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1、Blast(Basic Local Alignment Search Tool)是一套在蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)或DNA數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行相似性比較的分析工具。BLAST程序能迅速與公開(kāi)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行相似性序列比較。BLAST結(jié)果中的得分是對(duì)一種對(duì)相似性的統(tǒng)計(jì)說(shuō)明。BLAST 采用一種局部的算法獲得兩個(gè)序列中具有相似性的序列NCBI的在線(xiàn)blast:st.cgi本文詳細(xì)出處參考:/475/舉例一:核酸序列的比對(duì)1, 進(jìn)入在線(xiàn)blast界面,可以選擇blast特定的物種(如人,小鼠,水稻等),也可以選擇blast所有的核酸或蛋白序列。不同的blast程序上面已經(jīng)有了介紹。這里以常
2、用的核酸庫(kù)作為例子。(補(bǔ)充介紹下:1、BLASTN【 nucleotide blast】是核酸序列到核酸庫(kù)中的一種查詢(xún)。庫(kù)中存在的每條已知序列都將同所查序列作一對(duì)一地核酸序列比對(duì)。2、BLASTP【protein blast】是蛋白序列到蛋白庫(kù)中的一種查詢(xún)。庫(kù)中存在的每條已知序列將逐一地同每條所查序列作一對(duì)一的序列比對(duì)。3、BLASTX是核酸序列到蛋白庫(kù)中的一種查詢(xún)。先將核酸序列翻譯成蛋白序列(一條核酸序列會(huì)被翻譯成可能的六條蛋白),再對(duì)每一條作一對(duì)一的蛋白序列比對(duì)。4、TBLASTN是蛋白序列到核酸庫(kù)中的一種查詢(xún)。與BLASTX相反,它是將庫(kù)中的核酸序列翻譯成蛋白序列,再同所查序列作蛋白與蛋
3、白的比對(duì)。5、TBLASTX是核酸序列到核酸庫(kù)中的一種查詢(xún)。此種查詢(xún)將庫(kù)中的核酸序列和所查的核酸序列都翻譯成蛋白(每條核酸序列會(huì)產(chǎn)生6條可能的蛋白序列),這樣每次比對(duì)會(huì)產(chǎn)生36種比對(duì)陣列。)2,粘貼fasta格式的序列。選擇一個(gè)要比對(duì)的數(shù)據(jù)庫(kù)。關(guān)于數(shù)據(jù)庫(kù)的說(shuō)明請(qǐng)看NCBI在線(xiàn)blast數(shù)據(jù)庫(kù)的簡(jiǎn)要說(shuō)明。一般的話(huà)參數(shù)默認(rèn)。3,blast參數(shù)的設(shè)置。注意顯示的最大的結(jié)果數(shù)跟E值,E值是比較重要的。篩選的標(biāo)準(zhǔn)。最后會(huì)說(shuō)明一下。4,注意一下你輸入的序列長(zhǎng)度。注意一下比對(duì)的數(shù)據(jù)庫(kù)的說(shuō)明。5,blast結(jié)果的圖形顯示。沒(méi)啥好說(shuō)的。6,blast結(jié)果的描述區(qū)域。注意分值與E值。分值越大越靠前了,E值越小也是
4、這樣。7,blast結(jié)果的詳細(xì)比對(duì)結(jié)果。注意比對(duì)到的序列長(zhǎng)度。評(píng)價(jià)一個(gè)blast結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)主要有三項(xiàng),E值(Expect),一致性(Identities),缺失或插入(Gaps)。加上長(zhǎng)度的話(huà),就有四個(gè)標(biāo)準(zhǔn)了。如圖中顯示,比對(duì)到的序列長(zhǎng)度為1405,看Identities這一值,才匹配到1344bp,而輸入的序列長(zhǎng)度也是為1344bp(看上面的圖),就說(shuō)明比對(duì)到的序列要長(zhǎng)一點(diǎn)。由Qurey(起始1)和Sbjct(起始35)的起始位置可知,5'端是是多了一段的。有時(shí)也要注意3'端的。附:E值(Expect):表示隨機(jī)匹配的可能性,E值越大,隨機(jī)匹配的可能性也越大。E值接近零或?yàn)榱銜r(shí),具本上就是完全匹配了。一致性(Identities):或相似性。匹配上的堿基數(shù)占總序列長(zhǎng)的百分?jǐn)?shù)。缺失或插入(Gaps):插入
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