NMDA受體2B亞單位在C57BI6小鼠生后腦聽覺功能發(fā)育中的作用

1、.NMDA受體2B亞單位在C57BI6小鼠生后腦聽覺功能發(fā)育中的作用【摘要】：本實驗室以往的研究表明，在生后發(fā)育“關(guān)鍵期”內(nèi)對大鼠施行單耳堵塞，成年后測定顯示，堵塞耳對側(cè)中樞神經(jīng)元聽反應(yīng)敏感性降低，并伴隨相關(guān)腦區(qū)NMDA受體密度的下降，NMDA受體亞單位mRNA表達減弱。推測NMDA受體與腦聽覺功能發(fā)育及其可塑性相關(guān)。本實驗采用腦區(qū)埋管給藥技術(shù)，在C57B1/6小鼠生后發(fā)育“關(guān)鍵期”內(nèi)，在其左側(cè)大腦聽皮層定位、慢性施加NMDA受體NR2B亞單位非競爭性特異拮抗劑MK-801。待成年后，應(yīng)用行為學(xué)方法、常規(guī)電生理學(xué)方法和形態(tài)學(xué)方法，考察在發(fā)育“關(guān)鍵期”內(nèi)，聽皮層定位、慢性施加MK-801對小鼠腦

2、聽覺功能發(fā)育的影響。1、NR2B對聽空間方位分辨行為的影響實驗在正常組、單純手術(shù)組和實驗組C57B1/6小鼠上進行，應(yīng)用本實驗室自行研制的聽空間方位分辨測定裝置，研究了在動物發(fā)育“關(guān)鍵期”內(nèi)聽皮層定位、慢性施加MK-801對其聽空間方位辨別能力的影響。結(jié)果提示，實驗組動物建立朝向條件反射所需的訓(xùn)練時間長，成功率低；當(dāng)取食時間限制為7.5秒內(nèi)時，即不能建立朝向條件反射，而正常組和手術(shù)組動物在此時間限制下能夠建立良好的朝向條件反射。在保證相近的全場取食成功率前提下，實驗組動物的朝向條件反射反應(yīng)時較正常組和手術(shù)組延長65，且聽空間方位角分辨誤差較正常組和手術(shù)組增大210。正常組和手術(shù)組存在取食的優(yōu)勢

3、方位角，在優(yōu)勢方位角范圍內(nèi)，反應(yīng)時和方位誤差明顯小于全場的反應(yīng)時和方位誤差；而實驗組動物沒有取食優(yōu)勢方位，其在各個方位的反應(yīng)時和方位誤差接近。實驗結(jié)果證實，實驗組動物聽空間方位分辨能力較正常組和手術(shù)組動物明顯降低。2、NRZB對聽皮層神經(jīng)元聽覺敏感性發(fā)育的影響實驗分別在7只正常組動物、5只手術(shù)組動物和6只實驗組動物上進行，采用常規(guī)電生理學(xué)方法，分別記錄了3個組各81個初級聽皮層聽神經(jīng)元聽反應(yīng)，考察了在發(fā)育“關(guān)鍵期”內(nèi)，聽皮層定位、慢性施加MK801對其聽覺敏感性的影響。結(jié)果顯示，實驗組動物初級聽皮層聽神經(jīng)元分布范圍較局限，埋管位置內(nèi)和埋管位置附近聽神經(jīng)元數(shù)量較正常組和手木組明顯減少，神經(jīng)元聽反

