檢驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)程

1、檢 驗(yàn) 技 術(shù) 操 作 規(guī) 范目錄第一節(jié) 全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀操作規(guī)程第二節(jié) 尿液分析儀使用規(guī)程第三節(jié) 自動(dòng)凝血儀操作規(guī)程第四節(jié) 半自動(dòng)生化分析儀操作規(guī)程第五節(jié) 血常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程第六節(jié) 尿常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程第七節(jié) 肝功能檢驗(yàn)操作規(guī)程第八節(jié) 腎功能檢驗(yàn)操作規(guī)程第九節(jié) 血脂檢驗(yàn)操作規(guī)程第十節(jié) 血液葡萄糖測(cè)定技術(shù)操作規(guī)程第十一節(jié) 凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)操作規(guī)程第十二節(jié) AB0 血型正、反血型鑒定技術(shù)操作規(guī)程第十三節(jié) 交叉配血試驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)程第一節(jié) 全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀操作規(guī)程1、樣品分析前準(zhǔn)備1.1 開(kāi)機(jī)前的檢查、準(zhǔn)備在開(kāi)啟分析儀電源之前，操作者須按以下要求進(jìn)行檢查:1.1.1 檢查稀釋液、清洗液、溶血素是否

2、充足，有無(wú)過(guò)期; 試劑管路是否彎折，連接是否可靠。1.1.2 電源線是否正確連接。1.1.3 廢液桶是否清空。1.1.4 UPS電是否足夠，打印紙安裝是否正確，是否足夠。1.1.5 確保鍵盤正確連接到鍵盤接口上。1.2.開(kāi)機(jī)打開(kāi)分析儀后面的電源開(kāi)關(guān)，電源指示燈亮，屏幕上顯示"Initializing”.分析儀進(jìn)行初始化，整個(gè)初始化過(guò)程持續(xù)約47分鐘。1.2.3 初始化過(guò)程結(jié)束后，系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。1.3 動(dòng)物類型選擇1.3.1 按菜單 鍵，移動(dòng)光標(biāo)，選擇“動(dòng)物” ，按確認(rèn)進(jìn)入“動(dòng)物”界面。1.3.2 操作者根據(jù)測(cè)量的動(dòng)物類型，選擇需要分析的動(dòng)物類型。2.1.1 按菜單 鍵，選

3、擇“計(jì)數(shù)” ，進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。再按 模式鍵，將當(dāng)前模式設(shè)置為 “全血”模式。2.1.2 確認(rèn)狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“就緒” ，工作模式為“全血” 。2.1.3 將準(zhǔn)備好的全血樣本放到采樣針下， 使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一 定距離。2.1.4 按計(jì)數(shù)鍵，啟動(dòng)樣本分析過(guò)程。此時(shí)，狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“運(yùn)行”。采樣針自動(dòng)吸取13ul的樣本后蜂鳴器響，在采樣針抬起后，移開(kāi)樣本。分析完成后，按F4鍵進(jìn)入“樣本信息編輯”界面。按F9 鍵進(jìn)入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下，按F8鍵在全拼和五筆輸入法之間進(jìn)行切換，輸入樣本信息，輸入完成后，點(diǎn)擊“確認(rèn)”，保存輸入的內(nèi)容并返回到“計(jì)數(shù)”界面。2.1.7

4、 按打印 鍵打印樣本分析報(bào)告。2.1.8 按照此操作過(guò)程進(jìn)行其余樣本的分析。2.2 預(yù)稀釋樣本分析2.2.1 按菜單 鍵，選擇“計(jì)數(shù)” ，進(jìn)入“計(jì)數(shù)”界面。再按 模式鍵，將當(dāng)前模式設(shè)置為 “預(yù)稀釋”模式。按 稀釋鍵，屏幕彈出“加稀釋液”對(duì)話框，取一個(gè)干凈的樣本杯放在采樣針下，按計(jì)數(shù)鍵，微傾斜樣本杯一定角度讓分析儀自動(dòng)排出的1.6ml稀釋液沿管壁流入樣本杯中，避免產(chǎn)生氣泡或?yàn)R出。2.2.2 加完稀釋液后，按 確認(rèn)鍵，“加稀釋液”對(duì)話框關(guān)閉，分析儀自動(dòng)清洗采樣針。2.2.3 采集 20ul 血液迅速注入盛有稀釋液的樣本杯中混勻。2.2.4 確認(rèn)狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“就緒” ，工作模式為“預(yù)稀釋”

5、 。2.2.5 將準(zhǔn)備好的預(yù)稀釋樣本放到采樣針下， 使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持 一定距離。2.2.6 按計(jì)數(shù)鍵，啟動(dòng)樣本分析過(guò)程。此時(shí)，狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“運(yùn)行” 。2.2.7 采樣針自動(dòng)吸取 0.7ml 的樣本后蜂鳴器響，在采樣針抬起后，移開(kāi)樣本。228分析完成后，按F4鍵進(jìn)入“樣本信息編輯”界面。按F9鍵進(jìn)入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下，按F8鍵在全拼和五筆輸入法之間進(jìn)行切換，輸入樣本信息，輸入完成后，點(diǎn)擊“確認(rèn)”，保存輸入的內(nèi)容并返回到“計(jì)數(shù)”界面。按打印 鍵打印樣本分析報(bào)告。按照此操作過(guò)程進(jìn)行其余樣本的分析。3、樣品分析結(jié)束后3.1 按菜單鍵，彈出系統(tǒng)菜單，選擇“關(guān)機(jī)”。3.

