藥理實(shí)驗(yàn)-半數(shù)致死量課件

1、章半數(shù)致死量章半數(shù)致死量 在動(dòng)物毒理學(xué)和藥理學(xué)研究中，通常用試驗(yàn)動(dòng)在動(dòng)物毒理學(xué)和藥理學(xué)研究中，通常用試驗(yàn)動(dòng)物對(duì)某種藥物、毒物、細(xì)菌及理化刺激等反應(yīng)來(lái)測(cè)物對(duì)某種藥物、毒物、細(xì)菌及理化刺激等反應(yīng)來(lái)測(cè)定其效力或毒性。定其效力或毒性。 常用的指標(biāo)是半數(shù)效量常用的指標(biāo)是半數(shù)效量(median effective dose: ED50)：指使半數(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)生特定效應(yīng)的劑量，：指使半數(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)生特定效應(yīng)的劑量， 如半數(shù)治愈量、半數(shù)麻醉量、半數(shù)感染量、半如半數(shù)治愈量、半數(shù)麻醉量、半數(shù)感染量、半數(shù)驚厥量、半數(shù)致死量等等數(shù)驚厥量、半數(shù)致死量等等第一節(jié)第一節(jié) 半數(shù)致死量概述半數(shù)致死量概述第一節(jié)第一節(jié) 半數(shù)致死量概

2、述半數(shù)致死量概述死死亡亡數(shù)數(shù)劑量劑量對(duì)數(shù)劑量對(duì)數(shù)劑量累累積積死死亡亡率率對(duì)數(shù)劑量對(duì)數(shù)劑量概概率率單單位位劑量劑量累累積積死死亡亡率率藥物的劑量與效應(yīng)關(guān)系藥物的劑量與效應(yīng)關(guān)系死死亡亡數(shù)數(shù)對(duì)數(shù)致死劑量對(duì)數(shù)致死劑量第一節(jié)第一節(jié) 半數(shù)致死量概述半數(shù)致死量概述第一節(jié)第一節(jié) 半數(shù)致死量概述半數(shù)致死量概述【測(cè)定【測(cè)定LD50的意義】的意義】 LD50反映藥物的毒性大小。反映藥物的毒性大小。 因?yàn)閯┝颗c致死百分率曲線呈因?yàn)閯┝颗c致死百分率曲線呈S形，因而形，因而LD50是劑量反應(yīng)曲線上致死百分率變化最靈敏是劑量反應(yīng)曲線上致死百分率變化最靈敏的劑量點(diǎn)，重現(xiàn)性好，準(zhǔn)確性高。的劑量點(diǎn)，重現(xiàn)性好，準(zhǔn)確性高。第一節(jié)第一

3、節(jié) 半數(shù)致死量概述半數(shù)致死量概述最小致死劑量和絕對(duì)致死量的不合適性最小致死劑量和絕對(duì)致死量的不合適性 在曲線的兩端即藥物在低濃度或高濃度時(shí)在曲線的兩端即藥物在低濃度或高濃度時(shí)藥物濃度的改變對(duì)動(dòng)物死亡率的改變影響較小，藥物濃度的改變對(duì)動(dòng)物死亡率的改變影響較小，動(dòng)物的死亡率對(duì)藥物濃度不敏感。動(dòng)物的死亡率對(duì)藥物濃度不敏感。 在動(dòng)物試驗(yàn)中，不同批動(dòng)物求得的最小致在動(dòng)物試驗(yàn)中，不同批動(dòng)物求得的最小致死劑量和絕對(duì)致死量的變動(dòng)很大，以這種指標(biāo)作死劑量和絕對(duì)致死量的變動(dòng)很大，以這種指標(biāo)作為藥物毒力的指標(biāo)是不合適的。為藥物毒力的指標(biāo)是不合適的。第一節(jié)第一節(jié) 半數(shù)致死量概述半數(shù)致死量概述第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的

