透射反射偏光顯微鏡

1、透射反射偏光顯微鏡一、實驗?zāi)康?.熟悉透射反射偏光顯微鏡的使用方法和工作原理。2.通過親自使用透射反射偏光顯微鏡對樣品拍照，進一步加深對透射反射偏光顯微鏡了解。3.學(xué)會分析對由透射反射顯微鏡產(chǎn)生的圖像進行分析。二、實驗原理 偏光顯微是鑒定物質(zhì)細(xì)微結(jié)構(gòu)光學(xué)性質(zhì)的一種顯微鏡。凡具有雙折射性的物質(zhì)，在偏光顯微鏡下就能分辨的清楚，當(dāng)然這些物質(zhì)也可用染色法來進行觀察，但有些則不可能，而必須利用偏光顯微鏡。 偏光顯微鏡的特點，就是將普通光改變?yōu)槠窆膺M行鏡檢的方法，以鑒別某一物質(zhì)是單折射性（各向同性）或雙折射性（各向異性）。 雙折射性是晶體的基本特征。因此，偏光顯微鏡被廣泛地應(yīng)用在礦物、化學(xué)等領(lǐng)域。在生物

2、學(xué)中，很多結(jié)構(gòu)也具有雙折射性，這就需要利用偏光顯微鏡加以區(qū)分。在植物學(xué)方面，如鑒別纖維、染色體、紡錘絲、淀粉粒、細(xì)胞壁以及細(xì)胞質(zhì)與組織中是否含有晶體等。在植物病理上，病菌的入侵，常引起組織內(nèi)化學(xué)性質(zhì)的改變，可以偏光顯微術(shù)進行鑒別。在人體及動物學(xué)方面，常利用偏光顯微術(shù)來鑒別骨骷、牙齒、膽固醇、神經(jīng)纖維、腫瘤細(xì)胞、橫紋肌和毛發(fā)等。 熱臺顯微鏡的工作原理是將普通光改變?yōu)槠窆膺M行鏡檢，以鑒別某一物質(zhì)是單折射（各向同行）或雙折射性（各向異性）。其中，雙折射性是晶體的基本特性。偏光顯微鏡是根據(jù)有關(guān)物質(zhì)所具有的偏光性，可以進行定性觀察和定量測定，因此偏光顯微鏡可用作物質(zhì)鑒定。其廣泛地應(yīng)用于礦物、晶體等各種

3、具有雙折射性偏光物質(zhì)的觀察、研究和鑒別。熱臺顯微鏡是研究物質(zhì)的結(jié)構(gòu)最常用的物理方法之一，適用于巖石薄片、玻璃、陶瓷、塑料、高分子材料等多種樣品的偏光特性高級觀察分析。 偏光原理是偏光顯微鏡的核心部分：光可以看作是由一些微小的波構(gòu)成的，這些波可以在任何一個平面上振動。在一個特定的光束中，波的振動方向分上下振動，左右振動和對角方向振動，振動方向可能均勻地分布在所有各個方向上，沒有一個振動平面占優(yōu)勢或者在光波中比其他平面占有更大的份額。 晶體是由排成規(guī)整的行列和平面的原子或原子團構(gòu)成的。當(dāng)光波的振動平面恰巧能塞進兩個原子平面之間時，它就很容易通過這塊晶體；要是它的振動平面與原子的平面成一個角度，它就

4、會撞在原子上，光波就要消耗很多能量方能繼續(xù)振動下去，這樣的光會局部或全部被吸收掉。 有些晶體能夠強迫光波把所有能量分成兩束分離的光線，這時。動平面就不再均勻分布了。在其中的一個光束中，所有的波都在一個特定的平面上振動；而在另一個光束中，所有的波都在與第一束光的平面成直角的平面上振動，不可能出現(xiàn)任何對角方向的振動。 當(dāng)光波被迫在某一特定的平面上振動時，稱“面偏振光”或“偏振光”。朝著所有各個方向振動的普通光是“非偏振光”，西方國家把偏振光稱為“極化光”。 偏振眼鏡片（它是在塑料中嵌入許多細(xì)小的這類晶體）就是以上述方式吸收掉許多光，由于這種鏡片著色，吸收掉的光就更多了，這種鏡片就是這樣消除眩目的強

5、光的。 當(dāng)偏振光通過含有某種不對稱分子的溶液時，它的振動平面會被扭轉(zhuǎn)一個角度?；瘜W(xué)家根據(jù)這種扭轉(zhuǎn)的方向和角度的大小，就能夠?qū)@種分子的真實結(jié)構(gòu)作出許多推斷，特別是對于有機化合物的分子更是如此。正因為這樣，偏振光對于化學(xué)理論來說，一直是極其重要的。3、 儀器設(shè)備設(shè)備名稱：透射反射偏光顯微鏡及計算機控制檢驗臺規(guī)格、型號：DM2500P 透射反射偏光顯微鏡；THMS600/CI94 計算機控制檢驗臺生產(chǎn)廠家：投射反射偏光顯微鏡為德國徠卡公司產(chǎn)品；計算機控制檢驗臺為英國Linkam 公司產(chǎn)品。該顯微鏡由鏡座、鏡柱、鏡臂、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器（旋轉(zhuǎn)器）、鏡臺（載物臺）、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋、粗準(zhǔn)焦螺旋、目鏡、物鏡等組

6、成。該儀器可以進行數(shù)字化的操作，不需要觀察目鏡，產(chǎn)生的圖形能直接通過儀器轉(zhuǎn)換到計算機上并形成圖形。主要技術(shù)指標(biāo)：1）透射反射偏光顯微鏡（1）2 檔調(diào)焦，180 檢偏鏡；（2）適用于反射偏光和反射DIC（Pol&ICR）的Smith 鏡；（3）LH 107/2 12V 100W 燈箱，單投射；（4）UCA/P 帶6 位轉(zhuǎn)盤，用于厚片或熱臺；（5）安裝于物鏡轉(zhuǎn)換盤上方的全波長鏡；（6）安裝于物鏡轉(zhuǎn)換盤上方的1/4 波長鏡；（7）360 度偏光鏡，帶熱保護膜；（8）R/P 起偏鏡，到0、45、90 度定位；（9）N PLAN（5×、10×），HI PLAN（40×

7、;）物鏡系列，10×/22M+目鏡；（10）標(biāo)準(zhǔn)濾鏡組合（日光、綠色、中灰）2）計算機控制檢驗臺（1）溫度范圍：室溫到600；（2）溫度設(shè)定：100 段溫度程序；（3）溫度精度/穩(wěn)定性：0.1/小于0.01；（4）光孔直徑：2.4mm；（5）樣品X、Y 軸向移動：16mm；（6）加熱/冷卻速率：0.1-130/min;（7）超薄熱臺窗口：0.17 mm；（8）最小物鏡/聚光鏡工作距離：4.5/12.5 mm；（9）氣密樣品腔室，可充入保護性氣體。四、實驗步驟1、打開電源；2、在載物臺上放置樣品；3、將倍率調(diào)到低倍率；4、將載物臺其上升，調(diào)節(jié)粗螺紋在低倍鏡下尋找目標(biāo)點；5、找到目標(biāo)后，可以細(xì)調(diào)將圖像調(diào)節(jié)清晰；在調(diào)節(jié)的過程中，可以根據(jù)需要，自己調(diào)節(jié)光源的強度，得到處于最清晰的狀態(tài)的圖像。6、保存圖像；7、圖像分析。5、 圖