6、2界面彈出“關(guān)機(jī)”對(duì)話框，點(diǎn)擊“確認(rèn)”進(jìn)入關(guān)機(jī)界面。3.3 將 E-Z 清洗液放到采樣針下，按計(jì)數(shù)鍵，采樣針將自動(dòng)吸取 E-Z 清洗液，執(zhí)行液路 和計(jì)數(shù)池的清洗。3.4 按照界面提示信息，將 E-Z 清洗液放到采樣針下，按計(jì)數(shù)鍵，采樣針將再次自動(dòng)吸 取 E-Z 清洗液，執(zhí)行液路和計(jì)數(shù)池的清洗。3.5 執(zhí)行完成后，界面提示“請(qǐng)關(guān)閉電源”是，關(guān)閉分析儀的電源開(kāi)關(guān)。3.6 關(guān)閉電源后檢查分析儀是否有滲漏，并將血液分析儀的周邊環(huán)境打掃干凈。第二節(jié) 尿液分析儀使用規(guī)程本測(cè)試儀是一項(xiàng)精密儀器，為了更好的維護(hù)和使用本儀器必須遵照以下操作規(guī)程。一、操作步驟1. 尿液分析儀的通訊電纜與電腦背面的通訊端口相連，接

7、通電源，先打開(kāi)電腦，再打開(kāi)分析儀；儀器啟動(dòng)，風(fēng)扇轉(zhuǎn)動(dòng)，推進(jìn)器移動(dòng)，屏幕顯示“系統(tǒng)正在測(cè)試”，此時(shí)系統(tǒng)正在自檢，顯示屏顯示主菜單，工作臺(tái)檢條區(qū)有紅色光交替閃爍，用戶可以開(kāi)始測(cè)試2. 點(diǎn)擊電腦桌面尿液分析軟件；3. 將試紙條的試劑區(qū)完全浸入新鮮的、充分混合的、未離心的樣本中立即取出，將試 紙條的側(cè)邊沿尿樣容器的管壁刮去多余尿液；4. 將蘸有尿液的試紙平放在工作臺(tái)的檢條區(qū)，確保試紙同工作臺(tái)前壁接觸；5. 儀器檢測(cè)到試紙存在后，推進(jìn)器將試紙推到測(cè)試區(qū)進(jìn)行測(cè)試；6. 當(dāng)推進(jìn)器退回原位，放下一條試紙，這樣實(shí)現(xiàn)連續(xù)測(cè)試；7. 當(dāng)工作臺(tái)上所有的試紙條測(cè)試完畢，打印結(jié)果輸出結(jié)束后，按菜單鍵進(jìn)入儀器設(shè)置，將電源開(kāi)

8、關(guān)撥到 “斷（O）”位置，關(guān)閉儀器電源。二、儀器維護(hù)1. 不要在儀器通電狀態(tài)下清潔儀器；2. 不要用汽油、油漆稀釋劑、苯化合物等可能腐蝕儀器的有機(jī)溶劑擦拭儀器；3. 不要用水清洗液晶屏，不要用任何會(huì)擦傷工作臺(tái)和白基準(zhǔn)的物質(zhì)擦拭工作臺(tái)；4. 不要用任何溶劑清潔白基準(zhǔn)，如果白基準(zhǔn)有明顯劃痕或損壞，請(qǐng)與供應(yīng)商聯(lián)系；5. 用柔軟干布或沾有溫和去污劑的軟布擦拭儀器，保持儀器清潔；6. 用柔軟、無(wú)磨損的布擦拭液晶屏；7. 為使儀器正常運(yùn)行并提供準(zhǔn)確的測(cè)試結(jié)果，必須定期從儀器中取下推進(jìn)器、工作臺(tái)、 步進(jìn)板、用清水沖洗，用軟布依次擦干保持工作臺(tái)的清潔。三、注意事項(xiàng)1. 測(cè)試時(shí)不要將儀器放置在陽(yáng)光直射的地方 ,

9、以免影響測(cè)試精度；2. 請(qǐng)?jiān)跍y(cè)試前核對(duì)尿液分析試紙型號(hào)，避免因使用的尿液分析試紙型號(hào)不正確而導(dǎo)致 測(cè)試結(jié)果錯(cuò)誤；3. 請(qǐng)勿使用過(guò)有效期或變質(zhì)的尿液分析試紙；4. 尿樣本中血的濃度高時(shí)，可影響測(cè)試的準(zhǔn)確性，儀器能夠識(shí)別出高濃度血尿并打印出 “結(jié)果無(wú)效”的提示；5. 必須在推進(jìn)器動(dòng)作前，將待測(cè)試紙條放好；6. 在放置試紙條時(shí)應(yīng)確保試紙條前端接觸工作臺(tái)前壁；7. 如果儀器測(cè)試頭下發(fā)生故障導(dǎo)致紙條運(yùn)行受阻。關(guān)掉儀器，拉出工作臺(tái)，取出受阻 試紙條后，重新安裝工作臺(tái)。開(kāi)機(jī)自檢后，對(duì)未得出結(jié)果的樣本重測(cè)。第三節(jié) 自動(dòng)凝血儀操作規(guī)程1、儀器的常規(guī)操作1.1打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)前的檢查。檢查廢液瓶及洗液瓶。 如果洗液瓶

10、中洗液的液面過(guò)低， 請(qǐng)用蒸餾水或去離子水將罐充滿。 清空廢液瓶。管道連接 檢查各種管線的連接。確保沒(méi)有管子脫落或扭結(jié)，電源線被安全的插入交流 插座。確保打印機(jī)中有足夠的紙張以供打印當(dāng)天所需處理的所有樣本結(jié)果。補(bǔ)充反應(yīng)杯 丟棄用過(guò)的反應(yīng)杯，加入適量的干凈的反應(yīng)杯。1.2打開(kāi)電源開(kāi)機(jī)順序：打印機(jī) T壓力單元T電源單元和主單元（右側(cè)） 。 打開(kāi)電源后，儀器自動(dòng)進(jìn)入自檢。將病人樣本，質(zhì)控與試劑分別按要求準(zhǔn)備就緒，進(jìn)入分析過(guò)程：試劑準(zhǔn)備 t Set Reage nt宀輸入確認(rèn)試劑體積宀補(bǔ)充反應(yīng)杯 宀安放樣本架1.3 樣本分析 :Work List t ID No.Entry t 輸入樣本號(hào) t ENTE

