藥物分析實(shí)驗(yàn)2012

1、藥物分析實(shí)驗(yàn)上海工程技術(shù)大學(xué)制藥工程系實(shí)驗(yàn)一葡萄糖酸鈣片的分析2實(shí)驗(yàn)二葡萄糖的一般雜質(zhì)檢查5實(shí)驗(yàn)三阿司匹林腸溶片的分析11實(shí)驗(yàn)四過(guò)氧化苯甲酰凝膠的分析15實(shí)驗(yàn)五鹽酸小美堿片的分析17實(shí)驗(yàn)六紫外分光光度法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚片的含量24實(shí)驗(yàn)七維生素AD滴劑中維生素A的鑒別與含量測(cè)定26實(shí)驗(yàn)八 牛黃解毒片的鑒別 309實(shí)驗(yàn)一葡萄糖酸鈣片的分析目的要求】1 .掌握葡萄糖酸鈣片鑒別實(shí)驗(yàn)的原理；2 .掌握滴定法測(cè)定葡萄糖酸鈣片含量的原理與操作【基本原理】藥物Ca2+COOHC OHHOOHOH,H 2。本品含葡萄糖酸鈣(Cl2H22CaOi4 H2O)應(yīng)為標(biāo)示量的95.0%-105.0%性狀：本品為白色片。

2、1原理 (1)鑒別:與苯冊(cè)反應(yīng)本品在酸性條件下與苯肥反應(yīng)生成黃色的結(jié)晶。本品與三氯化鐵 本品在無(wú)色火焰中燃燒，火焰即顯磚紅色。(2)含量測(cè)定鈣紫紅素先與鈣離子絡(luò)合生成紫紅色絡(luò)合物，隨著EDTA絡(luò)合劑的加入，由于EDTA與鈣離子的配位能力強(qiáng)于鈣指示劑與鈣離子的配位能力，而使鈣紫紅素先與鈣離子絡(luò)合生成紫紅色絡(luò)合物中的鈣離子被 EDTA奪取，將指示劑游離出來(lái)，溶液即顯示游離指示劑的顏色，從而指示滴定的終點(diǎn)【實(shí)驗(yàn)操作】(一) 鑒別 ：1 與三氯化鐵反應(yīng)取本品一片，研細(xì)，加溫?zé)岬乃?0mL ，振搖，過(guò)濾，吸取5mL 溶液，加 FeCl3溶液一滴，應(yīng)顯深黃色。2 燃燒顯色取鉑絲，用鹽酸浸濕后，蘸取供試品，

3、在無(wú)色火焰中燃燒，火焰即顯磚紅色。3 與苯肼反應(yīng)取本品約0.5g,置試管中，加水5 mL,微熱溶解后，加冰醋酸0.7mL與新蒸的苯肼 1mL ，置水浴上加熱30分鐘，放冷，用玻璃棒擦試管的內(nèi)壁，漸生成黃色的結(jié)晶。(二)含量測(cè)定：取本品 5 片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于葡萄糖酸鈣1g) ，加水50 毫升，微熱使葡萄糖酸鈣溶解，放冷至室溫，移植至100mL 容量瓶中，再用水稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過(guò)，精密量取濾液25mL ，加水75mL ，加氫氧化鈉溶液15mL與鈣紫紅素0.1g,用EDTA溶液滴定至溶液自紫色轉(zhuǎn)變?yōu)榧兯{(lán)色。每1mLEDTA 溶液( 0.05mol/L )相當(dāng)于

4、 22.42mg 的葡萄糖酸鈣。標(biāo)示量，()=V EDTA 22.42 X00XW1/(1000 W2250.5 5) 乂 100%W1:5 片藥品的重量(g)W2: 稱重溶解的藥品重量VEDTA 滴定消耗的EDTA 溶液的體積。實(shí)驗(yàn)二 葡萄糖的一般雜質(zhì)檢查目的要求1 了解葡萄糖的全檢過(guò)程；2 掌握氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽及熾灼殘?jiān)纫话汶s質(zhì)檢查原理、操作方法及雜質(zhì)限量計(jì)算；3 掌握旋光法216 定葡萄糖注射液含量的基本原理、操作方法及結(jié)果計(jì)算；4 正確使用納氏比色管、檢砷器、高溫爐及旋光儀，熟悉旋光儀的構(gòu)造、以及保養(yǎng)。二 . 基本原理葡萄糖分子結(jié)構(gòu)中的五個(gè)碳都是手性碳原子，具有旋光

