實(shí)驗(yàn)立項(xiàng)申請(qǐng)書(shū)

1、附件1：項(xiàng) 目編 號(hào)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放項(xiàng)目申請(qǐng)表項(xiàng)目名稱(chēng)： 周口水果市場(chǎng)獼猴桃軟腐病病害分析 項(xiàng) 目 類(lèi) 別： 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)計(jì)型 申請(qǐng)人： 劉勇亮 申請(qǐng)人所在學(xué)院： 生命科學(xué)與農(nóng)學(xué)學(xué)院 實(shí) 驗(yàn) 室 名 稱(chēng)： 微生物工程 導(dǎo)師姓名職稱(chēng)： 填表日期： 2014年3月15日 周口師范學(xué)院教務(wù)處制填 寫(xiě) 說(shuō) 明一、本表要按順序逐項(xiàng)填寫(xiě)，內(nèi)容要實(shí)事求是，表達(dá)要明確、嚴(yán)謹(jǐn)。空缺項(xiàng)要填“無(wú)”。要求一律用A4紙雙面打印，于左側(cè)裝訂成冊(cè)。本表一式四份，指導(dǎo)教師、實(shí)驗(yàn)室、院（系）、教務(wù)處各一份。二、項(xiàng)目編號(hào)由教務(wù)處統(tǒng)一編制填寫(xiě)。項(xiàng)目類(lèi)別分為以下五種：科技創(chuàng)新型，自選型，實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)計(jì)型，參與科研型，參加各種比賽型。三、申請(qǐng)參

2、加周口師范學(xué)院實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)人數(shù)不得超過(guò)10人（1人為項(xiàng)目負(fù)責(zé)人，參與合作研究者19人），運(yùn)行周期一般為1年。四、指導(dǎo)教師主持科研項(xiàng)目情況限填兩項(xiàng)；代表性科研成果限填三項(xiàng)，若為論文需按照論文題目、發(fā)表刊物名稱(chēng)及年、卷、期、頁(yè)碼填寫(xiě)，若為科研成果獎(jiǎng)，需按照成果名稱(chēng)、授獎(jiǎng)機(jī)構(gòu)及獲獎(jiǎng)等級(jí)填寫(xiě)，若為專(zhuān)利，需按照專(zhuān)利名稱(chēng)、專(zhuān)利性質(zhì)（國(guó)家發(fā)明專(zhuān)利或?qū)嵱眯滦蛯?zhuān)利）、授權(quán)機(jī)構(gòu)填寫(xiě)。以上成果限第一作者或第一完成人。 五、項(xiàng)目所需費(fèi)用主要用于補(bǔ)貼學(xué)生參加開(kāi)放實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目所需的材料消耗、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)計(jì)中必要的設(shè)備制作、研制費(fèi)用，不列支人員勞務(wù)等其它費(fèi)用。 一、項(xiàng)目申請(qǐng)人情況 申請(qǐng)人姓名劉勇亮性別男民族漢學(xué)號(hào)20130

3、7030023所在學(xué)院生命科學(xué)與農(nóng)學(xué)學(xué)院專(zhuān)業(yè)、班級(jí)生物技術(shù)、2013級(jí)生物技術(shù)項(xiàng)目名稱(chēng)周口水果市場(chǎng)獼猴桃軟腐病病害分析項(xiàng)目類(lèi)別實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)計(jì)通訊地址生命科學(xué)與農(nóng)學(xué)學(xué)院2013級(jí)生物技術(shù)班聯(lián)系電歷自何年月至何年月學(xué)習(xí)單位（高中以上，含高中）任職2010.92013.6汝南高中課代表2013.9至今周口師范學(xué)院班長(zhǎng)申請(qǐng)人參加科研的經(jīng)歷自何年月至何年月參加項(xiàng)目名稱(chēng)項(xiàng)目來(lái)源擔(dān)任的工作取得的成果申請(qǐng)人入校以來(lái)的主要專(zhuān)業(yè)必修課成績(jī)課程名稱(chēng)類(lèi)別成績(jī)課程名稱(chēng)類(lèi)別成績(jī)動(dòng)物學(xué)專(zhuān)業(yè)課90無(wú)機(jī)化學(xué)專(zhuān)業(yè)課95植物學(xué)專(zhuān)業(yè)課93微生物學(xué)專(zhuān)業(yè)課91生物化學(xué)專(zhuān)業(yè)課88免疫學(xué)專(zhuān)業(yè)課84有機(jī)化學(xué)專(zhuān)業(yè)課92項(xiàng)

