胃復(fù)春片對幽門螺桿菌抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究

1、胃復(fù)春片對幽門螺桿菌抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究【關(guān)鍵詞】幽門螺桿菌最近幾年來，臨床醫(yī)治幽門螺桿菌(Helicobacterpylori，Hp)碰到了專門大困難，Hp耐藥的問題日趨嚴(yán)峻，如何選擇更有效的西藥和研究中藥對Hp的醫(yī)治，是擺在消化科醫(yī)生眼前的重要任務(wù)之一。本實(shí)驗(yàn)選用中藥胃復(fù)春片對Hp的體外實(shí)驗(yàn)，旨在探討中藥胃復(fù)春片對幽門螺桿菌可能的抑制作用和臨床意義。1材料與方式實(shí)驗(yàn)材料(1)菌種：Hp標(biāo)準(zhǔn)菌株NCTC1163兩浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)系醫(yī)學(xué)細(xì)菌研究室提供。近期從臨床胃炎或消化性潰瘍患者胃黏膜活檢標(biāo)本中分離了60株Hp，經(jīng)系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)鑒定證明為Hp后保留于-70。(2)藥物：受試藥物胃復(fù)春片由杭

2、州市胡慶余堂藥業(yè)生產(chǎn)，每片重；批號(hào)060618；國藥準(zhǔn)字Z。對照藥麗珠得樂(枸櫞酸鉍鉀顆粒)，由麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字H。將胃復(fù)春片碾成粉末，加滅菌蒸儲(chǔ)水4c浸泡24h,濾除殘?jiān)?00c水溫15min滅菌。枸椽酸韌鉀顆粒先用滅菌蒸儲(chǔ)水溶解，然后區(qū)m濾膜過濾除菌。上述實(shí)驗(yàn)藥和對照藥再用滅菌蒸餾水配制成所需濃度的溶液。實(shí)驗(yàn)方式(1) 細(xì)菌培育基：采納含5%脫纖維羊血的哥倫比亞瓊脂(法國梅麗埃公司)，作為分離和培育Hp的培育基，同時(shí)該培育基也作為藥敏實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)培育基。脫纖維羊血購自杭州康裕貿(mào)易，Hp培育時(shí)環(huán)境氣體條件是5%5、10%CO級85%N2(杭州特種氣體廠提供)。(2) 藥敏實(shí)驗(yàn)

3、培育基：將上述哥倫比亞培育基加熱充分溶解，冷卻至60左右時(shí)加入終濃度為5%脫纖維羊血，再別離加入不同稀釋度的上述藥物溶液，使培育基所含藥物的濃度別離為、mg/ml，傾注平板，37孵育24h檢菌合格后置4備用。(3)藥物最低抑菌濃度(MIC)測定：采納二倍平皿稀釋法。刮取新鮮培育的Hp菌苔，用滅菌生理鹽水充分混勻，用麥?zhǔn)媳葷岱ㄅ渲瞥?X107/ml的菌液。取各菌液5膜點(diǎn)種于含藥物的平板上，37c培育72h后觀看結(jié)果。以50%口90%Hp菌株的生長被抑制為該藥物的50%ft低抑菌濃度(MIC5。和90%最低抑菌濃度(MIC90)。實(shí)驗(yàn)中同時(shí)設(shè)置不加任何藥物、正常培育的對照。2 結(jié)果正常對照中60株

4、Hp均生長良好。受試藥胃復(fù)春片和對照藥麗珠得樂對60株Hp臨床分離菌株和標(biāo)準(zhǔn)菌株NCTC11637勺MIC測定結(jié)果見表1。表1胃復(fù)春片和麗珠得樂對60株Hp及NCTC11637勺MIC測定結(jié)果（略）3 討論Hp是一種微需氧的革蘭陰性螺旋形細(xì)菌，要緊棲居于人胃黏膜的粘液層，被以為是慢性胃炎、消化性潰瘍的重要致病因素，并與胃癌的發(fā)生也有必然關(guān)系。新近研究發(fā)覺Hp感染與胃腸外疾病如心血管疾病等也有必然相關(guān)性。因此，Hp感染及其相關(guān)疾病已成為一個(gè)嚴(yán)峻的問題。Hp在人群中感染率約為60%-70%慢性胃炎或消化性潰瘍患者中可高達(dá)70唳90溢右。人胃是Hp感染的要緊棲居場所。隨著對抗Hp感染醫(yī)治的深切，發(fā)覺

