(jìn)行精密度驗(yàn)證，很有可能它將成為許的數(shù)據(jù)就可進(jìn)行精密度驗(yàn)證，很有可能它將成為許多實(shí)驗(yàn)室采用的方案。多實(shí)驗(yàn)室采用的方案。精選ppt48CLSI EP5-A2 定量方法精密度性能評(píng)價(jià)Evaluation of Precision Performance of Quantitative Methods; Approved GuidelineSecond Edition精選ppt49精密度的內(nèi)容精密度的內(nèi)容o批內(nèi)精密度（重復(fù)性：repeatability）o批間精密度o日內(nèi)精密度o日間精密度o實(shí)驗(yàn)室內(nèi)精

27、密度（within-laboratory precision）精選ppt50實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法o試劑和校準(zhǔn)物：同一批號(hào)o樣本：基質(zhì)與臨床樣本相似，2個(gè)以上濃度 （參考醫(yī)學(xué)決定水平）。o實(shí)驗(yàn)天數(shù)：20天以上o實(shí)驗(yàn)次數(shù)：每天2批，每批2個(gè)樣本，每個(gè) 樣本重復(fù)2次精選ppt51Westgard確定偏倚的方法確定偏倚的方法o概述 由新方法（試驗(yàn)方法）和可比較方法同時(shí)分析患者樣本的實(shí)驗(yàn)，基于兩方法觀測(cè)的差值估計(jì)系統(tǒng)誤差。o考慮因素o1.可比較方法o2.患者標(biāo)本數(shù)量o3.單次或雙份測(cè)量o4.時(shí)間周期o5.標(biāo)本穩(wěn)定性o6.數(shù)據(jù)分析o7.圖形顯示數(shù)據(jù)o8.計(jì)算適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)量o9.可接受性能標(biāo)準(zhǔn)o10.廠家聲明的驗(yàn)

28、證o11.推薦的最低程度的研究o12.未來(lái)的發(fā)展方向精選ppt521.可比較方法可比較方法 “可比較方法” 并不意味方法已證明其正確性。大多數(shù)常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法歸為此類。必須仔細(xì)解釋試驗(yàn)方法和常規(guī)方法之間的任何差異。如果差別很小，則兩方法具有相同的相對(duì)的準(zhǔn)確度。如果差別很差別很大大并醫(yī)學(xué)上不可接受，則需要識(shí)別哪一方法是不準(zhǔn)確的?？刹捎貌捎没厥蘸透蓴_回收和干擾實(shí)驗(yàn)提供這一額外的信息。精選ppt532.患者標(biāo)本數(shù)量患者標(biāo)本數(shù)量 兩個(gè)方法檢測(cè)最少40份不同的患者標(biāo)本。選擇的這些標(biāo)本覆蓋整標(biāo)本覆蓋整個(gè)方法的可報(bào)告范圍個(gè)方法的可報(bào)告范圍及代表方法在常規(guī)應(yīng)用預(yù)期疾病的濃度范圍。檢測(cè)標(biāo)本的實(shí)際個(gè)數(shù)沒(méi)有標(biāo)本的質(zhì)量重

29、要。精選ppt543.單次或雙份測(cè)量單次或雙份測(cè)量o雙份測(cè)定o不同的批、或至少不同的順序（而不是在同一樣本杯中來(lái)回重復(fù)）不同的樣本（或杯）精選ppt554.時(shí)間周期o一般建議最少5天o每天檢測(cè)2至5個(gè)患者標(biāo)本精選ppt565.標(biāo)本穩(wěn)定性o一般由試驗(yàn)和可比較方法在兩個(gè)小時(shí)內(nèi)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，除非標(biāo)本有很短的穩(wěn)定性精選ppt576.數(shù)據(jù)分析o方式存在爭(zhēng)論和討論精選ppt587.圖形顯示數(shù)據(jù) 差值圖（difference plot） 比對(duì)圖” （comparison plot）精選ppt598.計(jì)算適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)量計(jì)算適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)量o1.以比較方法測(cè)定值Xc為橫坐標(biāo)，試驗(yàn)方法測(cè)定值Yc為縱坐標(biāo)，采用直線回歸

30、或最小二乘法擬合直線，建立回歸方Y(jié)c=a+bXc，并由此計(jì)算在MDL時(shí)的時(shí)的SE，SE=Yc- Xco2.另一常計(jì)算的指標(biāo)是相關(guān)系數(shù)r，主要用于評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)范圍是否足評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)范圍是否足夠?qū)拤驅(qū)捯员闾峁┬甭屎徒鼐喔玫墓烙?jì)。而不是判斷方法的可接受性。當(dāng)r為0.99或更大時(shí)，簡(jiǎn)單的線性回歸計(jì)算可提供斜率和截距可靠的估計(jì)。如果r小于0.99，最好是收集額外的數(shù)據(jù)擴(kuò)大濃度范圍?？紤]到使用t-檢驗(yàn)計(jì)算估計(jì)數(shù)據(jù)均值的系統(tǒng)誤差，或使用更檢驗(yàn)計(jì)算估計(jì)數(shù)據(jù)均值的系統(tǒng)誤差，或使用更復(fù)雜的回歸計(jì)算復(fù)雜的回歸計(jì)算適合于數(shù)據(jù)更窄的范圍。o3.對(duì)于比對(duì)結(jié)果覆蓋較窄的分析范圍，如：鈉或鈣等，計(jì)算兩方法平均值之間的差，也通常稱為

