基因工程單元檢測(cè)

1、階段質(zhì)量檢測(cè)(一)基因工程(時(shí)間：60分鐘；滿分：100分)一、選擇題(每小題2.5分，共50分)120世紀(jì)70年代，科學(xué)家創(chuàng)立了一種新的生物技術(shù)基因工程，實(shí)施該工程的最終目的是()A定向提取生物體的DNA分子B定向?qū)NA分子進(jìn)行人工剪切C在生物體外對(duì)DNA分子進(jìn)行改造D定向改造生物的遺傳性狀2下列關(guān)于DNA連接酶作用的敘述，正確的是()A將單個(gè)核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯鍵B將斷開(kāi)的兩個(gè)DNA片段的骨架連接起來(lái)，重新形成磷酸二酯鍵C連接兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵D只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端連接起來(lái)3下列關(guān)于cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù)的說(shuō)法，正確的是()A同一物種的cDN

2、A文庫(kù)只有1種B某真核生物的cDNA文庫(kù)中的某基因一定比基因組文庫(kù)中的該基因短C可以利用反轉(zhuǎn)錄法獲取cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù)D只有cDNA文庫(kù)中的基因可實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流4下列有關(guān)質(zhì)粒的敘述，正確的是()A質(zhì)粒是存在于細(xì)菌中的一種細(xì)胞器B質(zhì)粒改造后可用作基因工程的載體C質(zhì)粒上基因的表達(dá)不遵循中心法則D質(zhì)粒一般具有合成抗生素的基因以便篩選受體細(xì)胞5下列有關(guān)基因工程技術(shù)的敘述，正確的是()A重組DNA技術(shù)所用的工具酶是限制酶、連接酶和載體B所有的限制酶都只能識(shí)別同一種特定的核苷酸序列C只要是細(xì)菌中的質(zhì)粒都可以直接作為基因工程中的載體D載體必須具備的條件之一是有一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，以便與外源

3、基因進(jìn)行連接6下列關(guān)于基因工程的過(guò)程和應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是()A限制酶具有特異性，主要從原核細(xì)胞中分離純化而來(lái)B基因工程操作的核心步驟是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞C將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D將魚(yú)的耐凍基因?qū)霟煵莺头洋w內(nèi)，可能使煙草和番茄的抗寒能力提高7動(dòng)物基因工程前景廣闊，最令人興奮的是利用基因工程技術(shù)使哺乳動(dòng)物成為乳腺生物反應(yīng)器，以生產(chǎn)所需要的藥品，如轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)人的生長(zhǎng)激素?？茖W(xué)家培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物成為乳腺生物反應(yīng)器時(shí)()A僅僅利用了基因工程技術(shù)B不需要乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子C利用基因槍法將人的生長(zhǎng)激素基因直接導(dǎo)入受精卵中D需要其進(jìn)入泌乳期才能成為“批量生產(chǎn)藥物的工廠

4、”8有關(guān)基因工程和蛋白質(zhì)工程的敘述，正確的是()A通過(guò)基因工程產(chǎn)生的蛋白質(zhì)都符合人類(lèi)需要B通過(guò)基因工程能得到自然界中不存在的蛋白質(zhì)C蛋白質(zhì)工程通常是對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行直接改造D蛋白質(zhì)工程可以創(chuàng)造新的、自然界中不存在的蛋白質(zhì)9人類(lèi)利用基因工程的方法成功培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉，以下說(shuō)法正確的是()A蘇云金芽孢桿菌的毒蛋白基因與質(zhì)粒結(jié)合后直接進(jìn)入棉花的葉肉細(xì)胞表達(dá)B抗蟲(chóng)基因?qū)朊藁ㄈ~肉細(xì)胞后，可通過(guò)傳粉、受精的方法，使抗蟲(chóng)性狀遺傳下去C標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因D轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉經(jīng)過(guò)種植，棉鈴蟲(chóng)不會(huì)產(chǎn)生抗性，這樣可以徹底消滅棉鈴蟲(chóng)10科學(xué)家把菠菜的基因植入豬的受精卵內(nèi)，培育出不飽和脂肪酸含

