免疫比濁法測定PCT的方法學評價

1、免疫比濁法測定PCT的方法學評價6 / 5免疫比濁法測定PCT的方法學評價PBL教學天天向上團隊第一部分1.1 查閱資料，討論與交流通過課后交流，及建立網(wǎng)上交流群，使我們的討論取得了較好的成果。1.2 提出問題，分配問題在經(jīng)過幾次交流后，我們提出了下列十個問題:1、PCT定義及臨床意義？2、免疫比濁法的原理及分類?3、測定PCT的方法有哪些?4、如何評價免疫比濁法測定（王妍樂）（唐莉）（尤倩）PCT?（張艷美）5、精密度的評價？（鄭天宇）6、精確度的評價？（a.干擾試驗 寧佳寶；b.回收試驗 王彥潔；c.方法比較試驗 龍曙萍）7、檢測限的評價？（孟逍）8、可報告范圍及參考區(qū)間的驗證 ？（魏小雪

2、）（括號內(nèi)表示相應負責解決問題的人）1.3 解決問題在分配問題后，大家積極查閱文獻，有不懂的或不理解的，我們會在交流群里一起討論；我們也會將一些好的文獻及資料進行共享。大家在相互學習和幫助中將問題都一一解決了，并制成了詳細的精美PPT第二部分2.1 實驗討論在完成第一部分后，老師在第二部分中交給了我們一些數(shù)據(jù)，讓我們進行數(shù)據(jù)的分析與討論。2.2 實驗分配經(jīng)過一番討論后，我們將實驗具體分給了個人，如下：1、干擾實驗（Hb:寧佳寶，膽紅素：鄭天宇， TG:孟逍）2、批內(nèi)重復實驗（魏小雪）3、天間重復實驗（王彥潔）4、不確定度測定（張艷美）5、回收試驗（王妍樂）6、方法對比實驗（龍曙萍）7、檢出限（

3、尤倩）8、可報告范圍（唐莉）（括號內(nèi)表示負責相應實驗的人）2.3實驗結果與分析a.干擾實驗1、Hb實驗結果：基礎管 PCT濃度：0.75ng/ml干擾 I PCT 濃度：0.64ng/ml 干擾 II PCT 濃度：0.55ng/ml 結果分析：1).干擾值計算：干擾值1=干擾管I測定值一基礎管測定值 =0.64-0.75=-0.11ng/ml 干擾值II=干擾管II測定值一基礎管測定值 =0.55-0.75=-0.20ng/ml2).計算恒定系統(tǒng)誤差：用干擾值的絕對值與EA進行對比，若小于EA則可接受，反之不可以。當Xc為0.25、0.5時，EA為0.22 ng/ml |干擾值11 v EA

4、 ,|干擾值 II| VEA,當 Xc 為 2.0 時，EA 為 0.32 ng/ml |干擾值 11 v EA,|干擾值 II| < EA ,當Xc為10.0時，EA為1.25ng/ml |干擾值11 < EA, |干擾值II | VEA,所以，當TG濃 度為1.0mmol/L,10.0mmol/L 時，其干擾作用所產(chǎn)生的恒定誤差小于允許分析誤差，故免疫 透射比濁法測定PCT的恒定誤差可接受。2、TG實驗結果；基礎管 PCT濃度：0.75ng/ml 干擾 I PCT 濃度：0.77ng/ml 干擾 II PCT 濃度：0.74ng/ml 結果分析：1).干擾值計算：干擾值I=干擾

5、管I測定值一基礎管測定值 =0.77-0.75=0.02ng/ml 干擾值II=干擾管II測定值一基礎管測定值 =0.74-0.75=-0.01ng/ml2).計算恒定系統(tǒng)誤差：用干擾值的絕對值與EA進行對比，若小于EA則可接受，反之不可以。當 Xc為0.25、0.5時，EA為0.22 ng/ml |干擾值11 v EA ,|干擾值II | v EA,當Xc為2.0時，EA為0.32 ng/ml |干擾值11 v EA , |干擾值II | < EA , 當Xc為10.0時，EA為1.25ng/ml |干擾值11 < EA, |干擾值II | VEA,所以，當TG濃 度為1.0mm

