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文檔簡(jiǎn)介
1、常用培養(yǎng)基配方目錄:01糖發(fā)酵管02ONPG培養(yǎng)基03西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基04緩沖葡萄糖蛋白陳水MR和VP試驗(yàn)用05克氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基06丙二酸鈉培養(yǎng)基07葡葡糖鏤培養(yǎng)基08Hugh-Leifson培養(yǎng)基O/F試驗(yàn)用09馬尿酸鈉培養(yǎng)基10營(yíng)養(yǎng)明膠11苯丙氨酸培養(yǎng)基12氨基酸脫竣酶試驗(yàn)培養(yǎng)基13蛋白陳水靛基質(zhì)t驗(yàn)用14硫酸亞鐵瓊脂硫化氫t驗(yàn)用15尿素瓊脂16氧化鉀KCN培養(yǎng)基17氧化酶試驗(yàn)18硝酸鹽培養(yǎng)基19細(xì)胞色素氧化酶試驗(yàn)20過氧化氫酶試驗(yàn)21過氧化物酶試驗(yàn)22磷酸鹽緩沖液23明膠磷酸鹽緩沖液24乳酸-苯酚溶液25肉浸液肉湯26肉浸液瓊脂27牛肉或牛心消化湯28血消化湯29豆粉瓊脂30血瓊脂
2、31營(yíng)養(yǎng)瓊脂32營(yíng)養(yǎng)肉湯33乳糖膽鹽發(fā)酵管34乳糖發(fā)酵管35EC肉湯36緩沖蛋白陳水BP37氯化鎂孔雀綠增菌液MM38四硫磺酸鈉煌綠增菌液TTB39四硫磺酸鈉煌綠增菌液換用方法40亞硒酸鹽胱氨酸增菌液SC41GN增菌液42腸道菌增菌肉湯43亞硫酸胡瓊脂BS44 DHL瓊月旨45 HE瓊脂46 SS瓊脂47 WS瓊脂48麥康凱瓊脂49伊紅美藍(lán)瓊脂EMB50三糖鐵瓊脂TSI51三糖鐵瓊脂換用方法52克氏雙糖鐵瓊脂KI53克氏雙糖鐵瓊脂換用方法54葡萄糖半固體發(fā)酵管55 5%乳糖發(fā)酵管56 CAYE培養(yǎng)基57 Honda氏產(chǎn)毒肉湯58 Elek氏培養(yǎng)基毒素測(cè)定用59氯化鎂孔雀綠竣葦青霉素培養(yǎng)基60胰
3、蛋白陳水61Rustigian氏尿素培養(yǎng)液62氯化鈉結(jié)晶紫增菌液63氯化鈉蔗糖瓊脂64嗜鹽菌選擇性瓊脂653.5%氯化鈉三糖鐵瓊脂66氯化鈉血瓊脂673.5%氯化鈉生化試驗(yàn)培養(yǎng)基68改進(jìn)磷酸鹽緩沖液小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌專用69CIN-1培養(yǎng)基70嗜鹽性試驗(yàn)培養(yǎng)基01糖發(fā)酵管成分:牛肉膏5g蛋白陳10g氯化鈉3g磷酸氫二鈉(Na2HPO412H2O)2g0.2%滇麝香草酚藍(lán)溶液12mL蒸儲(chǔ)水1000mLpH7.4制法:1葡萄糖發(fā)酵管按上述成分配好后,按0.5%參加葡萄糖,分裝于有一個(gè)倒置小管的小試管內(nèi),121C高壓滅菌15min.2其他各種糖發(fā)酵管可按上述成分配好后,分裝每瓶100mL,121C
