生物技術(shù)制藥試題(打印版)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上生物技術(shù)制藥試題1. 生物技術(shù)制藥:生物技術(shù)制藥是指運(yùn)用微生物學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)等的研究成果，從生物體、生物組織、細(xì)胞、體液等，綜合利用微生物學(xué)、化學(xué)、生物化學(xué)、生物技術(shù)、藥學(xué)等科學(xué)的原理和方法進(jìn)行藥物制造的技術(shù)。2. 基因表達(dá):基因表達(dá)(gene expression)是指細(xì)胞在生命過程中,把儲(chǔ)存在DNA順序中遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯,轉(zhuǎn)變成具有生物活性的蛋白質(zhì)分子.生物體內(nèi)的各種功能蛋白質(zhì)和酶都是同相應(yīng)的結(jié)構(gòu)基因編碼的。3. 質(zhì)粒的分裂不穩(wěn)定:通常將質(zhì)粒不穩(wěn)定性分為兩類:一類是結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定性,也就是質(zhì)粒由于堿基突變、缺失、插入等引起的遺傳信息變化;另一類是分離

2、不穩(wěn)定性,指在細(xì)胞分裂過程中質(zhì)粒不能分配到子代細(xì)胞中,從而使部分子代細(xì)胞不帶質(zhì)粒(即P-細(xì)胞)。在連續(xù)和分批培養(yǎng)過程中均能觀察到此兩類現(xiàn)象發(fā)生。一般情況下具有質(zhì)粒的細(xì)胞(即P細(xì)胞)需要合成較多的DNA、RNA和蛋白質(zhì),因此其比生長(zhǎng)速率低于P-細(xì)胞,從而P-細(xì)胞一旦形成能較快速地生長(zhǎng)繁殖并占據(jù)培養(yǎng)物中的大多數(shù)。4. 補(bǔ)料分批培養(yǎng):發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基是供菌種生長(zhǎng)、繁殖和合成產(chǎn)物之用。它既要使種子接種后能迅速生長(zhǎng)，達(dá)到一定的菌絲濃度，又要使長(zhǎng)好的菌體能迅速合成需產(chǎn)物。因此，發(fā)酵培養(yǎng)基的組成除有菌體生長(zhǎng)所必需的元素和化合物外，還要有產(chǎn)物所需的特定元素、前體和促進(jìn)劑等。但若因生長(zhǎng)和生物合成產(chǎn)物需要的總

3、的碳源、氮源、磷源等的濃度太高，或生長(zhǎng)和合成兩階段各需的最佳條件要求不同時(shí)，則可考慮培養(yǎng)基用分批補(bǔ)料來加以滿足。5. 人-鼠嵌合抗體:嵌合抗體（ chimeric atibody ）是最早制備成功的基因工程抗體。它是由鼠源性抗體的 V 區(qū)基因與人抗體的 C 區(qū)基因拼接為嵌合基因，然后插入載體，轉(zhuǎn)染骨髓瘤組織表達(dá)的抗體分子。因其減少了鼠源成分，從而降低了鼠源性抗體引起的不良反應(yīng)，并有助于提高療效。6. 懸浮培養(yǎng):非貼壁依賴性細(xì)胞的一種培養(yǎng)方式。細(xì)胞懸浮于培養(yǎng)基中生長(zhǎng)或維持。某些貼壁依賴性細(xì)胞經(jīng)過適應(yīng)和選擇也可用此方法培養(yǎng)。增加懸浮培養(yǎng)規(guī)模相對(duì)比較簡(jiǎn)單，只要增加體積就可以子。深度超過5mm，需要攪

