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1、3化驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程編號:zmljykxm-001丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定(動力法) 第 1 頁 共 3 頁起草人莊紅梅起草日期200510生效日期2005.11審核人張慶芳審核日期200510頒布后重審日期2005.11批準(zhǔn)人許清泉批準(zhǔn)日期200510 頒布部門檢驗(yàn)科頒布部門走馬嶺中心衛(wèi)生院丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定 1.原理: ALTL-丙氨酸+a-酮戊二酸 丙酮酸+L-谷氨酸LOH丙酮酸+NADH+H+ L-乳酸+NAD+2.標(biāo)本采集與處理:2.1受檢者準(zhǔn)備:病人必須空腹12小時(shí),不飲酒24小時(shí)后采集血樣。2.2靜脈采血:除非是臥床的病人,一般采血取坐位,從肘靜脈取血,使用止血帶的時(shí)間不超過1分鐘

2、,穿刺成功后立即松開止血帶;2.3標(biāo)本處理:血清要迅速與血細(xì)胞分離,因紅細(xì)胞中ALT比血清中ALT的濃度高。血清中的ALT能在室溫(2025)下保存24小時(shí)或者在4下保存1周。2.4采血管要求:采血時(shí)要求使用一次性無菌注射器,一人一管,用后毀形,用500mg/L有效氯浸泡消毒分鐘,回收、焚燒、做好登記。2. 5標(biāo)本拒收;接收標(biāo)本應(yīng)檢查是否符合要求(有無溶血)試管是否填寫完整,對不合格標(biāo)本應(yīng)重新采集。3.試劑:3.1試劑盒組成:(柏定生物工程(北京)有限公司)a-酮戊二酸 15mmol/LNADH 0.18 mmol/L乳酸脫氫酶(LDH) >5000U/LTris緩沖液 100 mmol

3、/L化驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程編號:zmljykxm-001丙氨酸氨基轉(zhuǎn)酶測定(動力法) 第 2 頁 共 3 頁起草人莊紅梅起草日期200510生效日期2005.11審核人張慶芳審核日期200510頒布后重審日期2005.11批準(zhǔn)人許清泉批準(zhǔn)日期200510 頒布部門檢驗(yàn)科頒布部門走馬嶺中心衛(wèi)生院3.2質(zhì)控血清:應(yīng)在測量未知樣本的同時(shí)檢測質(zhì)控物并確保質(zhì)控在可接受的范圍內(nèi),并且結(jié)果必須在范圍內(nèi)。質(zhì)控品批號及范圍:批號022431,范圍*±2st和*±3s。保存環(huán)境:在28保存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。3.3試劑貯存及穩(wěn)定性:試劑在28保存可穩(wěn)定至瓶簽所示失效日期;工作液28可穩(wěn)定30天。4.儀

4、器: 上海迅達(dá)公司的半自動生化分析儀XD811。5.操作程序:5.1試劑準(zhǔn)備:在室溫中按瓶簽標(biāo)定的體積,定量加入新鮮去離子水,輕輕混勻至試劑完全溶解。5.2分析參數(shù):方法:速率法;波長340nm 溫度:37比色杯光徑: 1cm 延遲時(shí)間60秒5.3操作步驟:質(zhì)控管標(biāo)本管工作液100ml1.00ml樣品0.10ml 質(zhì)控品0.10ml混合均勻,在反應(yīng)溫度保溫60秒,分別讀取吸光度。5.4計(jì)算方法:樣品中ALT活動;ALT(U/L)=A/分*F V1 F= *1000=1746 Vs*消光系數(shù)V1=反應(yīng)總體積 Vs=樣品體積NADH在340的毫克分子消光系數(shù)=6.3 6.操作性能:線性范圍:010

5、00U/L(37)如果血清中ALT活力超出范圍,則用生理鹽水稀釋血清重做,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。7.參考范圍:040U/L 化驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程編號:zmljykxm-001丙氨酸氨基轉(zhuǎn)酶測定(動力法) 第 3 頁 共 3 頁起草人莊紅梅起草日期200510生效日期2005.11審核人張慶芳審核日期200510頒布后重審日期2005.11批準(zhǔn)人許清泉批準(zhǔn)日期200510 頒布部門檢驗(yàn)科頒布部門走馬嶺中心衛(wèi)生院8.結(jié)果審核:8.1室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果的判斷:對質(zhì)控結(jié)果進(jìn)行分析是否在控。8.2對檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行審核,包括檢驗(yàn)項(xiàng)目是否漏項(xiàng),打印是否清楚、正確,難以解釋的結(jié)果,并決定是否需要復(fù)查。9.臨床意義:ALT在下列疾病可增高:(1)充血性心臟衰竭;各種肝臟疾病。 (2)傳染病白細(xì)胞增多癥(3)嚴(yán)重的心肌梗塞 (4)骨骼肌疾病

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