5、量高的豬。在對(duì)這種豬的脂肪組織進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，它們體內(nèi)的不飽和脂肪酸要比一般豬高大約20%。植入豬受精卵里的菠菜基因控制菠菜根部的一種酶FAD2，這種酶能夠?qū)柡椭舅徂D(zhuǎn)換為不飽和脂肪酸。下列說(shuō)法正確的是()A該實(shí)驗(yàn)的核心是將重組DNA導(dǎo)入豬的受精卵B受體細(xì)胞之所以選擇受精卵是因?yàn)樗苄愿逤菠菜基因之所以能植入豬細(xì)胞，并大量復(fù)制的物質(zhì)基礎(chǔ)是菠菜和豬共用一套密碼子D該實(shí)驗(yàn)植入菠菜基因的方法一般選用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法11中美科學(xué)家通過(guò)改變一種名為NR2B的基因研制出了轉(zhuǎn)基因超級(jí)小鼠Hobbie­J, Hobbie­J比普通老鼠更加聰明，大腦運(yùn)轉(zhuǎn)更加迅速，它能夠輕松完成迷宮任務(wù)。下列

6、關(guān)于Hobbie­J產(chǎn)生過(guò)程的敘述，錯(cuò)誤的是()ANR2B基因可通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增B改變后的NR2B基因作為目的基因，可直接注入小鼠受精卵內(nèi)C通常采用顯微注射法將帶有改變后的NR2B基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入小鼠受精卵內(nèi)D可采用基因探針檢測(cè)改變后的NR2B基因是否導(dǎo)入小鼠體內(nèi)12中華鱘是地球上最古老的脊椎動(dòng)物，被稱(chēng)為“活化石”。研究者試圖通過(guò)蛋白質(zhì)工程改造中華鱘體內(nèi)的某些蛋白質(zhì)，使其更加適應(yīng)現(xiàn)在的水域環(huán)境。以下說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A該工程可以定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)B改造蛋白質(zhì)是通過(guò)改造基因結(jié)構(gòu)而實(shí)現(xiàn)的C改造后的中華鱘和現(xiàn)有中華鱘仍是同一物種D改造后的中華鱘的后代不具有改造的蛋白質(zhì)13應(yīng)用基

7、因工程技術(shù)診斷疾病的過(guò)程中必須使用基因探針才能達(dá)到檢測(cè)疾病的目的，這里的基因探針是指()A人工合成的免疫球蛋白的DNA分子B人工合成的苯丙氨酸羥化酶的DNA分子C用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的蛋白質(zhì)分子D用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的DNA分子14下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述，正確的是()A我國(guó)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉是轉(zhuǎn)入了植物凝集素基因培育出來(lái)的B可用于轉(zhuǎn)基因植物的抗蟲(chóng)基因只有植物凝集素基因和蛋白酶抑制劑基因C抗真菌轉(zhuǎn)基因植物中，可使用的基因有幾丁質(zhì)酶基因和抗毒素合成基因D提高作物的抗鹽堿和抗干旱能力，與調(diào)節(jié)滲透壓的基因無(wú)關(guān)15下列對(duì)如圖所示黏性末端的說(shuō)法正確的是()A甲、乙、丙黏性末端是由兩種限制

8、性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的B圖乙中的酶切位點(diǎn)在A與G之間C如果甲中的G發(fā)生突變，限制性核酸內(nèi)切酶可能不能識(shí)別該切割位點(diǎn)D構(gòu)建基因表達(dá)載體所用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶分別作用于a處和b處16甲、乙兩圖表示從細(xì)菌細(xì)胞中獲取目的基因的兩種方法，以下說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A甲方法可建立該細(xì)菌的基因組文庫(kù) B乙方法可建立該細(xì)菌的cDNA文庫(kù)C甲方法要以脫氧核苷酸為原料 D乙方法需要逆轉(zhuǎn)錄酶參與17如圖表示蛋白質(zhì)工程的操作過(guò)程，相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A蛋白質(zhì)工程中對(duì)蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的了解是非常關(guān)鍵的工作B蛋白質(zhì)工程是完全擺脫基因工程技術(shù)的一項(xiàng)全新的生物工程技術(shù)Ca、b過(guò)程分別是轉(zhuǎn)錄、翻譯D蛋白質(zhì)工程中可能構(gòu)建出一