5、性。一定條件下的旋光度是旋光性物質(zhì)的特性常數(shù)，測(cè)定葡萄糖的比旋度具有初步鑒別及估測(cè)純度的意義。葡萄糖分子中具有醛基，還原堿性酒石酸銅生成紅色氧化亞銅沉淀。本品除了檢查氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬，砷鹽等一般雜質(zhì)外，還需檢查溶液的澄清度與顏色（目的是檢查水不溶性物質(zhì)或有色雜質(zhì)） 、乙酸溶液的澄清度（目的是檢查醇不溶性雜質(zhì)，如蛋白質(zhì)等） 、亞硫酸鹽與可溶性淀粉（因?yàn)橹苽鋾r(shí)使用的醇可能帶有亞硫酸鹽，而可溶性淀粉為引入的中間體） 。旋光度與溶液的濃度（c）和偏振光透過(guò)溶液的厚度（1）成正比。當(dāng)偏振光通過(guò) 厚1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液，使用光線波長(zhǎng)為鈉光D線（589.3nm）, 穩(wěn)定溫度

6、為t記時(shí)，測(cè)得的旋光度稱為該物質(zhì)的比旋度，以小入。葡萄糖的比旋度小入為+52.75。所以，測(cè)定葡萄糖溶液的旋光度可以求得其含 量。三 . 實(shí)驗(yàn)操作 一 性狀 本品為無(wú)色結(jié)晶或白色結(jié)晶性或顆粒性粉末；無(wú)臭，味甜。取本品約10.81g精密稱定，置100ml量瓶中，加水適量與氨試液 0.2ml,溶解后水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘，在25c時(shí)測(cè)定比旋度，應(yīng)為+52.5至+53.0。 二 鑒別取本品約0.2g,加水5ml溶解后，緩緩滴入溫?zé)岬膲A性灑石酸銅試液中，即產(chǎn)生氧化亞銅紅色沉淀。 三 檢查1 酸度 取本品2g， 加新沸過(guò)的冷水20ml 溶解后， 加酚酞指示液3 滴與氫化鈉滴定濃（ 0.02mo

7、l/l ） 0.20ml ，應(yīng)顯粉紅色。2 .溶液的澄清度與顏色取本品5g,置25ml納氏比色管中，加熱水溶解后，放冷，用水稀釋至10ml,溶液應(yīng)澄清無(wú)色；如顯渾濁，與I號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更濃；如顯色，與對(duì)照液（取比色用氯化鈷溶液10ml ，比色用重鉻酸鉀溶液30ml 與比色用硫酸銅溶液20ml,加水稀釋成100ml） 0.4ml加水稀釋至10ml比較，不得更深。3 .乙醇溶液的澄清度取本品1g,加90%乙醇30ml,置水浴上加熱回流約10min,溶液應(yīng)澄清。4 .亞硫酸鹽與可溶性淀粉取本品1g,加水10ml溶解后，加碘試液1滴，應(yīng)即顯黃色。5 干燥失重取本品置與供試品同樣條件下干燥至恒重

8、的扁形稱量瓶中， 將供試品平鋪于瓶底，厚度不超過(guò)5 nlm，加蓋，精密稱定。將稱量瓶放入潔凈的培養(yǎng)皿中，瓶蓋半開或置瓶旁，放入105干燥箱中干燥。取出后迅速蓋好瓶蓋，置干燥器內(nèi)放冷至室溫，迅速精密稱重（放置時(shí)間與稱重順序與空稱量瓶一致）105干燥箱中干燥至恒重，即得。減失重量不得過(guò)9.5% 。6 .蛋白質(zhì) 取本品1.0g,加水10ml溶解后，加磺基水楊酸溶液（1-5） 3ml,不得 發(fā)生沉淀。7 .氯化物 取本品0.6g,置50ml納氏比色管中，加水溶解使成約 25ml （溶液如顯堿 性，可滴加硝酸使調(diào) pH 試紙顯中性） ，再加稀硝酸10ml （溶液如不澄清，應(yīng)濾過(guò)），加水使成約40ml,搖