11、R t 選擇所需檢測(cè)的項(xiàng)目 （變 為O ），確認(rèn)所有的設(shè)置結(jié)束后t ENTER t按屏幕右上方"Start”鍵，執(zhí)行分析。分析完畢 ,儀器進(jìn)入準(zhǔn)備狀態(tài)。1.4關(guān)機(jī)前的工作每日清潔所有樣本針和試劑針：在主菜單屏上按下【Rinse probe鍵。將出現(xiàn)清洗針屏。按下【Excute】鍵。1.5關(guān)機(jī)關(guān)閉電源。2. 儀器保養(yǎng)2.1每日保養(yǎng)清洗樣品針每次做完試驗(yàn)都必須清洗樣品針，主要是預(yù)防堵針，執(zhí)行Rinse Probep Excute清空垃圾箱2.2清空廢液查看儀器后面防逆流瓶 Trap Chamber有無(wú)水，防止因?yàn)橛兴鴮?dǎo)致真空泵不能抽真空 在洗液瓶中注蒸餾水， 最高不要超過(guò)上面的凹槽，

12、防止因水過(guò)滿， 工作時(shí)水回流到壓力泵和 壓力傳感器上導(dǎo)致人為破壞。2.3每周保養(yǎng)做一次管路清潔，執(zhí)行 Special Operate p Rinse&Prepare 清潔儀器2.4每半年保養(yǎng) 清洗洗液瓶?jī)?nèi)部，清洗洗液瓶出水管上的過(guò)濾網(wǎng)一次。2.5每三或六個(gè)月保養(yǎng)清潔傳動(dòng)滑軌（X軸、Y軸）并上潤(rùn)滑油。防止因積塵而使樣品針運(yùn)行不到位，向下扎錯(cuò) 位置造成樣品針彎曲或斷裂第四節(jié) 半自動(dòng)生化分析儀操作規(guī)程【操作規(guī)程】1. 開(kāi)機(jī)之前檢查電源線是否連接無(wú)誤，電源要求接地良好 ;連接打印機(jī)電源線，接通打印 機(jī)電源開(kāi)關(guān) ;將廢液管插入廢液容器內(nèi) ;接通顯示器開(kāi)關(guān)及主機(jī)背部電源開(kāi)關(guān)。2開(kāi)機(jī)p自檢后p鍵入

13、En ter，確定已設(shè)定測(cè)試參數(shù)宀鍵入 En ter，進(jìn)入編制工作表宀在 設(shè)置欄，開(kāi)啟聯(lián)機(jī)打印p儀器預(yù)熱 20分鐘后，調(diào)用已設(shè)定測(cè)試項(xiàng)目進(jìn)行樣品測(cè)定p打印結(jié) 果p清洗儀器p關(guān)機(jī)。3吸液口由不銹鋼保護(hù)管和鋼管內(nèi)聚四氟乙烯吸液管組成，應(yīng)注意保護(hù)，不要碰彎。4切忌在帶電狀態(tài)下連接任何連接口?！緝x器的保養(yǎng)與維護(hù)】1日常保養(yǎng)工作主要是清洗流動(dòng)比色皿，每天工作結(jié)束后，要用蒸餾水清洗。具體方法 如下：將吸液管插入蒸餾水中，向上扳動(dòng)吸液開(kāi)關(guān)，反復(fù)沖洗流動(dòng)比色皿，直到蒸餾水的吸 光度值正常為止。2每周要用專門的清洗劑清洗一次流動(dòng)比色皿，清洗時(shí)，讓清洗劑停留在比色皿中約半 小時(shí)，然后排掉，再用蒸餾水沖洗干凈，最后

14、注入蒸餾水。3不使用儀器時(shí)，流動(dòng)比色皿內(nèi)一定要保證充滿蒸餾水。4更換打印機(jī)色帶時(shí)，嚴(yán)格遵照打印機(jī)操作手冊(cè)，避免不規(guī)范操作。5光源燈更換時(shí)一定要先切斷儀器的電源，手不可觸摸光源燈的玻璃部分，萬(wàn)一光源燈 的玻璃部分弄臟了，可用無(wú)水乙醇將污物除去。6更換的蠕動(dòng)泵管尺寸材料應(yīng)與原泵管一致，如不一致則要重新調(diào)整吸液量。第五節(jié) 血常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程【標(biāo)本】 抗凝靜脈血（有些儀器也可用末梢血） ?！痉椒ā?血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀測(cè)定法?！驹噭?血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀配套試劑?！静僮鳌?詳見(jiàn)血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀使用手冊(cè)?！靖阶ⅰ?. 血常規(guī)包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞比積、血小板 計(jì)數(shù)等項(xiàng)目。

15、這些項(xiàng)目亦有相應(yīng)的手工方法，詳見(jiàn)有關(guān)資料。2. 半自動(dòng)及全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀從設(shè)計(jì)上均要求用抗凝靜脈血。其優(yōu)點(diǎn)為：（1）靜脈血能正確地反映病人實(shí)際情況，重復(fù)性好；（2）利于延長(zhǎng)儀器的使用壽命；（3）解決了采血盤的交叉感染問(wèn)題等。3. 血細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)用 EDTA K2 :為抗凝劑（EDTA 心 2出0 1.52.2mg可抗凝1ml 血）。4. 貯血容器應(yīng)選用有蓋塑料管?？鼓杉笤谑覝刂匈A存應(yīng)不超過(guò)6h;如需制作血涂片應(yīng)在 2h 內(nèi)完成。5. 測(cè)定前必須將 EDTA K2抗凝血充分混勻。6. 血細(xì)胞分析儀測(cè)定最適溫度為1822C,低于15C或高于30C，均可使細(xì)胞體積發(fā)生改變，影響各參數(shù)的結(jié)果。

16、7. 血細(xì)胞分析儀用于白細(xì)胞分類只能當(dāng)作一種過(guò)篩手段，當(dāng)白細(xì)胞、 紅細(xì)胞、 血紅蛋白和血小板的任何一項(xiàng)有明顯升高或降低；白細(xì)胞分類出現(xiàn)異常結(jié)果（中間細(xì)胞群百分率8.0%）;紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的任何一個(gè)直方圖出現(xiàn)異常圖形等情況，須用顯微鏡檢查及分類。第六節(jié) 尿常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程【標(biāo)本】 新鮮尿液?！痉椒ā?化學(xué)試帶法?！驹噭扛餍吞?hào)尿液化學(xué)分析儀配套試帶?！静僮鳌吭斠?jiàn)尿液化學(xué)分析儀使用手冊(cè)。【附注】1.尿常規(guī)檢查使用尿液化學(xué)分析儀，目前能進(jìn)行810項(xiàng)檢測(cè)（PH、蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽素原、亞硝酸鹽、比重、白細(xì)胞）。這些項(xiàng)目亦有相應(yīng)的手工 方法，詳見(jiàn)有關(guān)資料。2. 必須了解所用