5、Hp耐藥的問題日趨嚴(yán)峻。據(jù)國外資料報(bào)導(dǎo)，Hp對克拉霉素的耐藥率在3%14%13,對甲硝噪的耐藥率在20%-40%4,某些進(jìn)展中國家可高達(dá)50%-80%5。國內(nèi)資料顯示，克拉霉素的耐藥率為%25%69,且有上升的趨勢。中成藥胃復(fù)春片是純中藥制劑，臨床普遍用于慢性淺表性胃炎、萎縮性胃炎、腸腺化生、腸上皮不典型增生、功能性消化不良等癥。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明，胃復(fù)春片具有必然的體外抑制Hp作用，盡管達(dá)到MIC90所需的藥物濃度是麗珠得樂的4倍。在先前作者的研究也說明，某些藥物雖無具有直接抑制Hp的成份，但確有抑制Hp的作用10。國內(nèi)應(yīng)用中藥對Hp醫(yī)治進(jìn)行了許多研究，結(jié)果發(fā)覺確有3040味中藥或6個(gè)以上復(fù)方有

6、不同程度的抗Hp作用。某些中藥及非抗生素類非鉍劑類西藥對Hp的抑菌作用，推測除直接作用外可能與其改變了Hp賴以生存的局部胃內(nèi)環(huán)境有關(guān)。胃復(fù)春可能亦有此作用。樨此作者以為抗生素耐藥現(xiàn)象日趨嚴(yán)峻的今天，不斷開發(fā)醫(yī)治Hp的新藥，包括中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)治，是幸免耐藥菌株產(chǎn)生的有效方式，中藥及非抗生素類非鉍劑類西藥作為抗Hp的二線或后續(xù)醫(yī)治的作用，值得臨床進(jìn)一步研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1 FranzinL,PennazioM,CaboliD,etal.ClarithromycinandamoxicillinsusceptibilityofHelicobacterpyloristrainsisolatedfromad

7、ultpatientswithgastricorduodenalulcerinItaly.CurrMicrobiol,2000,40:96100.2 TaylorDE,JiangQ,FedorakRN,etal.AntibioticsusceptibilitiesofHelicobacterpyloristrainsisolatedintheProvinceofAlberta.CanJGastroenterol,1998,12:295298.3 SavarinoV,ZentilinP,PivariM,etal.Theimpactofantibioticresistanceontheeffica

8、cyofthethree7-dayregimensagainstHelicobacterpylori.AlimentPharmacolTher,2002,14:893900.4 PillottoA,RassuM,LeandroG,etal.PrevalenceofHelicobacterpyloriresistancetoantibioticsinNortheastItaly:amulticentrestudy.GISU.InterdisciplinaryGroupfortheStudyofUlcer.DigLiverDis,2000,32:763768.5 TorresJ,Camorlinga-PonceM,Perez-PerezG,etal.IncreasingmultidrugresistanceinHelicobacterpyloristrainsisolatedfromchildrenandadultsinMexico.JClinMicrobiol,2001,39:26772680.6 張曉光，胡品津，陳為，等.廣東地域幽門螺桿菌耐藥的調(diào)查.胃腸病學(xué)，2001，6(1)：A66.7 成虹，胡伏蓮.北京地域幽門螺桿菌耐藥的臨床研究.胃腸病學(xué)，2001，6(1)：A31.8 史彤，劉文忠，蕭樹東，等.上海地域幽門螺桿菌對抗生素耐藥率的變遷