4、高壓滅菌15min.另將各種糖類分別配好10%溶液,同時(shí)高壓滅菌.將5mL糖溶液參加于100mL培養(yǎng)基內(nèi),以無(wú)菌操作分裝小試管.注:蔗糖不純,加熱后會(huì)自行水解者,應(yīng)采用過濾法除菌.試驗(yàn)方法:從瓊脂斜面上挑取小量培養(yǎng)物接種,于36c±C培養(yǎng),一般觀察23d.緩慢反響需觀察1430d.02ONPG培養(yǎng)基成分:鄰硝基酚為D-半乳糖昔(ONPG)60mg(O-Nitrophenyl-&D-galactopyranoside)0.01mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5)10mL1%蛋白陳水(PH7.5)30mL制法:將ONPG溶于緩沖液內(nèi),參加蛋白陳水,以過濾法除菌,分裝于10mrW7
5、5mm試管,每管0.5mL,用橡皮塞塞緊.試驗(yàn)方法:自瓊脂斜面上挑取培養(yǎng)物1滿環(huán)接種,于36士C培養(yǎng)13h和24h觀察結(jié)果.如果3半乳糖普酶產(chǎn)生,那么于13h變黃色,如無(wú)此酶那么24h不變色.03西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基成分:氯化鈉5g硫酸鎂(MgSO47H2O)0.2g磷酸二氫鏤1g磷酸氫二鉀1g檸檬酸鈉5g瓊脂20g蒸儲(chǔ)水1000mL0.2%溟麝香草酚藍(lán)溶液40mLpH6.8制法:先將鹽類溶解于水內(nèi),校正pH,再加瓊脂,加熱溶化.然后參加指示劑,混合均勻后分裝試管,121C高壓滅菌15min.放成余面.試驗(yàn)方法:挑取少量瓊脂培養(yǎng)物接種,于36士C培養(yǎng)4d,每天觀察結(jié)果.陽(yáng)性者斜面上有菌落生長(zhǎng),
6、培養(yǎng)基從綠色轉(zhuǎn)為藍(lán)色.04緩沖葡萄糖蛋白陳水(MR和VP試驗(yàn)用)成分:磷酸氫二鉀5g多陳7g葡萄糖5g蒸儲(chǔ)水1000mLpH7.0制法:溶化后校正pH,分裝試管,每管1mL,121c高壓滅菌15min.甲基紅(MR)試驗(yàn):自瓊脂斜面挑取少量培養(yǎng)物接種本培養(yǎng)基中,于36±1C培養(yǎng)25d,哈夫尼亞菌那么應(yīng)在2225c培養(yǎng).滴加甲基紅試劑一滴,立即觀察結(jié)果.鮮紅色為陽(yáng)性,黃色為陰性.甲基紅試劑配法:10mg甲基紅溶于30mL95%乙醇中,然后參加20mL蒸儲(chǔ)水.V-P試驗(yàn):用瓊脂培養(yǎng)物接種本培養(yǎng)基中,于36士C培養(yǎng)24d.哈夫尼亞菌那么應(yīng)在2225c培養(yǎng).參加6%“-茶酚-乙醇溶液0.5m
7、L和40%氫氧化鉀溶液0.2mL,充分振搖試管,觀察結(jié)果.陽(yáng)性反響馬上或于數(shù)分鐘內(nèi)出現(xiàn)紅色,如為陰性,應(yīng)放在36士C下培養(yǎng)4h再進(jìn)行觀察.05克氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基成分:檸檬酸鈉3g葡萄糖0.2g酵母浸膏0.5g單鹽酸半胱氨酸0.1g磷酸二氫鉀1g氯化鈉5g0.2%酚紅溶液6mL瓊脂15g蒸儲(chǔ)水1000mL制法:加熱溶解,分裝試管,121C高壓滅菌15min.放成余面.試驗(yàn)方法:用瓊脂培養(yǎng)物接種整個(gè)斜面,在36±1C培養(yǎng)7d,每天觀察結(jié)果.陽(yáng)性者培養(yǎng)基變?yōu)榧t色.06丙二酸鈉培養(yǎng)基成分:酵母浸膏1g硫酸鏤2g磷酸氫二鉀0.6g磷酸二氫鉀0.4g氯化鈉2g丙二酸鈉3g0.2%溟麝香草酚藍(lán)溶液
