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1、Diversity of Structure and Function of ProteinX-射線衍射法(射線衍射法(X-ray diffraction method)核磁共振(核磁共振(NMR)電子顯微技術(shù)電子顯微技術(shù) 質(zhì)譜法質(zhì)譜法熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù) 光譜法(紅外光譜、紫外差光譜、熒光光譜)光譜法(紅外光譜、紫外差光譜、熒光光譜)旋光色散法(旋光色散法(optical rotatory dispersion, ORD)園二色性(園二色性(circular dichroism, CD)X-X-射線衍射法射線衍射法 簡單原理簡單原理 基本原理基本原理質(zhì)譜技術(shù)質(zhì)譜技術(shù) MS
2、 是將帶電原子、分子或分子碎片按其質(zhì)荷比的大小順序排是將帶電原子、分子或分子碎片按其質(zhì)荷比的大小順序排 列而形成的圖譜列而形成的圖譜 經(jīng)過空間編碼技術(shù),把在磁共振過程中所發(fā)出的電磁波以及與之經(jīng)過空間編碼技術(shù),把在磁共振過程中所發(fā)出的電磁波以及與之有關(guān)的各種信息參數(shù)等,通過計算機(jī)處理,最后形成圖像。醫(yī)生通過有關(guān)的各種信息參數(shù)等,通過計算機(jī)處理,最后形成圖像。醫(yī)生通過分析圖像中的具體情況做出診斷分析圖像中的具體情況做出診斷 對樣品的要求對樣品的要求質(zhì)譜質(zhì)譜 樣品必須先轉(zhuǎn)化為氣態(tài)樣品必須先轉(zhuǎn)化為氣態(tài)核磁共振核磁共振 樣品通常都配制溶液,在配制溶液應(yīng)注意幾個問題樣品通常都配制溶液,在配制溶液應(yīng)注意幾個
3、問題: 溶劑不應(yīng)含被檢測的原子溶劑不應(yīng)含被檢測的原子 如:常用的氫譜,其溶劑不應(yīng)含質(zhì)子,常用的有如:常用的氫譜,其溶劑不應(yīng)含質(zhì)子,常用的有 CCl4、CS2 樣品溶液的濃度一般為樣品溶液的濃度一般為2-10 化學(xué)位移基準(zhǔn)物質(zhì)化學(xué)位移基準(zhǔn)物質(zhì)(TMS)的濃度一般為的濃度一般為0.2左右左右譜圖提供的主要信息譜圖提供的主要信息 共振吸收峰的組數(shù)共振吸收峰的組數(shù) 一般表明有幾種帶氫一般表明有幾種帶氫基團(tuán)基團(tuán)各組吸收峰的位置各組吸收峰的位置 提供各類型氫核提供各類型氫核(各基團(tuán)各基團(tuán))所處化學(xué)環(huán)境的信息,用所處化學(xué)環(huán)境的信息,用化學(xué)化學(xué) 位移位移表示表示各組峰的分裂情況及分裂峰的數(shù)目各組峰的分裂情況及
4、分裂峰的數(shù)目 提供各類型提供各類型(各基團(tuán)各基團(tuán))的的相互作用情況相互作用情況,用磁核的自旋偶,用磁核的自旋偶 合和裂分表示合和裂分表示 各組峰的相對強(qiáng)度各組峰的相對強(qiáng)度 提供各類型氫核提供各類型氫核(各基團(tuán)各基團(tuán))的的數(shù)量比數(shù)量比。在。在NMR譜圖中用峰譜圖中用峰 面積的積分階梯線高度表示面積的積分階梯線高度表示橫坐標(biāo)為化學(xué)位移,說明在不同分子或同一分子的不同基團(tuán)中,氫核所處的化學(xué)橫坐標(biāo)為化學(xué)位移,說明在不同分子或同一分子的不同基團(tuán)中,氫核所處的化學(xué)環(huán)境不同,產(chǎn)生核磁共振所吸收的頻率也不一樣,這種由于核周圍分子環(huán)境不同環(huán)境不同,產(chǎn)生核磁共振所吸收的頻率也不一樣,這種由于核周圍分子環(huán)境不同引起
5、共振吸收頻率位移的現(xiàn)象叫化學(xué)位移引起共振吸收頻率位移的現(xiàn)象叫化學(xué)位移核磁共振波譜法的特點核磁共振波譜法的特點核磁共振波譜法是結(jié)構(gòu)分析最強(qiáng)有力的手段之一,因為它把核磁共振波譜法是結(jié)構(gòu)分析最強(qiáng)有力的手段之一,因為它把 有機(jī)化合物最常見的組成元素氫有機(jī)化合物最常見的組成元素氫(氫譜氫譜)或碳或碳(碳譜碳譜)等作為等作為“生生 色團(tuán)色團(tuán)”來使用的,因此它可能確定幾乎所有常見官能團(tuán)的環(huán)來使用的,因此它可能確定幾乎所有常見官能團(tuán)的環(huán) 境,有的是其它光譜或分析法所不能判斷的環(huán)境,境,有的是其它光譜或分析法所不能判斷的環(huán)境,NMR法譜法譜 圖的直觀性強(qiáng),特別是碳譜能直接反映出分子的骨架,譜圖圖的直觀性強(qiáng),特別是碳譜能直接反映出分子的骨架,譜圖 解釋較為容易。解釋較為容易。 有多種原子核的共振波譜有多種原子核的共振波譜(除了常用的氫譜外,還有碳譜,除了常用的氫譜外,還有碳譜, 氟譜,磷譜等氟譜,磷譜等),因此,擴(kuò)大了應(yīng)用范圍,各種譜之間還可以,因此,擴(kuò)大了應(yīng)用范圍,各種譜之間還可以 互相印證。互相印證。 可以進(jìn)行定量測定,研究反應(yīng)機(jī)理,還可以求得某些化學(xué)過可以進(jìn)行定量測定,研究反應(yīng)機(jī)理,還可以求得某些化學(xué)過 程的動力和熱力學(xué)的參數(shù)。程的動力和熱力學(xué)的參數(shù)。 該法的缺
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