4、應(yīng)中心彌散地分布在記錄皮層對測聽空間，且有一部分神經(jīng)元的聽反應(yīng)中心落在測量方位以外的聽空間里，而正常組和手術(shù)組初級聽皮層神經(jīng)元聽反應(yīng)中心集中落在對側(cè)聽空間的水平方位20“60“，垂直方位上方20”下方20“的范國內(nèi)。實驗組初級聽皮層神經(jīng)元最佳頻率分布在410kHZ，較正常組和手術(shù)組最佳頻率分布（520kHZ）明顯降低。實驗組短潛伏期神經(jīng)元數(shù)量較正常組和手術(shù)組減少，閾值也較正常組和手術(shù)組明顯升高，平均提高10dBSPL。實驗組頻率調(diào)諧曲線較正常組和手術(shù)組增寬，Q值降低，銳度明顯減小。實驗組聽神經(jīng)元的聽空間反應(yīng)域較正常組和手術(shù)組明顯增大，其中閾上sdB聲刺激強度時，實驗組的聽空間反應(yīng)域平均較正常組

5、和手術(shù)組擴大300以上。結(jié)果提示，實驗組動物聽覺敏感性較正常組和手術(shù)組動物明顯降低。2、NRZB對聽皮層形態(tài)發(fā)育的影晌實驗在正常組、手術(shù)組和實驗組各3只動物上進行，采用快速HE冰凍切片Sheehc。染色法，考察了在發(fā)育“矢鍵期”內(nèi)，聽皮層定位、慢性施加MK801對小鼠聽皮層神經(jīng)組織發(fā)育的影響。結(jié)果顯示，實驗組動物聽皮層受藥側(cè)厚度較正常組和手術(shù)組動物明顯變薄，聽皮層細胞密度明顯減少，存在極顯著差異（P0001），非受藥側(cè)皮層較正常組和手術(shù)組略有增厚，細胞密度略有增加，存在顯著性差異（P005），11推測可能是動物發(fā)育中的一種代償作用。以上實驗結(jié)果提示，NMDA受休在小鼠生后腦神經(jīng)元聽空間敏感性發(fā)

6、育中起重要作用?！娟P(guān)鍵詞】：C57B1/6聽覺聽皮層空間方位敏感性可塑性【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)【學(xué)位級別】：博士【學(xué)位授予年份】：2002【分類號】：Q43【目錄】：中文摘要7-10英文摘要10-14第一章實驗動物、埋管手術(shù)與慢性施藥14-271實驗動物14-152實驗動物分組153埋管手術(shù)15-164慢性施藥16-175觀察與成活率記錄17-196討論19-217參考文獻21-238版圖與說明23-27第二章NR2B對聽空間方位分辨行為的影響27-54摘要27前言27-541材料與方法28-302結(jié)果30-35（1）朝向條件反射的建立30-31（2）取食率31-32（3）反應(yīng)時32-

7、33（4）方位誤差33-34（5）一定方位誤差范圍內(nèi)的取食成功率34-353討論35-37（1）朝向條件反射的建立35-36（2）取食率、反應(yīng)時和方位誤差的相關(guān)性36-37（3）一定方位誤差范圍內(nèi)的取食成功率374結(jié)論375參考文獻37-396版圖與說明39-54第三章NR2B對聽皮層神經(jīng)元聽覺敏感性發(fā)育的影響54-84摘要54-55方法55-841材料和方法55-572結(jié)果57-60（1）初級聽皮層神經(jīng)元分布57（2）記錄到聽神經(jīng)元的皮層深度57（3）聽反應(yīng)中心57-58（4）最佳頻率和最低閾值58（5）潛伏期58（6）頻率調(diào)諧曲線與Q_（ndB）值58-59（7）聽空間反應(yīng)域59-603討論60-63（1）初級聽皮層神經(jīng)元分布60（2）聽反應(yīng)中心60-61（3）最佳頻率、閾值、潛伏期、頻率調(diào)諧曲線與Q_（ndB）值61-62（4）聽空間反應(yīng)域62-634結(jié)論635參考文獻63-696版圖與說明69-84第四章NR2B對聽皮層形態(tài)發(fā)育的影響84-96摘要84前言84-961取材852快速HE冰凍切片Sheehcm染色法85-863封片觀察86-874結(jié)果87-88（1）聽皮層厚度87（2）聽皮層細胞密