6、ol/L,10.0mmol/L 時，其干擾作用所產(chǎn)生的恒定誤差小于允許分析誤差，故免疫 透射比濁法測定PCT的恒定誤差可接受。3、膽紅素實驗結果：| 0.02 | < EA | -0.14 | < EA結果分析：當膽紅素的病理值達到0.2g/L, 10.0g/L時，其干擾作用產(chǎn)生的恒定誤差小于醫(yī)學決定水平，故免疫比濁法的恒定誤差可接受。E （Xi -X fi 1=0.017b、批內(nèi)重復實驗（魏小雪） 標準品1 （濃度0.25ng/ml）:X = 丁 = 0.25 ng/mSCV = X 100% = 6.8 % 標準品2 （濃度2.0 ng/ml）：X = n = 2.02 ng/

7、mln 2、Xi-Xi 1n=0.27SCV = X 100% = 13.37 %標準品3 （濃度10.0 ng/ml）:n29X-XX = n = 10.03 ng/mlS = ' n = 0.02SCV = X 100% = 0.19 %S為標結果分析：當1.96S < Ea時（Ea為某一醫(yī)學決定水平下的允許分析誤差， 準差），隨機誤差（RE）可接受；反之隨機誤差（RE）不可接受。已知 PCT 測定：Xc 為 0.25; 0.5; 2.0 時 EA 為 0.22 ng/mlXc 為 2.0 時 EA 為 0.32 ng/mlXc 為 10.0 時 EA 為 1.25ng/ml

8、所以，當 Xc 為 0.25 時，1.96S=0.033,即 1.96S<Ea, RE 可接受。當 Xc 為 2.0 時，1.96S=0.53,即 1.96S>Ea, RE 不可接受。當 Xc 為 10.0 時，1.96S=0.039,即 1.96S<Ea, RE 可接受。c、天間重復實驗（王彥潔）標準品1 （濃度0.25ng/ml）:X； 0.26 ng/mlSCV = X 100% = 7.69 %標準品2 （濃度2.0 ng/ml）：X = T = 1.94 ng/mlSCV = X 100% = 21.13 % 標準品3 （濃度10.0 ng/ml）:=0.02

9、9; Xi-X2- T S =n = 0.41“ Xi-X 2S = ' n = 0.20X = n = 10.02 ng/mlSCV = X 100% = 2.00 %【結果判斷】：當1.96S < Ea時(Ea為某一醫(yī)學決定水平下的允許分析誤差，S為標準差)，隨機誤差(RE)可接受；反之隨機誤差(RE)不可接受。已知 PCT 測定： Xc 為 0.25; 0.5; 2.0 時 EA 為 0.22 ng/mlXc 為 2.0 時 EA 為 0.32 ng/mlXc 為 10.0 時 EA 為 1.25ng/ml所以，當 Xc 為 0.25 時，1.96S=0.04,即 1.96

10、S<Ea, RE 可接受。當 Xc 為 2.0 時，1.96S=0.80,即 1.96S>Ea, RE 不可接受。當 Xc 為 10.0 時，1.96S=0.39,即 1.96S<Ea, RE 可接受。d、不確定度測定(張艷美)【結果與計算】30次重復測量結果為 0.55; 0.50; 0.46; 0.47; 0.59; 0.58; 0.47; 0.42; 0.49; 0.58; 1.55; 0.53; 0.56; 0.44; 0.48; 0.42; 0.58; 0.51; 0.52; 0.53; 0.47; 0.45; 0.46; 0.50; 0.51; 0.58; 0.5

11、2; 0.57; 0.55; 0.53 將數(shù)值帶入計算：平均值 X=0.5457 A 類 不確定度UA=s=0.588 (由于數(shù)據(jù)中缺少 a1、a2,而且查資料也未能找到，所以無法計算出 B不確定度UB、合成不確定度 U以及擴展不確定度 U95)【結果報告】此樣本測量的平均值是0.5457,不確定度為 U95,其95%的置信區(qū)間為(0.5457-U95, 0.5457+U95)。e、回收試驗(王妍樂)實驗結果：平均回收率為118.1%,比例誤差為-18.1%。結果判斷：PCT測定的醫(yī)學決定水平(XC)為0.25ng/ml、0.5ng/ml時，相應的允許分析 誤差(EA)為 0.22ng/ml