4、測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法 半數(shù)致死量的計(jì)算方法有多種，其中寇氏法半數(shù)致死量的計(jì)算方法有多種，其中寇氏法最為常用，目測(cè)概率單位法最為簡(jiǎn)便，序貫法最最為常用，目測(cè)概率單位法最為簡(jiǎn)便，序貫法最節(jié)約實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。下面將分別介紹這三種方法。節(jié)約實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。下面將分別介紹這三種方法。一、寇氏法一、寇氏法寇氏法是寇氏法是Kaeber（1931年）提出，又稱平均法年）提出，又稱平均法 它是根據(jù)對(duì)數(shù)劑量與致死百分?jǐn)?shù)呈它是根據(jù)對(duì)數(shù)劑量與致死百分?jǐn)?shù)呈S形曲線，形曲線，由由S形曲線包括的面積推導(dǎo)出致死百分率為形曲線包括的面積推導(dǎo)出致死百分率為50%相當(dāng)?shù)膭┝俊Ｏ喈?dāng)?shù)膭┝?。第二?jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)

5、定方法 1111502/ )(lgkixiiixxppLDk為劑量組數(shù)為劑量組數(shù)xi+xi+1為相鄰兩組對(duì)數(shù)劑量之和為相鄰兩組對(duì)數(shù)劑量之和Pi+1-pi為相鄰兩組致死百分率之差為相鄰兩組致死百分率之差 使用此公式的條件是各組的動(dòng)物數(shù)相等，最使用此公式的條件是各組的動(dòng)物數(shù)相等，最小致死百分?jǐn)?shù)為小致死百分?jǐn)?shù)為0%，最大致死百分?jǐn)?shù)為，最大致死百分?jǐn)?shù)為100%1. 1. 計(jì)算計(jì)算50lg LD第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法 當(dāng)劑量呈等比數(shù)列或?qū)?shù)劑量呈等差數(shù)列，當(dāng)劑量呈等比數(shù)列或?qū)?shù)劑量呈等差數(shù)列，且最小和最大劑量組的致死百分?jǐn)?shù)分別為且最小和最大劑量組的致死百分?jǐn)?shù)分別為0%和和

6、100%時(shí)時(shí) 11150)(2lgkiiikppdxLD kiikpdxLD150)5 . 0(lg其中：其中： 為最大為最大對(duì)數(shù)對(duì)數(shù)劑量劑量 d 相鄰兩組相鄰兩組對(duì)數(shù)對(duì)數(shù)劑量之差，即相鄰劑量比值的對(duì)數(shù)劑量之差，即相鄰劑量比值的對(duì)數(shù) kx kikikpppdxLD11504/ )3(lg如果如果p1不為不為0且小于且小于20%，pk不等于不等于1且大于且大于80%時(shí)時(shí)第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法2. 2. 求求 的反對(duì)數(shù)得的反對(duì)數(shù)得 3. 3. 求求 的標(biāo)準(zhǔn)誤的標(biāo)準(zhǔn)誤 iiiLDnppdS)1(50lg4. 4. 求求 的的95%95%的置信區(qū)間的置信區(qū)間)96. 1

7、(lglg50lg501LDSLD 50lg LD50lg LD50lg LD50LD50lgLDs【應(yīng)用條件【應(yīng)用條件 】 1 劑量必須按等比級(jí)數(shù)（劑量對(duì)數(shù)按等級(jí)數(shù)）分劑量必須按等比級(jí)數(shù)（劑量對(duì)數(shù)按等級(jí)數(shù)）分組。組。 2 各組動(dòng)物數(shù)應(yīng)相等。各組動(dòng)物數(shù)應(yīng)相等。 3 最小劑量組的死亡率（最小劑量組的死亡率（Pn）應(yīng)為）應(yīng)為 0% ，最大劑，最大劑量組的死亡率（量組的死亡率（Pm）應(yīng)為）應(yīng)為 100% ；如果如果 Pn80% 需用校正公式計(jì)算；需用校正公式計(jì)算；如如 Pn20% 或或 Pm80% 則不能用此法計(jì)算。則不能用此法計(jì)算。 第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法【例】為了