31、偏倚。這種計(jì)算的偏倚從統(tǒng)計(jì)程序可獲得提供配對(duì)配對(duì)t-檢驗(yàn)檢驗(yàn)計(jì)算。例如，如果鈉試驗(yàn)方法40個(gè)分析的均值是141.0mmol/L，相同樣本比較方法的均值為138.5，則平均系統(tǒng)誤差或偏倚是2.5mmol/L（141.0 138.5）。精選ppt609.可接受性能標(biāo)準(zhǔn)o判斷可接受性依賴于允許分析誤差的大小，任何單個(gè)試驗(yàn)的總誤差（TE）包括系統(tǒng)誤差（SE）加隨機(jī)誤差（RE）?！翱傉`差”計(jì)算公式如下：TEcalc =SE+ RE TEcalc = Biasmeas+3Smeas S meas是重復(fù)性試驗(yàn)估計(jì)的方法標(biāo)準(zhǔn)差，Biasmeas是從回歸方程Yc=a+bXc計(jì)算的Yc-Xc或從配對(duì)配對(duì)t-檢驗(yàn)計(jì)

32、算的平均差，當(dāng)檢驗(yàn)計(jì)算的平均差，當(dāng)TEcalcTEa方法性能是可接受的o方法決定圖精選ppt6110.廠家聲明的驗(yàn)證oCLIA并沒(méi)有嚴(yán)格地要求實(shí)驗(yàn)室參照任何質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，甚至是其 能力驗(yàn)證可接受性能準(zhǔn)則判斷任何觀測(cè)的偏倚或系統(tǒng)誤差的可接受性。代之，CLIA強(qiáng)調(diào)驗(yàn)證廠家的準(zhǔn)確度（或不準(zhǔn)確度、強(qiáng)調(diào)驗(yàn)證廠家的準(zhǔn)確度（或不準(zhǔn)確度、偏倚，系統(tǒng)誤差）聲明。偏倚，系統(tǒng)誤差）聲明。如果廠家的聲明沒(méi)有偏倚，t-檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量將揭示出實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)證實(shí)其聲明是否符合。如果從配對(duì)t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)計(jì)算的t值小于臨界t值，則沒(méi)有顯著性差異，或觀測(cè)到?jīng)]有真實(shí)的偏倚。如果廠家聲明有限的偏倚，則有用的是確定確定你估計(jì)偏倚的置信區(qū)間你估計(jì)偏倚的

33、置信區(qū)間，并將其與廠家的聲明的偏倚進(jìn)行比較。如果廠家的聲明偏倚落在觀測(cè)偏倚的上下置信限之內(nèi)，則證實(shí)了聲明；如果不在此區(qū)間內(nèi)，則沒(méi)有驗(yàn)證聲明。精選ppt62精選ppt6311.推薦的最低程度的研究推薦的最低程度的研究 選擇40份患者標(biāo)本覆蓋方法的整個(gè)可報(bào)告范圍。由試驗(yàn)和比較方法在2小時(shí)內(nèi)一天分析小時(shí)內(nèi)一天分析8份標(biāo)本份標(biāo)本。很快地將結(jié)果繪制差值圖并檢查差異；重新分析給出差異結(jié)果的標(biāo)本消除離群值，識(shí)別潛在的干擾。如果沒(méi)有觀測(cè)到差異的結(jié)果，繼續(xù)實(shí)驗(yàn)5天。如果在頭5天觀測(cè)到差異，繼續(xù)另外的5天。繪制所有數(shù)據(jù)的比對(duì)圖評(píng)價(jià)范圍，離群值和線性。計(jì)算相關(guān)系數(shù)，如果r為0.99或更大，計(jì)算簡(jiǎn)單直線回歸統(tǒng)計(jì)量及在

34、醫(yī)學(xué)決定濃度水平上估計(jì)系統(tǒng)誤差。如果如果r= 0.95 范圍適合 r2 0.95 擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍o線性回歸：線性回歸： 回歸方程計(jì)算： 截距 a = - 9.05 斜率b = 1.17 Y = 1.17 X 9.05 均勻離散度的直觀檢查精選ppt77結(jié)果判讀結(jié)果判讀o預(yù)期偏倚及可信范圍預(yù)期偏倚及可信范圍 線性回歸方程 計(jì)算偏倚（高、中、低3組）o解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果并與內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)比較解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果并與內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)比較精選ppt78 CLSI EP15-Ao精密度和正確度性能的用戶驗(yàn)證：精密度和正確度性能的用戶驗(yàn)證：User Verification of Performance forPrecision an

