超聲波提取腎蕨總黃酮及鑒別(一)

1、超聲波提取腎蕨總黃酮及鑒別(一)    作者：黃鎖義， 羅建華， 蒙春越， 李容【關(guān)鍵詞】 超聲波提取；,腎蕨；,總黃酮；,鑒別摘要：目的為充分利用腎蕨植物資源，避免資源的浪費(fèi)，探討腎蕨植物總黃酮的提取及鑒別方法。方法采用超聲波乙醇浸提法從腎蕨植物中提取黃酮類物質(zhì)，對所提取的黃酮類物質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證，并用紫外分光光度法測定含量。結(jié)果測得樣品中總黃酮的含量為0.403 9 mg/ml，回收率為102.6%，其純度和產(chǎn)率均較高。結(jié)論該方法采用全物理過程，無任何污染，是提取腎蕨植物黃酮類物質(zhì)的有效途徑。關(guān)鍵詞：超聲波提?。?腎蕨； 總黃酮； 鑒別The Total

2、Flavanone of Nephrolepis cordifolia（L.） Presl Extraction and the Identification by Ultrasonic WaveAbstract：Objective To investigate the extraction and distinguishing method of total flavanone of Nephrolepis cordifolia（L.） Presl. MethodsThe flavonoids were extracted by ethanol as the solvent from Nep

3、hrolepis cordifolia（L.） presl with ultrasonic wave and ethanol extraction.The flavanone of Nephrolepis cordifolia（L.） Presl was checked and determined by spectrophotometry.ResultsThe content of the total flavanone of nephrolepis cordifolia（L.） Presl obtained by this method was C=0.4039 mg/ml and the

4、 rate of recovery was 102.6%. ConclusionThis text provides the extraction and purifying methods to get the outcome and the purity of the flavanone.This method is a purely physical process and has no pollution. It is an ideal way to extract the flavanone of Nephrolepis cordifolia（L.） Presl.Key words：

5、Ultrasonic wave extraction； Nephrolepis cordifolia（L.） Presl； Total flavanone； Identification 蕨類植物是具有椎管束的孢子植物，全世界現(xiàn)有蕨類植物約12 000種。分布于熱帶、亞熱帶為多。喜生長于溫暖陰濕的森林地帶，我國約有2 600種。其中可供藥用的約300余種，藥用蕨類植物因其分布廣泛、資源豐富，歷年來為民間所習(xí)用。為擴(kuò)大藥源，近年來對其研究逐漸重視起來。藥用蕨類植物的化學(xué)成分較復(fù)雜，其中具有生物活性的成分主要有酚類化合物、黃酮類成分、生物堿類、甾體、三萜類化臺物、鞣質(zhì)、氨基酸及脂肪酸等1。腎蕨,又

6、名石黃皮、犸騮卵、圓羊齒，多年生草本,高3060 cm。地生或附生于溪邊下、石縫中或樹干上。主產(chǎn)于我國西南及福建、臺灣、廣東、廣西、浙江、湖南。其藥用部位為骨碎補(bǔ)科植物腎蕨(Nephrolepis cordifolia(L.)Presl.)的塊莖或全草。性味功效為：甘、澀、涼。清肺止咳，止血，清熱利濕。用全草煎服可治濕熱黃疸；地莖加糖濃煎沖酒服，可治療疝氣；配杉樹尖、夏枯草、野蘿卜菜煎服，可治淋濁、小便點(diǎn)滴、疼痛難忍2。還具有很好的抗菌、抗微生物、抗腫瘤等作用3。近年來，超聲技術(shù)應(yīng)用于提取植物中的生物堿、苷類、生物活性物質(zhì)、動物組織漿的毒質(zhì)等研究已有報道4，5，表明其具有能耗低、效率高、不破壞

7、有效成分的特點(diǎn)。很多研究表明，利用超聲波產(chǎn)生的強(qiáng)烈振動、高的加速度、強(qiáng)烈的空化效應(yīng)、攪拌作用等，可加速植物材料中的有效成分進(jìn)入溶劑，從而增加有效成分的提取率，縮短提取時間，并且還可避免高溫對提取成分的影響5。但超聲技術(shù)應(yīng)用于提取蕨類植物中黃酮類物質(zhì)的研究尚未見報道，本文報道用超聲波提取腎蕨植物總黃酮及鑒別。1 儀器與試劑1.1 儀器KQ5200DB型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；UV755B紫外可見分光光度計（上海分析儀器總廠）；ZFI型三用紫外分析儀(上海顧村光電儀器廠)；SHBIII循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）。1.2 試劑95%乙醇AR；亞硝酸鈉AR；硝酸鋁