8、研究銨碘消毒劑對(duì)建鯉毒力的影響，【例】為了研究銨碘消毒劑對(duì)建鯉毒力的影響，隨機(jī)撈取隨機(jī)撈取210尾規(guī)格基本一致的鯉魚(yú)，放入缸內(nèi)，每尾規(guī)格基本一致的鯉魚(yú)，放入缸內(nèi)，每缸缸30尾，尾，1組對(duì)照，組對(duì)照，6組處理。以等對(duì)數(shù)間距設(shè)置組處理。以等對(duì)數(shù)間距設(shè)置6個(gè)個(gè)劑量水平（單位：劑量水平（單位： ）分別為：）分別為：40.000、47.156、55.592、65.538、77.262、91.085，量取藥液并加入缸，量取藥液并加入缸內(nèi)，攪拌均勻，內(nèi)，攪拌均勻，96 h后所得資料見(jiàn)下表。試求銨碘對(duì)后所得資料見(jiàn)下表。試求銨碘對(duì)建鯉的半數(shù)致死量。建鯉的半數(shù)致死量。3/ mmL第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法

9、半數(shù)致死量的測(cè)定方法第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法本例中，相鄰劑量成等比級(jí)數(shù)，公比為本例中，相鄰劑量成等比級(jí)數(shù)，公比為0.8482，故，故對(duì)數(shù)劑量成等差級(jí)數(shù)。對(duì)數(shù)劑量成等差級(jí)數(shù)。具體計(jì)算步驟如下：具體計(jì)算步驟如下：50lgLD)(2lg150 iikppdxLD )000. 1900. 0()500. 0100. 0()100. 0000. 0(2000.40156.47lg085.91lg 第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法（2）求）求 的反對(duì)數(shù)得的反對(duì)數(shù)得 50lgLD50LD銨碘消毒劑對(duì)建鯉的半數(shù)致死量為：銨碘消毒劑對(duì)建鯉的半數(shù)致死量為： 72

10、2.58)(lglg50150 LDLD（3）求）求 的標(biāo)準(zhǔn)誤的標(biāo)準(zhǔn)誤 50lgLD iiiLDnppdS)1(50lg30000. 0000. 130900. 0100. 030000. 1000. 00714. 0 = 0.0577第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法（4）求）求 95%的置信區(qū)間的置信區(qū)間 50LD501150lglg (lg1.96)lg (1.7688 1.96 0.0577)LDLDS即銨碘消毒劑對(duì)建鯉即銨碘消毒劑對(duì)建鯉 的的95%置信區(qū)間為：置信區(qū)間為： 50LD33190.76258.45mmLmmL第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量

11、的測(cè)定方法1lg (1.76880.1131)第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法二、目測(cè)概率單位法二、目測(cè)概率單位法 目測(cè)概率單位法是一種較為簡(jiǎn)單的計(jì)算方法，目測(cè)概率單位法是一種較為簡(jiǎn)單的計(jì)算方法，其基本原理是將劑量改變成對(duì)數(shù)劑量，再將死亡其基本原理是將劑量改變成對(duì)數(shù)劑量，再將死亡率（率（%）轉(zhuǎn)換成）轉(zhuǎn)換成“概率單位概率單位”，則劑量反應(yīng)曲線，則劑量反應(yīng)曲線呈直線化，根據(jù)前述回歸分析畫(huà)出直線，再求呈直線化，根據(jù)前述回歸分析畫(huà)出直線，再求出出 。50LD第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法 所謂概率單位（所謂概率單位（Probit）就是指標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)曲線）就是指