17、試帶各膜塊注意事項(xiàng)、藥物干擾。3. 要注意尿液化學(xué)分析儀測(cè)定結(jié)果與手工法的差異，必要時(shí)用手工法復(fù)查。4. 尿液化學(xué)分析儀檢測(cè)僅是一個(gè)過(guò)篩手段， 當(dāng)?shù)鞍住?隱血、 白細(xì)胞等出現(xiàn)異常結(jié)果 （如 尿蛋白“”或以上）時(shí)，應(yīng)進(jìn)行鏡檢。5. 尿液顏色、透明度等一般性狀異常時(shí)也應(yīng)報(bào)告。第七節(jié) 肝功能檢驗(yàn)操作規(guī)程血清總膽紅素（ TBIL ）和結(jié)合膽紅素（ DBIL ）測(cè)定改良 JG 法【試劑】 參照書刊文獻(xiàn)（如全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第二版）自配，配制標(biāo)準(zhǔn)液的膽紅素應(yīng)符合如下標(biāo)準(zhǔn)，純膽紅素的氯仿溶液在25C當(dāng)光徑1.000± 0.001Cm波長(zhǎng)453nm條件下其摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在 60700±

18、1600范圍內(nèi)， 偶氮膽紅素的摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在74380± 866范圍內(nèi)， 配制標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋劑須含白蛋白， 可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白蛋白。 標(biāo)準(zhǔn)液應(yīng)貯 於棕色瓶中避光保存，在市售試劑中以含堿性酒石酸的靈敏度特異性高?！静僮鳌堪丛噭┖姓f(shuō)明書或相應(yīng)書刊文獻(xiàn)規(guī)程手工操作，比色測(cè)定，波長(zhǎng)600n m.制作準(zhǔn)曲線。血樣測(cè)定，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求 TBIL 及 DBIL 的含量以 umo1/L 報(bào)告。也可按廠家提供的試劑及儀器使用的說(shuō)明書的要求將相應(yīng)的程序及參數(shù)設(shè)入，用自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。【標(biāo) 本 】 血清，空腹血為宜，脂血、脂溶性色素及嚴(yán)重溶血干擾此測(cè)定，暫不能測(cè)定的標(biāo)本應(yīng)避光保存，室溫

19、可穩(wěn)定 8h, 28 C可保存48h。含疊氮鈉作防腐劑的質(zhì)控血清不宜用此法測(cè)定膽紅素。膽紅素氧化酶（ BOD ）法【試劑】市售成套試劑。BOD試劑復(fù)溶后28 C可保存一周?！静僮鳌堪磸S家提供的試劑及儀器說(shuō)明書要求設(shè)置程序輸入?yún)?shù)用自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。波長(zhǎng)450 或 460nm。【標(biāo) 本 】血清要求與改良 J 一 G 法相似。二甲亞楓（ DMSO ）法【試劑】 市售現(xiàn)成試劑。【操作】按試劑盒說(shuō)明書手工操作比色測(cè)定或用自動(dòng)生化儀測(cè)定。波長(zhǎng)560nm?！緲?biāo)本】 血清、輕度脂血，溶血標(biāo)本對(duì)結(jié)果無(wú)明顯影響、重度脂血、溶血標(biāo)本須作標(biāo)本空白進(jìn)行 較正。血氨測(cè)定【方法】酶兩點(diǎn)法。【試劑】 市售成套試劑。【操作

20、】 按試劑及儀器使用說(shuō)明書要求，設(shè)入相應(yīng)的程序及各項(xiàng)參數(shù)、用自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。 波長(zhǎng) 340nm?！緲?biāo)本】EDTA.Na 2 抗凝血漿。靜脈采血后與 EDTA.Na 2混勻，立即置冰水中盡快分離出血漿， 加塞置24 C保存，在23h內(nèi)分析，-20C可穩(wěn)定24h。溶血標(biāo)本忌用。第八節(jié) 腎功能檢驗(yàn)操作規(guī)程尿素氮1. 檢測(cè)目的：檢測(cè)血清、 血漿或尿液中尿素的含量， 為臨床對(duì)相關(guān)疾病的診斷、 觀察疾病的變化及治療 效果，以及對(duì)健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測(cè)提供重要的參考價(jià)值。2. 標(biāo)本要求：2.1病人準(zhǔn)備：空腹 12小時(shí)。2.2 標(biāo)本類型：血清、肝素化的血漿或 24 小時(shí)尿。3. 設(shè)備和試劑：3.1儀器

21、設(shè)備：邁瑞半自動(dòng)生化分析儀3.2 試劑材料：試劑3.3 試劑的貯存：3.3.1 28C密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。開(kāi)蓋上機(jī)28C避光穩(wěn)定 30天。變質(zhì)指示：試劑混濁變色或空白吸光度值<1.000時(shí)，不能繼續(xù)使用。3.4 注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中 或沾染到皮膚上請(qǐng)立即用清水徹底沖洗，必要時(shí)到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等 金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物，故廢棄時(shí)請(qǐng)充分稀釋廢液和沖洗排水管。3.5 試劑準(zhǔn)備：即開(kāi)即用的，無(wú)需特殊準(zhǔn)備。4. 操作步驟：見(jiàn)生化分析儀操作流程。5. 質(zhì)量控制：5.1 質(zhì)控物： RANDOX 多項(xiàng)人基質(zhì)血清5.2 質(zhì)