8、AR；正丁醇AR;氫氧化鈉AR；三氯化鋁AR；鹽酸AR；氨水AR；鎂粉AR;乙酸鎂AR;冰醋酸AR；乙酸乙酯AR；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（中國藥品生物制品檢定所）；新鮮腎蕨植物采自廣西金秀縣。2 方法與結(jié)果2.1 總黃酮成分提取取新鮮腎蕨植物，烘干，粉碎。稱取腎蕨植物粉末約6 g，加80 ml 95%乙醇，超聲波提取2.5 h，抽濾。濾渣再加80 ml 95 %乙醇，超聲波提取2.5 h，抽濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇至濾液僅剩25 ml為止，放置250 ml容量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，得樣品液。2.2 測定方法依據(jù) 以蘆丁為對照品測定腎蕨植物中總黃酮的含量，加入鋁離子試劑，同時控制適宜pH值，使

9、黃酮化合物與鋁鹽形成絡(luò)合物，在可見光區(qū)能獲得穩(wěn)定的特征吸收峰。2.3 定量實(shí)驗(yàn)總黃酮的含量測定表1 紫外可見分光光度計測定（略） 2.4 定性實(shí)驗(yàn)-總黃酮的鑒別3 討論3.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)方法工藝簡單，回收率為102.6%，利用本文所提供的超聲波提取、純化方法而得到的黃酮類物質(zhì)其純度較高。超聲波可以強(qiáng)化乙醇浸提法，達(dá)到省時、高效、節(jié)能的目的，此方法采用全物理過程，無任何污染，是一條理想的提取黃酮類物質(zhì)的途徑，具有廣闊的應(yīng)用前景。3.2 黃酮類化合物是一大類天然產(chǎn)物，廣泛存在于植物界，是許多中草藥的有效成分。在自然界中最常見的是黃酮和黃酮醇，其它包括雙氫黃（醇）、異黃酮、雙黃酮、黃烷醇、

10、查爾酮、橙酮、花色苷及新黃酮類等6。天然來源的生物黃酮分子量小，能被人體迅速吸收，能通過血腦屏障，能進(jìn)入脂肪組織，進(jìn)而體現(xiàn)出如下功能：消除疲勞、保護(hù)血管預(yù)防動脈硬化、擴(kuò)張毛細(xì)血管、疏通微循環(huán)、抗脂肪氧化、抗衰老、活化大腦及其它臟器細(xì)胞的功能。 黃酮類化合物具有抗癌、抗腫瘤、抗心腦血管疾病、抗炎鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、治療骨質(zhì)疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗輻射等作用712。近年來，世界上掀起了植物藥開發(fā)的熱潮，植物藥以其天然低毒的特點(diǎn)倍受青睞，而黃酮類化合物以其廣譜的藥理作用引人矚目。當(dāng)前，天然產(chǎn)物有效成分的研究與開發(fā)方興未艾，從中提取分離的有效成分應(yīng)用于醫(yī)藥、保健食品、食品添加劑以及化妝

11、品等行業(yè)，深受消費(fèi)者青睞，因而具有廣闊的發(fā)展前景。本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，腎蕨植物中含有較為豐富的黃酮。因此，腎蕨植物具有廣泛開發(fā)和利用價值，值得綜合利用，加強(qiáng)資源開發(fā)。參考文獻(xiàn)：1 徐冬英.藥用蕨類植物的研究進(jìn)展J.中醫(yī)藥信息，1997，（4）：20.2 譚樹輝，潘超美.中草藥野外識別手冊(一)M.廣州：廣東科技出版社，2004：30.3 趙 莉，楊文鈺.蕨類植物的活性成分研究進(jìn)展J.中藥材，2004，27(6):452.4 劉祥義.超聲波提取元寶楓葉總黃酮方法研究J.云南化工，2003，30（1）：27.5 謝明杰，宋 明，鄒翠霞，等. 超聲波提取大豆異黃酮J.大豆科學(xué)，2004，23(1):75.6 夏杏洲，張 輝，魏傳晚.榕樹葉中黃酮類化合物的提取條件研究J.食品研究與開發(fā)，2002，23(5):35.7 華光軍，郭 勇.黃酮類化合物藥理研究進(jìn)展J.廣東藥學(xué)，1999，9（4）：9.8 黃河勝，馬傳庚，陳志武.黃酮類化合物藥理作用研究進(jìn)展J.中國中藥雜志，2000，25（10）：499.9 王 瑋，王 琳. 黃酮類化合物的研究進(jìn)展J.沈陽醫(yī)學(xué)院學(xué)