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文檔簡介
1、高考生物必記知識點(選修3)專題一 基因工程1.作為載體的條件能在宿主細胞中穩(wěn)定保存并大量復制。有一個至多個限制性核酸內切酶切割位點,以便與外源基因連接。具有特殊的標記基因,便于篩選2.載體的作用作為運載工具,將目的基因轉移到宿主細胞內;利用它在宿主細胞內對目的基因進行大量復制。 3.DNA連接酶起作用時不需要模板。4.限制酶在使用時的注意事項:切割目的基因和載體時,最好用同一種限制酶,以產生相同的黏性末端。在切割含目的基因的DNA分子時,需用限制酶切割兩次此DNA分子,產生4個末端。只有這樣,目的基因兩端都有可連接的黏性末端或平末端。限制酶切割位點應位于標記基因之外,不能破壞標記基因,以便于
2、進行檢測。 5.未知序列的目的基因是無法從基因文庫中獲取的。6.PCR技術擴增目的基因的過程:加熱至9095DNA解旋冷卻到5560,引物結合到互補DNA鏈加熱至7075,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。7.基因表達載體的構建(1)目的:使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。(2)組成:目的基因啟動子終止子標記基因?;蚬こ讨袠嫿ɑ虮磉_載體需要限制酶來切割以獲取目的基因,同時需要相同的限制酶切割載體以獲取與目的基因相同的黏性末端或平末端,再通過DNA連接酶連接目的基因和載體。8.將目的基因導入受體細胞 植物細胞農桿菌轉化法、基因槍法、花
3、粉管通道法動物細胞顯微注射技術微生物細胞Ca2處理法9.目的基因的檢測和表達 分子水平檢測:目的基因是否進入受體細胞DNA分子雜交(DNA和DNA之間)目的基因是否轉錄出信使RNA分子雜交技術(DNA和RNA之間)目的基因是否翻譯出蛋白質抗原抗體雜交方法個體水平檢測抗蟲、抗病的接種實驗,以確定是否有抗性以及抗性的程度;基因工程產品與天然產品的活性比較,以確定功能是否相同等10.蛋白質工程通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質進行改造,或制造出一種新的蛋白質,以滿足人類生產和生活的需求,是延伸出來的第二代基因工程。11.限制酶能識別特定的DNA序列,并在特定位點上切割DNA,形成黏性末端或平末端1
4、2.啟動子為DNA序列,其具有RNA聚合酶結合位點,能啟動轉錄,合成RNA13.用農桿菌轉化法將目的基因導入植物細胞時,首先將目的基因導入農桿菌Ti質粒的TDNA中,再利用農桿菌侵染植物細胞,通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的染色體的DNA上。 14.載體上的抗性基因主要是有利于篩選含重組DNA的細胞,目的基因的表達與抗性基因存在與否無關。15.基因工程中有3種工具,但工具酶只有2種。工具酶本質為蛋白質,載體本質為小型DNA分子,但不一定是環(huán)狀。16.受體細胞中常用植物受精卵或體細胞(經組織培養(yǎng))、動物受精卵(一般不用體細胞)、微生物(大腸桿菌、酵母菌等)。一般不用支原體,原因是它營寄生生
5、活;一定不能用哺乳動物成熟紅細胞,原因是它無細胞核,不能合成蛋白質。 17.應用DNA探針技術,可以檢測轉基因植物中目的基因的存在,但不能完成對目的基因表達的檢測。18.目的基因必須借助載體才能導入受體細胞;目的基因導入成功后,不抑制細胞原有的代謝途徑。19.用同一種限制酶分別切質粒和含有目的基因的DNA,會切出相同的黏性末端,再用DNA連接酶連接后,會出現(xiàn)目的基因載體連接物、載體載體連接物、目的基因目的基因連接物三種連接物,再通過篩選才能夠獲得目的基因載體連接物。20.密碼子具有簡并性,基因序列不同,蛋白質可以相同。21.對蛋白質改造時,首先要知道蛋白質的結構,有氨基酸序列構成的一級結構和折
