高效液相色譜法對呋塞米注射液含量檢測的方法學驗證_圖文_百度

1、年月環(huán)渤海第一屆暨天津市第十九屆色譜學術(shù)報告會儀器展覽會文集高效液相色譜法對呋塞米注射液含量檢測的方法學驗證于潤芳，唐洪（天津金耀氨基酸有限公司）參照中國藥典版附錄藥品質(zhì)量標準分析方法驗證指導原則的要求，對呋塞米注射液含量測定項目進行方法學驗證。呋塞米注射液主要成分為呋塞米。其藥理作用：能增加水、鈉、氯、鉀、鈣、鎂、磷等的排泄，可抑制前列腺素分解酶的活性，使前列腺素含量升高，從而具有擴張血管作用。擴張腎血管，降低腎血管阻力，在呋塞米的利尿作用中具有重要意義，也是其用于預(yù)防急性腎功能衰竭的理論基礎(chǔ)。其適應(yīng)癥為：水腫性疾病。預(yù)防急性腎功能衰竭。高鉀血癥及高鈣血癥。分泌過多癥（）。急性藥物毒物中毒等

2、。高血壓。稀釋性低鈉血癥。抗利尿激素儀器與試藥儀器注：試驗用水均為天津金耀氨基酸有限公司每天生產(chǎn)的注射用水。色譜條件及測定方法色譜條件色譜柱：艾杰爾（×，），流動相：水一四氫呋喃一冰醋酸（：），流速：，柱溫：，檢測波長：。中國藥典版收載的呋塞米注射液的檢驗方法：有關(guān)物質(zhì)取本品，用混合溶劑取冰醋酸加乙腈一水（：）至混勻稀釋制成每中約含的溶液，作為供試品溶液；精密量取適量，用上述混合溶劑定量稀釋制成每中含的溶液，作為對照溶液。照含量測定項下的色譜條件，取對照溶液注入液相色譜儀，再精密量取供試品溶液與對照溶液各，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的倍，供試品溶液的色譜圖中如有

3、雜質(zhì)峰，單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面積的倍（），各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照年月環(huán)渤海第一屆暨天津市第十九屆色譜學術(shù)報告會一儀器展覽會文集溶液主峰面積的倍（）。含量測定照高效液相測定法（附錄）測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以水一四氫呋喃一冰醋酸（：）為流動相：檢測波長為姍。理論板數(shù)按呋塞米峰計算不低于。測定法精密量取本品，用混合溶劑取冰醋酸，加乙腈一水（：）至，混勻定量稀釋制成每中約含呋塞米的溶液。精密量取注入液相色譜儀，記錄色譜圖：另取呋塞米對照品，同法測定。按外標法以峰面積計算，即得。版中國藥典標準呋塞米注射液的驗證方法呋塞米注射液的限度測定結(jié)果計算

4、公式：含量測定標示量堿小工式中：供試品峰面積。一對照品峰面積，一供試品質(zhì)量，嘶對照品質(zhì)量（對照品稱樣量，）。有關(guān)物質(zhì)計算單個雜質(zhì)：單個雜質(zhì)峰面積對照溶液主峰面積木總雜質(zhì)峰：各雜質(zhì)峰面積的和對照溶液主峰面積如樣品測定有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果（）：年月環(huán)渤海第一屆暨天津市第十九屆色譜學術(shù)報告會儀器展覽會文集驗證內(nèi)容專屬性稱取無水碳酸鈉：壘墨璺配成溶液，備用。稱取氯化鈉：墨！墨，轉(zhuǎn)移至量瓶中，加入純化水適量溶解：再加入無水碳酸鈉溶液，用純化水稀釋至刻度，搖勻，作為空白輔料溶液。酸破壞：取本品至量瓶中，加入鹽酸溶液，搖勻，置水浴，放冷，用氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，用稀釋液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；取空白輔

5、料溶液適量至量瓶中，同法操作，按有關(guān)物質(zhì)方法進樣測定。堿破壞：取本品至量瓶中，加入氫氧化鈉溶液，搖勻，置水浴，放冷，用鹽酸溶液調(diào)至中性，用稀釋液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；取空白輔料溶液適量至量瓶中，同法操作，按有關(guān)物質(zhì)方法進樣測定。加熱破壞：取本品（玻璃瓶）置沸水中煮沸小時后取出，放冷，取空白輔料溶液適量，同法操作，按有關(guān)物質(zhì)方法進樣測定。氧化破壞：取本品，加過氧化氫溶液，搖勻，置水浴后，加稀釋液溶解并稀釋至，取空白輔料溶液至量瓶中，同法操作，按有關(guān)物質(zhì)方法進樣測定。光照破壞：取本品（玻璃瓶）支，空白輔料溶液（置于玻璃瓶中），在照度為日光燈條件下放置天，天后，按有關(guān)物質(zhì)方法進樣測定。測

