茶葉中美術(shù)綠（鉛鉻綠）的測定

1、茶葉中美術(shù)綠（鉛鉻綠）的測定BJS 2019101 范圍本標(biāo)準(zhǔn)第一篇規(guī)定了茶葉中鉻酸鉛含量的測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)第一篇適用于茶葉中鉻酸鉛的測定。本標(biāo)準(zhǔn)第二篇規(guī)定了茶葉中美術(shù)綠的定性方法。本標(biāo)準(zhǔn)第二篇適用于茶葉中美術(shù)綠的定性判定。2術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。2.1 美術(shù)綠美術(shù)綠又名鉛鉻綠，用鉻酸鉛顏料沉淀到鐵藍(lán)顏料分散體上或使用鉻酸鉛顏料與鐵藍(lán)顏料混合均能制備出的一種顏料。美術(shù)綠的主要成分為鉻酸鉛和鐵藍(lán)，且鉻酸鉛的比例不低于50%。第1篇 鉻酸鉛的測定鉛含量的測定采用現(xiàn)行有效的國家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.12方法，CrO42-的測定選用下述方法。第一法 高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用

2、法（HPLC-ICP/MS）3 原理茶葉樣品經(jīng)灰化后，其中的CrO42-經(jīng)堿性提取液提取后，以液相色譜進(jìn)行分離，分離后的目標(biāo)化合物經(jīng)過霧化由載氣送入ICP炬焰中，經(jīng)蒸發(fā)、解離、原子化、電離等過程，大部分轉(zhuǎn)化為帶正電荷的正離子，經(jīng)離子采集系統(tǒng)進(jìn)入質(zhì)譜儀，質(zhì)譜儀根據(jù)質(zhì)荷比進(jìn)行分離測定。以保留時(shí)間和質(zhì)荷比定性，外標(biāo)法定量。4 試劑和材料除非另有說明，本方法所用試劑均為優(yōu)級純，水為 GB/T 6682規(guī)定的一級水。4.1 試劑4.1.1硝酸（HNO3）。4.1.2氨水（NH3·H2O）。4.1.3氫氧化鈉（NaOH）：分析純。4.1.4無水碳酸鈉（Na2CO3）。4.2 試劑配制4.2.1堿

3、性提取液（0.1 mol/L NaOH和0.056 mol/L Na2CO3）：稱取4.0 ±0.05 g NaOH（4.1.3）和6.0±0.05g Na2CO3（4.1.4）溶解并定容至1 L，將溶液在20-25 下密封保存于聚乙烯瓶中，使用時(shí)pH必須達(dá)到11.5以上，有效期1個(gè)月。4.2.2堿性提取液（0.2 mol/L NaOH和0.112 mol/L Na2CO3）：稱取8.0 ±0.05 g NaOH（4.1.3）和12.0±0.05g Na2CO3（4.1.4）溶解并定容至1 L，將溶液在20-25 下密封保存于聚乙烯瓶中，使用時(shí)pH必須達(dá)

4、到11.5以上，有效期1個(gè)月。4.2.3硝酸溶液（5 mol/L）：取357 mL硝酸（4.1.1）用水定容至1000 mL，混勻待用。溶液在20-25 下避光保存，如溶液呈黃色需重新配制。4.2.4硝酸溶液（1+9）：取10 mL硝酸（4.1.1）與90 mL水混合，搖勻。4.2.5氨水溶液（1+9）:取10 mL氨水（4.1.2）與90 mL水混合，搖勻。4.2.6 硝酸銨溶液（0.05 mmol/L）：一定量水中加入3.4 mL硝酸（4.1.1）和3.7 mL氨水（4.1.2），用水定容至1 L，搖勻；用硝酸溶液(4.2.4)或氨水溶液(4.2.5)調(diào)節(jié)pH在7.0-7.2范圍內(nèi)。4.3

5、 標(biāo)準(zhǔn)品鉻酸鉛：Lead chromate，CAS號:7758-97-6，分子式PbCrO4，分子量323.18，純度99%。4.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制4.4.1 CrO42-標(biāo)準(zhǔn)儲備液：準(zhǔn)確稱取0.0279 g鉻酸鉛標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，于100 mL燒杯中，加入50 mL堿性提取液（4.2.2）置于恒溫磁力攪拌水浴鍋中，在90-95 溫度下不間斷攪拌30 min，取出后冷卻至室溫后轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，用水沖洗燒杯并轉(zhuǎn)移至容量瓶中，用水定容至刻度。溶液中CrO42-的濃度為100 mg/L?；蚴褂昧鶅r(jià)鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行配制。4.4.2 CrO42-標(biāo)準(zhǔn)工作液：取1.0 mLCrO42-標(biāo)準(zhǔn)儲備液（4.4