6、疊組裝成的空間結構。專題二 細胞工程1.植物組織培養(yǎng)在愈傷組織的誘導階段往往要暗培養(yǎng),有利于細胞的脫分化產生愈傷組織。當愈傷組織分化出芽和葉時,一定要有光照,有利于葉片內葉綠素的合成2.植物體細胞雜交育種時最大優(yōu)點:克服遠緣雜交不親和障礙3.利用植物體細胞雜交可以獲得某種多倍體植株,根據細胞中染色體數目和形態(tài)的差異可用來鑒定雜種細胞4.誘導原生質體融合通常用物理法或化學法,不能用滅活的病毒作誘導劑。5.微型繁殖不僅可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性,還可以高效快速地實現(xiàn)種苗的大量繁殖。6.利用植物分生組織(如莖尖、根尖)進行培養(yǎng),可以使新長成的植株脫除病毒。7.植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽或
7、腋芽,包上人工種皮就可以形成人工種子。(人工種子中可以加入適量的養(yǎng)分、無機鹽、有機碳源以及農藥、抗生素、有益菌等,以利于胚狀體生長發(fā)育成幼苗)8.動物細胞培養(yǎng)的結果是獲得細胞群,動物體細胞核移植的結果是獲得與供體遺傳物質基本相同的個體9.動物細胞培養(yǎng)中兩次用到胰蛋白酶,第一次用胰蛋白酶處理剪碎的組織使之分散成單個細胞,第二次使貼壁細胞從瓶壁上脫落下來。10.原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的分界點為分瓶的繼續(xù)培養(yǎng)11.動物細胞的培養(yǎng)是為了獲得更多的動物細胞,不同于植物組織培養(yǎng),它無法獲得完整動物個體。在培養(yǎng)之前對材料要用胰蛋白酶處理使細胞分散開。在培養(yǎng)過程中動物細胞會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象。12.動物細胞核移植技
8、術包括:細胞培養(yǎng)、核移植、胚胎培養(yǎng)和移植。13.動物細胞融合最重要的用途是制備單克隆抗體。 14.單克隆抗體的主要優(yōu)點:特異性強、靈敏度高,并可大量制備。 15.滅活是指用物理或化學方法使病毒或細菌失去感染能力,但是并不破壞這些病原體的抗原結構。 16.制備單克隆抗體過程中采用的實驗技術是動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合。17.經免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜交瘤細胞既能無限增殖,又能產生單一抗體。18.溶菌酶的作用是分解細胞壁專題三 胚胎工程1.精子的發(fā)生:從初情期開始,卵子的發(fā)生:胚胎在性別分化以后2.精子獲能:精子在雌性動物的生殖道中經歷一段時間,發(fā)生相應的生理變化后,才能獲得受精能力
9、。3.卵子的準備動物排出的卵子都要在輸卵管內進一步成熟,當達到減數第二次分裂的中期時,才具備與精子受精的能力。卵細胞形成時的分裂過程分兩個階段,未排卵之前是在卵巢進行的,排卵之后減數分裂的繼續(xù)完成則是在輸卵管中。4.精子獲能是指精子獲得受精“能力”,而不是獲得能量。5.排卵是指卵子從卵泡中排出,而不是卵泡從卵巢中排出。6.判斷卵子是否受精的重要標志:在卵黃膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個極體時,說明卵子已經完成了受精。防止多精入卵的兩道屏障:透明帶反應和卵黃膜封閉作用7.胚胎發(fā)育過程中,細胞開始出現(xiàn)分化的階段是囊胚。 8.沖卵的本質是沖出早期胚胎。9.早期胚胎在體外培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段進行移植
