金花茶組植物化學(xué)成分的定量分析

1、金花茶組植物化學(xué)成分的定量分析              作者：唐前 羅燕英 黃連冬 陸敏珠 唐玲 史麗穎 馮寶民 王永奇  【摘要】  目的測(cè)定金花茶、毛瓣金花茶、凹脈金花茶、四季金花茶、薄葉金花茶不同植物部位中總皂苷、總多酚（鞣質(zhì)）、總黃酮的含量。方法采用紫外分光光度法。結(jié)果其總皂苷、總多酚（鞣質(zhì)）、總黃酮的含量依次為：金花茶花蕾醇提物：21.30%、6.56%（0.34%）、21.76%；葉子醇提物：43.24%、3.95%（1.

2、57%）、0.93%；葉子水提物：9.91%、6.69%（1.34%）、5.19%；種子醇提物：13.53%、5.88%（0.83%）、6.85%。毛瓣金花茶葉子醇提物：43.49%、6.79%（1.65%）、1.54%。 凹脈金花茶葉子醇提物：36.29%、13.19%（5.33%）、1.12%；種子醇提物：20.58%、5.29%（0.14%）、0.33%。四季金花茶葉子醇提物：35.90%、7.01%（0.47%）、0.78%。薄葉金花茶葉子醇提物：30.08%、7.57%（0.19%），0.82%。結(jié)論紫外分光光度法測(cè)定以上3種物質(zhì)簡(jiǎn)便易行，準(zhǔn)確可靠，重復(fù)性和回收率都較理想。 【關(guān)鍵詞

3、】  金花茶組植物 總皂苷 總多酚（鞣質(zhì)） 總黃酮   Abstract:ObjectiveTo determine the chemical constituents of total saponin, total polyphenol (tannin) and total flavonoids in Section Chrysantha Chang. MethodsTheir contents were determined by spectrophotometry.ResultsThe contents of total saponin,total poly

4、phenol ( tannin) and total flavonoids were：21.30%,6.56%（0.34%）,21.76%； 43.24%,3.95%（1.57%）,0.93%； 9.91%,6.69%（1.34%）,5.19%； 13.53%,5.88%（0.83%）,6.85%；43.49%,6.79%（1.65%）,1.54%；36.29%,13.19%（5.33%）,1.12%； 20.58%,5.29%（0.14%）,0.33%；35.90%,7.01%（0.47%）,0.78%；30.08%,7.57%（0.19%）,0.82% respectively.Concl

5、usionThe method is convenient and reliable to determine the three substances, and the reproducibility and the recovery are fairly good.   Key words:Section Chrysantha Chang;  Total saponin;  Total polyphenol（tannin）;  Total flavonoids   20世紀(jì)60年代初，在我國(guó)廣西首次發(fā)現(xiàn)黃色山茶屬植物金花

6、茶Camellia chrysantha (Hu)Tuyama,震驚世界。到目前為止，已發(fā)現(xiàn)并命名的黃花山茶屬植物已達(dá)32種5變種，1998年張宏光教授將其歸類(lèi)為金花茶組。其中除越南與廣西接壤的北部有3種，云南、貴州、四川各有1種外，其余26種、5變種均產(chǎn)于我國(guó)廣西南部和西南部的亞熱帶南緣和熱帶北緣地區(qū)。90%分布于中國(guó)，80%分布于廣西，說(shuō)明中國(guó)是金花茶組植物的特產(chǎn)國(guó)，而廣西是金花茶組的特產(chǎn)區(qū)。   但因?yàn)榻鸹ú杞M植物發(fā)現(xiàn)較晚，加之分類(lèi)上爭(zhēng)議時(shí)間較長(zhǎng)，所以盡管在園林、花卉界轟動(dòng)較大，亦被國(guó)家列為珍稀保護(hù)植物，但對(duì)它的現(xiàn)代研究甚少。本文以皂苷、多酚、黃酮類(lèi)成分為指標(biāo)，對(duì)其中

7、產(chǎn)量大、資源較豐富的5種金花茶組植物化學(xué)成分進(jìn)行了分析測(cè)定?，F(xiàn)報(bào)道如下。   1  儀器與試藥   1.1  儀器Unico7200可見(jiàn)分光光度計(jì)(尤尼柯上海儀器有限公司); Laborata 4000 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀( Heidolph 公司) ;BP210S 十萬(wàn)分之一電子天平(Sartorius 公司) ; Jasco v2560紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(JASCO 日本分光株式會(huì)社) 。   2  方法與結(jié)果   2.1  總皂苷的含量測(cè)定1   2.2&

8、#160; 多元酚及鞣質(zhì)的含量測(cè)定2,3            2.3  總黃酮的含量測(cè)定4,5   對(duì)照品溶液的制備：精確稱(chēng)取干燥至恒重的對(duì)照品20 mg，置100 ml容量瓶中，加入甲醇溶解并稀釋到刻度，搖勻，得濃度為0.2 mg/ml的對(duì)照品溶液，備用。   供試品溶液的制備：精確稱(chēng)取金花茶組植物提取物的干浸膏 G(g), 置100 ml容量瓶中加入甲醇溶解并稀釋至刻度, 搖勻, 得 H(mg·ml- 1)的溶液, 備用。表3&#