9、種全新的基因18PCR技術(shù)通過(guò)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，可以得到大量的目的基因。下面對(duì)該技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是()A遵循的基本原理是DNA半保留復(fù)制和堿基互補(bǔ)配對(duì)原則B擴(kuò)增儀內(nèi)必須加入引物、原料和熱穩(wěn)定性DNA聚合酶、解旋酶C擴(kuò)增過(guò)程溫度發(fā)生周期性變化，DNA的空間結(jié)構(gòu)可恢復(fù)D呈指數(shù)式擴(kuò)增，約為2n(n為擴(kuò)增次數(shù))19如圖所示是利用基因工程生產(chǎn)可食用疫苗的部分過(guò)程，其中Pst、Sma、EcoR、Apa為四種限制性核酸內(nèi)切酶。下列有關(guān)敘述正確的是()A一種限制性核酸內(nèi)切酶不止識(shí)別一種特定的脫氧核苷酸序列B表達(dá)載體構(gòu)建時(shí)需要用到Sma、Pst限制性核酸內(nèi)切酶C抗卡那霉素基因的主要作用是促進(jìn)抗原基因在受體細(xì)

10、胞中表達(dá)D除圖示標(biāo)注的結(jié)構(gòu)外表達(dá)載體中還應(yīng)有啟動(dòng)子和終止子等20北極比目魚(yú)中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白具有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強(qiáng)。如圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過(guò)程示意圖，有關(guān)敘述正確的是()A過(guò)程獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚(yú)基因組測(cè)序B將多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成的基因不再是抗凍基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白C過(guò)程構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)二、非選擇題(除注明外，每空1分，共50分)21(2019·江蘇高考，節(jié)選)(11分)圖

11、1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程示意圖，載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)EcoR 酶切位點(diǎn)為，EcoR 酶切出來(lái)的線性載體P1為_(kāi)末端。(2)用Taq DNA聚合酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得的目的基因片段，其兩端各自帶有一個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。載體P1用酶處理，在兩端各添加了一個(gè)堿基為_(kāi)的脫氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在_酶作用下，形成重組質(zhì)粒P3。(3)為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選，得到A、B、C三類(lèi)菌落，其生長(zhǎng)情況如表(“”代表生長(zhǎng)，“”代表不生長(zhǎng))。根據(jù)表中結(jié)果判斷，應(yīng)選擇的菌落是_(

12、填表中字母)類(lèi)，另外兩類(lèi)菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是_、_。菌落類(lèi)型平板類(lèi)型ABC無(wú)抗生素氨芐青霉素四環(huán)素氨芐青霉素四環(huán)素22(2019·天津高考，節(jié)選)(9分)B基因存在于水稻基因組中，其僅在體細(xì)胞(2n)和精子中正常表達(dá)，但在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)。據(jù)圖回答：(1)B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄，推測(cè)其可能的原因是卵細(xì)胞中_(單選)。A含B基因的染色體缺失BDNA聚合酶失活CB基因發(fā)生基因突變DB基因的啟動(dòng)子無(wú)法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄(2)從水稻體細(xì)胞或_中提取總RNA，構(gòu)建_文庫(kù)，進(jìn)而獲得B基因編碼蛋白的序列。將該序列與Luc基因(表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生

