中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)的操作規(guī)范

1、中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)的操作規(guī)范(版本 2004 A)SOP of Similarity evaluation system for chromatographic fingerprint of TCM（Version 2004 A）一 簡介1版本介紹：本軟件系統(tǒng)包括兩個應(yīng)用版本：研究版（2004 A）和檢驗版（2004 B）。研究版主要用于科學(xué)研究工作，具有生成對照圖譜功能。檢驗版?zhèn)戎赜谏V指紋圖譜的檢驗工作，不具有生成對照圖譜的功能。2系統(tǒng)運行環(huán)境要求：(1). 最低配置：CPU主頻533 MHz以上，內(nèi)存64M，硬盤剩余最小空間100M，操作系統(tǒng)Windows 98以上，屏幕分辨

2、率800×600。(2). 推薦配置：PVI以上CPU，內(nèi)存128M，硬盤空間20G，操作系統(tǒng)Windows 2000以上，屏幕分辨率1024×768二 安裝方法點擊setup.exe后，進(jìn)入安裝程序，如果無其他特殊需要，可以直接點擊next至安裝結(jié)束。圖 1三 功能本軟件系統(tǒng)包括文件導(dǎo)入，數(shù)據(jù)庫管理，譜圖處理，分析檢驗和幫助等功能。安裝完本系統(tǒng)后，運行“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)”執(zhí)行程序，進(jìn)入登陸界面（圖2），這時需要用戶輸入用戶名和相應(yīng)的密碼（現(xiàn)暫無設(shè)置密碼）。點擊確定進(jìn)入啟動界面（圖3），三秒鐘后自動進(jìn)入本系統(tǒng)運行主界面。圖2圖3 繪圖區(qū)文件信息區(qū)圖4系統(tǒng)主界面

3、中，文件信息區(qū)顯示文件的路徑名稱等信息，繪圖區(qū)顯示相應(yīng)的色譜指紋圖譜的圖形。1 文件打開（1）打開文件（全譜導(dǎo)入）（圖5）：圖5本系統(tǒng)支持三種格式文件的導(dǎo)入：AIA(即*.cdf)文件，文本文件（*.txt）和Scp(*.Scp)格式文件的導(dǎo)入（圖5）。為了方便用戶的使用，附錄中給出了主要色譜工作站的（AGILENT，WATERS，和SHIMADZU）AIA數(shù)據(jù)格式的文件導(dǎo)出介紹。（2）導(dǎo)出文件（保存圖譜）本系統(tǒng)支持將導(dǎo)入的圖譜數(shù)據(jù)文件以文本文件（*.txt）導(dǎo)出保存（圖6）。圖6（3）導(dǎo)出圖象將導(dǎo)入繪制的色譜圖譜也可以圖象形式存放，文件格式為*.bmp（圖7）。圖7（4）圖譜刪除本系統(tǒng)提供譜

4、圖刪除功能（圖8）?？梢赃x中某一譜圖刪除（刪除當(dāng)前圖譜功能），也可將導(dǎo)入的譜圖全部刪除（清除所有圖譜數(shù)據(jù)）。 圖82 數(shù)據(jù)庫功能：數(shù)據(jù)庫管理包括藥材信息建檔（圖9）、制劑信息建檔（圖10）和參照圖譜建檔功能（圖11），便于用戶信息管理。圖9圖10圖113 譜圖處理：（1） 數(shù)據(jù)剪切采用數(shù)據(jù)剪切功能用戶可以選擇一定時間范圍內(nèi)的色譜數(shù)據(jù)進(jìn)行匹配（圖12）。圖12（2）色譜峰匹配色譜峰匹配包括指定參照峰，指定基準(zhǔn)峰和自動匹配。下面逐一介紹：· 指定參照圖譜：用戶可以任意選擇一條色譜圖譜作為指定參照圖譜。在圖所示的對話框中輸入?yún)⒄請D譜編號確定后即可將編號對應(yīng)的圖譜指定為參照圖譜（圖13）。該

5、圖譜變?yōu)榧t色，以區(qū)別于其他圖譜。圖13· 多點校正：系統(tǒng)支持“多點校正”功能。用戶根據(jù)需要直接在圖譜上設(shè)置匹配點（匹配點數(shù)不限）進(jìn)行多點校正。若設(shè)置結(jié)果不滿意，再點擊設(shè)置的匹配點即可取消以前設(shè)置的匹配點。（圖14）圖14· 自動匹配：本系統(tǒng)提供自動匹配功能，可實現(xiàn)色譜峰的自動匹配。自動匹配時，需要用戶設(shè)置時間漂移，系統(tǒng)默認(rèn)值為0.1（圖13）。用戶可以調(diào)節(jié)此參數(shù)以調(diào)整色譜峰的匹配結(jié)果。（4）生成對照圖譜對照圖譜的生成需要先進(jìn)行譜峰匹配然后才能生成對照圖譜。其生成方法包括均值法和中位數(shù)法（圖13）。用戶可以根據(jù)需要選擇合適的方法生成對照圖譜（見圖15中標(biāo)識為R的圖譜），并以特