22、控措施：室內(nèi)質(zhì)控：每日日常工作前進(jìn)行。室間質(zhì)控：參加北京臨床檢驗(yàn)中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評(píng)。6. 干擾因素：總膽紅素w 40mg/dL，血紅蛋白w 450mg/dL，抗壞血酸w 400mg/dL對(duì)本法無(wú)干擾。7. 參考區(qū)間及可報(bào)區(qū)間：7.1參考范圍：血清/血漿2.868.20mmol/L24小時(shí)尿 1535g/24h7.2可報(bào)范圍：0.0035.00mmol/L。樣品Urea含量超過(guò)線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做，結(jié) 果乘以稀釋倍數(shù)。8. 異常結(jié)果處理：結(jié)果異常、與臨床診斷不符，應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。肌酐1. 檢測(cè)目的：檢測(cè)血清、 血漿或尿液中肌酐的含量， 為臨床對(duì)相關(guān)疾病的診斷、 觀察疾病的變化及治療

23、 效果，以及對(duì)健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測(cè)提供重要的參考價(jià)值。3. 標(biāo)本要求：3.1 病人準(zhǔn)備：空腹 12小時(shí)。3.2標(biāo)本類型：血清、肝素化的血漿或尿液。4. 設(shè)備和試劑：4.1 儀器設(shè)備：邁瑞半自動(dòng)生化分析儀4.2試劑材料：試劑4 .3試劑的貯存：4.3.1 28C密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。開(kāi)蓋上機(jī)28C避光穩(wěn)定 30天。變質(zhì)指示：試劑混濁變色或空白吸光度值 >0.050時(shí)，不能繼續(xù)使用。4.4 注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中 或沾染到皮膚上請(qǐng)立即用清水徹底沖洗，必要時(shí)到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等 金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物，故廢棄時(shí)

24、請(qǐng)充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5 試劑準(zhǔn)備：即開(kāi)即用的，無(wú)需特殊準(zhǔn)備。5. 操作步驟：見(jiàn)半自動(dòng)生化分析儀操作流程。6. 質(zhì)量控制：6.1 質(zhì)控物： RANDOX 多項(xiàng)人基質(zhì)血清6 .2質(zhì)控措施：6.2.1 室內(nèi)質(zhì)控：每日日常工作前進(jìn)行。室間質(zhì)控：參加臨床化學(xué)室間質(zhì)評(píng)。7. 干擾因素：直接膽紅素w 257 pmol/L，血紅蛋白w 0.5g/L ,抗壞血酸w 3mmol/L,甘油三酯w 15.0mmol/L,肝素w 50KU/L，枸櫞酸鈉W 10g/L對(duì)本法無(wú)干擾。8. 參考區(qū)間及可報(bào)區(qū)間：8.1參考范圍：血清/血漿53.0123.0pmol/L （男性）44.0106.0pmol/L （女性

25、）首次晨尿153015320 gol/L24 小時(shí)尿 6.6 15.0mmol/24h8.2可報(bào)范圍：0.08840.0 gol/L。樣品Crea含量超過(guò)線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做，結(jié) 果乘以稀釋倍數(shù)。9. 異常結(jié)果處理：結(jié)果異常、與臨床診斷不符，應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。9. 危急值及處理方法：>177 gol/L。及時(shí)與臨床聯(lián)絡(luò)。10. 實(shí)驗(yàn)室解釋：增高：嚴(yán)重腎功能不全、各種腎障礙、肢端肥大癥等。降低：營(yíng)養(yǎng)不良、多尿等。第九節(jié) 血脂檢驗(yàn)操作規(guī)程標(biāo)本采集與處理1受檢者抽血前二周應(yīng)保持平衡的飲食習(xí)慣，近期體重穩(wěn)定無(wú)外傷， 手術(shù)等意外情況。并注意如有使用降糖、降脂、降壓、避孕藥，B-受體阻滯劑

26、，免疫抑制劑，激素藥物等，則應(yīng)根據(jù)所用藥物特性停藥數(shù)天或數(shù)周后再作血液脂類檢測(cè)。2空腹抽血， TG ，脂蛋白，載脂蛋白測(cè)定應(yīng)至少禁食 12 小時(shí)（僅作膽固醇測(cè)定不必 強(qiáng)求空腹） 24 小時(shí)內(nèi)不作劇烈運(yùn)動(dòng)。抽血前不要久站立。至少應(yīng)靜坐5 分鐘。抽血時(shí)止血帶使用不可超過(guò) 1 分鐘。3標(biāo)本用血清，也可用肝素或 EDTA.Na 2抗凝之血漿。 EDTA.Na 2 濃度不宜太高。4. 血標(biāo)本室溫放置不得超過(guò) 3h,放置3045分鐘后應(yīng)即時(shí)分離出血清 （漿）蓋封於4C 冰箱中可穩(wěn)定至少 4天，如需長(zhǎng)期保存，應(yīng)於-70C中冰凍存放，不可反復(fù)凍融。血清總膽固醇（TC）測(cè)定酶法（ CHODPAP 法）【試劑】

27、市售現(xiàn)成試劑?！静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說(shuō)明書要求設(shè)定程序， 輸入?yún)?shù)用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀測(cè)定 （速 率法）終點(diǎn)法可手工操作，用普通分光光度計(jì)比色測(cè)定。波長(zhǎng)500nm或520nm。【 標(biāo) 本 】 血清（漿）參看本節(jié)的標(biāo)本采集與處理?！靖阶ⅰ勘痉橹腥A醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)推薦的 TC 測(cè)定常規(guī)方法（中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1995、 18：185）。膽固醇標(biāo)準(zhǔn)液以定值參考血清為宜，而不宜用 Chol 的水溶液作標(biāo)準(zhǔn)。 Chol 定值質(zhì)控血 清亦不應(yīng)用作標(biāo)準(zhǔn)液。主要技術(shù)指標(biāo)：終點(diǎn)法批內(nèi)CV V 1.5%、批間CV < 2.5%。靈敏度：顯色劑用酚時(shí)，TC5.2mmo1/L（200mg/dl）時(shí)的吸光度

28、（A 500nm）約 0.300.35,故 A 500nm=0.005 時(shí) TC 濃度 約為 0.08mmo1/L（3mg/dL） 。測(cè)定范圍：當(dāng)血清與試劑用量之比為 1:100時(shí)其測(cè)定的上界為 13mmo1/L（500ng/dL） 。血清甘油三酯（ TG ）測(cè)定酶法（ GPOPAP 法）【試劑】 市售現(xiàn)成試劑。有兩種。一步酶法單一試劑，二步酶法雙試劑。標(biāo)準(zhǔn)液（參考物）一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液，也可用甘油，但甘油不適用於二 步酶法?！静僮鳌坑米詣?dòng)或半自動(dòng)生化分析儀測(cè)定， 終點(diǎn)500nm。二步酶法為中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)的推薦方法按試劑及儀器使用說(shuō)明書要求設(shè)定程序和參數(shù)， 法可用普通分光光度計(jì)手