4、動(dòng)培養(yǎng)基，超過10cm，還需要深層通入CO2和空氣，以保證足夠的氣體交換。通過振蕩或轉(zhuǎn)動(dòng)裝置使細(xì)胞始終處于分散懸浮于培養(yǎng)液內(nèi)的培養(yǎng)方法。7. 貼壁培養(yǎng):也稱為細(xì)胞貼壁，貼壁后的細(xì)胞呈單層生長(zhǎng)，所以此法又叫單層細(xì)胞培養(yǎng)。大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)必須采用這種方法。8. 固定化酶:不溶于水的酶。是用物理的或化學(xué)的方法使酶與水不溶性大分子載體結(jié)合或把酶包埋在水不溶性凝膠或半透膜的微囊體中制成的。酶固定化后一般穩(wěn)定性增加，易從反應(yīng)系統(tǒng)中分離，且易于控制，能反復(fù)多次使用。便于運(yùn)輸和貯存，有利于自動(dòng)化生產(chǎn)。9. 雙功能抗體:將識(shí)別效應(yīng)細(xì)胞的抗體和識(shí)別靶細(xì)胞的抗體聯(lián)結(jié)在一起，制成雙功能性抗體，稱為雙特異性抗體

5、。如由識(shí)別腫瘤抗原的抗體和識(shí)別細(xì)胞毒性免疫效應(yīng)細(xì)胞（ CTL 細(xì)胞、 NK 細(xì)胞、 LAK 細(xì)胞）表面分子的抗體（ CD3 抗體或 CD16 抗體）制成的雙特異性抗體，有利于免疫效應(yīng)細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤作用。10. 組織工程:應(yīng)用生命科學(xué)與工程學(xué)的原理與技術(shù)，在正確認(rèn)識(shí)哺乳動(dòng)物的正常及病理兩種狀態(tài)下的組織結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的基礎(chǔ)上，研究、開發(fā)用于修復(fù)、維護(hù)、促進(jìn)人體各種組織或器官損傷后的功能和形態(tài)的生物替代物的一門新興學(xué)科。11.生物藥物:指包括生物制品在內(nèi)的生物體的初級(jí)和次極代謝產(chǎn)物或生物體的某一組成部分，甚至整個(gè)生物體用作診斷和治療疾病的醫(yī)藥品。12.生物制品:指用細(xì)菌疫苗制成的供預(yù)防、治療和診斷特

6、定傳染病的藥品。13.生物技術(shù)藥物:采用DNA重組技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)或其它生物新技術(shù)研制的蛋白質(zhì)、治療性抗體或核酸類藥物。14、抗體酶:具催化能力的免疫球蛋白稱為催化抗體，即抗體酶。15. 單克隆抗體:只識(shí)別一種表位(抗原決定簇)的高純度抗體，一般來自單個(gè)淋巴細(xì)胞的克隆或一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的克隆。16. 細(xì)胞因子:在體內(nèi)或體外對(duì)效應(yīng)細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和分化起調(diào)節(jié)控制作用的一類物質(zhì)?；瘜W(xué)本質(zhì)主要是蛋白質(zhì)和多肽，許多生長(zhǎng)因子在靶細(xì)胞上有特異性受體，如細(xì)胞生長(zhǎng)因子和細(xì)胞生長(zhǎng)抑制因子。17.微生物的生物轉(zhuǎn)化:指微生物對(duì)有機(jī)化合物某一特定部位（基團(tuán)）的作用，使它轉(zhuǎn)變成結(jié)構(gòu)上相類似的另一種化合物。轉(zhuǎn)化的產(chǎn)物不

7、是由營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)經(jīng)微生物細(xì)胞的一系列代謝過程后產(chǎn)生的，而是利用微生物細(xì)胞的酶系對(duì)底物某一特定部位進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)形成的。18. 拷貝法 主要根據(jù)抗體生成過程中抗原- 抗體互補(bǔ)性來設(shè)計(jì)的。19.引入法 則借助基因工程和蛋白質(zhì)工程將催化基因引入到特異抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)上，使其獲得催化功能。移動(dòng)基因（movable gene）又叫轉(zhuǎn)位因子（transposable elements），可以在染色體基因組上移動(dòng)，甚至可在不同染色體間躍遷，故又稱跳躍基因（jumping gene），后來稱其為insertion sequences（現(xiàn)在一般叫IS elements）。現(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)在細(xì)菌中存在著三種類型的轉(zhuǎn)位因子，