8、12mL蒸儲(chǔ)水1000mLpH6.8制法:先將酵母浸膏和鹽類溶解于水,校正pH后再參加指示劑,分裝試管,121C高壓滅菌15min.試驗(yàn)方法:用新鮮的瓊脂培養(yǎng)物接種,于36±1C培養(yǎng)48h,觀察結(jié)果.陽(yáng)性者由綠色變?yōu)樗{(lán)色.07葡葡糖鏤培養(yǎng)基成分:氯化鈉5g硫酸鎂(MgSO47H2O)0.2g磷酸二氫鏤1g磷酸氫二鉀1g葡萄糖2g瓊脂20g蒸儲(chǔ)水1000mL0.2%溟麝香草酚藍(lán)溶液40mLpH6.8制法:先將鹽類和糖溶解于水內(nèi),校正pH,再加瓊脂,加熱溶化,然后參加指示劑,混合均勻后分裝試管,121C高壓滅菌15min,放成余面.試驗(yàn)方法:用接種針輕輕觸及培養(yǎng)物的外表,在鹽水管內(nèi)做成極
9、稀的懸液,肉眼觀察不見混濁,以每一接種環(huán)內(nèi)含菌數(shù)在20100之間為宜.將接種環(huán)滅菌后挑取菌液接種,同時(shí)再以同法接種普通斜面一支作為對(duì)照.于36士C培養(yǎng)24h.陽(yáng)性者葡萄糖鏤斜面上有正常大小的菌落生長(zhǎng);陰性者不生長(zhǎng),但在對(duì)照培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好.如在葡萄糖鏤斜面生長(zhǎng)極微小的菌落可視為陰性結(jié)果.注:容器使用前應(yīng)用清潔液浸泡.再用?#水,蒸儲(chǔ)水沖洗干凈,并用新棉花做成棉塞,干熱滅菌后使用.如果操作時(shí)不注意,有雜質(zhì)污染時(shí),易造成假陽(yáng)性的結(jié)果.08Hugh-Leifson培養(yǎng)基(O/F試驗(yàn)用)成分:蛋白陳2g氯化鈉5g磷酸氫二鉀0.3g瓊脂4g葡萄糖10g0.2%溟麝香草酚藍(lán)溶液12mL蒸儲(chǔ)水1000mLp
10、H7.2制法:將蛋白陳和鹽類加水溶解后,校正pH至7.2.參加葡萄糖,瓊脂煮沸,溶化瓊脂,然后參加指示劑.混勻后,分裝試管,121C高壓滅菌15min,直立凝固備用.試驗(yàn)方法:從斜面上挑取小量培養(yǎng)物作穿刺接種,同時(shí)接種兩支培養(yǎng)基,其中一支于接種后滴加溶化的1%瓊脂液于外表,高度約1cm,于36±1C培養(yǎng).09馬尿酸鈉培養(yǎng)基成分:馬尿酸鈉1g肉浸液100mL制法:將馬尿酸鈉溶解于肉浸液內(nèi),分裝于小試管內(nèi),并于管壁畫一橫線.以標(biāo)志管內(nèi)液面高度,高壓滅菌121c20min.試劑:三氯化鐵(FeCl36H2O)12g,溶于2%鹽酸溶液100mL中即成.試驗(yàn)方法:用純培養(yǎng)物接種,于42c培養(yǎng)4
11、8h,觀察培養(yǎng)液是否到達(dá)試管壁上記號(hào)處,如缺乏時(shí)用蒸儲(chǔ)水補(bǔ)足至原量.經(jīng)離心沉淀,吸取上清液0.8mL,參加三氯化鐵試劑0.2mL,立即混合均勻,經(jīng)1015min,觀察結(jié)果.結(jié)果:出現(xiàn)恒久之沉淀物為陽(yáng)性10營(yíng)養(yǎng)明膠成分:蛋白陳5g牛肉膏3g明膠120g蒸儲(chǔ)水1000mLpH6.87.0制法:加熱溶解,校正至pH7.47.6,分裝小管,121C高壓滅菌10min,取出后迅速冷卻,使其凝固.復(fù)查最終pH應(yīng)為6.87.0.試驗(yàn)方法:用瓊脂培養(yǎng)物穿刺接種,放在2225c培養(yǎng),每天觀察結(jié)果,記錄液化時(shí)間.或放在36士1C培養(yǎng),每天取出,放冰多I內(nèi)30min后再觀察結(jié)果.11苯丙氨酸培養(yǎng)基成分:酵母浸膏3g