12、標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)曲線下面積相當(dāng)于某一死亡率時(shí)橫軸上的距離。為方下面積相當(dāng)于某一死亡率時(shí)橫軸上的距離。為方便計(jì)算避免負(fù)號(hào)，標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變量便計(jì)算避免負(fù)號(hào)，標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變量u值一律加值一律加5，稱，稱為概率單位（為概率單位（y），即：），即：55 xuy 將死亡率轉(zhuǎn)換為概率單位后，對(duì)數(shù)劑量與死將死亡率轉(zhuǎn)換為概率單位后，對(duì)數(shù)劑量與死亡率呈直線關(guān)系。據(jù)此便可用回歸法進(jìn)行半數(shù)致亡率呈直線關(guān)系。據(jù)此便可用回歸法進(jìn)行半數(shù)致死量的估計(jì)。死量的估計(jì)。第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法【例】【例】 為弄清氟對(duì)禽類的毒性影響，選用為弄清氟對(duì)禽類的毒性影響，選用1日齡日齡羅曼褐蛋雞羅曼褐蛋雞48羽，隨機(jī)分為羽，隨

13、機(jī)分為6組，每組組，每組8羽，另羽，另設(shè)一組空白對(duì)照，經(jīng)飲水添加不同量的氟化鈉，設(shè)一組空白對(duì)照，經(jīng)飲水添加不同量的氟化鈉，1次性灌喂，觀察次性灌喂，觀察7 d天內(nèi)雛雞中毒死亡的情況。天內(nèi)雛雞中毒死亡的情況。計(jì)算計(jì)算 指標(biāo)。指標(biāo)。50LD第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法濃度濃度(mg/ml) 雛雞數(shù)（雛雞數(shù)（n） 死亡數(shù)（死亡數(shù)（r） 死亡率（死亡率（%）80.608675.064.518562.555.628450.041.278337.533.038337.526.428225.0服氟化鈉水溶液后對(duì)雛雞的毒性影響服氟化鈉水溶液后對(duì)雛雞的毒性影響第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的

14、測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法1編制計(jì)算表編制計(jì)算表（1）將劑量換算成對(duì)數(shù)劑量）將劑量換算成對(duì)數(shù)劑量x。（2）將死亡率換算成概率單位）將死亡率換算成概率單位y。死亡率為。死亡率為0或或100%者，它們的相應(yīng)概率單位是負(fù)無(wú)窮大和正無(wú)者，它們的相應(yīng)概率單位是負(fù)無(wú)窮大和正無(wú)窮大，在直線化過(guò)程無(wú)意義，通常不計(jì)入計(jì)算，窮大，在直線化過(guò)程無(wú)意義，通常不計(jì)入計(jì)算，或用校正數(shù)，即或用校正數(shù)，即0/0校正為校正為0.25/n，100%校正為校正為（n-0.25）/n，n為該組試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)，本例不需校為該組試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)，本例不需校正。查附表正。查附表16時(shí)：如死亡率為時(shí)：如死亡率為75%，其概率單位，其概率單位為為5.

15、674，余類推。，余類推。第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法濃度濃度(mg/ml)雛雞數(shù)雛雞數(shù)（n）死亡數(shù)死亡數(shù)（r）死亡率死亡率（%）對(duì)數(shù)劑量對(duì)數(shù)劑量（x）概率單概率單位位(y)80.608675.01.90655.67464.518562.51.80965.33255.628450.01.74525.00041.278337.51.61564.69533.038337.51.51894.69526.428225.01.42194.326服氟化鈉水溶液后對(duì)雛雞的毒性影響服氟化鈉水溶液后對(duì)雛雞的毒性影響第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法2. 用回歸法求半

16、數(shù)致死量。用回歸法求半數(shù)致死量。 依表的對(duì)數(shù)劑量（依表的對(duì)數(shù)劑量（x）和概率單位）和概率單位(y)資料配置資料配置直線。先繪制直線。先繪制“散點(diǎn)圖散點(diǎn)圖”，橫軸為對(duì)數(shù)劑量，橫軸為對(duì)數(shù)劑量x，縱軸，縱軸為概率單位為概率單位y，繪制，繪制6個(gè)點(diǎn)，計(jì)算回歸方程，并作圖。個(gè)點(diǎn)，計(jì)算回歸方程，并作圖。本例中，回歸方程為本例中，回歸方程為 0.6360 2.5860yx第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法3. 求半數(shù)致死量的置信區(qū)間。求半數(shù)致死量的置信區(qū)間。上面求得的上面求得的 是一個(gè)樣本指標(biāo)，只能作為總是一個(gè)樣本指標(biāo)，只能作為總體體 的點(diǎn)值估計(jì)，同樣也可對(duì)總體的點(diǎn)值估計(jì)，同樣也可對(duì)總體