8、相對(duì)分子質(zhì)量小于2000bp的一般叫插入序列（IS），大于2000bp的稱為轉(zhuǎn)位子（Transposon，Tn），第三種類型為噬菌體Mu和D108。20.化學(xué)修飾法 對(duì)抗體進(jìn)行化學(xué)修飾，使抗體與催化基團(tuán)相連。21.誘導(dǎo)法 是利用反應(yīng)過渡態(tài)類似物為半抗原制作單克隆抗體，篩選出具高催化活性的單抗即抗體酶。22.分生組織培養(yǎng)（meristem culture）又稱生長(zhǎng)錐培養(yǎng)，是指在人工培養(yǎng)基上培養(yǎng)莖端分生組織細(xì)胞。23.無性繁殖系（clone）又叫克隆，是指使用母體培養(yǎng)物反復(fù)進(jìn)行繼代培養(yǎng)時(shí)，通過同種外植體而獲得越來越多的無性繁殖后代而言，如根無性系、組織無性系、懸浮培養(yǎng)物無性系等。24.突變體 細(xì)胞

9、本身發(fā)生遺傳變異或應(yīng)用誘變處理發(fā)生的遺傳變異所得的新細(xì)胞，即為突變體（mutant）。25.植物抗毒素（phytoalexins）是指在植物防御系統(tǒng)內(nèi)能對(duì)抗微生物進(jìn)攻的某些次級(jí)代謝產(chǎn)物（根據(jù)其功能又稱為“后感染防御物質(zhì)”）。26.原代細(xì)胞：是直接取自動(dòng)物組織、器官，經(jīng)過粉碎、消化而獲得的細(xì)胞懸液。27.二倍體細(xì)胞系：原代細(xì)胞經(jīng)過傳代、篩選、克隆，從而從多種細(xì)胞成分的組織中挑選并純化出某種具有一定特征的細(xì)胞株。28.轉(zhuǎn)化細(xì)胞系：失去了正常細(xì)胞的特點(diǎn)，可以無限增殖。29.天然培養(yǎng)基：在細(xì)胞培養(yǎng)的早期階段使用的培養(yǎng)基，主要為來自天然的材料如血漿凝塊、血清、淋巴液、胚胎浸液以及羊水、腹水等。30.編碼

10、區(qū)是基因功能發(fā)揮的結(jié)構(gòu)基因（或稱功能基因），調(diào)控序列和啟動(dòng)子起調(diào)控啟動(dòng)作用，終止的非編碼區(qū)屬于調(diào)控基因。31.限制性核酸內(nèi)切酶是一類能夠識(shí)別雙鏈DNA分子中的某種特定核苷酸序列，并由此切割雙鏈DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的核酸內(nèi)切酶。它們主要是從原核生物中分離純化出來的。32. 反義核酶 作為一種基因下向調(diào)節(jié)作用因子，在抑制一些有害基因的表達(dá)和失控基因的過度表達(dá)上發(fā)揮著重要作用。33.DNA疫苗:是指將編碼某種蛋白質(zhì)抗原的重組真核表達(dá)載體直接注射到動(dòng)物體內(nèi)，使外源基因在活體內(nèi)表達(dá)，產(chǎn)生的抗原激活機(jī)體的免疫系統(tǒng)，從而誘導(dǎo)特異性的體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答。二、問答題1.、生物藥物的藥理學(xué)特性（1）、治療的針對(duì)性強(qiáng)

11、 細(xì)胞色素c用于治療組織缺氧所引起的一系列疾病。（2）、藥理活性高 注射用的純ATP可以直接供給機(jī)體能量。（3）、毒副作用小、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高 蛋白質(zhì)、核酸、糖類、脂類等生物藥物本身就直接取自體內(nèi)。（4）、生理副作用時(shí)有發(fā)生 生物體之間的種屬差異或同種生物體之間的個(gè)體差異都很大，所以用藥時(shí)會(huì)發(fā)生免疫反應(yīng)和過敏反應(yīng)。2.、生物藥物在生產(chǎn)、制備中的特殊性有哪些？（1）、原料中的有效物質(zhì)含量低：激素、酶在體內(nèi)含量極低。（2）、穩(wěn)定性差：生物藥物的分子結(jié)構(gòu)中具有特定的活性部位，該部位有嚴(yán)格的空間結(jié)構(gòu)，一旦結(jié)構(gòu)破壞，生物活性也就隨著消失。酶，很多理化因素使其失活。（3）、易腐敗：生物藥物營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，易染菌、腐

