Pellicon2操作手冊1

1、MilliporeBioProcesssDivision維護(hù)手冊Pellicon&Pellicon2超濾膜堆MILLIPORE手冊使用方法P.3.Pellicon&pellicon2膜堆P.4沖洗步驟P.5.清洗步驟P.6.消毒步驟P.1.0除熱原步驟P.1.1.水通量的測量P.1.2膜堆的完整性檢測P.1.4儲(chǔ)存步驟P.1.7化學(xué)兼容性P.1.9.本手冊對如何維護(hù)Millipore公司生產(chǎn)的切向流超濾膜、膜堆和超濾系統(tǒng)提供了一些建議。這些建議是根據(jù)我們現(xiàn)有的經(jīng)驗(yàn)和實(shí)踐編寫的，沒有將所有可能用到的清洗、消毒和除熱原的方法全部列出。如果本手冊中提供的方法不適合于您的應(yīng)用，請與Mi

2、llipore公司技術(shù)服務(wù)部門聯(lián)絡(luò)，以獲取進(jìn)一步的信息。手冊使用方法本手冊詳細(xì)介紹了以下的維護(hù)程序:?沖洗*清洗?消毒?除熱原?水通量NWP的檢測?完整性測試方法?保存本手冊介紹了在每一步操作時(shí)超濾系統(tǒng)的連接方式，以及建議使用的切向流速和膜透壓。在清洗條件建議表中，列明了各種清洗劑的濃度、pH值、時(shí)間、溫度和與膜的化學(xué)兼容性。清洗劑選擇表可以幫助用戶根據(jù)不同的應(yīng)用和污染情況，選擇相應(yīng)的清洗劑。但是很難預(yù)測出所有應(yīng)用所需的清洗劑，所以在清洗劑選擇表中也同時(shí)列出了可供選擇的其他清洗劑。有一些應(yīng)用可能需要兩步清洗。在這種情況下，必須用水將第一種清洗劑從超濾系統(tǒng)中完全沖洗干凈之后，才可以使用第二種清洗

3、劑，以免不同的清洗劑之間發(fā)生對膜堆有害的化學(xué)反應(yīng)。選擇清洗方法：1. 從清洗劑選擇表中，找出類似的應(yīng)用或可能的污染物。2. 選擇與所使用的膜堆兼容的清洗劑。3. 從清洗條件建議表中，找出對應(yīng)的清洗劑的操作條件。選擇消毒、除熱原和保存劑的方法與此相同。注：1. 一定要確認(rèn)您選擇的清洗劑與膜材質(zhì)是兼容的。2. 所有新膜堆在安裝后第一次使用之前，必須進(jìn)行沖洗和清洗。3. 清洗好的新膜堆要用純水測定水通量NWP。Pellicon&Pellicon2膜堆膜的類型膜分子量PH范圍溫度適用范圍cPT系列2-144-5010,0002-144-5010,0002-144-5010,00030,0002

4、-144-50PTGCPHSA-G2-144-50PHSA-TPTTKPTHK100,000PTMK300,0002-144-50Biomax系列改良聚醴碉Biomax52-144-50（合膜Biomax8Biomax10Biomax30Biomax50Biomax100Biomax3005,0008,00010,00030,00050,000100,000300,0002-142-142-142-142-142-144-504-504-504-504-504-50Biomax500500,0002-144-50Biomax10001,000,0002-144-50PL系列改良纖維素2-114

5、-502-114-501,0002-114-503,0005,0002-124-5010,00030,0002-124-50PLACPLBCPLCCPLGCPLTKPLHK100,0002-124-50PLMK300,0002-124-50PLC系列改良纖維素復(fù)合膜5,00010,00030,0002-112-122-122-124-504-504-504-50100,0002-124-50PLCCCPLCGCPLCTK300,000PLCHKPLCMKPLCXK1,000,0002-124-50Durapore低蛋白吸附聚偏二氟乙烯VVPP0.01um2-114-50GVPP/GVLP0.2

