免疫組化指標(biāo)意義及分子分型

1、 乳腺癌免疫組化指標(biāo)意義甘肅省婦幼保健院乳腺二科 白海亞腫瘤標(biāo)志物n定義：指腫瘤組織或細(xì)胞由于癌基因及其產(chǎn)物異常表達(dá)所產(chǎn)生的抗原和生物活性物質(zhì)。n反映癌的發(fā)生、發(fā)展過程中有關(guān)基因或癌基因活化程度n可在腫瘤病人的組織、體液和排泄物中檢出。n包括：激素、受體、酶和同工酶、癌基因及其產(chǎn)物，單克隆抗體等。性激素受體雌激素受體（estrogen receptor，ER）n為糖蛋白，生物特性不穩(wěn)定，受熱易破壞n只能與雌二醇及結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì)結(jié)合n受體飽和達(dá)到容量限度后，結(jié)合與離解呈動(dòng)態(tài)平衡n激素與受體結(jié)合后，在體內(nèi)發(fā)揮各種激素效應(yīng)染色結(jié)果nER陽性的細(xì)胞的核與胞漿中均可見深的棕黑色顆粒判斷標(biāo)準(zhǔn)：n(-):陽

2、性細(xì)胞數(shù)50%性激素受體 孕激素受體（prosgesterone receptor，PR） PR是E2和ER結(jié)合誘導(dǎo)的產(chǎn)物，其合成必須有雌激素作為啟動(dòng)，缺乏ER時(shí)很少能合成PR，PR 的出現(xiàn)顯示ER 功能機(jī)制的完整性， 大多數(shù)乳腺癌呈激素依賴性 n正常乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)存在ER、PR。n當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，ER和PR出現(xiàn)部分和全部缺失。n如果細(xì)胞仍保留ER和（或）PR，則該乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖仍然受內(nèi)分泌的調(diào)控，稱為激素依賴性乳腺癌n如果ER和（或）PR缺失，則該乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖不再受內(nèi)分泌的調(diào)控，稱為非激素依賴性乳腺癌基因n癌基因與抑癌基因：是細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)胞分裂和分化的基因族，在特定情況下

3、，可使其激活或失活，從而導(dǎo)致細(xì)胞癌變。C-erBb-2 基因n又稱neu 或HER2n定位于17q21，編碼分子質(zhì)量為185 kDa ( P185) 的跨膜蛋白，具有胞內(nèi)酪氨酸酶活性n與表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR) 具有高度同源性，故它又稱人表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)基因意義：n 參與細(xì)胞生長(zhǎng)、分化的調(diào)節(jié)。正常情況下處于非激活狀態(tài)，當(dāng)受到體內(nèi)、外某些因素作用而激活時(shí)，具有腫瘤轉(zhuǎn)化活性，通過基因擴(kuò)增和蛋白過度表達(dá)在細(xì)胞信號(hào)傳遞系統(tǒng)中起橋梁作用，刺激細(xì)胞增殖、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。n 在正常乳腺組織中呈低表達(dá)，在乳腺癌組織中表達(dá)率可增高，其表達(dá)與乳腺癌分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期呈正相關(guān)，表達(dá)率越高，預(yù)后可能也就越差。

4、 P53抑癌基因n有兩種類型：野生型和突變型，n野生型能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和促進(jìn)DNA 修復(fù)，但其半衰期短，含量低，用免疫組化方法難以檢測(cè)n突變型P53 蛋白因構(gòu)象改變，半衰期長(zhǎng)，故臨床測(cè)定主要是突變型的P53 蛋白。突變型P53 基因失去了對(duì)細(xì)胞的監(jiān)視功能，不能引起細(xì)胞增殖的停滯和凋亡，使細(xì)胞帶著受損和錯(cuò)配的DNA 進(jìn)入S 期，結(jié)果細(xì)胞因遺傳不穩(wěn)定而發(fā)生突變和染色體畸形變，最后發(fā)生癌變。意義n乳腺癌P53基因的突變率約為14%40%nP53基因突變或P53蛋白的過度表達(dá)與乳腺癌組織分化低、表皮生長(zhǎng)因子受體及Ki-67表達(dá)增加、晚期、轉(zhuǎn)移擴(kuò)散、ER、PR含量低有關(guān)nP53陽性病例無病生存率和總生存期

5、較短nP53基因與淋巴結(jié)關(guān)系不大，但淋巴結(jié)陽性同時(shí)P53陽性者預(yù)后較差 nm23基因n由Steeg 等在1988 年應(yīng)用消減技術(shù)發(fā)現(xiàn)的一種腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，定位于人17 號(hào)染色體長(zhǎng)臂n主要分布于細(xì)胞質(zhì)中，胞膜上有少量表達(dá)；其基因產(chǎn)物二磷酸核苷激酶(NDPK) 參與多種生物學(xué)活動(dòng)，在細(xì)胞信號(hào)傳遞、細(xì)胞分化、維持細(xì)胞的正常骨架等過程中起著重要作用。意義nNm23的表達(dá)與腫瘤大小、病理類型無相關(guān)性n淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移者nm23呈高表達(dá)，反之呈低表達(dá)Ki67抗原n是與增殖細(xì)胞相關(guān)的核抗原，分布于核內(nèi)，其功能被認(rèn)為與染色質(zhì)相連及與細(xì)胞的有絲分裂有絲分裂密切相關(guān)，與其他細(xì)胞周期相關(guān)的蛋白不同的是它不表達(dá)于D N