12、敗。生產(chǎn)過程中應(yīng)低溫、無菌。（4）、注射用藥有特殊要求：生物藥物易被腸道中的酶所分解所以多采用注射給藥，注射藥比口服藥要求更嚴(yán)格，均一性、安全性、穩(wěn)定性、有效性。理化性質(zhì)、檢驗(yàn)方法、劑型、劑量、處方、儲(chǔ)存方式。填空題A克隆真核基因常用的方法有逆轉(zhuǎn)錄法 和化學(xué)合成法 。A將抗體轉(zhuǎn)變?yōu)槊缚赏ㄟ^誘導(dǎo)法、拷貝法、引入法 和化學(xué)修飾法 等途徑。B酶固定法中的包埋法可分為網(wǎng)格型 和 微囊型 2種A噬菌體抗體庫的表達(dá)載體系統(tǒng)為 噬菌體 、 單鏈絲狀噬菌體 和噬菌粒 。 A細(xì)胞培養(yǎng)基的三類：天然培養(yǎng)基 、 合成培養(yǎng)基 和 無血清培養(yǎng)基。鼠源性單克隆抗體改造后的小分子抗體類型 人鼠嵌合抗體、改形抗體 、Fab抗

13、體B微生物轉(zhuǎn)化中常用微生物有 細(xì)菌 、放線菌 和霉菌 。、 啟始復(fù)制子、多克隆位點(diǎn) 和標(biāo)記基因。、透析 、層析 和離心 。B鼠源性單克隆抗體改造后的小分子抗體類型 人鼠嵌合抗體、改形抗體 、Fab抗體 、單鏈抗體、單域抗體 和分子識(shí)別單位 。4、蛋白質(zhì)類藥物分離提取方法有：沉淀法（鹽析、有機(jī)溶劑、等電點(diǎn)）；按分子大小分離（超濾、透析、層析、離心）；電荷（離子交換、層析、電泳、等電聚焦）；親和層析法（酶與底物、抗原與抗體、激素與受體）。5、氨基酸類藥物的分離純化方法 氨基酸的生產(chǎn)：蛋白質(zhì)水解，鹽酸水解迅速、完全，色氨酸被破壞，絲氨酸部分破壞；堿水解易產(chǎn)生消旋作用；酶水解不完全。發(fā)酵法，從發(fā)酵液中

14、提取。和學(xué)合成與酶促合成法，化學(xué)合成產(chǎn)物混旋需拆分，酶促合成效果較好。分離方法：沉淀法（溶解度差異），吸附法（吸附能力差異），離子交換法（所帶電荷不同）。6、動(dòng)物核酸類藥物主要種類和用途 DNA：能改善機(jī)體虛弱疲勞、與細(xì)胞毒藥物合用可提高細(xì)胞毒藥物對(duì)癌細(xì)胞的選擇性作用，與紅霉素合用，可降低毒性、提高療效；RNA：口服可用于精神遲緩、記憶衰退、動(dòng)脈硬化性癡呆、靜注用于刺激造血和促進(jìn)白細(xì)胞生成、治療慢性肝炎、肝硬化和初期癌癥；輔酶A用于動(dòng)脈硬化、白細(xì)胞、血小板減少，肝、腎病等；ATP：用于心力衰竭、心肌炎、心肌梗死、腦動(dòng)脈和冠狀動(dòng)脈硬化、急性脊髓灰質(zhì)炎、肌肉萎縮、慢性肝炎等。7、試述微生物的生物轉(zhuǎn)