6、定結(jié)果（）：檢測限精密稱取呋塞米，加入容量瓶中，加入混合溶劑取冰醋酸，加乙腈一水（：）至，混勻溶解并稀釋至刻度，精密量取至、至容量瓶中容量瓶中，加入混合溶劑溶解并稀釋至刻度，按照有關(guān)物質(zhì)方法進樣測定年月環(huán)渤海第一屆暨天津市第十九屆色譜學術(shù)報告會儀器展覽會文集中間精密度不同操作人員，不同時間對供試品溶液按含量方法進樣測定。重復測定次，共次，計算。塞米注射液含量趨勢圖為驢線性范圍按確認的各溶劑的驗證范圍，以標準溶液為濃度為基礎(chǔ)，配制、濃度系列，作為線性測定溶液。包括范圍的最高點和最低點以及標準點，每個溶液進樣次弘，記錄色譜圖。以峰面積對濃度二次回歸，得到回歸方程和相關(guān)系數(shù)。（標準溶液的配制要相對樣

7、品的濃度考慮）呋塞米線性結(jié)果：回歸方程：以上結(jié)果表明：呋塞米注射液濃度和峰面積呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。（呋塞米注射液線性試驗趨勢圖附后。）回收率：標準溶液：線性項下，濃度溶液作為標準溶液。呋塞米的回收率：精密稱取呋塞米約、各三份，分別加入容年月環(huán)渤海第一屆暨天津市第十九屆色譜學術(shù)報告會一儀器展覽會文集量瓶中，加入純化水稀釋至刻度，照呋塞米含量測定項下方法測定，計算回收率，試驗結(jié)果見表：濃度加入量（懈）測得的量（孵）回收率（）平均回收率（）（）（）哪窖阱佗咖似叭啪眈嗍蚴鉍盯咀呂齜喁吼鯽泓叮昕加嬲記勰弓：凹：；慨蚰屹猻拼亂掰們猶凹呋塞米的回收率均大于，符合要求。變更和偏差調(diào)查如驗證過程中出現(xiàn)變更，則按

8、公司相對應(yīng)的的名稱進行。如驗證過程中出現(xiàn)偏差，則按公司相對應(yīng)的的名稱進行。此次呋塞米注射液驗證過程中沒有出現(xiàn)偏差。結(jié)論：根據(jù)實驗結(jié)果，與方案中的標準進行比較，均符合規(guī)定。此次呋塞米注射液按照中國藥典年版分析方法驗證成功，此方法可用于呋塞米注射液的檢測，可以有效保證產(chǎn)品質(zhì)量，為產(chǎn)品使用者提供安全保證。趨勢圖呋塞米注射液含量趨勢圖呋塞米注射液含量趨勢圖工石爹霉荔影覆震霧黟霧零鬻鬻黲霪豸鬻覆溺毪鏟一誓。蘇舷“諺譬一纛，筆褫豫移褫爹；哮霉縞黟霉彩荔爹磣：；纛象譬荔夠黟荔；荔凌男霪”薯：自一二夕彩：蘭零一，一；二一甏囂。，。磣。夠夠露：。？雹。警夕鋤篆德含量蠢？；蠢；？麓愛謦：麓：乏滲澎奄澎：镢。靄麓誓

9、簪，？鼉參謄。魏，？：霧麓豫綴？琵；。翰毳纛象磊：滋；么磊豢差鬟簸；：茹纛囊溢籠乏疊簇囊簍翻注：呋塞米注射液含量趨勢圖略（下轉(zhuǎn)第頁）年月 環(huán)渤海第一屆暨天津市第十九屆色譜學術(shù)報告會一儀器展覽會文集 可以看出，在該色譜條件下，九種物質(zhì)在不到分鐘的時間洗脫出來并達到基線分離， 具有分析時間短、分離度高、選擇性好的優(yōu)點；同時由于該法采用等度洗脫，降低了儀器的 配置要求，簡化了操作，為建立快速、有效的精神類藥物檢測提供了一定的理論依據(jù)。 參考文獻： 【】 【】 ， 鼠缸，（） （ ） ， 【】八 【 ， ，（） ， ，（） 【】 ， （） 【】，鼬凰，（） 【】 ，尸聊 鼠瓠，（） 八八， 勘 ，（ ） ： ￥ ， ， ， ， ， 岬（） 、析也 （上接第頁） 線性試驗趨勢圖 霪翼一秒：忑攀鬈。謬”了了歹譬笱秘弱移黟零荔 擎：。，。÷。，？。瓷。一，。，江差：力 。鬣， 。 ； ：？“。：，。，“，：，。、”，“，：！。：，。：；。：。，。：， 。 。，?！埃葫?，？氌 陲妻萼。毒害