CFX系列快速操作指南及注意事項

1、CFX系列 Real-Time PCR 檢測系統(tǒng)快速操作指南1. 確認(rèn)系統(tǒng)數(shù)據(jù)線和電源線連接正常后，打開CFX96電源開關(guān)，系統(tǒng)進(jìn)入自檢。2. 自檢完成后啟動CFX Manager，軟件將自動搜索設(shè)備，完成連接后“Detected Instruments”列表出現(xiàn)設(shè)備名稱，PCR儀器屏幕顯示紅色“Under remote control”文字。3. 點(diǎn)擊“Experiment setup ”彈出實驗設(shè)置選項。4. 標(biāo)簽下，“Create New”可新建熱循環(huán)程序，“Select Existing”可調(diào)用已有熱循環(huán)程序，“Express load”下拉菜單中可選擇各種標(biāo)準(zhǔn)熱循環(huán)程序，“Edit

2、Selected”可對選中的熱循環(huán)程序進(jìn)行編輯。4.1新建或編輯熱循環(huán)程序時，可在圖形或文字區(qū)域輸入各步驟設(shè)定溫度、時間值。4.2：插入一個普通溫控步驟；4.3：插入溫度梯度步驟；4.4 ：插入熱循環(huán)范圍，須在插入后輸入循環(huán)起始步驟和循環(huán)次數(shù)；4.5 ：插入熔解曲線分析步驟；4.6 ：插入熒光采集步驟；4.7 ：對當(dāng)前溫控步驟的變溫速率及方式進(jìn)行調(diào)節(jié)；4.8 ：刪除當(dāng)前溫控步驟；4.9 里應(yīng)輸入PCR反應(yīng)液體積（此例為25微升）4.10 編輯好熱循環(huán)程序后點(diǎn)擊OK保存。5. 確定熱循環(huán)程序后點(diǎn)擊“Next”或標(biāo)簽進(jìn)入樣品位置及類型設(shè)定?！癈reate New”可新建樣品設(shè)置，“Select”可

3、調(diào)用已有樣品設(shè)置，“Express load”下拉菜單可選擇各種標(biāo)準(zhǔn)樣品設(shè)置，“Edit Selected”可對選中的熱循環(huán)程序進(jìn)行編輯。新建和編輯按下面步驟進(jìn)行：5.1 從里選擇熒光掃描模式，“SYBR/FAM Only”為單通道快速掃描模式，適用于僅使用核酸染料或/和FAM標(biāo)定探針的情況?！癆ll Channels”為全通道掃描模式，適用于任何檢測情況?！癋RET”模式使用于特殊的FRET探針的情況。5.2 點(diǎn)擊，可在彈出的對話框里選擇與檢測方法一致的熒光素。注意“SYBR/FAM only”模式下只有FAM/SYBR可用。5.3 選擇欲使用的樣品孔位置后，在下拉菜單里指定樣品類型，此例為

4、standard標(biāo)準(zhǔn)品。5.4 在打勾，為所選樣品指定熒光類型（此例為SYBR），根據(jù)實驗需要，還可在后面的輸入擴(kuò)增基因名稱。5.5 根據(jù)需要可在為輸入所選樣品孔位的樣品名稱。5.6 如果樣品設(shè)置有重復(fù)，可在里逐一指定，或者點(diǎn)擊快速設(shè)置重復(fù)。中分別填入重復(fù)的數(shù)量以及起始重復(fù)編號，可指定重復(fù)放置的方向，點(diǎn)擊即可。5.7 如果設(shè)置了標(biāo)準(zhǔn)品，需要為標(biāo)準(zhǔn)品賦值，可在中逐一輸入，或者點(diǎn)擊快速設(shè)定。5.8 可為相對定量數(shù)據(jù)分析時指定內(nèi)參基因的名稱。5.9 可解除所選樣品的重復(fù)設(shè)置狀態(tài)。5.10 可刪除當(dāng)前選定的樣品孔設(shè)置。5.11 有疑問可點(diǎn)擊，參考在線幫助。5.12 編輯好板位文件后，點(diǎn)OK保存。6.

5、確定樣品設(shè)置后點(diǎn)擊“Next”或者準(zhǔn)備運(yùn)行系統(tǒng)。點(diǎn)擊設(shè)備自動打開樣品槽，按照設(shè)置好的樣品位置放置好樣品，然后點(diǎn)擊關(guān)閉樣品槽。熱蓋閉合后點(diǎn)擊，設(shè)備詢問數(shù)據(jù)存放的位置，確定后開始運(yùn)行。7. 程序運(yùn)行時可對PCR程序循環(huán)數(shù)、樣品類型進(jìn)行實施再編輯，也可編輯新的實驗方案或者分析數(shù)據(jù)。注意事項：1. 設(shè)備長時間停用時請勿將樣品槽打開閑置，以免灰塵在樣品槽上長期積累，影響熱傳遞。2. 樣品槽開閉時讓設(shè)備自由運(yùn)行，不得強(qiáng)行人為掰開或壓合。3. 不可同時使用不同規(guī)格的耗材。4. 避免意外斷電，建議為設(shè)備配置在線式UPS系統(tǒng)。5. 程序未結(jié)束前不得關(guān)閉系統(tǒng)電源，不得帶電扳動設(shè)備背后的鎖定桿。6. PCR運(yùn)行時不要搬動設(shè)備，若需要長途