12、DI-苯丙氨酸或L-苯丙氨酸1g2g磷酸氫二鈉1g氯化鈉5g瓊脂12g蒸儲(chǔ)水1000mL制法:加熱溶解后分裝試管,121C高壓滅菌15min,使成斜面.試驗(yàn)方法:自瓊脂斜面上挑取大量培養(yǎng)物,移種于苯丙氨酸瓊脂,在36±1C培養(yǎng)4h或1824h.滴加10%三氯化鐵溶液23滴,自斜面培養(yǎng)物上流下,苯丙氨酸脫氨酶陽(yáng)性者呈深綠色.12氨基酸脫竣酶試驗(yàn)培養(yǎng)基成分:蛋白陳5g酵母浸膏3g葡萄糖1g蒸儲(chǔ)水1000mL1.6%滇甲酚紫-乙醇溶液1mLL-氨基酸或DL-氨基酸0.5或1g/100mLpH6.8制法:除氨基酸以外的成分加熱溶解后,分裝每瓶100mL,分別參加各種氨基酸:賴氨酸,精氨酸和鳥
13、氨酸.L-氨基酸按0.5%參加,DL-氨基酸按1%參加.再行校正pH至6.8.對(duì)照培養(yǎng)基不加氨基酸.分裝于滅菌的小試管內(nèi),每管0.5mL,上面滴加一層液體石蠟,115C高壓滅菌10min.試驗(yàn)方法:從瓊脂斜面上挑取培養(yǎng)物接種,于36±1C培養(yǎng)1824h,觀察結(jié)果.氨基酸脫竣酶陽(yáng)性者由于產(chǎn)堿,培養(yǎng)基應(yīng)呈紫色.陰性者無(wú)堿性產(chǎn)物,但因葡萄糖產(chǎn)酸而使培養(yǎng)基變?yōu)辄S色.對(duì)照管應(yīng)為黃色.13蛋白陳水靛基質(zhì)t驗(yàn)用成分:蛋白陳或胰蛋白陳20g氯化鈉5g蒸儲(chǔ)水1000mLpH7.4制法:按上述成分配制,分裝小試管,121C高壓滅菌15min.靛基質(zhì)試劑柯凡克試劑:將5g對(duì)二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇
14、中.然后緩慢參加濃鹽酸25mL.歐-波試劑:將1g對(duì)二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇內(nèi).然后緩慢參加濃鹽酸20mL.試驗(yàn)方法:挑取小量培養(yǎng)物接種,在36±C培養(yǎng)12d,必要時(shí)可培養(yǎng)45d.參加柯凡克試劑約0.5mL,輕搖試管,陽(yáng)性者于試劑層呈深紅色;或參加歐-波試劑約0.5mL,沿管壁流下,覆蓋于培養(yǎng)液外表,陽(yáng)性者于液面接觸處呈玫瑰紅色.注:蛋白陳中應(yīng)含有豐富的色氨酸.每批蛋白陳買來(lái)后,應(yīng)先用菌種鑒定前方可使用.14硫酸亞鐵瓊脂硫化氫t驗(yàn)用成分:牛肉膏3g酵母浸膏3g蛋白陳10g硫酸亞鐵0.2g硫代硫酸鈉0.3g氯化鈉5g瓊脂12g蒸儲(chǔ)水1000mLpH7.4制法:加熱溶解,校