6、2um2-114-50HVMP0.45um2-114-50DVPP0.65um2-114-50沖洗步驟Pellicon盒式膜堆在使用前后及清洗前都應(yīng)沖洗，在每次清洗、消毒和除熱原之后也要進(jìn)行沖洗，以便將化學(xué)試劑沖洗干凈。1 .將透過管路和回流管路處于排放狀態(tài)，確保在沖洗過程中沒有液體流回清洗罐2 .在清洗罐中加入4050C的純水(經(jīng)過過濾的去離子水、注射用水或反滲透水)或緩沖液，如果水會(huì)導(dǎo)致系統(tǒng)和膜堆內(nèi)溶質(zhì)的沉淀，就必須用合適的緩沖液沖洗后才進(jìn)行清洗。建議的清洗體積膜堆面積體積0.1m2“Mini”膜堆1.8升0.5m2標(biāo)準(zhǔn)膜堆10升2.5m2“Maxi”膜堆50升注：如果是新膜，建議使用30

7、-40升/米2的水進(jìn)行沖洗，以確?？梢园涯ぐ械谋４嬉簺_洗干凈。3 .將透過液閥門和回流閥門完全打開。4 .如果您的系統(tǒng)采用的是離心泵，可將泵的出口閥關(guān)閉；如果您的系統(tǒng)采用的是變速泵，請把泵速調(diào)到最低5 .啟動(dòng)泵，并立即開啟泵的出口閥或提高泵速到下面所列出的數(shù)值。膜堆面積流速0.1m2“Mini”膜堆1.2lpm0.5m2標(biāo)準(zhǔn)膜堆6.0lpm6 .5m2"Maxi”膜堆301Pm6 .用回流閥把本體的回流壓力提高到5Psi(0.3bar),同時(shí)保持原來的切向流速，這時(shí)候進(jìn)口壓應(yīng)該在20Psi(1.3bar)左右。7 .繼續(xù)用上述條件沖洗一到兩分鐘。8 .確定清洗罐內(nèi)的水在停泵前沒有用

8、光，避免泵空轉(zhuǎn)。9 .如需要可以在沖洗的后期，從濾過液和回流液中抽樣檢驗(yàn)殘留物，來檢查沖洗效果。清洗步驟1. 把濾過液和回流液出口連接到清洗罐。2. 關(guān)掉清洗罐的排液閥、打開回流和濾過口的閥門。3. 如果您的系統(tǒng)采用的是離心泵，可將泵的出口閥關(guān)閉；如果您的系統(tǒng)采用的是變速泵，請把泵速調(diào)到最低。4. 從清洗劑選擇表中，選出能去除系統(tǒng)內(nèi)的堵塞物的適當(dāng)清洗劑，在清洗條件建議表中確認(rèn)該清洗劑與您所使用的膜材質(zhì)兼容，同時(shí)選定該清洗劑的濃度和條件；將40-50C的水加入到清洗罐中，再把清洗劑按照選定的濃度加入到清洗罐內(nèi)。如果能在清洗期間保持這一溫度對清洗效果會(huì)有顯著的幫助。5. 啟動(dòng)泵，并立即開啟泵的出口

9、閥或提高泵速到下面所列出的流速。膜的類型流道類型Mini膜堆0.1m2標(biāo)準(zhǔn)膜堆0.5m2Maxi膜堆2.5m2Pellicon一1.2lpm6.0lpm30lpmPellicon2A0.6-0.7lpm2.8-3.5lpm14-18lpmC1.1-1.3lpm5.5-6.5lpm27-33lpmV1.1-1.3lpm5.5-6.5lpm27-33lpm6. 調(diào)節(jié)回流閥及泵速達(dá)到以下壓力條件進(jìn)口壓力2530Psi(1.7bar5Psi (0.3bar)2.0bar)回流壓力7. 讓清洗液循環(huán)到指定時(shí)間。如果使用的是揮發(fā)性清洗劑如氯時(shí)，要定時(shí)測量清洗劑的濃度，并當(dāng)濃度下降時(shí)補(bǔ)充清洗劑至設(shè)定濃度。8