9、勻，即得供試溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)氯化納溶液（10仙g/ml的Cl） 6ml, 置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10ml,加水使成約40ml,搖勻，即得對(duì)照溶液。于 供試溶液與對(duì)照溶液中，分別加入硝酸銀試液1ml ，用水稀釋至 50ml ，搖勻，在暗處放置 5min ，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比濁，供試溶液不得比對(duì)照溶 液更濃（ 0.01% ） 。8 .硫酸鹽 取本品2g,置50ml納氏比色管中，加水溶解使成約 40ml （溶液如顯堿性，可滴加鹽酸使遇pH 試紙顯中性；溶液如不澄清，應(yīng)濾過(guò)）加稀鹽酸2ml ，搖勻，即得供試溶液。另取標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液（100仙gSO4/ml） 2ml,置50

10、ml納氏比色管中， 加水使成約40ml,加稀鹽酸2ml,搖勻，即得對(duì)照溶液。于供試溶液與對(duì)照溶液中， 分別加入25%氯化鋼溶液5ml,用水稀釋至50ml,充分搖勻，放置10min ,同置黑色背 景上，從比色管上方向下觀察、比濁，供試溶液不得比對(duì)照溶液更濃（ 0.01% ）。9 .鐵鹽 取本品2g,置50ml納氏比色管中，加水20ml溶解后，加硝酸3滴，緩緩 煮沸5min,放冷，加水稀釋使成45ml,加硫氟酸錢溶液（30-100） 3ml,搖勻，如顯色， 與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液（10仙gFe/ml） 2ml用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得更深（0.001%）。10 .重金屬 取50ml納氏比色管兩支，甲管

11、中加標(biāo)準(zhǔn)鉛液（Pb8ig/ml） 一定量與醋酸 鹽緩沖液（pH3.5） 2ml,用水稀釋至25ml:若供試液帶顏色，可在甲管中滴加少量的 稀焦糖溶液或其他無(wú)干擾的有色溶液，使之與乙管一致；再在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml,搖勻，放置2min,同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深（重金屬不得過(guò)5ppm ） 。四 . 注意事項(xiàng)限度檢查應(yīng)遵循平行操作原則，即供試管與對(duì)照管的實(shí)驗(yàn)條件應(yīng)盡可能一致，包括實(shí)驗(yàn)用具的選擇、試劑與事業(yè)的量取方法及加入順序、反應(yīng)時(shí)間的長(zhǎng)短等。1 .比色、比濁前應(yīng)使比色管內(nèi)試劑充分混勻。比色方法是將兩管同置于白色背景上，從側(cè)面或自上而下觀察；比

12、濁方法是將兩管同置于黑色背景上，從上向下垂直觀察。所用比色管刻度高低差異不應(yīng)超過(guò)2ml, 使用過(guò)的比色管應(yīng)及時(shí)清洗， 注意不能用毛刷刷洗，可用硫酸洗液浸泡。一般情況下可取1 份供試品進(jìn)行檢查，對(duì)供試品和對(duì)照管各復(fù)檢2 份，方可判定。五 . 思考題1 葡萄糖的檢查項(xiàng)目中哪些屬于一般雜質(zhì)？哪些屬于特殊雜質(zhì)？試述它們的來(lái)源及檢查意義。2 亞硝酸鹽和可溶性淀粉超標(biāo)會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象？3 氯化物、重金屬及砷鹽檢查中的操作注意事項(xiàng)有哪些？比濁檢查時(shí)為什么應(yīng)將反應(yīng)液稀釋后再加沉淀劑？實(shí)驗(yàn)三阿司匹林腸溶片的分析目的要求】1 .熟悉片劑分析的項(xiàng)目與方法；2 .掌握阿司匹林鑒別實(shí)驗(yàn)的原理及與藥物結(jié)構(gòu)的關(guān)系；3 .掌握

13、兩步滴定法測(cè)定阿司匹林片含量的原理與操作，及容量分析法測(cè)定片劑含量的 計(jì)算方法?！净驹怼克幬颫 II C-OHO，,.-OC CH3C9H 8O4性狀：本品為腸溶包衣片，除去包衣后顯白色。本品含阿司匹林( C9H8O4)應(yīng)為標(biāo)示量的 95.0%-105.0%1原理(1)鑒別：三氯化鐵反應(yīng)水楊酸及其鹽在中性或弱酸性條件下，與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成紫堇色配位化 合物。阿司匹林加熱水解生成水楊酸，可用三氯化鐵反應(yīng)鑒別。水解反應(yīng)阿司匹林與碳酸鈉試液加熱，酯鍵水解，得水楊酸鈉和醋酸鈉，加過(guò)量稀硫酸酸 化后，生成水楊酸沉淀，并發(fā)生醋酸得臭氣，因此可用水解反應(yīng)鑒別。檢查阿司匹林游離水楊酸得檢查a.雜質(zhì)來(lái)