29、工操作，比色測(cè)定。波長(zhǎng)【標(biāo)本】 血清（漿）參看本節(jié)標(biāo)本采集與處理?！靖阶ⅰ勘痉ㄔ诓僮鞒绦蛏戏譃橐徊矫阜ㄅc二步酶法，（中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志 1995、 18： 249）?，F(xiàn)階段允許二法并存，要求逐步過(guò)渡到統(tǒng)一采用二步 酶法， 在方法尚未統(tǒng)一前， 實(shí)驗(yàn)室報(bào)告 TG 測(cè)定結(jié)果時(shí)應(yīng)注明 “除 FG 值”或“未除 FG 值”。主要枝術(shù)指標(biāo)：酶試劑用緩沖液配制后，2025 C應(yīng)穩(wěn)定1天，4 C可穩(wěn)定37天，試劑空白為 A500nm< 0.05;顯色后穩(wěn)定30min :測(cè)定上界 11.3mmo1/L（100mg/dL）;精密度：批內(nèi) CV< 3%,批間 CV< 5%:靈敏度：2mmo1/L T

30、G A 500nm >0.2。血清高密度脂蛋白膽固醇 （HDL-C） 測(cè)定磷鎢酸鎂沉淀法【試劑】市售成套試劑,沉淀劑,酶試劑（同 TG 測(cè)定）。【操作】 按試劑盒說(shuō)明書操作。1. 沉淀含apoB的脂蛋白。2測(cè)定上清液（只含 HDL ）的膽固醇含量（方法同酶法 TC 測(cè)定）。 【標(biāo)本】血清（漿）。硫酸葡聚糖一鎂沉淀法【試劑】市售成套試劑：總 HDL 試劑, HDL3 試劑,酶試劑（同 TC 試劑）?！静僮鳌?按試劑說(shuō)明書操作： 1沉淀含 apoB 的脂蛋白，（總 HDL 試劑）；2. 沉淀含apoB的脂蛋白及 HDL2 （HDL3試齊U）;3測(cè)定總 HDLC 及 HDL3C （同酶法 TC

31、 測(cè)定），并計(jì)算出 HDL2C 量。 【標(biāo)本】 血清（漿）血樣在室溫中不宜久放，應(yīng)即時(shí)測(cè)定，原則應(yīng)低溫保存。直接 HDLC 測(cè)定法【 試 齊 】市售專門的試齊，無(wú)沉淀齊。酶試齊同 TC 測(cè)定。（如日本第一化學(xué)藥品株式會(huì)社的產(chǎn) 品）?！静僮鳌?按試齊盒及儀器使用說(shuō)明書要求設(shè)置程序， 輸入?yún)?shù)直接用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀測(cè) 定，無(wú)須沉淀離心分離出 HDL 步驟?！緲?biāo)本】血清（漿）。血清低密度脂蛋白膽固醇（ LDL-C ）測(cè)定1. Friedwald 工式計(jì)算法：（1）LDL-C=TC HDL-C TG/5 （以 mg/dl 為單位計(jì)）;（2）LDL-C=TC HDL-C TG/2.2（以 mmo1

32、/L 為單位計(jì)）；（3）只有當(dāng)血 TG v 4.52mmo/L結(jié)果才較準(zhǔn)確；（4） 只有 TC、TG、HDL-C 三項(xiàng)測(cè)定都準(zhǔn)確且符合標(biāo)準(zhǔn)化要求時(shí)，才可計(jì)算出LDL-C 的近似值。2. 聚乙烯硫酸沉淀法【 試 齊 】 沉淀齊市售，酶試齊同 TC 測(cè)定?！静僮鳌?. TC 測(cè)定。2. 選擇性沉淀血清中 LDL，測(cè)定上清液之 HDL C與VLDL C之和的量，（同TC測(cè) 定）。3. 計(jì)算出 LDL C 的含量?！緲?biāo)本】血清。血清載脂蛋白A1 （apoA1）測(cè)定免疫透射比濁法。波長(zhǎng) 340nm,本法批間CVv 5%?！?試 齊 】市售試劑盒，試劑 28 C保存，不同批號(hào)試劑不能混合使用，抗血清效價(jià)不

33、應(yīng)低於16?！静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說(shuō)明書要求, 設(shè)定程序和參數(shù)用自動(dòng)生化分析儀測(cè)定, 也可用特定蛋 白分析儀作速率法散射比濁測(cè)定，或用含 340nm 的分光光度計(jì)手工操作測(cè)定。 【標(biāo)本】血清。血清載脂蛋白B (apoB)測(cè)定免疫透射比濁法。波長(zhǎng) 340nm,本法批間CVv 5%?！驹噭渴惺墼噭?，28 C保存，不同批號(hào)試劑不能混合使用，抗血清效價(jià)不應(yīng)低於1: 128?！静僮鳌繀⒖?apoA1 測(cè)定?！緲?biāo)本】血清。第十節(jié) 血液葡萄糖測(cè)定技術(shù)操作規(guī)程1. 檢測(cè)目的： 檢測(cè)血清或血漿中葡萄糖的含量, 為臨床對(duì)相關(guān)疾病的診斷、 觀察疾病的變化及治療效果, 以及對(duì)健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測(cè)提供重要的參

34、考價(jià)值。3. 標(biāo)本要求：3.1 病人準(zhǔn)備：空腹 12 小時(shí)。3.2 標(biāo)本類型：血清或 NaF 抗凝的血漿。采血后及時(shí)分離,以避免血清或血漿中葡萄糖被細(xì) 胞利用而降低。4. 設(shè)備和試劑：4.1 儀器設(shè)備：奧林巴斯 AU600 生化分析儀4.2 試劑材料：四川邁克公司試劑參與反應(yīng)成份：R1 ：酚( 12.0mmol/L )R2: GOD (> 35KU/L )、POD (> 5KU/L )、4-AAP (1.20mmol/L )4.3試劑的貯存：4.3.1 28C密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。開(kāi)蓋上機(jī)28C避光穩(wěn)定 30天。變質(zhì)指示:試劑混濁變色或空白吸光度值 >0.150時(shí),不