6、.1）用硝酸銨溶液（4.2.6）定容至10 mL，制得標(biāo)準(zhǔn)中間液，濃度為10 mg/L。分別吸取0.05，0.1，0.2，0.5，1.0，2.0，5.0 mL標(biāo)準(zhǔn)中間液于100 mL容量瓶中，用硝酸銨溶液（4.2.6）定容并混勻，過水系微孔濾膜（0.45 m），待上機(jī)測定。該標(biāo)準(zhǔn)工作液CrO42-的濃度分別為5 g/L，10 g/L，20 g/L，50 g/L，100 g/L，200 g/L，500 g/L。該標(biāo)準(zhǔn)工作液現(xiàn)用現(xiàn)配。5 儀器和設(shè)備注：玻璃器皿及坩堝均需以硝酸溶液（1+4）浸泡2 h，用水反復(fù)沖洗，最后用去離子水沖洗干凈。5.1 高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用儀（HPLC-

7、ICP/MS）。5.2 分析天平：感量為0.1 mg和0.01 g。5.3 可調(diào)式電阻爐，功率為2000 W。5.4 磁力攪拌恒溫水浴鍋：能在90 -95 恒溫。5.5 pH計(jì)：精度為0.01。5.6 樣品粉碎裝置。6 試樣制備與保存茶葉樣品去雜后，放入粉碎機(jī)中粉碎，樣品全部過標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)篩（425 m），儲于潔凈容器中，至于陰涼干燥處密封保存，備用。7 分析步驟7.1 樣品提取準(zhǔn)確稱取粉碎均勻的茶葉樣品1 g(精確到0.01 g)于100 mL坩堝中，將坩堝置于電爐上以最大功率灼燒至無白煙。冷卻至室溫后加入50 mL堿性提取液(4.2.1)，置于磁力攪拌恒溫水浴鍋中，在90 -95 溫度下不間斷攪

8、拌30 min，取出后冷卻至室溫，定容至100 mL容量瓶中，從中取1.0 mL用硝酸銨溶液（4.2.6）定容至50 mL（或根據(jù)實(shí)際濃度適當(dāng)稀釋），過水系微孔濾膜（0.45 m），待上機(jī)測定。按同一操作方法作空白試驗(yàn)。7.2 儀器參考條件7.2.1 液相色譜參考條件色譜柱：G3268-80001 色譜柱，(柱長30 mm，內(nèi)徑4.6 mm)，或等效柱。流動相：0.05 mmol/L的硝酸銨溶液（4.2.6）。洗脫方式:等度洗脫。流速：0.6 mL/min。進(jìn)樣量：50 L。7.2.2 電感耦合等離子體質(zhì)譜儀參考條件模式：碰撞反應(yīng)池模式；RF入射功率為1600 W；載氣為高純氬氣；載氣流速為1

9、.0 L/min；霧化器：漩流霧化器；碰撞反應(yīng)氣（He），流速為3.5 mL/min；檢測質(zhì)量數(shù)m/z=52(Cr)。7.3 定量測定7.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作吸取標(biāo)準(zhǔn)系列溶液（4.4.2）50 L注入液相色譜-電感耦合等離子質(zhì)譜儀，按儀器參考條件（7.2）進(jìn)行測定，得到相應(yīng)的色譜圖，以保留時(shí)間定性。以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中目標(biāo)化合物的濃度為橫坐標(biāo)，以色譜峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。7.3.2 試樣溶液的測定在相同條件下，吸取空白溶液、試樣溶液（7.1）50 L注入液相色譜-電感耦合等離子質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行測定，得到相應(yīng)色譜圖（參見附錄A），以保留時(shí)間定性。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測液中組分的含量，平行測定次

10、數(shù)不少于兩次。8 分析結(jié)果表述8.1試樣中鉻酸根（CrO42-）的含量按式（1）計(jì)算：X=C1-C0×V×1000m×1000×1000×(1)式中：X 試樣中CrO42-的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）；C1 樣品溶液中CrO42-的濃度，單位為微克每升（g/L）；C0 溶劑空白中CrO42-的濃度，單位為微克每升（g/L）；V 試樣溶液定容體積，單位為毫升（mL）；試樣溶液稀釋倍數(shù);1000換算系數(shù);m 樣品質(zhì)量，單位為克（g）。8.2試樣中鉻酸鉛含量的計(jì)算：當(dāng)CrO42-含量Pb含量0.5597時(shí)，試樣測得的Pb含量乘以換算系數(shù)1.

