臨床檢驗方法學評價(共8頁)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上臨床檢驗方法學評價目前，臨床實驗室中所使用的檢驗方法，多為常規(guī)分析方法，一般使用商品試劑，基本上可以滿足臨床檢驗的要求。由于作為常規(guī)分析方法的商品試劑種類繁多，其檢驗結(jié)果的質(zhì)量也不相同，因此，臨床實驗室在建立新的檢驗方法時，應(yīng)對該方法的基本性能進行評價，以掌握方法的特征，判斷其能否滿足使用要求。在選擇方法并對其進行評價時，可主要考慮以下幾個方面： 檢驗結(jié)果的可溯源性檢驗結(jié)果的準確性，是臨床醫(yī)生對疾病進行診斷和治療的重要依據(jù)。在臨床實驗室中如何確保檢驗結(jié)果的準確，是每個檢驗人員必須關(guān)心的問題。通常，在檢驗過程中使用可溯源性校準品是保證檢驗結(jié)果準確性的前提，而參加室間質(zhì)評

2、價活動，可以發(fā)現(xiàn)實驗室結(jié)果準確性的偏倚。 檢驗方法學分類包括：決定性方法（ definitive method ）： 經(jīng)詳盡研究尚未發(fā)現(xiàn) 不 準確度或不確定性原因的方法； 參考方法（ reference method ）： 經(jīng)詳盡研究證實其 不 準確度與 不 精密度可以忽略的方法； 常規(guī)方法（ routine method ）： 可滿足臨床或其他目的需要的日常使用的方法。標準物質(zhì)又稱參考物質(zhì)（ reference material ），是一類充分均勻，并具有一個（或多個）確定的特性值的材料或物質(zhì)，用以校準儀器設(shè)備、評價測量方法，或給其它物質(zhì)賦值。標準物質(zhì)的定值結(jié)果一般表示為：標準值 ±

3、; 總不確定度。 “ 標準物質(zhì)證書“是介紹標準物質(zhì)的技術(shù)文件，是研制單位向用戶提出的質(zhì)量保證書和使用說明。附有證書的標準物質(zhì)稱為有證標準物質(zhì)（ certified reference material, CRM ），其特性值由建立了溯源性的程序確定，使可溯源至準確復現(xiàn)的表示該特性值的計量單位，且每個標準值都附有給定置信水平的不確定度。 一級標準物質(zhì)（ primary reference material ）：穩(wěn)定、均 一，采用高度準確、可靠的若干方法定值，可用于校準決定性方法及為二級標準物質(zhì)定值。在我國，一級標準物質(zhì)是測量準確度達到國內(nèi)最高水平的有證標準物質(zhì)，由國家技術(shù)監(jiān)督局批準、頒布并授權(quán)生

4、產(chǎn)。如： 人血清無機成分分析標準物質(zhì)（ GBW09135 ）和血清膽固醇標準物質(zhì)（ GBW 09138 ）。 二級標準物質(zhì)（ secondary reference material ）：用一級標準物質(zhì)校準，參考方法定值。如： 紅細胞微粒標準物質(zhì) GBW （ E ） 、膽紅素標準物質(zhì) GBW （ E ） 、氰化高鐵血紅蛋白溶液標準物質(zhì) GBW （ E ） 和純化血紅蛋白標準物質(zhì) GBW （ E ） 。校準物（ calipator ）：用二級標準物質(zhì)校準，常規(guī)方法定值。用于對常規(guī)方法和儀器的校準。質(zhì)控物（ control material ）：具有與檢測過程相適應(yīng)的特性，其成份與檢測樣本的基質(zhì)相

5、同或相似。應(yīng)使用充分均 一 和穩(wěn)定的質(zhì)控物， 其瓶間變異 必須小于監(jiān)測系統(tǒng)預期的變異，其常規(guī)檢測應(yīng)有助于確認報告范圍。為了保證質(zhì) 控方法 對系統(tǒng)性能提供獨立的評價，必須將 質(zhì)控物與 校準物區(qū)分開來。 分析系統(tǒng)與可溯源性：分析系統(tǒng)是指檢驗方法所涉及的儀器、試劑、參數(shù)和校準品，其檢驗結(jié)果經(jīng)一系列合理實驗的驗證能夠滿足廠家聲明的要求，其量值能夠溯源到高級標準物質(zhì)。在實際工作中，實驗室使用分析系統(tǒng)進行檢驗，其檢驗結(jié)果具有可溯源性。改變分析系統(tǒng)中的任一因素，其檢驗結(jié)果的可溯源性將被打斷。如果必須改變分析系統(tǒng)中的某種因素，實驗室在應(yīng)用該方法前，則應(yīng)對改變后的系統(tǒng) 作出 適當?shù)男阅茉u價，以確定方法準確性的偏