10、10.胚胎移植后一定要對受體母牛進行是否妊娠的檢查11.胚胎分割時,應選擇發(fā)育到桑椹胚或囊胚時期的胚胎進行操作。12.對囊胚階段的胚胎進行分割時,要注意將內細胞團均等分割,否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發(fā)育(內細胞團多的部分發(fā)育能力強,少的部分發(fā)育受阻或發(fā)育不良,甚至不能發(fā)育)。胚胎分割的份數越步,操作的難度就會越大,移植的成功率就越低。 13.對供體和受體同時用激素同期發(fā)情處理是為了保證供體和受體具有相同的生理狀態(tài),以確保胚胎移植后能正常發(fā)育。14.動物克隆操作過程中要將來源于體細胞的核移植到去核卵細胞中,其原因是去核卵細胞內含有的細胞質成分更能促進細胞核的分化,并且卵細胞大,易操作。1
11、5.哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞,是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類具有發(fā)育的全能性的細胞。 16.胚胎干細胞可分為全能干細胞、多能干細胞和專能干細胞。胚胎干細胞具有體積小、細胞核大、核仁明顯等特點。17.ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上,或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中,能夠維持不分化的狀態(tài);在培養(yǎng)液中加入分化誘導因子,如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學物質時,就可以誘導ES細胞向不同類型的組織細胞分化。 18.培養(yǎng)胚胎干細胞使用的物質主要是飼養(yǎng)層和動物血清等,說明飼養(yǎng)層主要是給胚胎干細胞提供營養(yǎng)物質;抗生素能殺細菌,在細胞培養(yǎng)中加入抗生素能防止雜菌污染。19.目前,器官移植面臨的難題主要是供體的短
12、缺和免疫排斥。器官移植過程中產生的免疫是細胞免疫,細胞免疫主要和胸腺中發(fā)育成熟的T細胞有關。 20.在轉基因動物的培育過程中,需要用到的胚胎工程技術主要有體外受精技術、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等。 21.骨髓是人體的造血組織,存在造血干細胞,骨髓移植的實質是將造血干細胞移植到患者體內。22.克隆某種哺乳動物需要供體提供細胞核,而成熟的紅細胞沒有細胞核,所以不能作為供體。23.卵裂階段的細胞分裂方式有絲分裂。24.受卵膜制約,從受精卵到囊胚階段總體積不變或略有減小,所以每個細胞體積減少。25.伴隨細胞分裂,細胞數目增多,總DNA含量增多,但每個細胞中DNA含量保持相對穩(wěn)定。26.受體對移入子宮的外
13、來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應。胚胎移植在桑椹胚或囊胚期進行,因原腸胚期的胚胎已形成,此時胎盤與母體發(fā)生聯(lián)系。27.胚胎干細胞培養(yǎng)時在培養(yǎng)液中加入血清,可以補充一些天然成分和一些微量營養(yǎng)物質。28.胰蛋白酶可以水解細胞間質(蛋白質)而使細胞相互分離。 29.試管動物的技術基礎是體外受精、胚胎移植;克隆動物的技術基礎是動物細胞核移植30.試管動物的意義是充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力,縮短供體本身的繁殖周期;克隆動物的意義是加速家畜遺傳改良進程、挽救瀕危物種等31.試管動物技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后,再經移植產生后代的技術,該技術包括的環(huán)節(jié)
14、有體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植,不包括轉基因、核移植和體細胞克隆。32.動物的早期胚胎移植到同種且生理狀態(tài)與供體相同的動物體內,使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術叫做胚胎移植。生理狀態(tài)相同更有利于胚胎的存活。移植胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受受體的影響。33.促性腺激素在胚胎移植中有非常重要的作用,包括超數排卵和同情發(fā)情處理。用激素對雌畜進行超數排卵處理,是獲得大量卵母細胞的有效辦法。33.胚胎移植的意義:可充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力;大量節(jié)省購買種畜的費用;一胎多產。專題四 生物技術的安全性和倫理問題1.轉基因生物的安全性問題(1)外源基因擴散到其他物種(外源基因漂移)。(2)轉基因植株擴散