12、; XC 為 2.0ng/ml 時，EA 為 0.32ng/ml ; XC 為 10.0 時，EA 為 1.25ng/ml。 當 XC=0.25 , PE= (|R-100|)(XC/100)=0.05<EA , PE 可接受 當 XC=0.5, PE= (|R-100|)(XC/100)=0.09<EA , PE 可接受 當 XC=2.0, PE= (|R-100|)(XC/100)=0.36>EA , PE 不可接受 當 XC=10.0, PE= (|R-100|)(XC/100)=1.81>EA , PE 不可接受(R:平均回收率；PE:比例誤差)當XC=0.25

13、 , XC=0.5時免疫透射比濁法測定PCT濃度的比例誤差可接受。f、方法對比實驗(龍曙萍)實驗結果：線性回歸方程為： Y=0.0687+1.2645x結果分析：當 Xc 為 0.25 時|( a+bXc) -Xc | =0.1348 < EA當 Xc 為 0.5 時；| ( a+bXc) -Xc| =0.200< EA當 Xc 為 2.0 時；| ( a+bXc) -Xc| =0.5977> EA當 Xc 為 10.0 時；I ( a+bXc) -Xc| =2.7137> EA實驗結論：當Xc為0.25; 0.5時都有| (a+bXc)-Xc | v EA,系統(tǒng)誤差可

14、以接受,免疫比濁法測定 pct可以接受。恒定誤差為0.0687,比例誤差為1.2645。當Xc為2.0; 10.0時|(a+bXc) -Xc | > EA ,系統(tǒng)誤差不可以接受，免疫比濁法測定pct不可以接受。g、檢出限(尤倩) 實驗分析：1.檢測低限：97.7%可能性：0.178ng/mL;2 .生物檢測限：97.7%可能性：祥見第二部檢測象中的數(shù)表。3 .功能靈敏度：從結果可得樣品 3重復檢測變異系數(shù) CV為24.78%,最 接近20%,此時檢測限濃度為 0.561 ng/mL,因此，本法的功能靈敏度為 0.561 n g / m L oh、可報告范圍(唐莉)實驗結果：Y=0.799

15、6X+0.0178,相關系數(shù) r=0.7996結果分析：免疫比濁法測定PCT的分析測量范圍為 0.150ng/ml.第三部分結論與總結：通過以上實驗的結果和數(shù)據(jù)分析，可知：1、免疫比濁法測定 PCT的分析測量范圍為 0.150ng/ml.2、檢測低限：97.7%可能性：0.178 n g/mL;功能靈敏度為0.561 n g/mL。3、方法比較試驗：當 Xc為0.25; 0.5時都有| (a+bXc) -XcI v Ea,系統(tǒng) 誤差可以接受，免疫比濁法測定 pct可以接受。恒定誤差為 0.0687,比例誤差為1.2645。當 Xc為2.0; 10.0時I (a+bXc) -Xc| > E

16、a,系統(tǒng)誤差不可以接受，免疫比濁法測定pct不可以接受。4、回收試驗：當 XC=0.25, XC=0.5時免疫透射比濁法測定PCT濃度的比例誤差可接受；當XC=2.0 , XC=10時免疫透射比濁法測定PCT濃度的比例誤差不可接受。5、不確定度測定：不確定度為U95,其95%的置信區(qū)間為(0.5457-U95 ,0.5457+U95)。6、天間重復試驗：當 Xc為0.25時，1.96S=0.04,即1.96S<Ea, RE可接受。當 Xc 為 2.0 時，1.96S=0.80,即 1.96S>Ea, RE 不可接受。當 Xc 為 10.0 時,1.96S=0.39,即 1.96S<Ea, RE 可接受。7、批內(nèi)重復試驗：當 Xc為0.25時，1.96S=0.033,即1.96S<Ea, RE可接受。當 Xc 為 2.0 時，1.96S=0.53,即 1.96S>Ea, RE 不可接受。當 Xc 為 10.0 時,1.96S=0.039,即 1.96S<Ea, RE 可接受。8、干擾試驗：a.膽紅素：當膽紅素的病理值達到0.2g/L, 10.0g/L時，其干擾作用產(chǎn)生的恒定誤差小于醫(yī)學決定水平，故免疫比濁法的