9、160; 金花茶總酚和鞣質(zhì)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表4  總酚和鞣質(zhì)含量測(cè)定結(jié)果測(cè)定波長(zhǎng)的選擇：對(duì)照品溶液和供試品溶液NaNO2- AlCl3 顯色后, 在紫外可見(jiàn)分光光度上, 波長(zhǎng)200600 nm 區(qū)間掃描。均在400 nm 處有最大吸收, 因此選擇400 nm 為測(cè)定波長(zhǎng)。測(cè)得的結(jié)果以對(duì)照品為基準(zhǔn)計(jì)算總黃酮的含量。   線性關(guān)系考察：精密吸取對(duì)照品溶液 0.00，0.30，0.60，0.90，1.20，1.50 ml，各加甲醇至4.0 ml，再分別加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的NaNO2溶液0.3 ml,搖勻，室溫放置6 min，再加10% AlCl3溶液0.3 ml,搖勻，室溫放

10、置10 min，在400 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度A，同時(shí)以試劑空白做參比。以吸光度A為縱坐標(biāo)，濃度C（mg/ml）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得到回歸方程A=15.065C+0.002 6,R2=0.999 9 線性范圍：0.0130.065 2 mg/ml。   重復(fù)性實(shí)驗(yàn)：精確吸取 I（ml） 的供試品溶液, 置于試管中, 加入甲醇至4.0 ml , 按照標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下的方法操作, 測(cè)定吸光度, 平行做5次實(shí)驗(yàn), 代入回歸方程, 計(jì)算總黃酮的含量。G 、H 、I的數(shù)據(jù)見(jiàn)表5。結(jié)果見(jiàn)表6。表5  金花茶總黃酮的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表6  總黃酮含量測(cè)定結(jié)果 &#

11、160; 對(duì)照品溶液的制備：精確稱(chēng)取干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品20 mg, 置100 ml 容量瓶中, 加入甲醇溶解并稀釋至刻度, 搖勻, 得濃度為0.2 mg·ml- 1 的對(duì)照品溶液, 備用。   供試品溶液的制備：精確稱(chēng)取金花茶組植物提取物的干浸膏J(g), 置100 ml容量瓶中加入甲醇溶解并稀釋至刻度, 搖勻, 得K(mg·ml- 1)的溶液, 備用。   測(cè)定波長(zhǎng)的選擇：蘆丁對(duì)照品溶液和供試品溶液NaNO2-Al(NO3)3-NaOH 顯色后, 在紫外可見(jiàn)分光光度上, 波長(zhǎng)200600 nm 區(qū)間掃描。均在500 nm 處有最

12、大吸收, 因此選擇500 nm 為測(cè)定波長(zhǎng)。測(cè)得的結(jié)果以蘆丁為基準(zhǔn)計(jì)算總黃酮的含量。   重復(fù)性實(shí)驗(yàn)：精確吸取1.0 ml 的供試品溶液, 置于試管中, 加入甲醇至2.0 ml , 按照標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下的方法操作,測(cè)定吸光度, 平行做5次實(shí)驗(yàn), 代入回歸方程, 計(jì)算總黃酮的含量。J，K，L的數(shù)據(jù)見(jiàn)表7。結(jié)果見(jiàn)表8。表7  金花茶總黃酮的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表8  總黃酮含量測(cè)定結(jié)果%   3  討論   3.1  總黃酮含量測(cè)定方法的選擇經(jīng)大量的文獻(xiàn)調(diào)研表明，采用可見(jiàn)分光光度法測(cè)定總黃酮的含量是比較成熟的方法，

13、此方法穩(wěn)定性好，準(zhǔn)確度高，且簡(jiǎn)便快捷，易于操作，結(jié)果可靠，故選擇了采用分光光度法測(cè)定金花茶提取物中總黃酮的含量。   3.2  皂苷含量測(cè)定方法的選擇皂苷的分析測(cè)定有多種方法，如沉淀法、溶血指數(shù)法、層析法等，沉淀法測(cè)定往往易帶進(jìn)雜質(zhì)或?qū)е略碥兆冑|(zhì)；層析法一般可以分離出總皂苷，但對(duì)總含量測(cè)定不適，誤差大，成本高，而分光光度法操作簡(jiǎn)便、靈敏，屬于經(jīng)典、成熟的方法，我們選擇了與金花茶皂苷類(lèi)成分基本母核結(jié)構(gòu)接近的齊墩果酸為對(duì)照品，采用分光光度法測(cè)定其總皂苷的含量。   3.3  鞣質(zhì)測(cè)定方法的選擇鞣質(zhì)的經(jīng)典含量測(cè)定方法有很多種，如重量法、容量法、比色法等。以前最常用的有皮粉法、高錳酸鉀法、絡(luò)合定量法。2005年版以前的中國(guó)藥典部2鞣質(zhì)含量測(cè)定法一直沿用皮粉法。但是其缺點(diǎn)是耗用樣品多，測(cè)定時(shí)間長(zhǎng)，且沒(méi)有選擇性，測(cè)定結(jié)果偏高，而且皮粉用量很大，而2005年版中國(guó)藥典部鞣質(zhì)測(cè)定法，以沒(méi)食子酸為對(duì)照品穩(wěn)定性好，干酪素的吸附作用具有專(zhuān)屬性，其方法操作簡(jiǎn)便，用時(shí)短，且重復(fù)性和回收率都較理想。【參考文獻(xiàn)】  1 高聲傳，郭 濤，夏維杰，等比色法測(cè)定酸棗仁提取物中總皂苷的含量J.實(shí)用藥