17、 作作區(qū)間估計(jì)，即求總體區(qū)間估計(jì)，即求總體 的置信區(qū)間。按公式的置信區(qū)間。按公式求各致死劑量對(duì)數(shù)值的標(biāo)準(zhǔn)差（求各致死劑量對(duì)數(shù)值的標(biāo)準(zhǔn)差（s）。）。50lgLD50lg LD50lg LD50lgLD2121xxsyy第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法 本例取第一點(diǎn)（本例取第一點(diǎn)（1.49, 4.5），）， 取第二點(diǎn)（取第二點(diǎn)（1.88, 5.5）代入公式得：）代入公式得： 21211.88 1.490.395.54.5xxsyy根據(jù)下面的公式求半數(shù)致死量對(duì)數(shù)值的標(biāo)準(zhǔn)誤根據(jù)下面的公式求半數(shù)致死量對(duì)數(shù)值的標(biāo)準(zhǔn)誤 50lg/2LDssN N 為概率單位為概率單位4至至6范圍內(nèi)（即

18、死亡率為范圍內(nèi)（即死亡率為15.87%至至84.13%范圍內(nèi)）各組試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)。范圍內(nèi)）各組試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)。第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法本例，此范圍內(nèi)共用試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)合計(jì)本例，此范圍內(nèi)共用試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)合計(jì)48頭，即頭，即N =48。故。故 進(jìn)而半數(shù)致死量的進(jìn)而半數(shù)致死量的95%置信區(qū)間。置信區(qū)間。50150lglg (lg1.96)LDLDs)156. 069. 1(lg)0796. 096. 169. 1(lg11 即即 34.197 94(mg/ml)70.145 53(mg/ml)0796. 024839. 0250lg NssLD第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致

19、死量的測(cè)定方法 關(guān)于概率單位法常用的還有關(guān)于概率單位法常用的還有“概率單位法概率單位法”和和 “加權(quán)概率單位法加權(quán)概率單位法”（也叫（也叫“概率單位加權(quán)回歸概率單位加權(quán)回歸法法”），后者計(jì)算較為復(fù)雜，但常被看作最為有），后者計(jì)算較為復(fù)雜，但常被看作最為有效的方法。考慮到計(jì)算的復(fù)雜性，在多數(shù)統(tǒng)計(jì)軟效的方法?？紤]到計(jì)算的復(fù)雜性，在多數(shù)統(tǒng)計(jì)軟件包中均有估計(jì)件包中均有估計(jì) 和和 的程序，使用起來(lái)十的程序，使用起來(lái)十分方便。分方便。50ED50LD三、序貫法三、序貫法 序貫法是最能節(jié)省試驗(yàn)動(dòng)物的一種方法，又稱序貫法是最能節(jié)省試驗(yàn)動(dòng)物的一種方法，又稱“上上下法下法”。由于其把計(jì)量集中用在。由于其把計(jì)量集中

20、用在50%反應(yīng)率的上下，反應(yīng)率的上下，因此在確定因此在確定 時(shí)具有很高的效率。時(shí)具有很高的效率。 其一般方法是：根據(jù)以前的經(jīng)驗(yàn)選擇一個(gè)近其一般方法是：根據(jù)以前的經(jīng)驗(yàn)選擇一個(gè)近50%反反應(yīng)率的等比級(jí)數(shù)劑量組，通常用應(yīng)率的等比級(jí)數(shù)劑量組，通常用4-6個(gè)劑量組，然后將個(gè)劑量組，然后將動(dòng)物一只一只有序地進(jìn)行試驗(yàn)，當(dāng)動(dòng)物出現(xiàn)陰性反應(yīng)動(dòng)物一只一只有序地進(jìn)行試驗(yàn)，當(dāng)動(dòng)物出現(xiàn)陰性反應(yīng)時(shí)，就選用較高一級(jí)的劑量給予下一只動(dòng)物，當(dāng)出現(xiàn)時(shí)，就選用較高一級(jí)的劑量給予下一只動(dòng)物，當(dāng)出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)時(shí)，就選用較低一級(jí)的劑量給予下一只動(dòng)物，陽(yáng)性反應(yīng)時(shí)，就選用較低一級(jí)的劑量給予下一只動(dòng)物，直到試驗(yàn)結(jié)束，試驗(yàn)所需的動(dòng)物總數(shù)直到試驗(yàn)結(jié)