10、. 如果系統(tǒng)比較復(fù)雜有多個(gè)歧管的話，要確保所有接觸料液的表面都能被清洗劑清洗干凈，同樣所有接觸料液的閥門也需要清洗干凈；一個(gè)比較好的方法是，在清洗過程中，將閥門開大-關(guān)小兩次以上，以保證閥體內(nèi)接觸料液的內(nèi)表面全部都能接觸到清洗劑。9. 清洗循環(huán)結(jié)束，關(guān)閉泵并排空系統(tǒng)。10. 按照沖洗步驟，用純水把系統(tǒng)沖洗干凈。Pellicon&Pellicon2超濾膜堆料液可能堵塞物推薦清洗劑其他清洗劑蛋白溶液被吸附的蛋白NaOHTritonX-100血液或血清制品NaOCIHenkelP3-11細(xì)困和動(dòng)物蛋白Tergazyme酶疫苗菌體吸附的蛋白先用NaOCl再用NaOH先用NaOCl再用大腸桿菌消

11、泡劑HenkelP3-11或TritonX-100或SDS細(xì)菌脂肪Tergazyme其他多糖細(xì)晌碎中細(xì)菌裂解液蛋白先用H3PO4再用NaOHTween-80脂多糖先用H3P。4再用NaOCl先用NaOCl再用細(xì)菌碎片TritonX-100或SDS多糖吸附的多糖NaOH先用NaOCl再用脂多糖、糊精、淀粉果膠、粘多糖HenkelP3-11或TritonX-100或SDSTergazyme除熱原殘留的有機(jī)膠體NaoHX光顯影劑、抗生素脂多糖氨基酸、小分子溶液食品和飲料蛋白、糅酸、苯酚、有機(jī)膠體、先用NaOCl再用NaOH*HenkelP3-11酒、果汁、蛋白液、醋等腐殖酸先用NaOCl再用*Hen

12、kelP3-53HenkelP3-11或*TergazymeHenkelP3-53或Tergazyme水處理鐵的化合物檸檬酸硝酸水處理礦物鱗片硝酸檸檬酸無機(jī)沉淀物磷酸Pellicon膜堆料液可能堵塞物推薦清洗劑其他清洗劑蛋白澄清?重組蛋白?血液和血清制品?層析前潛清沉淀蛋白脂肪蛋白和脂肪NaOCITween-80TritonX-100Tergazyme尿素哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)物細(xì)胞碎片NaOCIH3PO4紅細(xì)胞碎片細(xì)胞壁碎片沉淀蛋白NaOCITergazymeHenkelP3-53細(xì)菌發(fā)酵液菌絲體或真菌的發(fā)酵液吸附的蛋白消泡劑、細(xì)胞碎片脂肪、多糖卬加工NaOCI先用NaOCI再用HenkelP3-

13、53或Tergazyme先用NaOCI再用TritonX-100或SDS溶菌產(chǎn)物澄清蛋白、脂多糖細(xì)菌碎片先用H3PO4再用NaOCITween80先用NaOCI再用TritonX-100或SDS層析前澄清不溶解父性蛋白NaOCI先用NaOCI再用TweenTritonX-100多糖脂多糖、多聚葡錮糖淀粉、果膠、粘多糖吸附的多糖NaOHHenkelP3-53或Tergazyme先用NaOCI再用TritonX-100或SDS果汁和飲料澄清蛋白、糅酸、聚苯酚有機(jī)膠體、淀粉先用NaOCI再用HenkelP3-53NaOCI水處理鐵復(fù)合物礦物鱗片檸檬酸磷酸無機(jī)鹽沉淀澄清礦物鱗片無機(jī)沉淀物硝酸H3PO4

14、檸檬酸清洗條件污染物膜清洗劑濃度溫度0CPH時(shí)間（分鐘）有機(jī)物生物膜，蛋白生物多聚物多聚石炭酸PT系列BiomaxNaOH0.1-0.5N40-5013-13.730-60同上PLAC,PLBC,PLCCNaOH0.1N20-251330-60同上PLGC,PLCGC,PLTK,PLCTK,PLCHK,PLCMK,piPYIZNaOH0.1N25-401330-60蛋白生物多聚物多糖PLCXKPT系列BiomaxDuraporeNaOCl250ppm活性氯40-5010-1130-60生物多聚物蛋白，膠體，多聚石炭酸脂油，消泡劑，無機(jī)物結(jié)垢所有材質(zhì)的膜Tergazyme0.2%40-509-1