35、能繼續(xù)使用。4.4 注意:此試劑為體外診斷用,禁止入口,吞下有害。試劑含有疊氮化鈉,誤入眼、口中 或沾染到皮膚上請(qǐng)立即用清水徹底沖洗,必要時(shí)到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等 金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物,故廢棄時(shí)請(qǐng)充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5 試劑準(zhǔn)備:即開(kāi)即用的,無(wú)需特殊準(zhǔn)備。5 質(zhì)量控制:5.1 質(zhì)控物: RANDOX 多項(xiàng)人基質(zhì)血清5 .2質(zhì)控措施:室內(nèi)質(zhì)控：每日日常工作前進(jìn)行。 室間質(zhì)控：參加北京臨床檢驗(yàn)中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評(píng)。6. 參考區(qū)間及可報(bào)區(qū)間：6.1參考范圍：空腹3.8A 6.11mmol/L餐后1小時(shí) 7.788.89mmol/L餐后 2 小時(shí) 3.89- 7.78mmol

36、/L6.2可報(bào)范圍：0.0022.30mmol/L。樣品GLU含量超過(guò)線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。7. 危急值及處理方法：<2.5mmol/L 或>10mmol/L。及時(shí)與臨床聯(lián)絡(luò)。第十一節(jié) 凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)操作規(guī)程全血凝固時(shí)間檢驗(yàn)（ CT）【標(biāo)本】 靜脈取血 3ml?！?方法與操作 】 試管法、硅管法操作參見(jiàn)全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 （第二版） ?！靖阶ⅰ?. 靜脈取血要一針見(jiàn)血，盡量減少組織液和空氣混入。2. 水浴箱溫度要恒定，過(guò)高或過(guò)低，可影響結(jié)果。活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定（ APTT ）【標(biāo)本】自靜脈取血，用 109mmol/L 枸椽酸鈉作 1:9抗凝?！驹噭?/p>

37、市售成套試劑。【 方法與操作】 按試劑及有關(guān)儀器說(shuō)明書要求進(jìn)行?！靖阶ⅰ?. 標(biāo)本應(yīng)及時(shí)檢測(cè)，最遲不超過(guò) 2h。2. 分離血漿應(yīng)在 3000r/min ，離心 10min。3. 本試驗(yàn)較試管法全血凝血時(shí)間敏感，能檢出因子忸：Cv 25%輕型血友病。血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定（PT, 一期法）【標(biāo)本】靜脈血1.8ml,用109mmol/L枸椽酸鈉0.2ml抗凝?！驹噭?. 組織凝血活酶浸出液；2. 0.025mol/L CaCl2 液；【 方法與操作 】 見(jiàn)全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 （第二版）?！靖阶ⅰ?. 采血后宜在1h內(nèi)完成，置冰箱 4C保存，不應(yīng)超過(guò)4h, -20C下可放置2周，-70C可 放置

38、6 個(gè)月。2. 水溫箱控制在37C± 1C,過(guò)高過(guò)低均影響結(jié)果。簡(jiǎn)易凝血活酶生成試驗(yàn)（ STGT）【標(biāo)本】取全血0.04ml加5ml蒸餾水，混勻，即成溶血液，備用。 【 方法與操作 】見(jiàn)全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 （第二版）第十二節(jié) AB0 血型正、反血型鑒定技術(shù)操作規(guī)程1. 檢測(cè)目的 用于檢測(cè)患者血型，實(shí)施輸血治療和組織器官移植等。2. 檢測(cè)原理（正定型法）根據(jù) IgM 類特異性血型抗體與紅細(xì)胞上特異性抗原結(jié)合能夠出現(xiàn)凝集反應(yīng)的原理，用已知 IgM 類特異性標(biāo)準(zhǔn)抗血清與被檢紅細(xì)胞在室溫條件下反應(yīng)，若被檢紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集現(xiàn)象， 表明被檢紅細(xì)胞上有與血型抗體對(duì)應(yīng)的抗原。3. 標(biāo)本要求新鮮全血。

39、4. 試劑標(biāo)準(zhǔn)抗A、抗B血清。5. 操作步驟（玻片法）5.1標(biāo)記：取一載玻片，用蠟筆畫上直徑2cm左右的兩個(gè)圓圈，分別標(biāo)記抗A、抗B。5.2抗血清：在玻片蠟筆圈內(nèi)按標(biāo)記所示分別滴加抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)抗血清各一滴。5.3紅細(xì)胞：在抗 A、抗B圈內(nèi)加被檢者全血各一滴。用玻棒將紅細(xì)胞與抗體充分混勻， 室溫下放置1830min （為防止天氣干燥造成玻片干涸，可把試驗(yàn)玻片放在有濕紗布的 蓋盤中）。5.4 血型判讀：搖動(dòng)玻片，肉眼觀察玻片蠟筆圈內(nèi)有無(wú)顆粒狀凝集及凝集程度，判定陰性、 陽(yáng)性和陽(yáng)性程度。 陰性指視野中紅細(xì)胞程均勻散布， 無(wú)凝集顆粒， 顯微鏡下紅細(xì)胞分散存在，無(wú)聚集靠攏現(xiàn)象。陽(yáng)性時(shí)紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集。6

40、. 質(zhì)量控制6.1 分型血清質(zhì)量性能符合要求，用畢后應(yīng)放置冰箱保存，以免細(xì)菌污染。6.2 試管、滴管和玻片必須清潔干燥，防止溶血。6.3按理IgM抗-A和抗-B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以6 C為最強(qiáng)，但為了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾，一般仍在室溫內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，36C可反應(yīng)減弱。6.4 觀察時(shí)應(yīng)注意紅細(xì)胞呈特異性凝集、繼發(fā)性凝固以及緡錢狀排列的區(qū)別。7. 干擾因素7.1 分型血清效價(jià)太低、親和力不強(qiáng)；7.2 受檢者紅細(xì)胞上抗原位點(diǎn)過(guò)少或抗原性減弱；7.3受檢者血清中缺乏應(yīng)有的抗 -A/抗-B抗體；7.4 各種原因引起的紅細(xì)胞溶解，誤判為不凝集。部分溶血時(shí)，可溶性血型物質(zhì)中和了相應(yīng)的抗體；7.5 由細(xì)菌污染