21、束，試驗(yàn)所需的動(dòng)物總數(shù)n應(yīng)在試驗(yàn)開(kāi)始應(yīng)在試驗(yàn)開(kāi)始前決定。前決定。50LD第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法 【例例】 為測(cè)定某試劑的安全性，用序貫法測(cè)定此試劑小白鼠為測(cè)定某試劑的安全性，用序貫法測(cè)定此試劑小白鼠腹腔注射的腹腔注射的 (mg/kg）, 選用選用1月齡小白鼠月齡小白鼠22只，給藥的對(duì)數(shù)只，給藥的對(duì)數(shù)劑量應(yīng)盡量從估計(jì)最可能接近劑量應(yīng)盡量從估計(jì)最可能接近 的劑量開(kāi)始，本例從的劑量開(kāi)始，本例從1.85開(kāi)開(kāi)始，死亡記為始，死亡記為“+”號(hào)，存活記為號(hào)，存活記為“-”號(hào)。后一動(dòng)物的劑量上升號(hào)。后一動(dòng)物的劑量上升或下降由前一動(dòng)物的死亡（或下降由前一動(dòng)物的死亡（S）或存活（）

22、或存活（F）來(lái)決定，從第一只）來(lái)決定，從第一只改變算起（即表中第一條虛線起），至改變算起（即表中第一條虛線起），至22只止，最后的終止號(hào)只止，最后的終止號(hào)（即第二條虛線后的（即第二條虛線后的“”）也作為一次試驗(yàn)結(jié)果。其位置決定）也作為一次試驗(yàn)結(jié)果。其位置決定于末一只動(dòng)物的死亡或存活，末一只動(dòng)物死亡者，下降一格給于末一只動(dòng)物的死亡或存活，末一只動(dòng)物死亡者，下降一格給“”，以存活論；末一只動(dòng)物存活者上升一格繪，以存活論；末一只動(dòng)物存活者上升一格繪“”號(hào)，以號(hào)，以死亡論。結(jié)果見(jiàn)表，其中死亡論。結(jié)果見(jiàn)表，其中S表示死亡，表示死亡，F(xiàn)表示存活。表示存活。50LD50LD第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法

23、半數(shù)致死量的測(cè)定方法對(duì)數(shù)劑量對(duì)數(shù)劑量（lgD）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物號(hào)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物號(hào)死亡死亡存活存活合計(jì)合計(jì)12 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 1920 21 22 23S(+)F()r1.95 +1011.90 + +2131.85+ + + + + +5271.80 + + +3581.75 033某藥物某藥物 的值測(cè)定結(jié)果的值測(cè)定結(jié)果50LD的計(jì)算公式為：的計(jì)算公式為： rdrLD)lg(lg5050LD第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法2275. 1380. 1885. 1790. 1395. 11lg50 LD=1.8295 50

24、LD=67.5376mg/kg 第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法 序貫法簡(jiǎn)便易行，適于反應(yīng)快速的藥物試驗(yàn)，序貫法簡(jiǎn)便易行，適于反應(yīng)快速的藥物試驗(yàn)，且使用動(dòng)物較為節(jié)省，但不能估計(jì)誤差，無(wú)法進(jìn)行且使用動(dòng)物較為節(jié)省，但不能估計(jì)誤差，無(wú)法進(jìn)行 顯著性檢驗(yàn)，因此應(yīng)用受到一定的限制。但也有一顯著性檢驗(yàn)，因此應(yīng)用受到一定的限制。但也有一些補(bǔ)充方法，可自行查閱相關(guān)資料。些補(bǔ)充方法，可自行查閱相關(guān)資料。（例如，利用寇氏法中的公式估計(jì)（例如，利用寇氏法中的公式估計(jì) ，將其中，將其中的的 用本法的用本法的 代替，同時(shí)需計(jì)算本法中代替，同時(shí)需計(jì)算本法中 各劑量各劑量組的死亡率。）組的死亡率。）5