13、熒光)連接成融合基因(表達(dá)的蛋白質(zhì)能保留兩種蛋白質(zhì)各自的功能)，然后構(gòu)建重組表達(dá)載體。(3)在過(guò)程、轉(zhuǎn)化篩選時(shí)，過(guò)程_中T­DNA整合到受體細(xì)胞染色體DNA上，過(guò)程_在培養(yǎng)基中應(yīng)加入卡那霉素。(4)獲得轉(zhuǎn)基因植株過(guò)程中，以下鑒定篩選方式正確的是_(多選)。A將隨機(jī)斷裂的B基因片段制備成探針進(jìn)行DNA分子雜交B以Luc基因?yàn)槟０逶O(shè)計(jì)探針進(jìn)行DNA分子雜交C以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計(jì)探針與從卵細(xì)胞提取的mRNA雜交D檢測(cè)加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光23(10分)苦蕎是一種有名的經(jīng)濟(jì)植物，其含有的黃酮類(lèi)化合物具有降血糖、降血脂等功效。CHS是合成黃酮類(lèi)化合物的關(guān)鍵酶，有人把經(jīng)修飾

14、的CHS基因?qū)肟嗍w細(xì)胞中，培育高產(chǎn)黃酮苦蕎品系。據(jù)圖示回答下列問(wèn)題：(1) 過(guò)程中將修飾后的CHS基因與Ti質(zhì)粒連接成重組Ti質(zhì)粒的酶稱(chēng)為_(kāi)。這種酶主要有兩類(lèi)，一類(lèi)是從T4噬菌體中分離得到的，另一類(lèi)是從大腸桿菌中分離得到的，稱(chēng)為_(kāi)。這兩類(lèi)酶都能恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的_鍵。(2)圖中將修飾后的CHS基因?qū)肟嗍w體細(xì)胞的方法稱(chēng)為_(kāi)，除此外還可以利用的方法有_。對(duì)過(guò)程操作前，需先用Ca2處理農(nóng)桿菌，使其成為_(kāi)細(xì)胞。(3)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因苦蕎培育是否成功，不能用抗原抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)的原因是_，可以比較轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的_含量或測(cè)定細(xì)胞中CHS含量進(jìn)行鑒定。24.(10分)復(fù)合型免疫缺陷

15、癥(SCID)患者失去ada基因。利用基因療法將人正常ada基因轉(zhuǎn)入患者 自身T細(xì)胞，可改善患者的免疫功能。如圖顯示該基因療法的兩個(gè)關(guān)鍵步驟?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)圖中所示獲取正常ada基因的方法是_。若要大量獲取該基因，可通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制過(guò)程相比，PCR技術(shù)的不同點(diǎn)有：_(答出兩點(diǎn))。(2)步驟是_。在該步驟中，病毒作為_(kāi)起作用，需使用的工具酶有_。(3)完成步驟后，在體外將人正常ada基因?qū)牖颊咦陨淼腡細(xì)胞。此后，在將T細(xì)胞重新輸入患者體內(nèi)之前，還必須完成哪兩項(xiàng)操作？_。25(10分)請(qǐng)回答有關(guān)下圖的問(wèn)題：(1)圖甲中所示的生物工程為_(kāi)。該工程是指以_作為基礎(chǔ)，通

16、過(guò)_修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有_進(jìn)行改造，或制造出一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求。(2)圖甲中所示過(guò)程叫_，該過(guò)程遵循的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則不同于翻譯過(guò)程的是_(請(qǐng)將模板堿基寫(xiě)在前)。(3)若預(yù)期蛋白質(zhì)欲通過(guò)乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)，則構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，圖乙中序號(hào)1代表的是_；在圖甲中過(guò)程之前，要對(duì)精子進(jìn)行篩選，保留含性染色體_的精子。階段質(zhì)量檢測(cè)(一)基因工程一、選擇題(每小題2.5分，共50分)1解析：選D基因工程是在生物體外通過(guò)對(duì)DNA分子進(jìn)行人工“剪切”和“拼接”等過(guò)程，對(duì)生物的基因進(jìn)行改造和重新組合，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行無(wú)性生殖，使重組基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，創(chuàng)造出人類(lèi)所需的基因產(chǎn)