15、化及其特點(diǎn) 微生物的生物轉(zhuǎn)化是指微生物對(duì)有機(jī)化合物某一特定部位（基團(tuán)）的作用，使它轉(zhuǎn)變成結(jié)構(gòu)上相類似的另一種化合物。轉(zhuǎn)化的產(chǎn)物不是由營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)經(jīng)微生物細(xì)胞的一系列代謝過程后產(chǎn)生的，而是利用微生物細(xì)胞的酶系對(duì)底物某一特定部位進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)形成的。 生物轉(zhuǎn)化的特點(diǎn)：專一性，底物及產(chǎn)物空間結(jié)構(gòu)專一；產(chǎn)量高，一個(gè)酶促反應(yīng)可代替幾個(gè)化學(xué)反應(yīng)，收率高；反應(yīng)條件溫和，常溫常壓，可改善工人勞動(dòng)條件，避免減少使用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或有毒物質(zhì)；可進(jìn)行化學(xué)法難以進(jìn)行的反應(yīng)。8、基因工程技術(shù)生產(chǎn)藥物的優(yōu)點(diǎn)是什么？1、大量生產(chǎn)過去難以獲得的生理活性蛋白和多肽，為臨床使用提供有效的保障；2、可以提供足夠數(shù)量的生理活性物質(zhì)，以便對(duì)其生

16、理、生化和結(jié)構(gòu)進(jìn)行深入的研究，從而擴(kuò)大這些物質(zhì)的應(yīng)用范圍；3、可以發(fā)現(xiàn)、挖掘更多的內(nèi)源性生理活性物質(zhì)；4、內(nèi)源生理活性物質(zhì)在作為藥物使用時(shí)存在的不足之處，可通過基因工程和蛋白質(zhì)工程進(jìn)行改造和去除；5、可獲得新型化合物，擴(kuò)大藥物篩選來源。9、基因工程藥物生產(chǎn)的基本過程是什么？基因工程技術(shù)就是將重組對(duì)象的目的基因插入載體，拼接后轉(zhuǎn)入新的宿主細(xì)胞，構(gòu)建成工程菌，實(shí)現(xiàn)遺傳物質(zhì)的重新組合，并使目的基因在工程菌內(nèi)進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)的技術(shù)?；蚬こ趟幬镏圃斓闹饕绦蚴牵耗康幕虻目寺。粯?gòu)建DNA重組體；將DNA重組體轉(zhuǎn)入宿主菌構(gòu)建工程菌；工程菌的發(fā)酵；外源基因表達(dá)產(chǎn)物的分離純化；產(chǎn)品的檢驗(yàn)等。 通常將基因工程藥

17、物的生產(chǎn)分為上游和下游技術(shù)。上游階段是研究開發(fā)必不可少的基礎(chǔ)，它主要是分離目的基因，構(gòu)建工程菌，主要在實(shí)驗(yàn)室完成。下游階段是從工程菌的大規(guī)模培養(yǎng)到產(chǎn)品的分離純化、質(zhì)量控制，該階段是將實(shí)驗(yàn)室成果產(chǎn)業(yè)化、商品化。10、克隆真核基因常用的方法有哪幾種？克隆真核基因常用的方法有逆轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。一、逆轉(zhuǎn)錄法逆轉(zhuǎn)錄法就是先分離純化目的基因的mRNA，再反轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)DNA，然后進(jìn)行互補(bǔ)DNA的克隆表達(dá)。從產(chǎn)生該蛋白質(zhì)的真核細(xì)胞中提取mRNA，以其為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，反轉(zhuǎn)錄合成該蛋白質(zhì)mRNA的互補(bǔ)DNA，再以互補(bǔ)DNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶或DNA聚合酶作用下，最終合成編碼該蛋白質(zhì)的雙鏈DNA序列

18、，該序列不含內(nèi)含子。1、mRNA的純化 細(xì)胞內(nèi)含有三種RNA，mRNA占RNA總量的2%-5%，相對(duì)分子量大小不一致，分離也有很大的困難，但是mRNA的3末端常含有一多聚腺苷酸組成的末端，長(zhǎng)達(dá)20-250個(gè)腺苷酸，足以吸附于寡聚胸苷酸-纖維素上，從而可以用親和層析法將mRNA從細(xì)胞總RNA上分離出來，可得到純度較高的mRNA。2、互補(bǔ)DNA第一鏈的合成 mRNA的3末端常含有一多聚腺苷酸序列，可用寡聚脫氧胸苷酸為引物，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，開始互補(bǔ)DNA的合成。在合成反應(yīng)體系中加入一種放射性標(biāo)記的dNTP，在反應(yīng)中以及反應(yīng)后可通過測(cè)定放射性標(biāo)記的dNTP摻入量，計(jì)算出互補(bǔ)DNA的合成效率，在凝膠