11、560，即得鉻酸鉛（以PbCrO4計(jì)）的含量；當(dāng)CrO42-含量/Pb含量0.5597時(shí)，試樣測得的CrO42-含量乘以換算系數(shù)2.787，即得鉻酸鉛（以PbCrO4計(jì)）的含量。計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。9 檢測方法的精密度、靈敏度、準(zhǔn)確度9.1 精密度在重復(fù)條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。9.2 靈敏度當(dāng)稱樣量為1.0 g，定容體積為100 mL后稀釋50倍測定時(shí)，PbCrO4檢出限為10 mg/kg，定量限30 mg/kg。9.3 準(zhǔn)確度本方法CrO42-添加濃度在30300 mg/kg范圍內(nèi)，回收率為87.1%105.9%。第二法 離子色譜法（IC法）1

12、0 原理茶葉樣品經(jīng)灼燒后，其中的CrO42-經(jīng)堿性提取液提取，在堿性條件下（pH=9.0±0.5），采用陰離子交換色譜柱分離，離子色譜-電導(dǎo)檢測器測定，外標(biāo)法定量。11試劑和材料除非另有說明，本方法所用試劑均為優(yōu)級純，水為 GB/T 6682規(guī)定的一級水。11.1 試劑11.1.1 濃硫酸（H2SO4）。11.1.2 硝酸（HNO3）。11.1.3 碳酸氫鈉（NaHCO3）。11.1.4 氫氧化鈉（NaOH）:分析純。11.1.5無水碳酸鈉（Na2CO3）。11.2試劑配制11.2.1 堿性提取液：配制同4.2.1。11.2.2 硝酸溶液（5 mol/L）：配制同4.2.3。11.2

13、.3 淋洗液儲備液（40 mmol/L碳酸鈉和10 mmol/L碳酸氫鈉混合溶液）：分別稱取4.25 g無水碳酸鈉（11.1.5）和0.84 g碳酸氫鈉（11.1.3），用水溶解并定容至1 L，混勻待用。11.2.4 淋洗液使用液（4 mmol/L碳酸鈉和1 mmol/L碳酸氫鈉混合溶液）：將淋洗液儲備液(11.2.3)用水稀釋10倍，混勻，經(jīng)水系微孔濾膜（0.45 m）抽濾后使用。11.2.5 再生液：吸取2 mL濃硫酸（11.1.1）用水定容至1L，搖勻，經(jīng)水系微孔濾膜（0.45 m）抽濾后使用。11.3 標(biāo)準(zhǔn)品同4.3。11.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制11.4.1鉻酸根（CrO42-）標(biāo)準(zhǔn)儲備液

14、：配制同4.4.1。11.4.2 CrO42-標(biāo)準(zhǔn)工作液：取濃度為100 mg/L的CrO42-標(biāo)準(zhǔn)儲備液（4.4.1）10 mL用水定容至100 mL，制得標(biāo)準(zhǔn)中間液，濃度為10 mg/L。分別吸取0.2，0.5，1.0，5.0，10.0，20.0 mL標(biāo)準(zhǔn)中間液于100 mL容量瓶中，用水定容并混勻，過水系微孔濾膜，待上機(jī)測定。該標(biāo)準(zhǔn)工作溶液CrO42-的濃度分別為0.02 g/mL，0.05 g/mL，0.10 g/mL，0.50 g/mL，1.00 g/mL，2.00 g/mL。該標(biāo)準(zhǔn)工作液現(xiàn)用現(xiàn)配。12 儀器和設(shè)備12.1 離子色譜儀，配電導(dǎo)檢測器，碳酸鹽淋洗系統(tǒng)。如采用氫氧根系統(tǒng)，

15、條件見附錄C。12.2 分析天平：感量0.1 mg和0.01 g。12.3 可調(diào)式電阻爐，功率為2000 W。12.4 磁力攪拌恒溫水浴鍋：能在90 -95 恒溫。12.5 pH計(jì):精度為0.01。12.6 樣品粉碎裝置。13 試樣制備與保存同6。14 分析步驟14.1 樣品提取準(zhǔn)確稱取粉碎均勻的茶葉樣品1 g(精確到0.01 g)于100 mL坩堝中，將坩堝置于電爐上以最大功率灼燒至無白煙。冷卻至室溫后加入50 mL堿性提取液(4.2.1)，置于恒溫磁力攪拌水浴鍋中，在90 -95 溫度下不間斷攪拌30 min，取出后冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至100 mL燒杯中，用硝酸溶液(4.2.3)調(diào)pH至9.