14、源 游離水楊酸為阿司匹林生產(chǎn)中未反應(yīng)的原料或貯存過(guò)程中的水解產(chǎn)物b.檢查方法阿司匹林無(wú)游離酚羥基，不與高鐵鹽溶液作用，而水楊酸則磕與之反應(yīng)生成生成紫堇色此種方法稱為對(duì)照法，極為靈敏，可檢測(cè)出1ug的游離水楊酸。（3）含量測(cè)定阿司匹林分子結(jié)構(gòu)中含有酯鍵，易水解成水楊酸和醋酸，片劑中為防止酯鍵水解加 入少量灑石酸或枸檬酸做穩(wěn)定劑，因此在片劑中有酸性雜質(zhì)，含量測(cè)定時(shí)為消除酸 性雜質(zhì)干擾，采用兩步滴定法。第T 中和，消除酸性雜質(zhì)（酸性附加5酒后酸枸檬酸水楊酸醋酸COOHOCOCH 3 + NaOH第二步水解后剩余滴定COOHOCOCH3 + NaOH2NaOH + H 2so4 -【實(shí)驗(yàn)操作】（一）鑒

15、別匕二氯化鐵反應(yīng)取本品的細(xì)分適量（相當(dāng)于阿司匹林利和降解產(chǎn)物）的干擾+ NaOH 鈉鹽 + H2OCOONaOCOCH 3 + H2OCOONa OH + CH 3COONaNa2so4 + 2H2O0.1g），加水10mL,煮沸，放冷，加三氯化10鐵試液一滴，即顯紫堇色。（二）檢查：游離水楊酸取本品3片，研細(xì)，用乙醇30mL分次研磨，并移入100mL容量瓶中，充分振搖，用水稀釋致刻度，搖勻，立即過(guò)濾，精密量取濾液10mL,致50mL納氏比色管中，用水稀釋致50mL ,立即加新制的稀硫酸鐵溶液（取 1mol/L鹽酸溶液1mL,加 硫酸鐵指示液2mL后再加水適量使成100mL） 3mL,搖勻，三

16、十秒內(nèi)如顯色，與 對(duì)照液（精密量取0.01%水楊酸溶液4.5mL,加乙醇3mL, 0.05%酒石酸溶液1mL, 用水稀釋致50mL,再加上述新制的稀硫酸鐵溶液 3mL,搖勻）比較，不得更深（1.5%） （三）含量測(cè)定：取本品10片，研細(xì)，用中性乙醇70mL分?jǐn)?shù)次研磨，并移入100mL容量瓶中，充分振搖，再用水適量洗滌研缽數(shù)次，洗液合并于 100mL容量瓶中，再用水稀釋致 刻度，搖勻，過(guò)濾，精密量取濾液 30mL （相當(dāng)于阿司匹林0.3g）,致錐形瓶中，加中 性乙醇（對(duì)酚吹指示液顯中性）10mL,振搖，使阿司匹林溶解，加酚吹指示液 3滴， 滴加氫氧化鈉滴定液（ 0.1mol/L）致溶液顯粉紅色，

17、再精密加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L） 40mL,置水浴上加熱15分鐘并時(shí)時(shí)振搖，迅速放冷致室溫，用硫酸滴 定液（0.05mol/L）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白實(shí)驗(yàn)校正，每 1mL氫氧化鈉滴定液100（0Omol/L）相當(dāng)于 18.02mgC9H8。4CH2SO4X2X （V硫酸空白V硫酸供試）X 18.02 XX 100%30阿司匹林標(biāo)示量，% =0.1 0.1 1000 X10（四）注意事項(xiàng):1.掌握片劑的取樣方法，并正確計(jì)算取樣量范圍2中和操作要快，避免阿司匹林在堿中水解。3.加堿、加熱水解阿司匹林應(yīng)不時(shí)振搖，保證水解完全；然后迅速放冷 堿液在受熱時(shí)吸收二氧化碳。29實(shí)驗(yàn)四過(guò)氧化苯甲