6、倚和檢驗結(jié)果的可溯源性。 精密度評價 1、精密度的內(nèi)容：精密度通常用 不精密度表示，精密度評價的目的是評價檢測設(shè)備的總不精密度，是設(shè)備在一定時間內(nèi)的變異性。許多變異源可在不同程度上影響設(shè)備的精密度，通常在進行精密度評價時要充分考慮所有影響總不精密度的來源，但不必去評價每個來源的相對大小。用于描述與時間相關(guān)的 不 精密度的內(nèi)容包括：批內(nèi)、批間、 日內(nèi)和 日間不 精密度。其中，批內(nèi) 不 精密度和總不精密度的內(nèi)容最為重要。 2、 一般實驗要求：為減少對結(jié)果的影響因素，全部實驗過程中應(yīng)使用單一批號的試劑和校準物。實驗樣本可采用穩(wěn)定化、蛋白基質(zhì)、可模擬臨床樣本特性的產(chǎn)品，必要時，可采用穩(wěn)定化的混合冷凍血

7、清。選擇樣本濃度時應(yīng)考慮醫(yī)學決定水平，推薦使用 2 個或以上濃度的樣本。3、 實驗程序：精密度評價實驗應(yīng)在操作者完全熟悉實驗過程和評價方案以后（通常需要 5 天時間）進行。每天分 2 批測定樣本，各批實驗間至少間隔 2 小時。每批測定 2 個濃度樣本，每個樣本重復測定 2 次。按表 1 記錄實驗結(jié)果。 4、 結(jié)果計算（略） 測定線性范圍評價 線性是分析方法的一個特征，不同于準確度和精密度。 線性范圍 （ Linear Range ）是指系統(tǒng)最終的輸出值（濃度或活性）與被分析物的濃度或活性成比例的范圍。線性范圍的測量即測定濃度曲線接近直線的程度，它反映整個系統(tǒng)的輸出特性 。 線性檢驗系統(tǒng)反應(yīng)，包

8、括校準、線性化技術(shù)、系數(shù)和儀器反應(yīng)。 一般要求： 執(zhí)行分析過程的實驗人員必須掌握儀器操作和維護程序、樣本準備方法和校準。對較簡單的設(shè)備需要 5 天或更少的時間，對較復雜的多通道設(shè)備需要 5 天或更長的時間。在完成儀器熟悉過程后開始實驗并收集數(shù)據(jù)。實驗樣本： 線性實驗應(yīng)使用與病人樣本相似的樣本或注明樣本的基質(zhì)類型，最少使用 4 個濃度水平，推薦 5 個水平。高值樣本應(yīng)高于線性上限 30% ， 低值樣本應(yīng)低 于線性低限。線性實驗可使用的樣本包括：混合病人血清（理想的 樣本基質(zhì)） 、 加入待測物的混合人血清（ 加入品在沒有干擾物存在時不需高純度） 、 對特殊材料透析過的混合人血清（ 用于降低分析物濃

9、度，如：透析、熱處理、層析） 、對鹽水透析過的 混合血清 （ 在線性實驗中使用此類樣本可掩蓋不同的基質(zhì)效應(yīng)）。商品 質(zhì)控物或 校準物 （ 此類樣本由于不是正常的生理形式，可掩蓋實際的線性結(jié)果）、水溶液 （一般無基質(zhì)效應(yīng)），等。實驗程序： 全部實驗和數(shù)據(jù)采集應(yīng)在同一工作日內(nèi)完成。分析序列應(yīng)為隨機排列。有顯著攜帶污染時，應(yīng)用空白隔開樣本。每個濃度樣本重復測定 4 次。記錄測定結(jié)果。 結(jié)果分析： 觀察結(jié)果有無明顯的數(shù)據(jù)錯誤，若有明顯異常時，應(yīng)判斷是否為離群點。對于特定濃度 Yi 值的離群點進行檢驗時，需將其 4 個重復值從大到小排列（ Yi -1 到 Yi -4 ）。計算極差 D = Y i-1 -

10、 Y i-4 。若 Y i-1 可能是離群點，計算： D 1 = （ Y i-1 Y i-2 ） / D 。 若 Y i-4 可能是離群點，計算： D 4 = （ Y i-3 Y i-4 ） / D 。計算結(jié)果（ D 1 或 D 4 ）如果大于 0.765 (0.05) 或 0.889 (0.01) ，則該點判為離群點。全部數(shù)據(jù)中的 離群點如果有 2 點或以上，則應(yīng)保留全部數(shù)據(jù)或重新進行實驗。 以分析物濃度為 X 軸，反應(yīng)值或儀器輸出值為 Y 軸，繪制 X-Y 線性圖 。 目測線性和進行統(tǒng)計學分析，判斷是否符合要求。 對于線性結(jié)果的分析，應(yīng)當注意統(tǒng)計學標準和臨床可接受限不同；應(yīng)慎用方法學線性范