16、0±0.5后轉(zhuǎn)移至500 mL容量瓶中，用水定容并混勻。過水系微孔濾膜(0.45 m)，待上機(jī)測定。按同一操作方法作空白試驗(yàn)。14.2 離子色譜條件 色譜柱：Metrosep A Supp 5-150或相當(dāng)?shù)年庪x子色譜柱。檢測器：電導(dǎo)檢測器。抑制器：MSM 化學(xué)抑制器。柱溫：30 。流速：0.7 mL/min。進(jìn)樣量：20 L。14.3 定量測定14.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作吸取標(biāo)準(zhǔn)系列溶液（11.4.2）20 L注入離子色譜儀，按儀器參考條件（14.2）進(jìn)行測定，得到相應(yīng)的色譜圖，以保留時(shí)間定性。以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中目標(biāo)化合物的濃度為橫坐標(biāo)，以色譜峰的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。14.

17、3.2 樣品測定在相同條件下，分別吸取空白溶液、試樣溶液（14.1）20 L，按儀器參考條件（14.2）進(jìn)行測定，得到相應(yīng)色譜圖（參見附錄B），以保留時(shí)間定性。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測液中組分的濃度，平行測定次數(shù)不少于兩次。15 結(jié)果計(jì)算15.1試樣中鉻酸根（CrO42-）的含量按式（2）計(jì)算：X=C1-C0×V×1000m×1000(2)式中：X 試樣中CrO42-的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）；C1 樣品溶液中CrO42-的濃度，單位為微克每毫升（g/mL）；C0 樣品空白液中CrO42-的濃度，單位為微克每毫升（g/mL）；V 試樣溶液定容體積，單位為毫

18、升（mL）；1000換算系數(shù);m 樣品質(zhì)量，單位為克（g）。15.2試樣中鉻酸鉛含量的計(jì)算：同8.2。計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。16 方法的精密度、靈敏度、準(zhǔn)確度16.1 精密度在重復(fù)條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。16.2 靈敏度當(dāng)稱樣量為1.0 g，定容體積為500 mL時(shí)，PbCrO4檢出限為10 mg/kg，定量限30 mg/kg。16.3 準(zhǔn)確度本方法CrO42-添加濃度在30300 mg/kg范圍內(nèi)，回收率為85.17107.59%。第二篇 鐵藍(lán)定性驗(yàn)證17 原理鐵藍(lán)的主要成分亞鐵氰根在酸性條件下蒸餾分解出氰化物，與氯胺T反應(yīng)，生成氯化氰，與顯色劑

19、生成藍(lán)色染料，分光光度法測定。18 試劑和材料除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為 GB/T 6682規(guī)定的三級水。18.1 試劑18.1.1 氫氧化鈉(NaOH)。18.1.2 無水磷酸氫二鈉（Na2HPO4）。18.1.3 無水磷酸二氫鉀（KH2PO4）。18.1.4 氯胺T（C7H7ClNNaO2S·3H2O）。18.1.5 酒石酸(C4H6O6)。18.1.6 酚酞（C20H14O4）。18.1.7 1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（C10H10N2O）。18.1.8 冰乙酸（CH3COOH）。18.1.9 無水乙醇（CH3CH2OH）。18.1.10 吡啶（C5H5

20、N）。18.1.11 甲基橙（C14H14N3SO3Na）。18.2試劑配制18.2.1 NaOH溶液（0.1 mol/L）：準(zhǔn)確稱取1.0 g NaOH(18.1.1) ，用水定容至250 mL，搖勻待用。18.2.2 NaOH溶液（0.5 mol/L）：準(zhǔn)確稱取5.0 g NaOH(18.1.1) ，用水定容至250 mL，搖勻待用。18.2.3磷酸鹽緩沖溶液（pH=7.0）：準(zhǔn)確稱取42.6 g無水磷酸氫二鈉(18.1.2)和13.6 g無水磷酸二氫鉀(18.1.3)，加水溶解，定容至1L，搖勻待用。18.2.4氯胺T溶液（10 g/ L）：準(zhǔn)確稱取 1.0 g氯胺T(18.1.4)，用