18、酰凝膠的分析目的要求】3 .熟悉凝膠劑分析的方法；4 .掌握阿過(guò)氧化苯甲酰凝膠分析的原理與操作藥物性狀 本品為白色乳膠粘稠體.本品含過(guò)氧化苯甲酰（Ci4H1004）應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%110.0%【基本原理】本品具有氧化性，把碘化鉀氧化為單質(zhì)碘，再用硫代硫酸鈉滴定生成的碘，根據(jù)消耗硫代硫酸鈉溶液的體積即可計(jì)算出過(guò)氧化苯甲酰的含量?！緦?shí)驗(yàn)操作】（一）鑒別1 .取本品適量（約相當(dāng)于過(guò)氧化苯甲酰 50mg）,加丙酮5mL,用玻棒擠壓使過(guò)氧化苯甲酰溶解，加碘化鉀試液 2mL,溶液呈紅棕色，加硫代硫酸鈉試液5mL,紅棕色應(yīng)消失2 .取本品適量（約相當(dāng)于過(guò)氧化苯甲酰100mg）,加丙酮10mL,用玻棒擠

19、壓，過(guò)濾，濾液作為供試溶液，另取過(guò)氧化苯甲酰標(biāo)準(zhǔn)品，用丙酮溶解并制成每1mL中含10mg的溶液作為對(duì)照液。吸取上述兩種溶液各 5微升，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上， 以甲苯-二氯甲烷-冰醋酸（50:2:1）為展開劑，展開后，涼干，置紫外燈下（254nm）檢示。供試 品溶液所顯主斑點(diǎn)的顏色與位置應(yīng)與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)相同。（二）含量測(cè)定：精密稱取本品適量（約相當(dāng)于過(guò)氧化苯甲酰200mg）,置100mL碘量瓶中，放置片刻，使供試品平鋪于碘瓶底層，加丙酮 30mL,用玻棒擠壓使過(guò)氧化苯甲酰溶解完全，用少量丙酮沖洗玻棒，洗液并入溶液中，加碘化鉀試液 5mL,密塞，搖勻，于暗處放置10分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液

20、滴定至無(wú)色，用力振搖30秒，放置2分鐘，如仍為無(wú)色，即為終點(diǎn)。1mL硫代硫酸鈉（0.1mol/L）相當(dāng)于12.11mg的過(guò)氧化苯甲酰.標(biāo)示量（尸 c V 1211 100%0.1 mc硫代硫酸鈉的濃度（mol/L）v消耗的硫代硫酸鈉的體積（mL）m稱取的樣品中按說(shuō)明書的標(biāo)示應(yīng)含過(guò)氧化苯甲酰的質(zhì)量（mg）（三）注意事項(xiàng)1 .樣品轉(zhuǎn)移要完全，玻棒上黏附的樣品要全部沖洗到碘瓶中，否則測(cè)定結(jié)果偏低。2 .滴定終點(diǎn)的確定要準(zhǔn)確，放置 2分鐘仍為無(wú)色，即為終點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)五鹽酸小葵堿片的分析目的要求】1 .掌握鹽酸小篥堿片鑒別實(shí)驗(yàn)的原理；2 .掌握氧化還原反應(yīng)滴定法測(cè)定鹽酸小篥堿片含量的原理與操作性狀本品為黃色

21、片或糖衣片Cl-, 2H2O本品含鹽酸小篥堿(C20H18C1NO42H2。)應(yīng)為標(biāo)示量的93.0107.0%1原理(1)鑒別：堿性溶液與丙酮作用生成沉淀本品水溶液與氫氧化鈉試液作用生成季胺堿型小篥堿而呈橙紅色，再與丙酮作用生成黃色的丙酮小篥堿沉淀。Cl-, 2H2O橙紅色+OICH3CCH3黃色氧化顯色 本品溶于稀鹽酸，可被漂白粉氧化而顯櫻紅色。與沒(méi)食子酸作用而顯色本品溶于硫酸，再與沒(méi)食子酸的乙醇溶液作用，水浴加熱后顯翠綠色。（2）含量測(cè)定本品用重銘酸鉀氧化后，剩余重銘酸鉀以間接碘量法測(cè)定。用過(guò)量重銘酸鉀滴定 液氧化供試品中的鹽酸小篥堿，剩余的重銘酸鉀將碘化鉀氧化為碘， 再用硫代硫酸鈉 滴定