17、物，也就是定向地改造生物的遺傳性狀。2解析：選BDNA聚合酶能將單個(gè)核苷酸加到某DNA片段末端形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶能將兩個(gè)雙鏈DNA片段連接起來(lái)，重新形成磷酸二酯鍵。E·coliDNA連接酶只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來(lái)，而T4DNA連接酶既可以連接雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端，又可以連接雙鏈DNA片段的平末端。3解析：選BcDNA文庫(kù)只包含某物種的部分基因，因此同一物種的cDNA文庫(kù)不止1種；真核生物的基因組文庫(kù)中的基因含有內(nèi)含子、啟動(dòng)子等，而真核生物的cDNA文庫(kù)的基因通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法形成，其中不含有內(nèi)含子、啟動(dòng)子等，因此某真核生物的cDNA文庫(kù)中的某基因一定

18、比基因組文庫(kù)中的該基因短；可以利用反轉(zhuǎn)錄法獲取cDNA文庫(kù)，但不能獲得基因組文庫(kù)；cDNA文庫(kù)的基因在以DNA為遺傳物質(zhì)的物種間可實(shí)現(xiàn)基因交流，基因組文庫(kù)的部分基因也可在部分物種間實(shí)現(xiàn)基因交流。4解析：選B質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子，一般含有抗生素抗性基因，而不是具有合成抗生素的基因。5解析：選D載體不屬于酶。不同的限制酶識(shí)別不同的核苷酸序列。天然質(zhì)粒大多不符合要求，需要進(jìn)行改造。6解析：選B酶都具有特異性，限制酶主要從原核細(xì)胞中提取?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建是基因工程操作的核心步驟。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌

19、轉(zhuǎn)化法。將耐凍基因?qū)霟煵莺头洋w內(nèi)，可以提高煙草和番茄的抗寒能力。7解析：選D培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物成為乳腺生物反應(yīng)器時(shí)，除了采用基因工程技術(shù)，還需要采用細(xì)胞工程(動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng))和胚胎工程技術(shù)(胚胎移植)；乳腺生物反應(yīng)器需要乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子，使目的基因只在乳腺組織中表達(dá)；基因槍法是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法，將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用的方法是顯微注射法；乳腺生物反應(yīng)器是從乳腺中獲取藥物，因此轉(zhuǎn)基因動(dòng)物需要進(jìn)入泌乳期才能成為“批量生產(chǎn)藥物的工廠”。8解析：選D基因工程通常以改造生物的遺傳特性為目的，所以基因工程的產(chǎn)物不一定都是人類(lèi)需要的蛋白質(zhì)；基因工程中的目的基因通常是天然的，它控制合成天然蛋白

20、質(zhì)，即使人工合成的目的基因，也是根據(jù)天然蛋白質(zhì)的有關(guān)信息合成的，所以基因工程不可能產(chǎn)生非天然蛋白質(zhì)；蛋白質(zhì)工程并不是直接改造蛋白質(zhì)，而是改造某種基因，對(duì)這種基因控制合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造；蛋白質(zhì)工程通過(guò)改造原有的基因，可以得到新的蛋白質(zhì)。9解析：選C蘇云金芽孢桿菌的毒蛋白基因與質(zhì)粒結(jié)合，導(dǎo)入棉花葉肉細(xì)胞后，需要經(jīng)過(guò)檢測(cè)、鑒定是否成功表達(dá)；抗蟲(chóng)棉在形成配子時(shí)，基因會(huì)發(fā)生分離，不一定能將抗蟲(chóng)性狀完全地遺傳下去；轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉種植時(shí)，棉鈴蟲(chóng)食用后可大量死亡，但同時(shí)使棉鈴蟲(chóng)的抗性不斷加強(qiáng)，不可能徹底消滅棉鈴蟲(chóng)。10解析：選B該實(shí)驗(yàn)的核心是構(gòu)建基因表達(dá)載體；由于受精卵全能性很高，故受體細(xì)胞一般選擇受精卵；菠