15、正pH,分裝試管,115C高壓滅菌15min,取出直立候其凝固.試驗(yàn)方法:挑取瓊脂培養(yǎng)物,沿管壁穿刺,于36±1C培養(yǎng)12d,觀察結(jié)果.產(chǎn)硫化氫者使培養(yǎng)基變?yōu)楹谏?注:腸桿菌科細(xì)菌測(cè)定硫化氫的產(chǎn)生,應(yīng)采用三糖鐵瓊脂或本培養(yǎng)基.15尿素瓊脂成分:蛋白陳1g氯化鈉5g葡萄糖1g磷酸二氫鉀2g0.4%酚紅溶液3mL瓊脂20g蒸儲(chǔ)水1000mL20%尿素溶液100mLpH7.2垃1制法:將除尿素和瓊脂以外的成分配好,并校正pH,參加瓊脂,加熱溶化并分裝燒瓶.121C高壓滅菌15min.冷至5055C,參加經(jīng)除菌過濾的尿素溶液.尿素的最終濃度為2%,最終pH應(yīng)為7.20.1.分裝于滅菌試管內(nèi),
16、放成斜面?zhèn)溆?試驗(yàn)方法:挑取瓊脂培養(yǎng)物接種,在36±1C培養(yǎng)24h,觀察結(jié)果.尿素酶陽(yáng)性者由于產(chǎn)堿而使培養(yǎng)基變?yōu)榧t色.16氧化鉀KCN培養(yǎng)基成分:蛋白陳10g氯化鈉5g磷酸二氫鉀0.225g磷酸氫二鈉5.64g蒸儲(chǔ)水1000mL0.5%氧化鉀溶液20mLpH7.6制法:將除氧化鉀以外的成分配好后分裝燒瓶,121C高壓滅菌15min.放在冰箱內(nèi)使其充分冷卻.每100mL培養(yǎng)基參加0.5%氧化鉀溶液2.0mL最后濃度為1:10000,分裝于12mrW100mm滅菌t管,每管約4mL,馬上用滅菌橡皮塞塞緊,放在4c冰箱內(nèi),至少可保存兩個(gè)月.同時(shí),將不加氧化鉀的培養(yǎng)基作為對(duì)照培養(yǎng)基,分裝試管
17、備用.17氧化酶試驗(yàn)試齊I:1%鹽酸二甲基對(duì)苯二胺溶液:少量新鮮配制,干冰箱內(nèi)避光保存.1%a-茶酚-乙醇溶液.試驗(yàn)方法:取白色潔凈濾紙沾取菌落.加鹽酸二甲基對(duì)苯二胺溶液一滴,陽(yáng)性者呈現(xiàn)粉紅色,并逐漸加深;再加a-茶酚溶液一滴,陽(yáng)性者于半分鐘內(nèi)呈現(xiàn)鮮藍(lán)色.陰性于兩分鐘內(nèi)不變色.以毛細(xì)吸管吸取試劑,直接滴加于菌落上,其顯色反響與以上相同.18硝酸鹽培養(yǎng)基成分:硝酸鉀0.2g蛋白5g蒸儲(chǔ)水1000mLpH7.4制法:溶解,校正pH,分裝試管,每管約5mL,121c高壓滅菌15min.硝酸鹽復(fù)原試劑:甲液:將對(duì)氨基苯磺酸0.8g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中.乙液:將甲紊胺0.5g溶解于
18、2.5mol/L乙酸溶液100mL中.試驗(yàn)方法:接種后在36士C培養(yǎng)14d,參加甲液和乙液各一滴,觀察結(jié)果.硝酸鹽復(fù)原為亞硝酸鹽時(shí)于馬上或數(shù)分鐘內(nèi)顯紅色.注:本試驗(yàn)陰性的原因有三:細(xì)菌不能復(fù)原硝酸鹽;亞硝酸鹽2續(xù)分解,生成氨和氮;培養(yǎng)基不適于細(xì)菌的生長(zhǎng).如欲檢查培養(yǎng)基中硝酸鹽是否未被分解,可再參加專翱少許,可使硝酸鹽復(fù)原為亞硝酸鹽而呈現(xiàn)紅色.19細(xì)胞色素氧化酶試驗(yàn)試齊I:1%鹽酸二甲基對(duì)苯二胺溶液.1%a-茶酚-乙醇溶液.試驗(yàn)方法:取37c或低于37C培養(yǎng)20h的斜面培養(yǎng)物一支,將兩種試劑各23滴,從斜面上端滴下,并將斜面略加傾斜,使試劑混合液流經(jīng)余面上的培養(yǎng)物.如系平板培養(yǎng)物,那么可用試劑混