19、電泳后，進(jìn)行放射自顯影分析產(chǎn)物的分子大小，探索最佳反應(yīng)條件。3、互補(bǔ)DNA第二條鏈的合成 先用堿解或核酸酶酶解的方法除去互補(bǔ)DNA-mRNA雜交鏈中的mRNA鏈，然后以互補(bǔ)DNA第一鏈為模板合成第二鏈，并用核酸酶S1專一性切除單鏈DNA。4、互補(bǔ)DNA克隆 載體有兩種質(zhì)粒和噬菌體，根據(jù)重組后插入的互補(bǔ)DNA是否能夠表達(dá)、能否經(jīng)轉(zhuǎn)錄和翻譯合成蛋白質(zhì)，又將載體分為表達(dá)型載體和非表達(dá)型載體?；パa(bǔ)DNA插入片段小于10千堿基對(duì)，可選用質(zhì)粒載體，如大于10千堿基對(duì)則選用噬菌體作為載體。二、化學(xué)合成法 較小的蛋白質(zhì)或多肽的編碼基因可以采用人工化學(xué)合成法合成，其先決條件是已知目的基因的核苷酸序列，或已知蛋白

20、質(zhì)的氨基酸序列，按相應(yīng)的密碼子推導(dǎo)出DNA的堿基序列。用化學(xué)方法合成目的基因不同部位的兩條鏈的寡核苷酸短片段，再退火成為兩端形成粘末端的DNA雙鏈片段，然后將這些雙鏈片段按正確的次序進(jìn)行退火使連接成較長(zhǎng)的DNA片段，再用連接酶連接成完整的基因。 人工化學(xué)合成的限制：1、不能合成太長(zhǎng)的基因，50-60個(gè)堿基對(duì)；2、人工合成堿基對(duì)時(shí)，遺傳密碼的簡(jiǎn)并會(huì)為選擇密碼子帶來很大的困難；3、費(fèi)用較高。11、固定化酶及固定化酶的特點(diǎn)：酶類可粗分為天然酶和修飾酶，固定化酶屬于修飾酶，修飾酶類還包括經(jīng)過化學(xué)修飾的酶和用分子生物學(xué)方法在分子水平上進(jìn)行改良的酶等。固定化酶最大特點(diǎn)是既具有生物催化劑的功能，又具有固相催

21、化劑的特性。固相酶還具有以下優(yōu)點(diǎn)：可多次使用，而且在多數(shù)情況下，酶的穩(wěn)定性提高。如固定化的葡萄糖異構(gòu)酶可以在6065條件下連續(xù)使用超過1000h；反應(yīng)后，酶與底物和產(chǎn)物易于分開，產(chǎn)物中無殘留酶，易于純化，產(chǎn)品質(zhì)量高；反應(yīng)條件易于控制，可實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化反應(yīng)的連續(xù)化和自動(dòng)控制；酶的利用效率高，單位酶催化的底物量增加，用酶量減少；比水溶性酶更適合于多酶反應(yīng)。12、酶反應(yīng)器操作條件及應(yīng)用的注意事項(xiàng)酶操作條件底物濃度 、酶濃度、溫度、PH、反應(yīng)液的混合與流動(dòng).注意事項(xiàng)酶 保持酶反應(yīng)器操作的穩(wěn)定性 保持反應(yīng)器中流體的流動(dòng)方式和狀態(tài) 防止酶的變性失活 防止微生物的污染13、兩相法培養(yǎng)系統(tǒng)必須滿足如下條件：添加的固

22、相（如樹脂）或液相對(duì)細(xì)胞無毒害作用，不影響細(xì)胞生長(zhǎng)和產(chǎn)物的合成； 產(chǎn)物易被固相吸附或被有機(jī)相溶解；兩相易分離；如為固相，不可吸附培養(yǎng)基中的添加成分，如植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、有機(jī)成分等。14、體外培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件：（1）絕對(duì)無菌操作；（2）足夠的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)，排除有害物質(zhì)包括極其微量的離子摻入；（3）適量氧氣供應(yīng)；（4）隨時(shí)清除細(xì)胞代謝中產(chǎn)生的有害產(chǎn)物；（5）有良好的適于生存外界環(huán)境，包括pH、滲透壓和離子濃度等；（6）及時(shí)分種，保持合適的細(xì)胞密度。15、無血清培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)如下：提高了細(xì)胞培養(yǎng)的可重復(fù)性，避免，避免了由于血清批之間差異的影響；減少了由血清帶來的病毒、真菌和支原體等微生物污染的危險(xiǎn)；供