15、030-60蛋白，肽，脂多糖，油，消泡劑所有材質(zhì)的膜Triton-X100SDSTween800.1%0.1%0.1%40-5040-5040-505-85-85-830-6030-6030-60蛋白，蛋白沉淀所有材質(zhì)的膜月尿7M40-50860礦物質(zhì)結(jié)垢，核酸所有材質(zhì)的膜HNO3H3PO40.1N0.1N40-5040-501.01.03030鐵，鈕結(jié)垢所有材質(zhì)的膜檸檬酸（用氨水將pH調(diào)到3）1%40-503.060膜堆的消毒應(yīng)該在完全清洗和沖洗后才可進(jìn)行從下表找出與膜材質(zhì)兼容的消毒劑:消毒時(shí)需要的壓力、流速等與清洗時(shí)所用的一樣。請參考清洗步驟消毒劑和所用的條件用于pellicon盒式膜堆*

16、為了保證膜的使用壽命，對于PLAC , PLBC和PLCC膜，消毒的溫度在20- 25 ° C膜材質(zhì)消母劑濃度溫度（°C）pH時(shí)間（分鐘）所有材質(zhì)的膜Naocl20-50ppm活性氯20506-81530所有材質(zhì)的膜過乙酸100-200Ppm(0.25-0.4%)10-403.515PT聚醴碉膜Biomax膜NaOH0.1-0.5N40-50*13一13.730PL改良纖維素NaOH0.1N40501330所有材質(zhì)的膜甲醛1-2%20305一83025-40 Co微佳；對于PLGC等大分子量的改良纖維素膜，消毒溫度可以達(dá)到除熱原步驟膜堆的除熱原應(yīng)該在清洗、消毒和沖洗之后進(jìn)行

17、。除熱原時(shí)的壓力、流速及所需液體體積與清洗相同，請參考清洗步驟。從下表中找出與超濾膜材質(zhì)兼容的除熱原試劑:除熱原試劑和應(yīng)用條件用于pellicon盒式膜堆膜材質(zhì)除熱原試劑濃度溫度CpH時(shí)間（分鐘）PT聚醴碉膜Biomax膜NaOH0.1-0.5N30-5013-13.730PL改良纖維素NaOH0.1N30-50?1330PT聚碉膜Durapore膜PHSA膜NaOCl300Ppm活性氯600ppmNaOCl3050101130所有材質(zhì)的膜HCl0.1N30-50130所有材質(zhì)的膜H3PO40.1N30-50130?為了保證膜的使用壽命，對于PLAC,PLBC和PLCC膜，消毒的溫度在20-2

18、5°C度可以達(dá)到25-40 Co為佳；對于PLGC等大分子量的改良纖維素膜，消毒溫水通量(NWP)測量新股在第一次使用之前，應(yīng)測量它的水通量NW P 。先對膜堆進(jìn)行清洗和沖洗,然后再測NWP,這時(shí)測出的NWP將作為標(biāo)準(zhǔn)來檢驗(yàn)每次使用后膜堆的清洗效果。步驟:1. 把回流管和透過液管引回清洗罐。2. 把罐的排放閥關(guān)閉，打開回流管路和透過液管路或閥門。3. 如果使用的是變速泵，把泵速調(diào)到最?。蝗绻褂玫氖请x心泵，關(guān)閉泵的出口閥。4. 在清洗罐中注滿純水，水溫在25°C左右，水質(zhì)應(yīng)是蒸儲(chǔ)水或過濾后的去離子水。5. 開啟泵，調(diào)節(jié)到以下壓力：進(jìn)口壓10Psi(0.7bar)回流出口壓5