41、或遺傳因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因；7.6血清中有意外抗體，如自身抗-I，常引起干擾；7.7 老年人血清中抗體水平大幅度下降；7.8 更換新批號(hào)抗血清或?qū)υ噭┙Y(jié)果有懷疑時(shí)，可設(shè)定陽(yáng)性、陰性和自身對(duì)照；7.9 為避免交叉污染，尖吸管、玻棒只能一次性使用；7.10 嬰幼兒紅細(xì)胞抗原未發(fā)育完全、老年體弱者抗原性較弱；7.11 有些疾病可能使紅細(xì)胞定性出現(xiàn)困難，如：嚴(yán)重的腸道細(xì)菌感染；嚴(yán)重的細(xì)菌感染； 血清中存在病理性冷凝集素與紅細(xì)胞上抗原結(jié)合；部分高球蛋白和異常高球蛋白血癥7.12 輸入異型血或做過(guò)與受者血型不同的異體骨髓器官移植的病人在血型堅(jiān)定時(shí)可能出 現(xiàn)混合外觀。第十三節(jié) 交叉

42、配血操作規(guī)程交叉配血試驗(yàn) （凝聚胺法）原理凝聚胺試驗(yàn)是利用低離子溶液促進(jìn)紅細(xì)胞抗原與血清 （漿）中的抗體反應(yīng)， 再利用凝聚 胺引起紅細(xì)胞間非免疫性的凝集，讓已有抗體（igG）反應(yīng)的紅細(xì)胞間的距離縮短。距離縮短后更能引起已反應(yīng)的抗體和別的紅細(xì)胞產(chǎn)生反應(yīng)形成免疫性的凝集。而由凝聚胺所引起的非免疫性紅細(xì)胞凝集反應(yīng)可被后來(lái)加入的復(fù)懸液所中和而散開(kāi)，如有免疫反應(yīng)， 凝集就不會(huì)散開(kāi)，為陽(yáng)性反應(yīng)。如沒(méi)有免疫反應(yīng)，凝集就會(huì)散開(kāi)，為陰性反應(yīng)。交叉配血試驗(yàn)是在鹽水 介質(zhì)的基礎(chǔ)上加入凝聚胺，檢測(cè)供患之間是否相合，患者血清（漿）中是否含有具臨床意義 的紅細(xì)胞異體抗體。 試劑組成 1 潔凈試管，離心機(jī)，顯微鏡。2 0.

43、85%氯化鈉溶液：準(zhǔn)確稱取氯化鈉（ AR） 8.5 g,用蒸餾水溶解并定容至 1000 ml。試劑啟用后，有效期為：二周。3 聚胺試劑（1）質(zhì)溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2 鈉及穩(wěn)定劑。（ 2） 凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化鈉及穩(wěn)定劑。（ 3）復(fù)懸液：含檸檬酸鈉，葡萄糖及穩(wěn)定劑。（ 4）陽(yáng)性對(duì)照血清：含抗 D 血清，氯化鈉及穩(wěn)定劑。4 抗人 IgG 血清。 試劑保存和穩(wěn)定性 1 凝聚胺試劑須保存在 2-25 Co2有效期內(nèi)可使用。3 .抗人IgG血清低溫冰箱保存。復(fù)溶后放2 4C冰箱保存。 標(biāo)本收集和準(zhǔn)備 1. 抽取受血者靜脈血 3-4ml （操作中小心防止紅細(xì)胞破損），放入一已貼標(biāo)簽干燥潔凈

44、的試 管中為血清管 （也可用 EDTA-K2 抗凝血液 ），并將注射器中余下的少量血液配成2%紅細(xì)胞生 理鹽水懸液，放入另一已貼標(biāo)簽干燥潔凈的試管中為紅細(xì)胞懸液管。以上標(biāo)本有效期為三天；若受血者抽取標(biāo)本后，輸用過(guò)血液或血液制品，且輸用時(shí)間超過(guò)12 小時(shí)的，必須重新采集標(biāo)本。2. 2% 紅細(xì)胞懸液：用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞 3 次。根據(jù)下表進(jìn)行紅細(xì)胞懸液的配制。懸液濃度（ %）壓積紅細(xì)胞（滴）鹽水（滴）2ml(40)0.8ml(16) 操作步驟 I . 取出 3 支試管分別標(biāo)記主，次及對(duì)照測(cè)試：主測(cè)管：加入病人血清（漿） 2 滴，再加入供血者 3-5%紅細(xì)胞懸液 1 滴， 次測(cè)管：加入供血者血清（漿

45、） 2 滴，再加入病人 3-5%紅細(xì)胞懸液 1 滴， 對(duì)照管：加入 2 滴 *4 陽(yáng)性對(duì)照血清，再加入供血者 3-5%紅細(xì)胞懸液 1 滴。2. 各加入*1低離子介質(zhì)溶液0.6ml，輕輕混勻，于室溫下靜置 1分鐘。3. 再滴入 2 滴*2 凝聚胺溶液，輕輕混勻，于室溫下靜置15秒。4. 3400rpm離心1分鐘，然后把上清液倒掉，管底保留大約0.1ml的液體。5. 目測(cè)紅細(xì)胞有無(wú)變成凝塊，如果沒(méi)有凝塊，則必須重做，（請(qǐng)看注意事項(xiàng) 6）。重做后仍然沒(méi)有凝集現(xiàn)象出現(xiàn)，可能試劑失效。6. 各滴入 2 滴*3 復(fù)懸液，并輕輕混勻，觀察結(jié)果。若為凝聚胺引起的非免疫性凝集，應(yīng)該在 1 分鐘內(nèi)散開(kāi)；若是異體抗體所引起的免疫性凝集，則不會(huì)散開(kāi)。7. 倒在玻片上用顯微鏡觀察有無(wú)凝集。如