22、碘，即可測(cè)出剩余的重銘酸鉀滴定液的毫升數(shù)， 并以空白試驗(yàn)校正，測(cè)出重銘酸 鉀滴定液的總體積?？瞻自囼?yàn)和樣品試驗(yàn)兩次毫升數(shù)之差， 即為氧化供試品所消耗的 重銘酸鉀滴定液的毫升數(shù)?！緦?shí)驗(yàn)操作】（一）鑒別1 .取本品0.1g,加水10mL,緩緩加熱溶解后，過(guò)濾，濾液備用，加氫氧化鈉試液4滴，放冷（必要時(shí)過(guò)濾），加丙酮8滴，即發(fā)生渾濁。2 .取本品約5mg,加稀鹽酸2mL,攪拌，加漂白粉少量，即現(xiàn)櫻紅色3 .取本品約0.1g,加水20mL,緩緩加熱溶解后，加硝酸0.3mL,冷卻，放置10分鐘，濾過(guò)，取濾液5mL,加入硝酸銀溶液，出現(xiàn)白色凝膠狀沉淀。（二）含量測(cè)定：取本品20片，如為糖衣片，注意去除糖衣

23、，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于鹽酸小篥堿0.3g）,置燒杯中，加沸水150mL,攪拌，使鹽酸小篥堿溶解，放冷，移入250容量瓶中，精密加重銘酸鉀滴定液 50mL,加水至刻度，振搖5分鐘，用干燥濾紙濾過(guò)，精密量取濾液 100mL,置250mL具塞錐形瓶中，加碘化鉀2g,振 搖使溶解，加鹽酸溶液10mL,密塞，搖勻，在暗處放置10分鐘，用硫代硫酸鈉滴定液滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液 2mL,繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，溶液呈亮綠色，并 將滴定的結(jié)果用空白實(shí)驗(yàn)校正。1mL重銘酸鉀滴定液相當(dāng)于12.39mg的C20H18C1NO4 2H2O。W1 （V。V。C 10.0136標(biāo)示量=20_0W67

24、_6100%100W2W3250W1 20片總重gW2供試品重gW3供試品的標(biāo)示量gC硫代硫酸鈉的濃度，mol/LV0空白實(shí)驗(yàn)消耗硫代硫酸鈉體積V1樣品消耗硫代硫酸鈉體積實(shí)驗(yàn)六 紫外分光光度法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚片的含量目的要求1 .熟悉片劑分析的基本操作；2 .掌握紫外分光光度法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚片含量的基本原理和方法?；驹? .藥物HOCH3C8H9NO2 151.16本品為白色片、薄膜衣或明膠包衣片，除去包衣后顯白色。含對(duì)乙酰氨基酚（C8H9NO2）應(yīng)為標(biāo)示量的 95.0%105.0%。2 .原理對(duì)乙酰氨基酚在0.4%氫氧化鈉溶液中，于257nm波長(zhǎng)處有最大吸收，具紫外吸 收光譜特征，可用

25、于其原料及其制劑的含量測(cè)定。具片劑的溶液經(jīng)干燥濾紙濾過(guò)，輔 料不再干擾測(cè)定。儀器與試劑（一）儀器紫外-可見分光光度計(jì)、容量瓶、移液管、過(guò)濾裝置。（二）試劑對(duì)乙酰氨基酚片、0.4%氫氧化鈉溶液實(shí)驗(yàn)操作取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚40 mg）,置250ml量瓶中，力口 0.4%氫氧化鈉溶液50ml及水50ml,振搖15min,加水至刻度， 搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5ml,置100ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液10ml,加 水至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法（中國(guó)藥典2005年版二部附錄IV A）,在257nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，按 C8H9NO2的吸光

26、系數(shù)（匚，）為715計(jì)算，即得。icmAW1%XD w Xw& LM00 W標(biāo)示量=M00%標(biāo)示量cm式中V為溶液的體積，ml 注意事項(xiàng)1 .對(duì)乙酰氨基酚片中含有輔料，因此紫外分析前應(yīng)進(jìn)行過(guò)濾操作。本實(shí)驗(yàn)先定容，后過(guò)濾，過(guò)濾時(shí)，所用儀器均需干燥。棄去初濾液，量取續(xù)濾液進(jìn)行分析，以保持濃度的一致，從而保證結(jié)果的準(zhǔn)確。2 .本實(shí)驗(yàn)用吸光系數(shù)法測(cè)定含量，具優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、快捷，不必用對(duì)照品。但該法受儀器精度、操作及環(huán)境因素等影響較大，因此測(cè)定前必須對(duì)紫外-可見分光光度計(jì)進(jìn)行校正與檢定，波長(zhǎng)、吸光度的準(zhǔn)確度、雜散光均應(yīng)符合要求，才能保證結(jié)果的準(zhǔn)確。3 .吸光系數(shù)法通常都是在最大吸收波長(zhǎng)出測(cè)定吸光度，因

