微生物的純種分離培養(yǎng)

1、自然界中不同種類(lèi)的微生物混雜生活在一起，要研究某種微生物的特性，必須從混雜的微生物類(lèi)群中分離它，使該微生物處于這種獲得純培養(yǎng)的方法稱(chēng)為l 純種：是微生物的某一個(gè)種或株，培養(yǎng)中的所純種：是微生物的某一個(gè)種或株，培養(yǎng)中的所有細(xì)胞有著共同的來(lái)源或僅是同一細(xì)胞的后代。有細(xì)胞有著共同的來(lái)源或僅是同一細(xì)胞的后代。 為了獲得單個(gè)菌體，要把待分離的材料進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂專(zhuān)雌渖L(zhǎng)所需要的條件，使其在平板上，單個(gè)菌體繁殖成單個(gè)菌落。由于細(xì)菌、放線(xiàn)菌和霉菌所要求的營(yíng)養(yǎng)條件不同，將樣品在不同培養(yǎng)基制成的平板上進(jìn)行分離，依據(jù)菌落形態(tài)的差異，可以區(qū)分細(xì)菌、放線(xiàn)菌和霉菌三大類(lèi)群，并計(jì)算出其數(shù)量。 菌 落 特 征（圓形，假根狀

2、，不規(guī)則狀）（光滑，皺縮，顆粒狀，龜裂狀，同心圓狀）（擴(kuò)展，臺(tái)狀，凹面，凸面，乳頭狀）（整齊，波狀，裂葉狀，鋸齒狀）（無(wú)光澤，金屬光澤，閃光）（油脂狀，膜狀，粘脆）（P6 圖 2-3）霉菌菌落霉菌菌落酵母菌落酵母菌落青霉青霉曲霉曲霉大腸桿菌菌落大腸桿菌菌落伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基1 土壤樣品2 培養(yǎng)基（1）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（2）高氏1號(hào)培養(yǎng)基（3）馬鈴薯培養(yǎng)基（PDA培養(yǎng)基）1.平板的制作： 將已滅菌的培養(yǎng)基融化，冷卻到40-50， 倒平板。2. 連續(xù)稀釋法分離土壤中的微生物計(jì)算每克土樣中微生物的數(shù)量選擇剛好能把菌分開(kāi)，而稀釋倍數(shù)最低的平板（含菌落數(shù)30300個(gè)）計(jì)數(shù)。微生物的細(xì)胞個(gè)數(shù)（

3、個(gè)微生物的細(xì)胞個(gè)數(shù)（個(gè)/g）平均菌落數(shù)平均菌落數(shù)稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)土壤克數(shù)土壤克數(shù)微生物分離基本方法及原則分離微生物時(shí)一般是根據(jù)該微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)，pH，氧氣，溫度等要求的不同，供給它們合適的條件或加入某種抑制劑，形成只利于該菌種生長(zhǎng)，不利于其他菌種生長(zhǎng)的環(huán)境，從而淘汰不需要的菌種。分離：取10-7、10-8兩個(gè)稀釋度各0.2ml加入培養(yǎng)皿中，涂布，倒置培養(yǎng)，24小時(shí)。 (2) 分離：取10-5、10-6兩個(gè)稀釋度各0.2ml，涂布（），倒置培養(yǎng)，34天。(3) 分離：取10-5、10-6兩個(gè)稀釋度各0.2ml，（）涂布，倒置培養(yǎng)，710天。 3.平板劃線(xiàn)分離法 操作要點(diǎn) (1)接種環(huán)與平板表面約成2030度角。(2)用力適當(dāng)，不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基.(3)方法A中，每次劃線(xiàn)都要灼燒接種環(huán)。制備固體平板培養(yǎng)基。從土樣中分離細(xì)菌、霉菌、放線(xiàn)菌，并觀察其菌落特征。在平板上劃線(xiàn)分離混合菌懸液中金黃色葡萄球菌和大腸桿菌。計(jì)算每克土樣中微生物的數(shù)量。為什么在分離霉菌時(shí)要加幾滴80的乳酸？加在何處？為什么