19、合液滴在菌落上.結(jié)果:于2min內(nèi)呈現(xiàn)藍(lán)色者為陽(yáng)性.陽(yáng)性培養(yǎng)物大多數(shù)于半分鐘內(nèi)出現(xiàn)強(qiáng)陽(yáng)性反響,2min以后出現(xiàn)微弱或可疑反響均作為陰性結(jié)果.20過氧化氫酶試驗(yàn)試劑:3%過氧化氫溶液:臨用時(shí)配制.試驗(yàn)方法:挑取固體培養(yǎng)基上菌落一接種環(huán),置于潔凈試管內(nèi),滴加3%過氧化氫溶液2mL,觀察結(jié)果.結(jié)果:于半分鐘內(nèi)發(fā)生氣泡者為陽(yáng)性,不發(fā)生氣泡者為陰性.21過氧化物酶試驗(yàn)試劑:2%兒茶酚溶液.3%過氧化氫溶液.試驗(yàn)方法:挑取固體培養(yǎng)基上菌落一接種環(huán),置于潔凈試管內(nèi),滴加2%兒茶酚溶液1mL及3%過氧化氫溶液1mL.靜置于室溫20C中3060min,觀察結(jié)果.結(jié)果:陽(yáng)性反響,細(xì)菌變?yōu)楹诤稚?;陰性反?細(xì)菌不變
20、色.注:過氧化物酶的作用可受氧化鉀的抑制.22磷酸鹽緩沖液儲(chǔ)存液磷酸二氫鉀34g1mol/L氫氧化鈉溶液175mL蒸儲(chǔ)水825mLpH7.2制法:先將磷酸鹽溶解于500mL蒸儲(chǔ)水中用1mol/L氫氧化鈉溶液校正pH后,再用蒸儲(chǔ)水稀釋至1000mL.稀釋液:取儲(chǔ)存液1.25mL,用蒸儲(chǔ)水稀釋至1000mL.分裝每瓶100mL或每管10mL,121c高壓滅菌15min.23明膠磷酸鹽緩沖液成分:明膠2g磷酸氫二鈉4g蒸儲(chǔ)水1000mLpH6.2制法:加熱溶解,校正pH,121c高壓滅菌15min.24乳酸-苯酚溶液成分:苯酚10g乳酸比重1.2110g甘油20g蒸儲(chǔ)水10mL制法:將苯酚在水中加熱
21、溶解,然后參加乳酸及甘油.用途:檢驗(yàn)真菌形態(tài)時(shí)用.25肉浸液肉湯成分:絞碎牛肉500g氯化鈉5g蛋白陳10g磷酸氫二鉀2g蒸儲(chǔ)水1000mL制法:將絞碎之去筋膜無(wú)油脂牛肉500g加蒸儲(chǔ)水1000mL,混合后放冰箱過夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小時(shí),使肉渣完全凝結(jié)成塊,用絨布過濾,并擠壓收集全部濾液,加水補(bǔ)足原量.參加蛋白陳,氯化鈉和磷酸鹽,溶解后校正pH7.47.6煮沸并過濾,分裝燒瓶,121C高壓滅菌30min.26肉浸液瓊脂成分:肉浸液肉湯PH7.41000mL瓊脂1720g制法:加熱溶化瓊脂,分裝燒瓶或試管,121C高壓滅菌30min.根據(jù)需要,傾注平板或放成斜面.27牛肉或牛心消化湯
22、成分:絞碎牛肉或牛心1000g15%氫氧化鈉溶液27mL胰蛋白酶40mL三氯甲烷1mL氯化鈉10g蒸儲(chǔ)水2000mL制法:1稱取碎牛肉,加蒸儲(chǔ)水,隔水加熱到80C,維持15min.2加氫氧化鈉溶液,對(duì)pH試紙呈弱堿性,冷至40C.3加胰蛋白酶,氯仿,在36土C放置45h,每小時(shí)搖動(dòng)一二次.44h后,吸取上層液5mL于試管中,加5%硫酸銅溶液0.1mL,4%氫氧化鈉溶液5mL,混合之.假設(shè)呈紅色,那么不須再消化,可由溫箱取出.5參加15%乙酸溶液45mL,對(duì)pH試紙呈酸性.6煮沸15min,使胰蛋白酶破壞,冷后,放冰箱內(nèi)一夜.7次日吸取上層清液,加氯化鈉10g,并加水補(bǔ)足原量,煮沸.8校正pH7