27、為在此波長(zhǎng)處測(cè)定靈敏度高，且波長(zhǎng)稍有偏差對(duì)吸光度影響不大。4 .紫外-可見分光光度法測(cè)定時(shí)，除另有規(guī)定外，應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對(duì)照，采用1 cm的石英吸收池，在規(guī)定的吸收峰波長(zhǎng)土 2nm以內(nèi)測(cè)試幾個(gè)點(diǎn)的吸光度，或由儀器在規(guī)定波長(zhǎng)附近自動(dòng)掃描測(cè)定，以核對(duì)供試品的吸收峰波長(zhǎng)位置是否正確。除另有規(guī)定外，吸收豐波長(zhǎng)應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的波長(zhǎng)土2nm以內(nèi)，并以吸光度最大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)。思考題1 .簡(jiǎn)述片劑過(guò)濾得操作要點(diǎn)。2 .采用吸光系數(shù)法測(cè)定藥物含量時(shí)，是否要對(duì)儀器進(jìn)行校正和檢定，為什么?實(shí)驗(yàn)七維生素AD滴劑中維生素A的鑒別與含量測(cè)定1、 目的要求1 復(fù)習(xí)并掌握維生素A 鑒別反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)

28、原理。2 復(fù)習(xí)并掌握三點(diǎn)校正法測(cè)定維生素 A 含量的實(shí)驗(yàn)原理。3 掌握三點(diǎn)校正法測(cè)定維生素 A 含量的操作方法。4 掌握三點(diǎn)校正法的計(jì)算方法。5 掌握滴劑的含量測(cè)定步驟及其計(jì)算方法。2、 儀器及試藥（1） 器材紫外 -可見分光光度儀，比色皿，電熱恒溫干燥箱，萬(wàn)分之一分析天平，托盤天平（精度0.01g） ，稱量瓶，稱量紙，藥匙，研缽，量筒（ 5ml、 10ml、 50ml、 100ml） ，膠頭滴管，刻度吸管（ 1ml、 2ml） ，容量瓶（100ml） ，計(jì)算器，溫度計(jì)，濕度計(jì)（2） 試藥維生素 AD 滴劑，純化水，三氯甲烷（分析純，無(wú)水乙醇） ，三氯化銻（分析純） ，環(huán)己烷（分析純）3、 實(shí)

29、驗(yàn)準(zhǔn)備25%三氯化睇的三氯甲烷溶液：取三氯化睇25g,加三氯甲烷使溶解成100ml,即得。4、 實(shí)驗(yàn)原理及方法（一） 鑒別三氯化銻反應(yīng)實(shí)驗(yàn)原理： 維生素 A 在飽和無(wú)水三氯化銻的無(wú)醇氯仿溶液中即顯藍(lán)色， 漸變紫紅。反應(yīng)機(jī)理為維生素A與三氯化睇（m）中存在的親電試劑氯化高睇（V）反應(yīng)，生成不穩(wěn)定的藍(lán)色碳正離子，反應(yīng)式如下:SbCl5.RCOO實(shí)驗(yàn)方法：取本品，加三氯甲烷稀釋成每1ml中含維生素A1020U的溶液；取1ml,加25%三氯化睇的三氯甲烷溶液 2ml,即顯藍(lán)色至藍(lán)紫色，放置后，藍(lán)色漸消 褪。（二）含量測(cè)定一一三點(diǎn)校正法實(shí)驗(yàn)原理：用分光光度法測(cè)定維生素A在特定波長(zhǎng)處的吸光度來(lái)計(jì)算其含量。

30、由 于維生素A制劑中含有稀釋用油，且維生素A原料藥中混有其他雜質(zhì)，因此測(cè)定吸光 度中含有無(wú)關(guān)吸收引入的誤差，需用校正公式校正以得到正確結(jié)果。其詳細(xì)內(nèi)容參見 附錄H -Do實(shí)驗(yàn)方法：取裝量項(xiàng)下的內(nèi)容物適量，精密稱定，加環(huán)己烷溶解并定量稀釋制成每 1ml中含 915U的溶液，照紫外-可見分光光度法，測(cè)定其吸收峰的波長(zhǎng)，并在表 9所列各波長(zhǎng) 處測(cè)定吸光度，計(jì)算各吸光度與波長(zhǎng) 328nm處吸光度的幣值和波長(zhǎng)328nm處的E；%1 cm 值。表9維生素A測(cè)定第一法的藥典規(guī)定值波長(zhǎng)（nm）測(cè)得吸光度吸光度比值計(jì)算值藥典規(guī)定值300A1A1/A30.555316A2A2/A30.907328A3A3/A31

