泥鰍實(shí)驗(yàn)報告

1、泥鰍的催青、人工授精和胚胎發(fā)育的整體觀察11級生科三班 程旖、陳曉鳳、楊祖勤、蘇巧、鞏雪、程程、張金萍、陳宇霖、崔凱1、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆漳圉q的催青和人工授精技術(shù)，觀察魚類胚胎發(fā)育過程的形態(tài)變化。2、 實(shí)驗(yàn)原理HCG（人絨毛膜促性腺激素）可促進(jìn)雌雄性腺的發(fā)育而產(chǎn)卵或排精。人工獲取精子和卵子并使兩者在體外融合形成受精卵的過程即稱為人工受精。在顯微鏡下可觀察到受精卵在孵化過程中出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目和形態(tài)的顯著變化。3、 材料用具和試劑1.材料用具泥鰍（8條雌性，2條雄性）、塑料盆2個、漏盆1個、培養(yǎng)皿8個、紗布1塊、吸管2支、解剖剪、鑷子、注射器2. 試劑 HCG、曝氣水4、 實(shí)驗(yàn)步驟1.催青5月9日晚19:

2、00取雌魚，在腹部注射HCG（濃度為500µl/ml），150µl/條。2. 人工授精5月10日早8:00取雌性泥鰍，用右手指由前向后擠壓魚的腹部擠出魚卵，置于培養(yǎng)皿中。取雄性泥鰍剪掉頭部，從泄殖孔剪開腹部。用鑷子取出背部的兩條白色精巢，放在干凈的培養(yǎng)皿中（不要有水），用剪刀剪碎。精子加水激活，倒到裝有卵的培養(yǎng)皿中進(jìn)行授精（12min內(nèi)完成）。3. 整體觀察 在顯微鏡4x物鏡下觀察受精卵發(fā)育過程，并拍照記錄。5、 觀察結(jié)果表1 泥鰍的胚胎發(fā)育時序表(水溫: 2025)序號 發(fā)育時期 各發(fā)育時期簡要特征 記錄時間 歷時(h: min) 圖序1 受精卵 圓粒狀,淡黃色,卵質(zhì)分布

3、均勻 0:002 胚盤期 胞質(zhì)集中到動物極，胚盤隆起 3 2細(xì)胞期 第1次卵裂,縱裂為2個細(xì)胞 9:21 1 4 4細(xì)胞期 第2次卵裂,縱裂為2排4個細(xì)胞 9:56 2 5 8細(xì)胞期 第3次卵裂,8個細(xì)胞分列2排 10:08 3 6 16細(xì)胞期 第4次卵裂,16個細(xì)胞分列4排 10:23 47 32細(xì)胞期 第5次卵裂,產(chǎn)生32個細(xì)胞 10:49 58 64細(xì)胞期 第6次卵裂,產(chǎn)生64個細(xì)胞 11:13 6 9 多細(xì)胞期 細(xì)胞越分越小,由單層變?yōu)槎鄬?11:26 710 高囊胚期 囊胚層隆起 12:02 811 低囊胚期 囊胚層下降 14:36 912 原腸早期 胚層下包1/31/2 15:03

4、 1013 原腸中期 胚層下包1/22/3 15:32 1114 原腸晚期 胚層下包2/35/6 15:59 1216 神經(jīng)胚期 胚層下包5/6,形成卵黃栓 16:37 1317 胚孔封閉期 胚孔完全封閉 17:53 1418 肌節(jié)出現(xiàn)期 胚體頭部增大,肌節(jié)出現(xiàn) 19:21 1519 眼囊期 出現(xiàn)眼囊 21:09 1620 尾芽期 尾端伸出錐狀尾芽 00:11 1721 肌肉效應(yīng)期 肌肉微抽動 03:12 1822 嗅囊出現(xiàn)期 眼前端出現(xiàn)嗅囊 04:34 1923 心臟原基期 心臟原基出現(xiàn),尾向上彎至頭部 05:43 2024 耳石出現(xiàn)期 聽囊出現(xiàn)2顆耳石 06:42 2125 心臟搏動期 心

5、臟有節(jié)律搏動,尾部劇烈擺動,胚 08:00 22 體在卵膜內(nèi)轉(zhuǎn)動26 孵出期 胚體破膜而出,初孵仔魚全長4mm 12:18 23 泥鰍胚胎發(fā)育圖 1. 2細(xì)胞期； 2. 4細(xì)胞期； 3. 8細(xì)胞期； 4. 16細(xì)胞期； 5. 32細(xì)胞期； 6. 64細(xì)胞期； 7.多細(xì)胞期；8. 高囊胚期； 9.低囊胚期； 10.原腸早期； 11.原腸中期； 12.原腸晚期； 13.神經(jīng)胚期； 14.胚孔封閉期； 15.肌節(jié)出現(xiàn)期； 16.眼囊期； 17.尾芽期； 18.肌肉效應(yīng)期； 19.嗅囊出現(xiàn)期； 20.心臟原基期； 21. 耳石出現(xiàn)期； 22.心臟搏動期； 23.孵出期（備注：有些時期的照片由于拍得不清楚或無法展示動態(tài)過程而不能完全反映胚胎的形態(tài)特征，如肌肉效應(yīng)期，心臟原基期，耳石出現(xiàn)期，心臟搏動期等。）參考文獻(xiàn)：1王寶森,姚艷紅,王志堅.短體副鰍的胚胎發(fā)育觀察