6、殊格式導(dǎo)出（圖14和16，對照圖譜不能在“文件”菜單中以“導(dǎo)出文件”導(dǎo)出，必須以圖14所示菜單中“導(dǎo)出對照圖譜導(dǎo)出”）。對于注射劑建議采用均值法產(chǎn)生對照指紋圖譜；對于中藥材，建議采用中位數(shù)法產(chǎn)生對照指紋圖譜。圖15圖16（5）隨機(jī)著色譜圖：用戶可以對繪制圖譜的顏色進(jìn)行隨機(jī)著色（圖14）。4 分析檢驗：（1）相似度計算：對照圖譜生成后，用戶通過“相似度計算”功能進(jìn)行色譜圖譜樣本與對照圖譜的相似度評價。評價結(jié)果以表格形式顯示，并可保存（圖17和18）?；?qū)⒔Y(jié)果拷貝到剪貼板上以方便用戶使用。圖17圖18（2）打印報告：用戶通過“打印報告”功能將分析結(jié)果打印出來。打印報告中包括報表信息輸入（圖19）和

7、分析報告兩部分（圖20和21）。其中分析報告包括原始指紋圖譜，匹配后圖譜和相似度評價結(jié)果。圖19圖20圖215 幫助為方便用戶使用，本系統(tǒng)提供簡潔完整的聯(lián)機(jī)幫助。6 工具欄按鈕簡介：工具欄按鈕如圖所示(圖22)。其中大部分按鈕的功能在前面已經(jīng)介紹過，不再贅述。這里將重點介紹“數(shù)據(jù)恢復(fù)”，“圖譜間距”，“單譜顯示”和x與y軸放大功能。（1）數(shù)據(jù)恢復(fù)“數(shù)據(jù)恢復(fù)”功能是使當(dāng)前處理結(jié)果恢復(fù)到圖譜數(shù)據(jù)剛導(dǎo)入的狀態(tài)。（2）圖譜間距“圖譜間距”可以調(diào)節(jié)繪制圖譜間的距離，便于用戶觀察和分析。（3）單峰顯示“單峰顯示”可使選中的圖譜單個顯示，便于用戶觀察和分析單個樣本圖譜。（4）x與y軸放大功能通過此功能可以對

8、圖譜的x和y軸進(jìn)行放大和縮小，系統(tǒng)默認(rèn)值為100。四 卸載在控制面板中，采用添加/刪除程序卸載本程序。五 應(yīng)用實例為方便用戶快速掌握本系統(tǒng)，我們以一例子加以介紹。例：對獲取的色譜指紋圖譜建立對照圖譜，進(jìn)行相似度評價，并打印報告?；玖鞒虉D如下（圖23）：樣本圖譜數(shù)據(jù)導(dǎo)入（AIA格式）設(shè)參照圖譜匹配結(jié)果不滿意，可調(diào)整匹配參數(shù)設(shè)置多點校正匹配不滿意，調(diào)整多點校正參數(shù)自動匹配匹配結(jié)果相似度評價結(jié)果對照圖譜生成打印報告圖231 樣本圖譜數(shù)據(jù)導(dǎo)入（AIA格式）圖24圖252 設(shè)參照圖譜圖263 自動匹配圖27 自動匹配結(jié)果4多點校正多點校正（這里為2點）圖28 多點校正設(shè)定圖29 多點校正后自動匹配結(jié)果

9、5 對照圖譜生成對照圖譜圖30非共有峰圖31圖32圖33圖34附常用色譜工作站AIA格式文件的導(dǎo)出：Agilent 色譜工作站1. 打開Agilent 色譜工作站；2. 進(jìn)入數(shù)據(jù)處理（View>>Data Analysis）；3. 調(diào)入要輸出的色譜文件（File>>Load Signal）；4. 進(jìn)入數(shù)據(jù)輸出窗口（File>>Export File>>AIA File），進(jìn)入方式如下圖所示：在彈出窗口中指定導(dǎo)出路徑及文件名，確定。可導(dǎo)出AIA 格式文件。5. 若選擇輸出文本格式文件（File>>Export File>>C

10、SV File），會彈出數(shù)據(jù)輸出窗口。在數(shù)據(jù)輸出窗口中，選中Signal 選項，在File Name 輸入框中輸入相應(yīng)的文件名及文件保存路徑。點擊 OK。在Signal Export 窗口下，選中Times axis 及Y axis 兩選項，點擊OK 后即可。6. 重復(fù)以上操作，依次輸出。Waters M32 色譜工作站建立輸出方法登陸M32，右擊Browse Data 小窗口，選擇相應(yīng)的Project。在Project 窗口中選定Channels 標(biāo)簽頁面下要輸出的某個數(shù)據(jù)（點黑）方法一：在File 菜單下，選New Method 下的Export Method以建立輸出方法模板方法二：在D

11、atabase 菜單下，選Export Data，在Export 窗口下點擊Edit Method 按鈕。方法一： 方法二：或選中需要輸出的數(shù)據(jù)文件，選擇或建立輸出方法 在隨后出現(xiàn)的Save current Export Method 窗口下的Name 框中填入輸出方法名關(guān)閉Export Method Editor 界面方法一：回到在Project 窗口，選中要輸出的一個或多個數(shù)據(jù)；在Tools 菜單下選Export；在隨后出現(xiàn)的Background Processing and Reporting 界面下確認(rèn)Exporting 項下的Export 框打勾，在Use specified export method 框下選建立過的輸出方法名點OK 鍵完成數(shù)據(jù)的輸出到Win