23、.47.6加15%氫氧化鈉溶液約10mL,加熱,用濾紙過濾,分裝燒瓶,121C高壓滅菌20min.注:此培養(yǎng)基可作為瓊脂培養(yǎng)基的根底,不需加蛋白陳.胰蛋白酶之配制:稱取去脂絞碎的豬胰500g,參加乙醇500mL,蒸儲(chǔ)水1500mL,混合之,裝人玻塞瓶?jī)?nèi).每日搖勻三次.3d后,用絨布過濾擠出其汁,加鹽酸至0.05%,放冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?28血消化湯成分:絞碎豬胃100g絞碎豬血塊100g蒸儲(chǔ)水1000mL濃鹽酸10mL制法:1洗滌豬胃,除去油脂,保存胃粘膜,用絞肉機(jī)絞碎.2用絞肉機(jī)將豬血塊絞碎.3將蒸儲(chǔ)水加熱至55C,參加豬胃,豬血塊和鹽酸,置55c水浴中24h,時(shí)常加以搖動(dòng).4從水浴內(nèi)取出,參加
24、1moL/L碳酸鈉溶液5mL,煮沸10min,置于冰箱內(nèi)一夜.5吸取上層清液,加磷酸氫二鉀1g,加熱至75C,參加1mol/L碳酸鈉溶液45mL,煮沸,校正pH7.27.4.6用濾紙過濾,分裝燒瓶,121C高壓滅菌20min.29豆粉瓊脂成分:牛心消化湯(PH7.47.6)1000mL瓊脂20g黃豆粉浸液50mL制法:將瓊脂加在牛心消化湯內(nèi),加熱溶解,過濾參加豌豆粉浸液,分裝每瓶100mL,121C高壓滅菌15min.豌豆粉浸液制法:取豌豆粉5g,氯化鈉10g,參加蒸儲(chǔ)水100mL.置100c水浴內(nèi)加熱1h,放于冰箱中過夜.吸取上清液即為豌豆浸液.30血瓊脂成分:pH7.47.6豆粉瓊脂100
25、mL脫纖維羊血(或兔血)510mL制法:加熱溶化瓊脂,冷至50C,以滅菌手續(xù)參加脫纖維羊血,搖勻,傾注平板.亦可分裝滅菌試管,置成余面.亦可用其他營(yíng)養(yǎng)豐富的根底培養(yǎng)基配制血瓊脂.31營(yíng)養(yǎng)瓊脂成分:蛋白陳10g牛肉膏3g氯化鈉5g瓊脂1520g蒸儲(chǔ)水1000mL制法:將除瓊脂以外的各成分溶解于蒸儲(chǔ)水內(nèi)參加15%氫氧化鈉溶液約2mL,校正pH至7.27.4.參加瓊脂,加熱煮沸便瓊脂溶化.分裝燒瓶,121C高壓滅菌15min.注:此培養(yǎng)基可供一般細(xì)菌培養(yǎng)之用,可傾注平板或制成斜面.如用于菌落計(jì)數(shù),瓊脂量為1.5%;如作成平板或斜面,那么應(yīng)為2%.32營(yíng)養(yǎng)肉湯成分:蛋白陳10g牛肉膏3g氯化鈉5g蒸儲(chǔ)
26、水1000mLpH7.4制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分裝燒瓶,每并225mL,121C高壓滅菌15min.33乳糖膽鹽發(fā)酵管成分:蛋白陳20g豬膽鹽或牛,羊膽鹽5g乳糖10g0.04%滇甲酚紫水溶液25mL蒸儲(chǔ)水1000mLpH7.4制法:將蛋白陳,膽鹽及乳糖溶于水中,校正pH,參加指示劑,分裝每管10mL,并放入一個(gè)小倒管,115C高壓滅菌15min.注:雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管除蒸儲(chǔ)水外,其他成分加倍.34乳糖發(fā)酵管成分:蛋白陳20g乳糖10g0.04%溟甲酚紫水溶液25mL蒸儲(chǔ)水1000mLpH7.4制法:將蛋白月東及乳糖溶于水中,校正pH,參加指示劑,按檢驗(yàn)要求分裝30mL,10m