15、影響生態(tài)系統(tǒng)的結構和功能。(3)轉基因植株擴散對生物多樣性的影響。(4)轉基因植物殘體或分泌物對環(huán)境的影響。(5)重組微生物的中間產物可能會造成二次污染。(6)轉基因中的某些有毒蛋白或過敏蛋白可能通過食物鏈進入動物或人體內。 2.轉基因生物的優(yōu)點解決糧食短缺問題;減少農藥使用,減少環(huán)境污染;增加食物營養(yǎng),提高附加值;增加食物種類,提升食物品質;提高生產效率,帶動相關產業(yè)發(fā)展。3.對待轉基因生物的正確態(tài)度是趨利避害,不能因噎廢食。 4.轉基因生物存在安全性的原因目前對基因的結構、調控機制及基因間的相互作用了解有限;目的基因往往是異種生物的基因;外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機的。 5.試管
16、嬰兒是利用體外受精和胚胎移植等技術繁殖個體,其主要目的是解決不孕夫婦的生育問題。6.設計試管嬰兒與試管嬰兒相比需在胚胎移植前對胚胎進行遺傳學診斷,以篩選符合特殊要求的胚胎,進而生出特定類型的嬰兒。 7.基因檢測是指通過基因芯片對被檢測者細胞中的DNA分子或蛋白質進行檢測,分析出被檢測者所含的各種致病基因(疾病)和疾病易感基因情況的一種技術。由于直接檢測基因較困難,可測定基因表達的產物蛋白質。原理是DNA分子雜交或抗原抗體雜交。8.嚴重沖擊婚姻、家庭和兩性關系等倫理道德觀念的技術是克隆人,基因檢測可應用于某些疾病的診斷,設計試管嬰兒的性別只是對性別比例有影響,不會沖擊倫理道德。9.生物武器與常規(guī)
17、武器的不同特點(1)致病力強,傳染性大。(2)有潛伏期。一般潛伏期的癥狀不明顯,難以及時發(fā)現(xiàn)。(3)污染面積大,危害時間長。(4)傳染途徑多。(5)生物武器造價低,技術難度不大,隱秘性強,可以在任何地方研制和生產。 10.人們對待生物武器的態(tài)度是:禁止生物武器的研發(fā)、生產、儲存、擴散、使用。11.生物武器的主要特點:擁有生命力、能夠在宿主體內繁殖,并隨宿主移動散布到不同的地方。生物武器具有傳染性強、污染面廣、難以防治等特點;我國在任何情況下不發(fā)展、不生產、不儲存生物武器。 12.生物武器的傳播途徑包括直接傳播、食物傳播和生活必需品傳播。13.基因選擇性表達是指在同一遺傳物質下因其轉錄的mRNA
18、不一樣,導致翻譯產生的蛋白質不相同,從而導致細胞的性狀、功能不相同,如有的是胰島細胞,有的是血細胞,有的是心肌細胞,該過程的開始發(fā)生在囊胚期。14.核移植成功后,用物理或化學方法激活受體細胞,目的是使其完成有絲分裂和發(fā)育進程,完成從一個細胞到相關組織、器官、個體的使命。15.在進行動物克隆時,一般都選擇去核的卵細胞作為受體細胞,原因是:卵細胞體積大,易操作;卵細胞中含有誘導體細胞核全能性表達的因子16.試管嬰兒技術的生物學原理是有性生殖(又稱為體外受精技術),克隆技術的生物學原理是無性生殖(又稱為體細胞核移植技術)。17.試管嬰兒與設計試管嬰兒的區(qū)別是后者比前者多了胚胎移植前的遺傳學診斷。 18. “實質性等同”是指在轉基因農作物中只要某些重要成分沒有發(fā)生改變,就可以認為與天然品種“沒有差別”。這僅僅是對轉基因農作物安全性評價的起點,而不是終點。19. 治療性克隆是通過將患者的健康細胞的細胞核移植,經培養(yǎng)形成所需要的組織器官。專題五 生態(tài)工程1.物質循環(huán)再
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