11、圍從 0 開始；有臨床意義的濃度應(yīng)在線性評價中，如 最低線性濃度、醫(yī)學決定水平及最高線性濃度。 方法學比較臨床實驗室中使用的檢驗方法，隨著科學技術(shù)的發(fā)展不斷更新，在 引進新方法前或用一種方法替代另一種方法時為保證臨床實驗室檢驗結(jié)果的連續(xù)性，通常要進行偏差分析，以比較不同的分析方法在測定同一分析項目時結(jié)果的差異。1、樣本要求： 用于方法學對比實驗的樣本，應(yīng) 來源于健康人或患者，無明顯干擾因素，并應(yīng)盡量避免使用貯存樣本。全部 樣本 在 醫(yī)學決定水平范圍內(nèi)均勻分布，樣本至少 40 例，增加可提高可信性。 2、對比方法： 可采用廠家要求的實驗室常規(guī)方法或公認的參考方法。對比方法應(yīng)具有好的精密度，沒有已

12、知的干擾物，與評價方法單位相同，相對國家標準或參考方法的偏差為已知。3、實驗程序： a) 操作者應(yīng)有足夠的時間熟悉儀器操作 ，保養(yǎng)程序及 評價方案。在全部實驗過程中，都必須建立適當?shù)馁|(zhì)量控制程序。 b) 進行方法學對比實驗，每天應(yīng)測定 8 份樣本，每份樣本都用評價方法和對比方法進行雙份測定，至少連續(xù)測定 5 天，共 40 份樣本。測定時先對樣本排序，再按順序 1 至 8 測定第一次，順序 8 至 1 測定第二次。按表 3 收集實驗數(shù)據(jù) c) 結(jié)果繪圖：實驗結(jié)果可繪制 4 張圖，第一張圖是 Y i 對 X i 的均值散點圖，第二張圖為 Y ij 對 X i 散點圖，第三張為（ Y i -X i

13、）對 X i 偏差圖，第四張為（ Y ij -X ij ）對 X i 的偏差圖。 常用的與方法 學評價EP5-A ： 臨床化學設(shè)備操作精密度評價 核準指南 （ Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices; Approved Guideline ）用于 臨床化學設(shè)備操作精密度評價的實驗設(shè)計及如何與生產(chǎn)廠聲明的精密度進行比較。EP6-P2 ： 定量分析方法的線性評價：統(tǒng)計方法，提議指南第二版（ Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Meth

14、ods: A Statistical Approach; Proposed Guideline Second Edition ）：指南可用于在法評價過程中檢驗方法線性、作為常規(guī)質(zhì)量保證的一部分進行線性檢查及驗證廠家聲明的線性范圍。 EP7-P ： 臨床化學實驗干擾 提議指南（ Interference Testing in Clinical Chemistry; Proposed Guideline ）提供背景信息和 監(jiān)定 程序，用于干擾物對檢驗結(jié)果影響的定性。 EP9-A ： 用病人樣本進行方法 學比較 和偏倚評估，核準批南（ Method Comparison and Bias Estim

15、ation Using Patient Samples; Approved Guideline ）。主要用于檢驗兩種臨床方法或設(shè)備間的偏倚，和使用病人樣本進行方法比較的實驗設(shè)計及數(shù)據(jù)分析。EP10-A ： 定量臨床實驗室方法的初步評價，核準指南（ Preliminary Evaluation of Quantitative Clinical Laboratory Methods; Approved Guideline ）：提供了用于分析方法和設(shè)備操作的初步評價的實驗設(shè)計和數(shù)據(jù)分析。EP11-P ： 用于體外診斷檢驗說明的統(tǒng)一描述，提議指南（ Uniform Description of Cla

16、ims For In Vitro Diagnostic Tests; Proposed Guideline ）EP12-P ： 用于定性實驗評價的用戶協(xié)議，提議指南（ User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Proposed Guideline ）EP13-R ： 實驗室統(tǒng)計標準差，報告 （ Laboratory Statistics Standard Deviation; A Report ）EP14-A ： 基質(zhì)效應(yīng)的評價，核準指南 （ Evaluation of Matrix Effects; Approved Guideline ） EP15-A: 精密度和準確度性能的應(yīng)用，核準指南（ User Demonstration of Performance for Precision