35、d Trueness）精選ppt79主要的主要的3種方案：種方案：o1.精密度基于5天，每天分析3份重復(fù)控制樣本；o2.真實(shí)度基于分析20份患者標(biāo)本；o3.真實(shí)度基于分析至少2份具有指定值的參考物質(zhì)。精選ppt80EP15 精密度方案 規(guī)定熟悉時(shí)期學(xué)習(xí)分析系統(tǒng)的適當(dāng)操作，包括校準(zhǔn)、維護(hù)程序和監(jiān)測(cè)程序（質(zhì)量控制）。使用廠家推薦的質(zhì)量控制程序質(zhì)量控制程序監(jiān)測(cè)在EP15檢測(cè)方案期的性能。選擇的控制物應(yīng)具有的濃度水平接近醫(yī)學(xué)決定性點(diǎn)。用于聲明驗(yàn)證的控制物應(yīng)選擇接近于醫(yī)學(xué)決定點(diǎn)的選擇接近于醫(yī)學(xué)決定點(diǎn)的濃度及接近于廠家進(jìn)行其精密度聲明試驗(yàn)所具有的濃度濃度及接近于廠家進(jìn)行其精密度聲明試驗(yàn)所具有的濃度。如果可

36、能，它們應(yīng)該與建立廠家聲明使用相同的材料，或非常類似的材料（類似的基質(zhì)類似的基質(zhì)）。精選ppt81實(shí)驗(yàn)方案實(shí)驗(yàn)方案o1五天，每日一分析批，每日兩個(gè)濃度水平，每一水平上同一樣本三次重復(fù)測(cè)定。o2如果因?yàn)橘|(zhì)量控制程序或操作困難判斷一批為 失控，剔除數(shù)據(jù)，并執(zhí)行額外的批。o3包括正常地使用每日質(zhì)量控制樣本。o4真實(shí)度試驗(yàn)樣本可在同一批內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。o5操作者按照廠家說(shuō)明書規(guī)定進(jìn)行校準(zhǔn)。如果廠家指出在其聲明它的精密度數(shù)據(jù)是在多個(gè)校準(zhǔn)周期下產(chǎn)生的，則操作者在實(shí)驗(yàn)期間選擇重新校準(zhǔn)。精選ppt82統(tǒng)計(jì)量的計(jì)算精選ppt83建立建立EXCEL表格表格精選ppt84用用EXCEL表格計(jì)算表格計(jì)算T值值精選ppt8

37、5精密度聲明的驗(yàn)證精密度聲明的驗(yàn)證精選ppt86EP15使用患者樣本的真實(shí)度方案 推薦采用如下的實(shí)驗(yàn)方案：推薦采用如下的實(shí)驗(yàn)方案：o1檢測(cè)20份患者樣本，其濃度水平覆蓋方法的可報(bào)告范圍。o2在實(shí)驗(yàn)室以常規(guī)操作方式檢測(cè)新鮮患者樣本。o3在3到4天時(shí)間內(nèi)，每天由試驗(yàn)和可比較方法在4小時(shí)內(nèi)測(cè)量5至7份樣本。o4評(píng)價(jià)質(zhì)量控制確保穩(wěn)定的操作條件和有效的試驗(yàn)結(jié)果。o5檢查比較數(shù)據(jù)識(shí)別任何差異的結(jié)果。o6計(jì)算配對(duì)結(jié)果之間的差值，并繪制差值與比較值之間的差值圖提供數(shù)據(jù)的圖形顯示。o7將數(shù)據(jù)進(jìn)行配對(duì)t-檢驗(yàn)計(jì)算確定方法之間的平均差值（偏倚），以及差值的標(biāo)準(zhǔn)差；o8計(jì)算置信區(qū)間和（或）驗(yàn)證限，將觀測(cè)的偏倚與廠家的聲明進(jìn)行比較。精選ppt87建立建立EXCEL表格表格精選ppt88計(jì)算偏倚的置信區(qū)間精選ppt89EP15使用參考物質(zhì)的真實(shí)度方案使用參考物質(zhì)的真實(shí)度方案 推薦的物質(zhì)包括：o1從美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)研究院（NIST）可獲得某些分析物的有證參考物質(zhì)（CRM）。o2能力驗(yàn)證計(jì)劃中具有指定值的參考物質(zhì)。o3廠家具有指定值的物質(zhì)。o4室間質(zhì)量評(píng)價(jià)(EQA)計(jì)劃中的物質(zhì)。o5由幾家實(shí)驗(yàn)室分析具有指定值來(lái)自第三方銷售商的物質(zhì)。o6制備的已知濃度的標(biāo)