31、.000340A4A4/A30.811360A5A5/A30.299如果吸收峰波長(zhǎng)在326329nm之間，且所測(cè)得各波長(zhǎng)吸光度比值不超過(guò)表中規(guī)定的0.02,可用下式計(jì)算含量：每1g供試品中含有的維生素 A的單位=匚1% (328nn) X 19001cm如果吸收峰波長(zhǎng)在326329nm之間，但所測(cè)得的各波長(zhǎng)吸光度比值超過(guò)表中規(guī)定值的 0.02，應(yīng)按下式求出校正后的吸光度，然后再計(jì)算含量：A328 (校正)=3.52(2A328-A 316-A 340)如果在328nm處的校正吸光度與未校正吸光度相差不超過(guò)土3.0%,則不用校正吸光度，仍以未經(jīng)校正的吸光度計(jì)算含量。如果校正吸光度與未校正吸光度相

32、差在-15%至-3%之間，則以校正吸光度計(jì)算 含量。如果校正吸光度超出未校正吸光度的-15%至-3%的范圍，或者吸收峰波長(zhǎng)不在326329nm之間，則供試品須按下述第二法測(cè)定。第二法的詳細(xì)描述參見附錄R-D。中國(guó)藥典(2005)規(guī)定，本品含維生素A 應(yīng)為標(biāo)示量的 90.0%120.0% 。5、 注意事項(xiàng)1 鑒別反應(yīng)必須在無(wú)水、無(wú)醇的條件下進(jìn)行。因此，所用儀器必須干燥無(wú)水，所用試劑必須為無(wú)水試劑，所用三氯甲烷中必須不含醇。2 維生素 A 遇光易氧化變質(zhì)，實(shí)驗(yàn)應(yīng)盡量在暗處快速進(jìn)行。3 .維生素A測(cè)定注意事項(xiàng)的詳細(xì)描述參見附錄n-D。4 .紫外-可見分光光度法注意事項(xiàng)的詳細(xì)描述參見附錄VI-A。5

33、.滴劑分析注意事項(xiàng)的詳細(xì)描述參見附錄田-D。6、 計(jì)算-D 相關(guān)內(nèi)容。維生素A的含量測(cè)定計(jì)算參見含量測(cè)定中的實(shí)驗(yàn)方法及附錄R七、 思考題1 鑒別反應(yīng)為何必須在無(wú)水、無(wú)醇的條件下進(jìn)行？2 為何不直接以紫外-可見分光光度法測(cè)定維生素A 的含量， 而要采用較為繁瑣的三點(diǎn)校正法？用于測(cè)定的三點(diǎn)該如何選擇？3 應(yīng)用三點(diǎn)校正法測(cè)定維生素 A 的含量，何時(shí)采用第一法，何時(shí)采用第二法？第二法如何操作？4 計(jì)算式中的參數(shù)1900 是如何得來(lái)的？實(shí)驗(yàn)八 牛黃解毒片的鑒別 目的要求 1. 掌握中藥制劑定性分析的一般原理和方法;2. 掌握牛黃解毒片的原理及有關(guān)操作. 基本原理 1. 處方人工牛黃5g 雄黃 50g 石

34、膏 200g 大黃 200g 黃芩 150g 桔梗 100g冰片 25g 甘草 50g2. 原理(1) 顯微鑒別法利用顯微鏡來(lái)觀察中藥制劑中原藥材的組織、細(xì)胞或內(nèi)含物等特征，從而鑒別制劑的處方組成。凡以藥材粉碎后直接制成制劑或添加有粉末藥材的制劑，由于其在制作過(guò)程中原藥材的顯微特征仍保留在制劑中，因此均可用顯微鑒別法進(jìn)行鑒別。本實(shí)驗(yàn)用顯微鑒別法鑒別大黃和雄黃。(2) 微量升華法可用于鑒別中藥制劑中具有升華性質(zhì)的化學(xué)成分。本實(shí)驗(yàn)采用微量升華法鑒別冰片。冰片的升華物加一定試劑處理后顯出不同顏色。(3) 顯色反應(yīng)則利用顏色反應(yīng)鑒別中藥制劑的組成。本實(shí)驗(yàn)利用黃酮類成分和蒽醌類成分的顯色反應(yīng)鑒別黃芩和大黃。黃酮類成分在鎂粉與鹽酸作用下易被還原，迅速生成