19、Psi(0.34bar)7. 記錄透過液的速度、進(jìn)口和回流壓力、水溫等數(shù)據(jù)。6. 循環(huán)510分鐘，保證壓力和水溫的穩(wěn)定8. 把泵關(guān)掉，把系統(tǒng)中的水排空。9. 用以下的公式計(jì)算NWP,將計(jì)算出的NWP與最初的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較A. 測量：R=透過速度ml/minPin=進(jìn)口壓psi(bar)Pout=出口壓psi(bar)Pp=透過口壓psi(bar)B. 算出過濾膜的總面積_.22A=面積ft(m)C. 根據(jù)測量的溫度，從下表中找出的NWP溫度校正系數(shù)FD. 利用下面公式計(jì)算NWPNWP=Pin+Pout當(dāng)膜堆使用了一次之后，所測出的NWP不應(yīng)低于最初標(biāo)準(zhǔn)的80%;在反復(fù)使用后，每次NWP的衰減不應(yīng)

20、超過10%。如果NWP衰減幅度較大，說明清洗效果不好，應(yīng)該試用其它的清洗劑和清洗程序。如有問題，請與密理博公司當(dāng)?shù)氐木S修工程師聯(lián)系。NWP水溫校正因素表（F）(°C)FT(aC)F0.595360.7930.605350.8080.615340.8250.625330.8420.636320.8590.647310.8770.658300.8960.670290.9150.682280.9350.694270.9560.707260.9780.720251.0000.734241.0230.748231.0470.762221.0720.777211.098T(°C)201

21、918171615141312111098765F1.1251.1521.1811.2121.2431.2761.3101.3461.3831.4221.4631.5061.5511.5981.6481.69910.T52515049484746454443424140393837膜堆的完整性檢測在對膜堆進(jìn)行完整性檢測之前,系統(tǒng)應(yīng)該經(jīng)過充分的清洗和沖洗，殘留的清潔劑會(huì)對結(jié)果有很大影響。1. 首先確定系統(tǒng)已經(jīng)清洗好，并且膜已經(jīng)完全濕透。膜的潤濕可以在TMP的條件下，用水循環(huán)五分鐘。2. 將系統(tǒng)內(nèi)的水排空。3. 把經(jīng)過過濾的并且壓力可調(diào)節(jié)的氣源接到膜堆的進(jìn)口或回流口，最好選擇位置比較高那一個(gè)口。4

22、. 把沒有接氣源的進(jìn)口或回流口用閥門或其他方法封閉。5. 透過液口是開放的。6. 慢慢的加壓到指定的氣壓，然后穩(wěn)定五分鐘讓殘留的水排出。7. 測量并記錄氣壓、溫度和從透過口出來的氣體流量。氣體流量可用氣體流量計(jì)測量或如圖示測量一定時(shí)間內(nèi)在倒置的灌滿水的量筒中有多少體積水被排走。注滿水的量筒手動(dòng)完整性檢測的示意圖空氣Pellicon 膜堆空氣一8. 比較測量的流量與表格中殿揖械出如果測量值大于指標(biāo)，請檢查盛水的容器是否按照操作手冊的指示正確安裝。如果膜堆安裝正確，但所測氣體流量仍然高于表中所列的指標(biāo)，請立即和Millipore公司當(dāng)?shù)氐霓k事處聯(lián)系。驗(yàn)證Pellicon膜堆完整性的空氣擴(kuò)散指標(biāo)充分

23、潤濕的完整的超濾膜的空氣流M(毫升/分鐘)膜分子量或孔徑1ft2Mini膜堆5ft2標(biāo)準(zhǔn)膜堆225ftMaxi膜堆測試壓力psi(bar)PT系列<3<12<605(0.34)PIIK10,000<3<12<605(0.34)PTGC30,000<3<12<605(0.34)PTHK100,000<12<60<3005(0.34)PTMK300,000N/A<12N/A5(0.34)10,000PHSA-G10,000N/A<24N/A10(0.68)PHSA-TPL系列1,000<3<12N/A5

24、(0.34)PLAC3,000<3<12N/A5(0.34)PLBC5,000<3<12N/A5(0.34)PLCC10,000<10<46N/A5(0.34)PLGC30,000100,000<12<60N/A5(0.34)PLTK300,000<12<90N/A5(0.34)PLHK<12<60N/A5(0.34)PLMK0.1umDurapore系列0.2um<3<12N/A10(0.68)VVPP0.45um0.65um<3<12N/A10(0.68)<3<12N/A10(0.6