27、L或3mL,并放入一個(gè)小倒管,115C高壓滅菌15min.注:雙料乳糖發(fā)酵管除蒸儲(chǔ)水外,其他成分加倍.30mL和10mL乳糖發(fā)酵管專供醬油及醬類檢驗(yàn)用,3mL乳糖發(fā)酵管供大腸菌群證實(shí)試驗(yàn)用.35EC肉湯成分:胰蛋白陳20g3號(hào)膽鹽或混合膽鹽1.5g乳糖5g磷酸氫二鉀4g磷酸二氫鉀1.5g氯化鈉5g蒸儲(chǔ)水1000mL制法:將上述成分混合,溶解后,分裝有發(fā)酵倒管的試管中,121C高壓滅菌15min,最終pH為6.9垃2.36緩沖蛋白陳水BP成分:蛋白陳10g氯化鈉5g磷酸氫二鈉Na2HPO412H2O9g磷酸二氫鉀1.5g蒸儲(chǔ)水1000mLpH7.2制法:按上述成分配好后以大燒瓶裝,121C高壓滅
28、菌15min.臨用時(shí)無(wú)菌分裝每瓶225mL.注:本培養(yǎng)基供沙門氏菌前增菌用.37氯化鎂孔雀綠增菌液MM甲液胰蛋白陳5g氯化鈉8g磷酸二氫鉀1.6g蒸儲(chǔ)水1000mL乙液氯化鎂化學(xué)純40g蒸儲(chǔ)水100mL4.13.3丙液0.4%孔雀綠水溶液.制法:分別按上述成分配好后,121C高壓滅菌15min備用.臨用時(shí)取甲液90mL,乙液9mL,丙液0.9mL,以無(wú)菌操作混合即可.注:本培養(yǎng)基亦稱Rappaport10R10增菌液.38四硫磺酸鈉煌綠增菌液TTB根底培養(yǎng)基多陳或目示陳5g膽鹽1g碳酸鈣10g硫代硫酸鈉30g蒸儲(chǔ)水1000mL碘溶液碘6g碘化鉀5g蒸儲(chǔ)水20mL制法:將根底培養(yǎng)基的各成分參加蒸
29、儲(chǔ)水中,加熱溶解,分裝每瓶100mL.分裝時(shí)應(yīng)隨時(shí)振搖,使其中的碳酸鈣混勻.121C高壓滅菌15min備用.臨用時(shí)每100mL根底培養(yǎng)基中參加碘溶液2mL,0.1%煌綠溶液1mL.39四硫磺酸鈉煌綠增菌液換用方法根底液:蛋白陳10g牛肉膏5g氯化鈉3g碳酸鈣45g蒸儲(chǔ)水1000mL將各成分參加于蒸儲(chǔ)水中,加熱至約70c溶解,校正pH至7.0垃1,121C高壓滅菌20min.硫代硫酸鈉溶液硫代硫酸鈉Na2s2O35H2O50g蒸儲(chǔ)水加至100mL碘溶液碘片20g碘化鉀25g蒸儲(chǔ)水加至100mL將碘化鉀充分溶解于是少量的蒸儲(chǔ)水中,參加碘片,振搖玻瓶至碘片全部溶解,再參加蒸儲(chǔ)水至規(guī)定量.貯于棕色玻瓶?jī)?nèi),緊塞瓶蓋備用.煌綠水溶液煌0.5g蒸儲(chǔ)水100mL存放暗處,不少于1d,使其自然滅菌.牛膽鹽溶液枯燥的牛膽鹽10g蒸儲(chǔ)水100mL煮沸溶解,121C高壓滅菌20min.制備:根底液900mL硫代硫酸鈉溶液100mL碘液20mL煌綠溶液2mL牛膽鹽溶液50mL臨用前,按上列順序,以無(wú)菌操作依次參加于根底液中,每參加一種成分,均應(yīng)搖勻后再參加另一種成分.分裝于滅菌瓶中每井1100mL.40亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)成分:蛋白陳5g乳糖4g亞硒酸氫鈉4g磷酸氫二鈉
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