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1、超聲提取夏枯草中總?cè)祁惓煞值难芯?一) 作者:呂杏放 朱文斌 楊倬榮 周楊 黃春瑜 彭新生【摘要】 目的:探討夏枯草中總?cè)祁惓煞值奶崛」に嚒?方法:采用正交試驗設(shè)計方案優(yōu)化夏枯草中總?cè)祁惓煞值某曁崛」に?。結(jié)果:最佳提取工藝為提取溫度65,85乙醇,超聲30min,10倍溶劑用量,超聲提取3次。結(jié)論:超聲提取既簡便又高產(chǎn),節(jié)能且環(huán)保。 【關(guān)鍵詞】 超聲提取 總?cè)祁?夏枯草 熊果酸夏枯草是唇形科植物夏枯草Prunella vulgaris Linn的干燥果穗或全草,別名夏至草、夏枯頭。在我國主產(chǎn)于江蘇、浙江、安徽和濟南等地,主要化學成分為三萜
2、類、甾體類、黃酮類、香豆素類、糖類和揮發(fā)油類等1,具有清肝、明目、散結(jié)、消腫、止痛之功效,臨床用于治療甲狀腺腫大、淋巴結(jié)核、乳腺增生、高血壓、肺結(jié)核、急性黃疸型傳染性肝炎等疾病2。夏枯草屬植物中含有多種三萜類成分, 主要為齊墩果烷型、烏蘇烷型和羽扇豆烷型三萜。其藥理活性成分熊果酸(UA)、齊墩果酸(OA)等三萜類化合物具有鎮(zhèn)靜、抗炎、抗菌、抗高血壓、抗糖尿病、抗?jié)?、降低血糖等多種生物學效應(yīng)3。近年來研究發(fā)現(xiàn),三萜類中的熊果酸(UA)具有抗致癌、抗促癌、誘導F9畸胎瘤細胞分化和抗血管生成作用,極有可能成為低毒高效的新型抗癌藥物4;齊墩果酸(OA)具有保肝、免疫作用5。本實驗采用正交試驗設(shè)計,以
3、夏枯草中總?cè)祁惓煞值暮繛樵u價指標,考察乙醇為溶劑用超聲提取的最佳工藝條件。1 儀器與試藥KQ 5200 DB型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);UV-1800紫外-可見分光光度儀(上海美譜達儀器廠);TGL-18G高速臺式離心機(湖南星科科學儀器公司);WK-1000A高速藥物粉碎機(山東青州市精誠機械有限公司)。夏枯草(干燥花序、果穗)購于廣東東莞國藥集團有限公司,經(jīng)茍占平副教授鑒定為夏枯草屬植物夏枯草(Prunella vulgaris Linn)。熊果酸標準品購于中國藥品生物制品檢定所?;钚蕴浚–.P),其余試劑均為A.R。2 實驗方法2.1 夏枯草超聲提取正交試驗設(shè)計方案
4、表1 因素水平表(略)2.2 測量方法的研究2.3 方法學考察6,7及含量測定2.4 結(jié)果表2 穩(wěn)定性考察表(略)表3 重現(xiàn)性考察表(略)表4 正交試驗結(jié)果與分析(略)表5 正交試驗結(jié)果的方差分析(略)注:* P0.05。由表5分析可知,夏枯草中總?cè)祁惓煞肿罴烟崛」に嚍椋篈3B3C2D3。對夏枯草中總?cè)祁愇镔|(zhì)含量影響因素主次順序為:B>A>C>D,即超聲溫度 65,85乙醇,超聲30min,10倍溶劑用量。表6 夏枯草總?cè)祁愇镔|(zhì)含量測定(略)表7 回收率試驗(略)3 討論在預試驗中發(fā)現(xiàn),提取3次總?cè)祁惓煞趾繛?5.71g,提取2次總?cè)祁惓煞趾繛?9.67g。提取3次的含量遠高于提取2次的含量,故選定工藝提取次數(shù)為3次。冰醋酸-香草醛、高氯酸比色法是測定三萜類化合物常用方法,本法測定的機制可能是三萜酸本身在可見光區(qū)無吸收,經(jīng)過三萜酸中羥基與香草醛結(jié)構(gòu)中的醛基進行縮合反應(yīng),生成紫紅色的縮合物,通過測定縮合物的量,從而計算出總?cè)祁愇镔|(zhì)的量。在0.30ml 5香草醛-冰醋酸溶液,1.00ml高氯酸,60水浴10min的條件下顯色,從實驗中知在顯色后3060min內(nèi)穩(wěn)定,有一個較準確的測定值。若在實驗中嚴格控制反應(yīng)條件,其結(jié)果穩(wěn)定且重現(xiàn)性好,可用于質(zhì)量控制8。通過回收率試驗驗證,最佳提取工藝對
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