21、菜基因之所以能植入豬細(xì)胞，并大量復(fù)制的物質(zhì)基礎(chǔ)是它們的遺傳物質(zhì)都是DNA，都具有雙螺旋結(jié)構(gòu)；由于受體細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞，故該實(shí)驗(yàn)植入菠菜基因的方法一般選用顯微注射法。11解析：選BPCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因；改變后的NR2B基因作為目的基因，需要與載體結(jié)合后才可導(dǎo)入小鼠受精卵內(nèi)；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法；可采用基因探針檢測(cè)改變后的NR2B基因是否導(dǎo)入小鼠體內(nèi)。12解析：選D蛋白質(zhì)工程可以定向改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)；改造蛋白質(zhì)是通過(guò)改造基因結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)的；改造后的中華鱘具有新的性狀，但其和現(xiàn)有中華鱘仍是同一物種；蛋白質(zhì)工程改造的是基因，基因可以遺傳給后代，因此改造后的中華鱘的后代也具有

22、改造的蛋白質(zhì)。13解析：選D基因探針是用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的DNA分子?；蛱结樣糜诨蛟\斷，利用DNA分子雜交原理，可以鑒定被檢測(cè)標(biāo)本上的遺傳信息。14解析：選C我國(guó)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉是轉(zhuǎn)入了Bt毒蛋白基因培育出來(lái)的，抗蟲(chóng)的基因還有蛋白酶抑制劑基因、淀粉酶抑制劑基因、植物凝集素基因等。利用調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓的基因，可以提高作物的抗鹽堿和抗旱能力。15解析：選C據(jù)圖分析，甲、乙、丙黏性末端是由3種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的；圖乙中的酶切位點(diǎn)在C與A之間；酶的作用具有專(zhuān)一性，如果甲中G發(fā)生突變，則限制性核酸內(nèi)切酶可能不能識(shí)別該切割位點(diǎn)；限制性核酸內(nèi)切酶能破壞磷酸二酯鍵，DNA連接酶可恢復(fù)磷酸二酯

23、鍵，它們都作用于a處。16解析：選C甲方法是以細(xì)菌中的DNA為基礎(chǔ)，用限制酶進(jìn)行切割，它包括了細(xì)菌所有的基因，可以建立基因組文庫(kù)，并且可以從中選出所需的目的基因；而乙方法是用逆轉(zhuǎn)錄的方法人工合成目的基因，它只能得到生物的部分基因，基因中只有編碼區(qū)，所以組成的是該細(xì)菌的cDNA文庫(kù)。17解析：選B蛋白質(zhì)工程中了解蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)，如蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)、氨基酸的排列順序等，對(duì)于合成或改造基因至關(guān)重要；蛋白質(zhì)工程的進(jìn)行離不開(kāi)基因工程，對(duì)蛋白質(zhì)的改造是通過(guò)對(duì)基因的改造來(lái)完成的；圖中a、b過(guò)程分別是轉(zhuǎn)錄、翻譯過(guò)程；蛋白質(zhì)工程中可根據(jù)已經(jīng)明確的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)構(gòu)建出一種全新的基因。18解析：選BPCR反應(yīng)中DNA

24、解旋需加熱至9095 ，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈需冷卻至5560 ，熱穩(wěn)定性DNA聚合酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成需加熱至7075 。此過(guò)程不需加入解旋酶，解旋過(guò)程通過(guò)高溫條件實(shí)現(xiàn)。19解析：選D限制性核酸內(nèi)切酶具有特異性，即一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核苷酸序列并在特定的位點(diǎn)切割；用Sma限制性核酸內(nèi)切酶切割會(huì)破壞目的基因，因此表達(dá)載體構(gòu)建時(shí)需要用EcoR、Pst限制性核酸內(nèi)切酶；抗卡那霉素基因的主要作用是篩選含有目的基因的受體細(xì)胞；基因表達(dá)載體的組成包括啟動(dòng)子、標(biāo)記基因、目的基因和終止子等，因此除圖示標(biāo)注的結(jié)構(gòu)外表達(dá)載體中還應(yīng)有啟動(dòng)子和終止子等。20解析：選B過(guò)程為反轉(zhuǎn)錄過(guò)程獲

