薄層色譜法對飲料中色素的測定(精)

1、薄層色譜法對飲料中色素的測定實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆毡由V法對飲料中色素的測定的方法。實(shí)驗(yàn)原理薄層色譜法又稱薄板層析法。薄層色譜使用涂敷有支持介質(zhì)硅膠或氧化鋁的平板為支撐體 ,流動(dòng)相的移動(dòng)是依靠毛細(xì)作用。將試樣點(diǎn)在層析板的一端,并將該端浸入作為流動(dòng)相的溶劑 (常稱之為展開劑中 ,試樣點(diǎn)隨著溶劑向上移動(dòng)。由于不同物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相中具有不同的分配系數(shù),當(dāng)兩相作相對運(yùn)動(dòng)時(shí) ,這些物質(zhì)也隨流動(dòng)相一起運(yùn)動(dòng) ,并在兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配,這就使得那些分配系數(shù)只有微小差別的物質(zhì) ,在移動(dòng)速度上產(chǎn)生明顯的差別,從而使各組分分離。通常用比移值R 來標(biāo)記和比較各斑點(diǎn)的位置 ,其定義是溶質(zhì)移動(dòng)速度與展開劑(流動(dòng)相的移動(dòng)

2、速度之比 :實(shí)驗(yàn)儀器及藥品1 檸檬黃樣品2 帶有色素的飲料芬達(dá) (橙味3 無水乙醇4 層析缸5 玻璃毛細(xì)管 (直徑約 1 mm6 薄層色譜板實(shí)驗(yàn)條件實(shí)驗(yàn)步驟0.預(yù)備 :將層析板置于烘箱中 ,于 105活化 30 min 后,保存于干燥器中備用。洗凈展開缸 ,晾干待用1.點(diǎn)樣 :1 在離層析板的底端2 cm 處用鉛筆輕畫一條線 ,作為原點(diǎn)線 ,在頂端 2 cm 處也同樣畫一條線 ,作為前沿線。2 用管口平整的毛細(xì)管分別吸取少量各色素溶液及飲料,點(diǎn)樣3 毛細(xì)管垂直地輕輕接觸到層析板的原點(diǎn)線上點(diǎn)樣,斑點(diǎn)直徑約為 23 mm,間隔約 1 cm。2.層析 :1 在層析缸中加入展開劑約30 mL(在缸中液

3、層約厚1 cm,蓋上層析缸蓋。待展開劑蒸氣在層析缸內(nèi)達(dá)到飽和(約 15 min2 將點(diǎn)好樣的層析板斜擱或近垂直地?cái)R在層析缸中,點(diǎn)有薹樣堂一鬻浸于展開劑,點(diǎn)有試樣的一端浸于展開劑內(nèi)。3.當(dāng)展開劑上升到前沿線時(shí),取出層析板 ,晾干 ,觀察有色斑點(diǎn)。4.觀察現(xiàn)象 ,計(jì)算比移值 R : f實(shí)驗(yàn)條件實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與現(xiàn)象黃色帶與檸檬黃樣品達(dá)到同一高度 ,另有淺黃色低于該高度。飲料中含有檸檬黃和另一種未知色素。備注 :由于時(shí)間關(guān)系 ,未測定比移值問題與討論(1 點(diǎn)樣時(shí) ,原點(diǎn)太大對實(shí)驗(yàn)有何影響 ?答:展開時(shí)會(huì)造成各種組分交叉或拖尾。(2 層析缸中展開劑的液面高度若超過原點(diǎn)線,對薄層色譜分析有什么影響?答:會(huì)使原點(diǎn)到層析點(diǎn)之間距離的數(shù)據(jù)不精準(zhǔn),比移值偏小。(3