6、 A 修復(fù)狀態(tài)的細(xì)胞。nKi67 在G1 后期開始出現(xiàn)，S、G2 期升高，M 期達(dá)高峰，其后迅速降解，在G0 期無表達(dá)，半衰期為1 小時(shí)或更短。意義n乳腺癌中Ki67抗原的陽性率與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有顯著關(guān)系，而Ki67抗原表達(dá)水平與乳腺癌患者生存率的直接關(guān)系國(guó)內(nèi)外罕見報(bào)道。nKi67抗原表達(dá)水平與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是與腫瘤細(xì)胞的增殖活性密切相關(guān)的，Ki67 抗原是與增殖細(xì)胞相關(guān)的核抗原，故Ki67 抗原表達(dá)水平高者易出現(xiàn)乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。nKi67 蛋白的表達(dá)，可反映腫瘤細(xì)胞活性，與惡性腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移和預(yù)后高度相關(guān)E - cadherinn屬于鈣粘蛋白家族中典型的鈣粘

7、蛋白亞族的一員。分布在所有上皮組織中，是建立與保持上皮細(xì)胞極性和細(xì)胞-細(xì)胞間緊密連接的關(guān)鍵分子。nE - cadherin是一分子量約120 kD的跨膜糖蛋白，分為細(xì)胞外區(qū)、跨膜區(qū)、胞漿區(qū)。意義nE -cadherin的表達(dá)與乳腺癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后均有一定的關(guān)系。n乳腺癌起源于乳腺的導(dǎo)管和小葉上皮細(xì)胞， E - cadherin在小葉癌和導(dǎo)管癌中表達(dá)是不同的，大多數(shù)導(dǎo)管癌表達(dá)E - cadherin陽性，而小葉癌E - cadherin表達(dá)很少n用免疫組織化學(xué)方法標(biāo)記E cadherin，用作導(dǎo)管癌和小葉癌的鑒別診斷。表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）n又稱C-erBb-1或Her-1n

8、能引起細(xì)胞的過度分裂、增殖，最后引起細(xì)胞癌變。意義nEGFR陽性率與乳腺癌的組織學(xué)分級(jí)呈顯著相關(guān)性，分化差的乳腺癌EGFR陽性率表達(dá)高，分化好的腫瘤細(xì)胞則較低nEGFR的高表達(dá)提示有較強(qiáng)的侵襲轉(zhuǎn)移力、生存率降低、預(yù)后差。p63基因n是一個(gè)抑癌基因，免疫組化染色主要定位于細(xì)胞核，判斷肌上皮完整性的指標(biāo)np63在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要的作用n可為乳腺癌的早期診斷、及時(shí)治療及預(yù)后判斷提供必要的理論依據(jù)。 BRCA1 ( breast cancer susceptibility gene 1) 是遺傳性乳腺癌和卵巢癌的易感基因，BRCA1基因的結(jié)構(gòu)和功能1990年Hall等研究發(fā)現(xiàn)，染色體1

9、7q21與早期發(fā)生的家族性乳腺癌相關(guān)。 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子VEGF 是一種重要的血管生成因子，又稱血管通透因子( vascular peameability factor ，VPF) ,是近年來發(fā)現(xiàn)的一種多肽類細(xì)胞因子n通過其受體直接刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，并誘導(dǎo)產(chǎn)生蛋白水解酶、間質(zhì)膠原酶和組織因子來促進(jìn)血管形成；n提高血管通透性，促進(jìn)血漿蛋白、纖維蛋白原外滲導(dǎo)致腫瘤間質(zhì)水腫，引起細(xì)胞外基層改變，從而為腫瘤浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移提供適合的基礎(chǔ)。SMA（smooth muscle actin）：n 稱為平滑肌肌動(dòng)蛋白，是可靠的標(biāo)記抗體。從乳腺正常組織、良性病變到原位癌，早期浸潤(rùn)和浸潤(rùn)性癌，它的消失是一逐漸發(fā)

10、展的過程。 COX-2 (cyclooxygenase-2)n COX - 2是前列腺素合成途徑中的關(guān)鍵酶，乳腺癌組織中存在COX-2的表達(dá)。在腫瘤生成的多個(gè)關(guān)鍵步驟，如細(xì)胞抗凋亡、增強(qiáng)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性及血管生成中發(fā)揮重要作用。 COX - 2高表達(dá)與乳腺癌脈管侵犯、淋巴結(jié)侵犯、分期、PR 表達(dá)、CerbB2 表達(dá)及p53表達(dá)具有相關(guān)性。 全球狀況100% 乳腺癌患者絕經(jīng)前26%絕經(jīng)后74%ER46%ER+54%ER 27%ER+73%晚期: 19% 早期: 81%Decision Resources Epidemiology Data & Primary MR.中國(guó)狀況100% 乳腺癌患者

11、絕經(jīng)前60%絕經(jīng)后40%ER50%ER+50%ER 40%ER+60%晚期: 19% 早期: 81%l 流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，中國(guó)婦女發(fā)病的高峰年齡較美國(guó)提前10年，為4049歲， 3039歲年齡組乳腺癌所占比例超過20乳腺癌分子分型乳腺癌術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的分組 低度陰性同時(shí)具備以下5條標(biāo)本中病灶大小（pT）2cm， 且分級(jí)a 1級(jí) 且瘤周脈管未見腫瘤侵犯b 且Her-2/neu 基因沒有過度表達(dá)或擴(kuò)增c 且年齡35歲 （ 且 ER和/或PR表達(dá)）中度以下5條至少具備一條：標(biāo)本中病灶大小（pT）2cm， 或分級(jí) 2-3級(jí) 或有瘤周脈管腫瘤侵犯 Her-2基因過度表達(dá)或擴(kuò)增 或年齡35歲 （或 ER和PR表達(dá)缺失）1-3個(gè)陽性未見Her