兔實(shí)驗(yàn)技術(shù)操作

1、 一、兔的抓取與1.準(zhǔn)備的物品、器械：固定器2.簡(jiǎn)要：（1）徒手抓取 （2）3.解說(shuō)操作：3.1徒手抓取用一只手將頸部的被毛和皮膚一起抓住提起，另一只手托住臀部。（如圖1）。也可一手抓住兔肩胛部的皮膚，另一手托住其臀部并將兔的頭部放置于臂彎中，再用前臂支撐兔體。3.2 3.2.1將兔放在操作臺(tái)上，用一只手抓住頸背部皮膚（包括兔耳），另一只手壓住腰部（或后肢）加以，可用于肌肉注射、灌胃等操作。3.2.2 將兔放在操作臺(tái)上，用左手抓住頸背部皮膚，使兔下半身固定在操作者左臂下方，用右手環(huán)抱兔前肢，適用于孕兔灌胃等操作。如圖2。3.2.3盒式法：將兔放入兔盒，蓋上蓋，使兔頭露在盒外，便可進(jìn)行采血或注射

2、給藥等操作。3.2.4板：將兔仰臥或俯臥在板上，用布帶，四肢和頭部也用布帶，即可進(jìn)行心電圖檢查、注射給藥、采血等操作。7 / 74.注意事項(xiàng)4.1 蓋兔盒時(shí)必須要輕，不能用力壓，否則兔脊椎骨很容易骨折，造成下肢癱瘓。4.2 將家兔放回兔籠時(shí)，先將臀部與后肢放入籠。4.3 抓取時(shí)禁止抓提兔耳。4.4抓取要穩(wěn)、準(zhǔn)、柔、快，不可過(guò)分用力抓捏腰腹部。二、兔的采血方法1.準(zhǔn)備的物品、器械：注射器、采血管、止血帶、酒精棉球、干棉球、架等2.簡(jiǎn)要：耳靜脈采血、耳動(dòng)脈采血、后肢靜脈采血、心臟采血3.解說(shuō)操作3.1耳緣靜脈或耳動(dòng)脈采血3.1.1 將兔于器，用酒精棉球擦拭消毒。3.1.2助手固定兔耳，并壓迫耳緣靜

3、脈根部，使血管充盈；操作者手持注射器，針頭沿耳緣靜脈平行刺入血管，慢慢抽取血液。3.1.3助手固定兔耳，操作者手持注射器，在耳中央動(dòng)脈末端，使針頭沿血管平行方向刺入動(dòng)脈，血液即可流入注射器。3.1.4 采血完畢后立即用消毒干棉球壓迫止血。3.2后肢靜脈采血3.2.1  兔固定于兔架上，剪去脛部被毛，股部扎上止血帶，使脛外側(cè)皮下靜脈充盈。3.2.2 固定靜脈，用左手兩指固定好靜脈，右手取帶有針頭的注射器皮下靜脈平行方向刺入血管，抽一下針?biāo)?，如血進(jìn)入注射器，表示針頭已刺入血管，即可取血。取血后要長(zhǎng)時(shí)間壓迫止血，一般取血量為25mL。3.2.3 取完后必須用棉球壓迫取血部位止血，時(shí)間要略長(zhǎng)

4、些，因此處不易止血。如止血不妥，可造成皮下血腫，影響連續(xù)多次取血。3.3心臟采血3.3.1 將兔仰臥在臺(tái)上，胸左側(cè)心臟部位剪毛、酒精棉球或碘伏消毒。3.3.2 在第3、4 肋間胸骨左緣3 mm 處穿刺，針頭刺入心臟后，持針手可感覺(jué)到兔心臟有節(jié)律的跳動(dòng)，血液會(huì)自然進(jìn)入注射器。3.3.3 此時(shí)如果抽不到血，可以前后進(jìn)退調(diào)節(jié)針頭位置，切不可使針頭在胸腔亂探，以防刺傷兔的心、肺，可以拔出重新穿刺。3.3.4 采血完畢后立即用干棉球按壓止血。4.注意事項(xiàng)4.1采血前應(yīng)充分?jǐn)U血管，可使用酒精棉球反復(fù)擦拭或使用溫水?dāng)U或用手指輕彈擴(kuò)血管。4.2采血時(shí)應(yīng)先從遠(yuǎn)心端開(kāi)始進(jìn)針，然后逐漸朝近心端推進(jìn)，進(jìn)針角度一般04