25、0lgLDSinir第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測(cè)定方法半數(shù)致死量的測(cè)定方法 一、半數(shù)致死量試驗(yàn)設(shè)計(jì)的要求一、半數(shù)致死量試驗(yàn)設(shè)計(jì)的要求 1試驗(yàn)劑量的確定試驗(yàn)劑量的確定 （）劑量范圍的選擇（）劑量范圍的選擇 根據(jù)以往的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，參根據(jù)以往的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，參考有關(guān)資料或進(jìn)行預(yù)備試驗(yàn)，了解動(dòng)物全致死和全不考有關(guān)資料或進(jìn)行預(yù)備試驗(yàn)，了解動(dòng)物全致死和全不致死的劑量范圍。要求最小劑量等于致死的劑量范圍。要求最小劑量等于0%死亡率的劑死亡率的劑量，最大劑量等于量，最大劑量等于100%死亡率的劑量。死亡率的劑量。 （）劑量分組（）劑量分組 一般以一般以58組為宜，要求死亡率在組為宜，要求死亡率在50%上下約各有一半

26、的組。如用寇氏法計(jì)算半數(shù)致死上下約各有一半的組。如用寇氏法計(jì)算半數(shù)致死量，最好包括有死亡率為量，最好包括有死亡率為0%及及100%的計(jì)量組。的計(jì)量組。第三節(jié)第三節(jié) 半數(shù)致死量的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與應(yīng)用半數(shù)致死量的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與應(yīng)用 一、半數(shù)致死量試驗(yàn)設(shè)計(jì)的要求一、半數(shù)致死量試驗(yàn)設(shè)計(jì)的要求 1試驗(yàn)劑量的確定試驗(yàn)劑量的確定（）各組劑量呈等比級(jí)數(shù)（）各組劑量呈等比級(jí)數(shù) 即換算成對(duì)數(shù)劑量后，即換算成對(duì)數(shù)劑量后，其相鄰對(duì)數(shù)劑量呈等差級(jí)數(shù)。劑量的比值可用下式其相鄰對(duì)數(shù)劑量呈等差級(jí)數(shù)。劑量的比值可用下式計(jì)算。計(jì)算。第三節(jié)第三節(jié) 半數(shù)致死量的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與應(yīng)用半數(shù)致死量的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與應(yīng)用 求得比值以后，自第一劑量（最小劑量）開(kāi)始

27、乘以求得比值以后，自第一劑量（最小劑量）開(kāi)始乘以比值，即得相鄰的下一組劑量，其余類推。比值，即得相鄰的下一組劑量，其余類推。相鄰兩組劑量的比值相鄰兩組劑量的比值= = ）組組數(shù)數(shù)最最小小劑劑量量最最大大劑劑量量（1lglglg1 第三節(jié)第三節(jié) 半數(shù)致死量的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與應(yīng)用半數(shù)致死量的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與應(yīng)用2試驗(yàn)動(dòng)物的選擇與分組試驗(yàn)動(dòng)物的選擇與分組（）試驗(yàn)動(dòng)物的選擇（）試驗(yàn)動(dòng)物的選擇 除動(dòng)物的種屬選擇外，對(duì)動(dòng)物個(gè)體的年齡、體重、除動(dòng)物的種屬選擇外，對(duì)動(dòng)物個(gè)體的年齡、體重、性別、生理狀態(tài)及健康狀況等均應(yīng)嚴(yán)格注意。在同一性別、生理狀態(tài)及健康狀況等均應(yīng)嚴(yán)格注意。在同一試驗(yàn)中，動(dòng)物的年齡、體重應(yīng)盡可能一致。動(dòng)物毒