4、目組其他成員（不包括申請(qǐng)人和導(dǎo)師）姓名性別學(xué)號(hào)所在學(xué)院專(zhuān)業(yè)分工簽名李素平女201307030024生命科學(xué)與 農(nóng)學(xué)學(xué)院生物技術(shù)文獻(xiàn)檢索張猛男201307030028生命科學(xué)與農(nóng)學(xué)學(xué)院生物技術(shù)參與實(shí)驗(yàn)楊信男201307030042生命科學(xué)與農(nóng)學(xué)學(xué)院生物技術(shù)參與實(shí)驗(yàn)校萬(wàn)瑩男201307030012生命科學(xué)與農(nóng)學(xué)學(xué)院生物技術(shù)數(shù)據(jù)收集與分析二、指導(dǎo)教師簡(jiǎn)況指導(dǎo)教師性別民族年齡研究方向職稱(chēng)部門(mén)所在實(shí)驗(yàn)室主持科研項(xiàng)目情況起止時(shí)間項(xiàng)目名稱(chēng)項(xiàng)目來(lái)源代表性科研成果三、指導(dǎo)教師對(duì)申請(qǐng)人的評(píng)價(jià)對(duì)申請(qǐng)人的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)、工作態(tài)度、學(xué)風(fēng)及研究能力的評(píng)價(jià) 該同學(xué)學(xué)習(xí)認(rèn)真，學(xué)風(fēng)端正，成績(jī)優(yōu)秀，專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)扎實(shí)，實(shí)驗(yàn)操作能力強(qiáng)，具有一

5、定獨(dú)立思考解決問(wèn)題的能力，科研能力強(qiáng)對(duì)申請(qǐng)項(xiàng)目的價(jià)值、可行性、工作基礎(chǔ)等方面的評(píng)價(jià)獼猴桃是獼猴桃科獼猴桃屬的落葉纏繞性藤本植物，獼猴桃果實(shí)酸甜可口，是一種鮮美而富含營(yíng)養(yǎng)的水果。每100g果肉中含有Vc100420mg，其Vc含量比柑桔高68倍，比蘋(píng)果高32倍以上，此外果肉中還含有機(jī)酸1.21.4%，糖814%，蛋白質(zhì)7.6%，脂肪0.3%以及少量的鈣。然而，幾乎所有的鮮食水果都會(huì)攜帶真菌進(jìn)入消費(fèi)市場(chǎng)，由于這些真菌多為田間潛伏侵染，需要一定的時(shí)間才能至腐，往往在果蔬進(jìn)出口通關(guān)時(shí)難以用肉眼察覺(jué)而被疏漏，所以不斷的對(duì)獼猴桃進(jìn)行深入研究意義重大。獼猴桃性味甘酸而寒，有解熱、止渴、通淋、健胃的功效?？梢?/p>

6、治療煩熱、消渴、黃疸、嘔吐、腹瀉、石淋、關(guān)節(jié)痛等疾病，而且還有抗衰老的作用。唐代醫(yī)藥學(xué)家陳藏器介紹獼猴桃的功效為“調(diào)中下氣、主骨節(jié)風(fēng)、癱緩不隨、長(zhǎng)年白發(fā)”。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究分析，獼猴桃果實(shí)中含有糖類(lèi)，蛋白質(zhì)中氨基酸豐富，蛋白酶十二種，維生素B1、C、胡蘿卜素以及鈣、磷、鐵、鈉、鉀、鎂氯、色素等多種成分。其維生素C含量是等量柑橘中的五至六倍。有報(bào)道稱(chēng)：獼猴桃能阻斷致癌物質(zhì)亞硝胺合成的活性成分，阻斷率達(dá)98%，有抑制癌細(xì)胞的作用。所以，獼猴桃是滋補(bǔ)強(qiáng)身，抵抗癌癥的上等果品，是人們生活中常見(jiàn)也很受歡迎一種水果。本研究小組成員具有微生物培養(yǎng)鑒別的相關(guān)理論知識(shí)和實(shí)驗(yàn)技能，并跟隨老師參加過(guò)相關(guān)研究的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、

7、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備及整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程，為開(kāi)展本課題研究奠定了良好的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)所用儀器的使用方法及生理指標(biāo)的測(cè)定方法已經(jīng)熟練掌握，無(wú)技術(shù)問(wèn)題。四、 項(xiàng)目說(shuō)明及評(píng)審意見(jiàn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目?jī)?nèi)容、創(chuàng)新點(diǎn)1. 周口水果市場(chǎng)獼猴桃軟腐病病害分析步驟選取材料 表面殺菌 平板培養(yǎng) 分離純化 對(duì)比鑒定2. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)2.1實(shí)驗(yàn)材料：腐爛的獼猴桃，PDA+鏈霉素平板培養(yǎng)基，恒溫培養(yǎng)箱，解剖刀，次氯酸鈉，70%酒精，無(wú)菌水，秒表，吸水紙2.2實(shí)驗(yàn)方法：取材及表面消毒選擇典型的單個(gè)病斑，用解剖刀從病源邊病組織數(shù)塊（每個(gè)果實(shí)4小塊，一共5個(gè)果實(shí)），于70%酒精中浸泡30秒，無(wú)菌水沖洗一次，次氯酸鈉浸泡1分鐘，無(wú)菌水沖洗3次，吸水紙吸干組織表面的