5、5°。4.3采血時(shí)應(yīng)注意血液流出是否順暢，若不順暢可用棉球沿血管輕擦，以擴(kuò)血管。4.4 采血結(jié)束后應(yīng)用干棉球按壓進(jìn)針部位進(jìn)行止血。三、兔給藥方法1.準(zhǔn)備的物品、器械：剃毛器、玻璃紙、紗布、膠布或彈性繃帶、酒精棉球、干棉球、生理鹽水、注射器等2.簡(jiǎn)要：皮膚給藥、皮下給藥、肌肉給藥、灌胃、靜脈給藥等3.解說(shuō)操作3.1皮膚給藥3.1.1給藥前準(zhǔn)備相關(guān)物品，包括剃毛器、玻璃紙、紗布、膠布或彈性繃帶、注射器等。3.1.2 核對(duì)動(dòng)物編號(hào)與組別，抓取和動(dòng)物。3.1.3 給藥部位：一般選擇脊柱兩側(cè)背部皮膚，試驗(yàn)有特別要求除外。給藥前去除背部約3cm×3cm 大小的被毛，注意不要損傷皮膚。3

6、.1.4取相應(yīng)劑量的受試物均勻涂抹在去毛處約2.5cm×2.5cm 大小的皮膚上，先用一層玻璃紙覆蓋給藥部位，再用紗布覆蓋，然后用無(wú)刺激性膠布或彈性繃帶固定。給藥時(shí)膠布的固定的松緊程度應(yīng)合理，應(yīng)確保能將藥物固定于兔皮膚而又不導(dǎo)致動(dòng)物窒息。3.1.5固定數(shù)小時(shí)后，除去受試物，并用溫水或無(wú)刺激性溶劑清潔給藥部位皮膚。4.6 如果實(shí)驗(yàn)需要破損皮膚，則在給藥前，用消毒針在敷藥部位皮膚劃一“井”字，或用砂紙?jiān)诜笏幉课黄つw摩擦，以皮膚表層損傷為限。4.7 記錄操作時(shí)間。若是長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)，可記錄每組動(dòng)物給藥開(kāi)始時(shí)間和結(jié)束時(shí)間。4.8 如果受試物為固體/粉劑，敷藥前先用適量水或其它賦形劑調(diào)成糊狀，以

7、保證藥物與皮膚充分接觸。4.9經(jīng)皮給藥前須將動(dòng)物給藥部位的毛發(fā)去除干凈，根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求可使用剃毛器或脫毛藥品進(jìn)行除毛。3.2皮下給藥3.2.1注射前準(zhǔn)備相關(guān)物品，包括剃毛器、注射器、注射針頭、酒精棉球、干棉球等。3.2.2 核對(duì)動(dòng)物編號(hào)與組別，抓取和動(dòng)物。3.2.3根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，可選擇肩胛間的頸背部或腹部等部位皮膚注射。注射前除去被毛，再用酒精棉球消毒注射部位皮膚。3.2.4 抽取相應(yīng)量的藥液，排盡針管的空氣；操作者一手提起家兔的注射部位皮膚，使其皺折成三角體，另一手持注射器自皺折下方刺入皮下，平行進(jìn)針一段距離，刺入后針頭可左右擺動(dòng)，表示已進(jìn)入皮下，便可緩慢推注，根據(jù)試驗(yàn)需要進(jìn)行下一只動(dòng)物的給

8、藥操作。3.2.5注射給藥完畢，與時(shí)記錄給藥時(shí)間。若是長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)，可記錄每組動(dòng)物給藥開(kāi)始時(shí)間和結(jié)束時(shí)間。3.2.6當(dāng)針頭刺入皮下時(shí)應(yīng)回抽注射器，避免注射入皮下血管。注射完畢后為避免藥物流出，可用干棉球按壓注射部位數(shù)秒。3.2.7給藥量：每個(gè)注射點(diǎn)常用給藥體積為1.0 mL/kg，每個(gè)注射點(diǎn)最大給藥體積為2.0mL/kg。3.3肌肉給藥3.3.1注射前準(zhǔn)備相關(guān)物品，包括剃毛器、注射器、注射針頭、酒精棉球、干棉球等。3.3.2核對(duì)動(dòng)物編號(hào)與組別，抓取和動(dòng)物。由助手一手固定兔兩前肢，另一手固定兩后肢?；蛴霉潭ㄆ鞴潭?。3.3.3剪去注射部位被毛，用酒精棉球消毒皮膚。3.3.4抽取相應(yīng)量的藥液，排盡針