25、得目的基因，缺少相應(yīng)內(nèi)含子，所以用這種方法獲得的基因不能用于比目魚(yú)基因組測(cè)序。將多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成的基因不再是抗凍基因，得到的蛋白質(zhì)抗凍性并不增強(qiáng)。重組質(zhì)粒上有標(biāo)記基因，并不是轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能篩選，而是用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，有利于重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞。應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測(cè)目的基因是否在受體細(xì)胞中存在，并不能檢測(cè)其是否表達(dá)。二、非選擇題(除注明外，每空1分，共50分)21解析：(1)從圖中可以看出，EcoR 酶切出來(lái)的載體質(zhì)粒為平末端。(2)從圖中可以看出，目的基因的兩端各有一個(gè)游離的腺嘌呤脫氧核苷酸，由于載體P1為平末端，所以載體P1的兩端應(yīng)該各添加一個(gè)胸腺嘧啶脫氧核苷酸，形成P2

26、，這樣在DNA連接酶的作用下才能把目的基因和載體P2連接起來(lái)。(3)由題意可知，構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)四環(huán)素抗性基因被破壞，所以導(dǎo)入目的基因的菌落只能在沒(méi)有抗生素或含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中存活，應(yīng)該選B類(lèi)菌落。A類(lèi)菌落能在表中條件下存活，說(shuō)明導(dǎo)入的是P0質(zhì)粒。C類(lèi)菌落只能在無(wú)抗生素的培養(yǎng)基中存活，說(shuō)明C類(lèi)菌落沒(méi)有導(dǎo)入質(zhì)粒。答案：(11分)(1)平(2)胸腺嘧啶(T)(2分)DNA連接(2分)(3)B(2分)A類(lèi)菌落含有P0(2分)C類(lèi)菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒(2分)22解析：(1)因B基因存在于水稻的基因組中，故水稻卵細(xì)胞中也含有B基因，但B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄，其原因可能是B基因的啟動(dòng)子無(wú)法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄。(2

27、)根據(jù)題干可知，B基因在水稻的體細(xì)胞和精子中正常表達(dá)，故若要通過(guò)構(gòu)建cDNA文庫(kù)獲得B基因編碼蛋白的序列，則需從水稻的體細(xì)胞或精子中提取總RNA，通過(guò)反(逆)轉(zhuǎn)錄法實(shí)現(xiàn)。(3)圖示為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，過(guò)程是篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌。由圖示可知，質(zhì)粒上的卡那霉素抗性基因可作為標(biāo)記基因，故可在培養(yǎng)基中加入卡那霉素進(jìn)行篩選。過(guò)程是用含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌感染水稻愈傷組織，使重組質(zhì)粒中的T­DNA整合到水稻愈傷組織細(xì)胞染色體的DNA上。(4)A項(xiàng)選用隨機(jī)斷裂的B基因片段制備探針，作為探針的B基因會(huì)不完整，與其雜交的DNA片段有可能不是B基因，因此隨機(jī)斷裂的B基因片段制備的探針不能用于篩選轉(zhuǎn)基因植株

28、，A項(xiàng)錯(cuò)誤；據(jù)圖可知，導(dǎo)入的是B­Luc融合基因，故可用DNA分子雜交的方法檢測(cè)卵細(xì)胞中是否含有B基因或Luc基因，B項(xiàng)正確；也可用核酸分子雜交的方法檢測(cè)卵細(xì)胞中B基因或Luc基因是否轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生了相應(yīng)的mRNA，即可用B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計(jì)探針與相應(yīng)mRNA雜交，C項(xiàng)正確；因Luc基因表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光，故還可以檢測(cè)加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光，從而篩選出轉(zhuǎn)基因植株，D項(xiàng)正確。答案：(9分)(1)D(2分)(2)精子cDNA(3)(2分)(4)BCD(2分)23解析：(1)過(guò)程中將修飾后的CHS基因與Ti質(zhì)粒連接成重組Ti質(zhì)粒需要DNA連接酶。這種酶主要有兩類(lèi)，一類(lèi)是從T4噬菌體中分離得到的，稱(chēng)為T(mén)4DNA連接酶，另一類(lèi)是從大腸桿菌中分離得到的，稱(chēng)為E·coliDNA連接酶。DNA連接酶連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(2)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法、