23、應(yīng)充足、穩(wěn)定；細(xì)胞產(chǎn)品容易純化；避免了血清中某些因素對(duì)有些細(xì)胞的毒性；減少了血清中蛋白對(duì)某些生物測(cè)定的干擾，便于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析。核酸藥物可分為1反義核酸、2核酶、3脫氧核酶、4抗基因寡核苷酸5裸DNA疫苗6基因藥物。10.抗體藥物的特點(diǎn)1 2多樣性3 定向性11.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件2PH值3通氧量4防止污染 質(zhì)粒以三種形式存在： 和 線狀雙螺旋。2動(dòng)物細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)基質(zhì)的依賴性，可分為貼壁依賴性細(xì)胞 非貼壁依賴性細(xì)胞 兼性貼壁細(xì)胞生物藥物的結(jié)構(gòu)分類不包括( )A氨基酸及其衍生物類藥物 B細(xì)胞生長(zhǎng)因子 C 化學(xué)合成制品 D酶和輔酶類藥物 生物藥物的結(jié)構(gòu)分類不包括( ) 。A糖類藥物 B多肽和蛋白質(zhì)類

24、藥物 C脂類藥物 D 化學(xué)合成制品不屬于抗體酶的催化反應(yīng)類型的是（ ）。A 轉(zhuǎn)?；磻?yīng) B 聚合反應(yīng) C Claisen重排反應(yīng) D 水解反應(yīng)不屬于抗體酶的催化反應(yīng)類型的是（ ）。A 聚合反應(yīng) B 氧化還原反應(yīng) C 順反異構(gòu)化反應(yīng) D 光誘導(dǎo)反應(yīng)不屬于基因來源抗體文庫的是（ ）。A天然抗體文庫 B免疫后抗體文庫 C半合成抗體文庫 D修飾抗體庫基因工程的單元操作順序是（ ）。酶切，連接，轉(zhuǎn)化，篩選，驗(yàn)證 酶切，轉(zhuǎn)化，連接，篩選，驗(yàn)證連接，轉(zhuǎn)化，篩選，驗(yàn)證，酶切 驗(yàn)證，酶切，連接，篩選，轉(zhuǎn)化cDNA第一鏈合成所需的引物是（ ）。PolyA PolyC PolyG PolyT鳥槍法克隆目的基因的戰(zhàn)略

25、適用于（ ）。原核細(xì)菌 酵母菌 絲狀真菌 植物cDNA法獲得目的基因的優(yōu)點(diǎn)是（ ）。成功率高 不含內(nèi)含子 能糾正密碼子的偏愛性 表達(dá)產(chǎn)物可以分泌 分子雜交的化學(xué)原理是形成（ ）。共價(jià)鍵 離子鍵 氫鍵 配位鍵若某質(zhì)粒帶有l(wèi)acZ標(biāo)記基因，那么與之相匹配的篩選方法是在篩選培養(yǎng)基中加入( )。 半乳糖 葡萄糖 蔗糖 5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷（X-gal）。 為了減輕工程菌的代謝負(fù)荷，提高外源基因的表達(dá)水平，可以采取的措施有（ ）。A將宿主細(xì)胞生長(zhǎng)和外源基因的表達(dá)分成兩個(gè)階段。B在宿主細(xì)胞快速生長(zhǎng)的同時(shí)誘導(dǎo)基因表達(dá)。C降低培養(yǎng)基中的PH值。D當(dāng)宿主細(xì)胞快速生長(zhǎng)時(shí)誘導(dǎo)重組質(zhì)粒的復(fù)制不