25、8)注：如果超濾膜不完整，其所測的空氣流量將大大超過表中流速指標(biāo)的上限充分潤濕的完整的超濾膜的空氣流M（毫升/分鐘）膜分子量0.1m20.5m22.5m2測試壓力或孔徑Mini膜堆標(biāo)準(zhǔn)膜堆Maxi膜堆psi(bar)Biomax膜Biomax55,0000-4<18<9010(0.68)Biomax88,0000-4<18<9010(0.68)Biomax1010,0000-4<18<9030(2.1)Biomax3030,0000-4<18<9010(0.68)Biomax5050,0000-4<18<9010(0.68)Bioma

26、x100100,0000-4<18<9010(0.68)Biomax300300,0000-12<60<30010(0.68)Biomax500500,0000-12<60<30010(0.68)Biomax1,0001,000,0000-12<60<30010(0.68)PL系列PLAC1,000<10<48<24030(2.1)PLBC3,000<10<48<24030(2.1)PLCC5,000<10<48<24030(2.1)PLGC10,000<6<30<1505(

27、0.34)PLTK30,000<12<60<3005(0.34)PLC系歹PLCCC5,000<7<35<17530(2.1)PLCGC10,000<7<35<17530(2.1)PLCTK30,000<4<18<9010(0.68)PLCHK100,000<3<12<6010(0.68)PLCMK300,000<4<18<9010(0.68)PLCXK1,000,000<4<18<9010(0.68)保存步驟1. 把回流和過濾管結(jié)回清洗罐。2. 將回流和過濾口的閥門打

28、開。3. 將泵流速調(diào)到最小。4. 從表上按膜的材質(zhì)找出合適的保存劑。按濃度的要求開一定量的保存。把保存液放進(jìn)清洗罐5. 調(diào)泵速到下列的流速。膜流道類型流速(lpm/m2)進(jìn)口壓力psibarpsibarPellicon一1225-301.7-2.150.3Pellicon2A5.6-725-301.7-2.150.3C11-1325-301.7-2.150.3V12-136-90.4-0.61-40.07-0.286. 調(diào)節(jié)回流閥把回流壓力和進(jìn)出口壓差調(diào)到上表中標(biāo)明的數(shù)值，同時(shí)保持要求的流速。7. 將保存液循環(huán)五分鐘。8. 如果膜堆在1-5天之內(nèi)還要再次使用，可以將膜堆在系統(tǒng)中保存，只需把泵關(guān)

29、閉，把進(jìn)出膜堆夾具的所有管路上的閥門關(guān)閉，讓膜堆中充滿保存液，然后把膜堆和夾具在4C下保存。9. 如果在長時(shí)間（如超過5天）不會(huì)再使用，應(yīng)把膜堆從濾器上拆下來，用保存液將膜堆充分潤濕后，保存在密封的塑料袋中，或放入裝有保存液的容器中，并讓保存液將膜堆浸沒，放在4C下保存。膜的材質(zhì)保存劑濃度PH時(shí)限聽有材質(zhì)的膜NaHSO31.0%4-8兩個(gè)月聽有材質(zhì)的膜NaCl5.0%4-8大聽有材質(zhì)的膜疊氮化鈉0.05%4-8三個(gè)月聽有材質(zhì)的膜甲醛1-2%4-8-年聽有材質(zhì)的膜H3PO40.1N2六個(gè)月Biomax系歹UNaOH0.1N13六個(gè)月PLGCNaOH0.1N0.05N1312.7四個(gè)月八個(gè)月除了PLAC,PLBC,PLCC外其他的PL膜包NaOH0.1N0.05N1312.7六個(gè)月12個(gè)月Pellicon&Pellicon2膜包的保存液以上所推薦的保存液可以保證膜堆的充分潤濕并抑制細(xì)菌的生長，避免膜包受損再次使用之前，要對膜包進(jìn)行沖洗、清洗和消毒。膜包要保存在塑料袋或容器中，在4C下（但注意不能結(jié)冰）保存。Pellicon&Pellicon2膜堆化學(xué)兼容性表化學(xué)品聚醴碉系列(PT)Biomax系