8、水。平板培養(yǎng)： 將組織塊移至PDA+鏈霉素的平板培養(yǎng)基上，每皿放4塊，25恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。選取生長(zhǎng)旺盛的菌落一個(gè)或幾個(gè)，用打孔器取邊緣的菌絲，移至新的PDA+鏈霉素的培養(yǎng)基中，分別在25恒溫培養(yǎng)基中培養(yǎng)。分離純化： 待菌落接觸前，分別取含菌落邊緣菌絲的菌蝶數(shù)塊，移至新PDA平板純化，每板1個(gè)菌碟，得到一純，25下，全黑暗培養(yǎng)。在菌落長(zhǎng)至2/3平板時(shí)，用打孔器取菌落邊緣菌碟，移至新PDA平板純化，每板一個(gè)培養(yǎng)基塊，得到二純，25下，全黑暗培養(yǎng)。此后，在菌落長(zhǎng)滿至2/3平板時(shí)，重復(fù)獲得二純的方法進(jìn)行培養(yǎng)，獲得純化的菌株后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。設(shè)置空白對(duì)照組對(duì)比鑒定由實(shí)驗(yàn)結(jié)果看出，有三種菌的菌落有差異：1.

9、病原菌在25PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)迅速，4d即長(zhǎng)到大約6cm，6d即長(zhǎng)滿整個(gè)平板，生長(zhǎng)初期呈白色絮狀菌絲體，菌落邊緣不清晰，有大量新生的菌絲，呈絨毛狀，大約5d后菌落轉(zhuǎn)變?yōu)榛野咨鯛睢馍z有隔，分生孢子單胞，無(wú)色，橢圓形，培養(yǎng)期間未見(jiàn)有性孢子產(chǎn)生。經(jīng)查閱參照真菌鑒定手冊(cè)得知，此種菌有可能為草莖點(diǎn)霉。2. 另一種在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)5天的菌落呈粉紅色，邊緣呈毛絨狀。初生菌絲為黃色，慢慢均轉(zhuǎn)變?yōu)榧t色。顯微鏡下可觀察到菌絲的形態(tài)為絲狀。光學(xué)顯微鏡下可以觀察到菌絲的形態(tài)為長(zhǎng)絲狀。經(jīng)查閱參照真菌鑒定手冊(cè)，此種菌可能為三線鐮刀菌。3. PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)5天的菌落正面中央部分呈灰黑色，邊緣為白色。背部中央

10、部分色素為墨黑色，邊緣為色素淡黃，邊緣蓬松呈毛絨狀。光學(xué)顯微鏡下可觀察到孢子的形態(tài)為手榴彈狀。根據(jù)菌落和孢子形態(tài)，參照真菌鑒定手冊(cè)，初步判斷此菌可能屬于鏈格孢菌。進(jìn)度安排2015年3月-2015年4月 利用數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行數(shù)據(jù)整理與分析2015年5月-2015年8月 進(jìn)行平板培養(yǎng)對(duì)照試驗(yàn)，并對(duì)比得出結(jié)論2015年9月-2015年10月 統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，整理論文實(shí)驗(yàn)開(kāi)展的措施 課題組成員進(jìn)行合理分工，明確課題研究的具體內(nèi)容，探究實(shí)驗(yàn)方案，制定實(shí)驗(yàn)步驟。指導(dǎo)老師負(fù)責(zé)對(duì)實(shí)驗(yàn)方案的認(rèn)真審閱，提出不足和建議并與學(xué)生討論，制定出更加合理的實(shí)驗(yàn)方案：指導(dǎo)老師參與到實(shí)驗(yàn)過(guò)程，隨時(shí)進(jìn)行指導(dǎo)。課題組成員在完成自己工作的同時(shí)，要協(xié)助其他同學(xué)，加強(qiáng)團(tuán)隊(duì)合作，對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的記錄和分析以及出現(xiàn)的問(wèn)題探討出有效的解決方法，使實(shí)驗(yàn)順利完成，達(dá)到預(yù)期的目的。預(yù)期目標(biāo) 本項(xiàng)目的完成將對(duì)周口水果市場(chǎng)獼猴桃的儲(chǔ)存銷(xiāo)售提供一定的理論依據(jù)。通過(guò)本項(xiàng)目的研究，可以延長(zhǎng)獼猴桃的儲(chǔ)存時(shí)間，獲得更大利潤(rùn)，并在核心期刊上發(fā)表研究性論文1篇。實(shí) 驗(yàn) 條 件主要儀器設(shè)備名稱(chēng)場(chǎng) 地主要實(shí)驗(yàn)耗材名 稱(chēng)數(shù) 量恒溫培養(yǎng)箱微生物實(shí)驗(yàn)室獼猴桃10斤無(wú)菌操