26、能進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化的是( )。A 細(xì)菌 B 病毒 C霉菌 D放線菌菌體生長(zhǎng)所需能量（ ）菌體有氧代謝所能提供的能量時(shí)，菌體往往會(huì)產(chǎn)生代謝副產(chǎn)物乙酸。A大于 B等于 C小于 D 未知促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素（EPO）基因能在大腸桿菌中表達(dá)，但卻不能用大腸桿菌的基因工程菌生產(chǎn)人的促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素，這是因?yàn)椋?）人的促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素對(duì)大腸桿菌有毒性作用人的促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素基因在大腸桿菌中極不穩(wěn)定大腸桿菌內(nèi)毒素與人的促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素特異性結(jié)合并使其滅活大腸桿菌不能使人的促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素糖基化三、判斷對(duì)錯(cuò)PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法的縮寫（ ）電刺激不能使細(xì)胞融合（ ）質(zhì)粒不具有自主復(fù)制能力。（ ）單克隆抗體就是單鏈抗體（ ）外

27、源基因的高效表達(dá)會(huì)影響宿主細(xì)胞正常的生長(zhǎng)代謝。（ ）熒光素可以作為免疫診斷試劑的標(biāo)記物（ ）抗體中結(jié)合抗原的部位分布在恒定區(qū)（ ）透析時(shí)，若樣品液中鹽濃度較高，透析袋所留空隙要大一些，防止透析袋脹破。（ ） 酶的固定化過程中需要使用載體.（ ）因?yàn)槎舅囟拘暂^大，所以免疫毒素不能用來治療疾病（ ）生物技術(shù)制藥試卷C答案1. 生物技術(shù)制藥:生物技術(shù)制藥是指運(yùn)用微生物學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)等的研究成果，從生物體、生物組織、細(xì)胞、體液等，綜合利用微生物學(xué)、化學(xué)、生物化學(xué)、生物技術(shù)、藥學(xué)等科學(xué)的原理和方法進(jìn)行藥物制造的技術(shù)。2. 基因表達(dá):基因表達(dá)(gene expression)是指細(xì)胞在生命過程

28、中,把儲(chǔ)存在DNA順序中遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯,轉(zhuǎn)變成具有生物活性的蛋白質(zhì)分子.生物體內(nèi)的各種功能蛋白質(zhì)和酶都是同相應(yīng)的結(jié)構(gòu)基因編碼的。3. 質(zhì)粒的分裂不穩(wěn)定:通常將質(zhì)粒不穩(wěn)定性分為兩類:一類是結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定性,也就是質(zhì)粒由于堿基突變、缺失、插入等引起的遺傳信息變化;另一類是分離不穩(wěn)定性,指在細(xì)胞分裂過程中質(zhì)粒不能分配到子代細(xì)胞中,從而使部分子代細(xì)胞不帶質(zhì)粒(即P-細(xì)胞)。在連續(xù)和分批培養(yǎng)過程中均能觀察到此兩類現(xiàn)象發(fā)生。一般情況下具有質(zhì)粒的細(xì)胞(即P細(xì)胞)需要合成較多的DNA、RNA和蛋白質(zhì),因此其比生長(zhǎng)速率低于P-細(xì)胞,從而P-細(xì)胞一旦形成能較快速地生長(zhǎng)繁殖并占據(jù)培養(yǎng)物中的大多數(shù)。4. 補(bǔ)料分批培養(yǎng):發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基是供菌種生長(zhǎng)、繁殖和合成產(chǎn)物之用。它既要使種子接種后能迅速生長(zhǎng)，達(dá)到一定的菌絲濃度，又要使長(zhǎng)好的菌體能迅速合成需產(chǎn)物。因此，發(fā)酵培養(yǎng)基的組成除有菌體生長(zhǎng)所必需的元素和化合物外，還要有產(chǎn)物所需的特定元素、前體和促進(jìn)劑等。但若因生長(zhǎng)和生物合成產(chǎn)物需要的總的碳源、氮源、磷源等的濃度太高，或生長(zhǎng)和合成兩階段各需的最佳條件要求不同時(shí)，則可考慮培養(yǎng)基用分批補(bǔ)料來加以滿足。5. 人-鼠嵌合抗體:嵌合抗體（ chimeric atibody ）是最早制備成功