28、性試驗(yàn)中，動(dòng)物的年齡、體重應(yīng)盡可能一致。動(dòng)物毒性試驗(yàn)一般應(yīng)雌、雄動(dòng)物分組同時(shí)進(jìn)行。若是性別混合試驗(yàn)一般應(yīng)雌、雄動(dòng)物分組同時(shí)進(jìn)行。若是性別混合編組，則要求雌雄各半。編組，則要求雌雄各半。第三節(jié)第三節(jié) 半數(shù)致死量的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與應(yīng)用半數(shù)致死量的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與應(yīng)用 （）設(shè)試驗(yàn)組與對(duì)照組（）設(shè)試驗(yàn)組與對(duì)照組 對(duì)試驗(yàn)組給予一定量受試物質(zhì)以觀對(duì)試驗(yàn)組給予一定量受試物質(zhì)以觀察毒物的反應(yīng)。試驗(yàn)組與對(duì)照組除去處理因素（給受試物質(zhì)）察毒物的反應(yīng)。試驗(yàn)組與對(duì)照組除去處理因素（給受試物質(zhì)）不同外，其他條件應(yīng)盡量相同。在試驗(yàn)時(shí)，如果對(duì)照組的試驗(yàn)不同外，其他條件應(yīng)盡量相同。在試驗(yàn)時(shí)，如果對(duì)照組的試驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)死亡，一般應(yīng)排除死亡原

29、因，重作試驗(yàn)。但是作昆蟲(chóng)動(dòng)物出現(xiàn)死亡，一般應(yīng)排除死亡原因，重作試驗(yàn)。但是作昆蟲(chóng)（如蚊子等）毒性試驗(yàn)時(shí)，因小動(dòng)物易發(fā)生自然死亡，當(dāng)對(duì)照（如蚊子等）毒性試驗(yàn)時(shí)，因小動(dòng)物易發(fā)生自然死亡，當(dāng)對(duì)照組的試驗(yàn)昆蟲(chóng)死亡率在組的試驗(yàn)昆蟲(chóng)死亡率在10%以下時(shí)，可對(duì)試驗(yàn)組的死亡率進(jìn)行以下時(shí)，可對(duì)試驗(yàn)組的死亡率進(jìn)行校正。然后根據(jù)校正死亡率計(jì)算半數(shù)致死量。校正。然后根據(jù)校正死亡率計(jì)算半數(shù)致死量。校正死亡率= %100%對(duì)照組死亡率對(duì)照組死亡率對(duì)照組死亡率對(duì)照組死亡率試驗(yàn)組死亡率試驗(yàn)組死亡率 第三節(jié)第三節(jié) 半數(shù)致死量的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與應(yīng)用半數(shù)致死量的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與應(yīng)用 3操作規(guī)程與記錄等都應(yīng)有統(tǒng)一的規(guī)格要求。操作規(guī)程與記錄等都應(yīng)有統(tǒng)一的規(guī)格要求。 在試驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)格遵守試驗(yàn)設(shè)計(jì)的要求。特別是分批在試驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)格遵守試驗(yàn)設(shè)計(jì)的要求。特別是分批試驗(yàn)時(shí)，更應(yīng)注意條件一致，人員操作一致，以避免產(chǎn)生不試驗(yàn)時(shí)，更應(yīng)注意條件一致，人員操作一致，以避免產(chǎn)生不必要的誤差。必要的誤差。（）試驗(yàn)動(dòng)物分組，必須嚴(yán)格遵守隨機(jī)化原則，以減少誤差。（）試驗(yàn)動(dòng)物分組，必須嚴(yán)格遵守隨機(jī)化原則，以減少誤差。第三節(jié)第三節(jié) 半數(shù)致死量的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與應(yīng)用半數(shù)致死量的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與應(yīng)用二、半數(shù)致死量的應(yīng)用二、半數(shù)致死量的應(yīng)用 1