9、管的空氣，一次一側(cè)注入量1 mL/只。3.3.5股四頭肌注射給藥：操作者一手固定給藥部位，另一手持注射器垂直刺入肌肉，回抽無(wú)血，即可進(jìn)行注射，如果有回血，應(yīng)拔出針頭，更換部位后重新進(jìn)針，避免誤將藥物注射入血液中。3.3.6臀部肌肉注射給藥：操作者一手繃緊注射部位附近皮膚，另一手持注射器與皮膚表面成約60o 角刺入肌肉，針頭刺入深度約1cm，如果回抽無(wú)血，即可緩慢進(jìn)行注射；如果有回血，應(yīng)拔出針頭，更換部位后重新進(jìn)針。3.3.7注射完畢，迅速拔出針頭，用干棉球按住注射部位片刻，以防止藥液漏出。3.3.8記錄注射時(shí)間。若是長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)，可記錄每組動(dòng)物給藥開(kāi)始時(shí)間和結(jié)束時(shí)間。3.3.9多次肌肉注射給藥

10、時(shí)，除試驗(yàn)特殊要求外，應(yīng)在左右兩側(cè)后肢肌肉輪流注射。應(yīng)注意避免傷與坐骨神經(jīng)。3.3.10如果進(jìn)行局部刺激性試驗(yàn)，注射部位應(yīng)相對(duì)固定3.4灌胃3.4.1灌胃前準(zhǔn)備相關(guān)物品，包括注射器、導(dǎo)管、藥液、開(kāi)口器與裝有清水的燒杯等。3.4.2核對(duì)動(dòng)物編號(hào)與組別，按SOP-T-Ad-02 抓取和動(dòng)物，使食道伸直。3.4.3抽取相應(yīng)量的藥液，排盡針管的空氣。3.4.4操作者將開(kāi)口器由兔嘴角插入，由前向后旋轉(zhuǎn)，橫放在兔子上下頜之間，固定在舌面上；將導(dǎo)管經(jīng)開(kāi)口器中央的小孔插入，慢慢沿上腭壁插入食道約15 cm18 cm達(dá)胃；插入過(guò)程要隨時(shí)觀察兔的反應(yīng)，防止導(dǎo)管插入氣管或盤旋于咽部；導(dǎo)管通過(guò)咽部時(shí)，兔會(huì)有輕微吞咽動(dòng)

11、作，但不會(huì)劇烈掙扎。3.4.5將導(dǎo)管外口端放入清水中片刻，如水中無(wú)氣泡逸出，即可套上注射器，開(kāi)始緩慢注入藥液，觀察兔若無(wú)掙扎，可以迅速注入余下藥液；如清水中有氣泡逸出，表明可能插入氣管，應(yīng)拔出重新插入。3.4.6注完藥液后，捏住導(dǎo)管外口，拔下注射器，抽3 mL5 mL 純凈水，然后重新套入導(dǎo)管，注入純凈水，將導(dǎo)管殘留的藥液全部沖入胃。3.4.7藥液注完后，先迅速拔出導(dǎo)管，然后取出開(kāi)口器。3.4.8記錄給藥相關(guān)容，根據(jù)試驗(yàn)需要進(jìn)行下一只動(dòng)物的給藥。3.4.9一次給藥量：最大給藥體積15 mL/ kg。3.4.10 給藥先從溶媒對(duì)照組開(kāi)始，再?gòu)牡蛣┝恐粮邉┝?，最后再進(jìn)行市售品/陽(yáng)性對(duì)照組。3.5靜

12、脈給藥3.5.1注射前準(zhǔn)備相關(guān)物品，包括器、注射器、注射針頭或頭皮針、酒精棉球、干棉球等。3.5.2核對(duì)動(dòng)物編號(hào)與組別，抓取和動(dòng)物。3.5.3抽取相應(yīng)量的藥液，排盡針管的空氣。3.5.4后肢小隱靜脈給藥：用酒精棉球消毒注射部位皮膚，左手壓迫后肢注射部位上方近心端血管，使血管充盈；右手持注射器，將針頭插入靜脈，回抽若有回血，左手即放松，緩慢推注藥液。3.5.5耳緣靜脈給藥：用酒精棉球輕輕擦拭耳緣靜脈注射部位，使靜脈清晰可見(jiàn)；一手固定耳廓邊緣部位，另一手持頭皮針或注射器，針頭斜面朝上，將針頭由耳尖部刺入靜脈，見(jiàn)回血后緩慢注入藥液。3.5.6注射進(jìn)針應(yīng)盡可能從耳緣靜脈遠(yuǎn)心端開(kāi)始，如果推注困難、滴注不暢或注射部位發(fā)白或局部組織腫脹時(shí)，表明注射失敗，應(yīng)