21、水定容至100 mL，搖勻待用，現(xiàn)用現(xiàn)配。18.2.5酚酞指示液：準(zhǔn)確稱取1.0 g酚酞(18.1.6)于60 mL 無水乙醇(18.1.9)中，加水40mL，搖勻待用。18.2.6吡啶-吡唑啉酮溶液(5 g/L)：準(zhǔn)確稱取1.0 g 1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(18.1.7)，溶于200 mL無水乙醇(18.1.9)中，加1.2 mL吡啶(18.1.10)，混勻待用，現(xiàn)用現(xiàn)配。18.2.7乙酸溶液（0.1 mol/ L)：準(zhǔn)確吸取1.15 mL冰乙酸(18.1.8)，用水定容至200 mL，搖勻待用。18.2.8甲基橙指示劑（0.5 g/ L)：準(zhǔn)確稱取50 mg甲基橙(18.1.11

22、)，溶于水中，定容至100 mL，搖勻待用。18.3 標(biāo)準(zhǔn)品鐵藍(lán)：Prussion Blue，CAS號:14038-43-8，分子式Fe4Fe(CN)63，分子量859.23，純度99%。18.4參比溶液配制準(zhǔn)確稱取0.0150 g鐵藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)于250 mL高型燒杯中，準(zhǔn)確加入100 mL NaOH溶液（18.2.1），于室溫下震蕩30 min后，取10.0 mL定容至100 mL，取稀釋液1.0 mL于500 mL蒸餾燒瓶中，加水至液體總量約為150 mL，加入12滴甲基橙指示劑（18.2.8），再加入2 g酒石酸（18.1.5），溶液由橙黃色變?yōu)槌燃t色，迅速連接好蒸餾裝置，將冷凝管下端插入

23、盛有10 mL NaOH溶液（18.2.2）的100 mL容量瓶中，收集蒸餾液，調(diào)節(jié)溫度將蒸餾速度控制在2 mL/min3mL/min，當(dāng)蒸餾液接近100 mL時(shí)，停止加熱，取下容量瓶，用水定容至刻度，搖勻。此標(biāo)準(zhǔn)溶液中鐵藍(lán)的濃度為0.15 mg/L。19 儀器和設(shè)備19.1 分光光度計(jì)：配1 cm比色池。19.2 分析天平：感量0.01 mg和0.01 g。19.3 500 mL蒸餾裝置：配冷凝器和聚乙烯毛細(xì)管。19.4 振蕩器。19.5 離心機(jī)。20分析步驟20.1試樣制備準(zhǔn)確稱取未經(jīng)粉碎的茶葉樣品10 g(精確至0.01 g)，準(zhǔn)確加入100 mL NaOH溶液（18.2.1）于250

24、mL 高型燒杯中，于室溫下震蕩30 min后，用漏斗濾去茶葉，濾液于3000 r/min離心5 min，準(zhǔn)確移取上清液50 mL于500 mL蒸餾燒瓶中，加水至液體總量約為150 mL，加入12滴甲基橙指示劑(18.2.8)，再加入2 g酒石酸（18.1.5），溶液由橙黃色變?yōu)槌燃t色，迅速連接好蒸餾裝置，將冷凝管下端插入盛有10 mL NaOH溶液（18.2.2）的 100 mL容量瓶中，收集蒸餾液，調(diào)節(jié)溫度將蒸餾速度控制在2 mL/min3 mL/min，當(dāng)蒸餾液接近100 mL時(shí)，停止加熱，取下容量瓶，用水定容至刻度，搖勻，待測。同時(shí)作空白試驗(yàn)，空白溶液除不加堿液（18.2.1）和酒石酸（18.1.5）外，均按（20.1）操作。20.2 測定準(zhǔn)確移取參比溶液（18.4）、樣液（20.1）、空白溶液（20.1）及水（儀器零點(diǎn)校正液）各5.0 mL置于25 mL比色管中，加入1滴酚酞指示液（18.2.5），用乙酸溶液（18.2.7）緩慢調(diào)