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文檔簡介
1、尿液分析檢查標準化簡介尿液分析(fnx)檢查標準化廣州醫(yī)學(xué)院許建邦第一頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介 尿液分析(尿液分析(Urinalysis)是尿液是尿液(Urina)和分析(和分析(Analysis)二詞組合,二詞組合,相當于我國沿用的尿常規(guī)(相當于我國沿用的尿常規(guī)(Urine Routine)檢驗。檢驗。 尿液分析對泌尿系、消化系、心血管、尿液分析對泌尿系、消化系、心血管、內(nèi)分泌等多種疾病的診斷、鑒別診斷、內(nèi)分泌等多種疾病的診斷、鑒別診斷、療效觀察,預(yù)后估計;對人群健康保健療效觀察,預(yù)后估計;對人群健康保健均有重要價值。更因標本易得、檢測簡均有重要價值。更因標本易得、檢測簡便,結(jié)
2、果客觀而成為臨床使用最廣泛便,結(jié)果客觀而成為臨床使用最廣泛(gungfn)的檢驗項目之一。的檢驗項目之一。第二頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介由于尿液成份復(fù)雜,易受污染,放置時間過長后受理化因素影響而使檢查結(jié)果發(fā)生改變,加上缺乏統(tǒng)一標準要求和檢查方法不一致,導(dǎo)致同一份標本在不同實驗室或同一實驗室不同操作者檢查得出截然不同的結(jié)果。因此,按照(nzho)標準化要求實施規(guī)范化操作是當前實驗室首要解決的問題。第三頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介1995年,NCCLS(美國臨床檢驗標準委員會)頒布了尿液分析和尿液樣本的收集,運輸及儲存;批準指南(zhnn)文件GP16-A,對尿液分析作出全面
3、的指導(dǎo)。第四頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介1999年,NCCLS和CCCLS(中國臨床檢驗標準分委會)正式(zhngsh)同意在臨床實驗的標準化與一致性方面進行合作,標志著我國檢驗醫(yī)學(xué)已與國際接軌,逐步走上規(guī)范化,法制化管理的軌道。第五頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介2002年1月在廣州召開中華醫(yī)學(xué)檢驗分會“血液學(xué)和體液學(xué)專家委員會”全體委員會議上,經(jīng)過認真討論,一致通過由叢玉隆教授起草(qco)的尿沉渣檢查標準化的建議文件。并建議全國檢驗界參考此文件規(guī)范實驗室的操作。第六頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介尿液分析(fnx)包括理學(xué)、化學(xué)、顯微鏡檢查三個組成部份。下面,以NC
4、CLSLiteratrueGP16-A和尿沉渣檢查標準化的建議為基礎(chǔ),參考JCCLSGP1P3文件、ECCLS提出尿沉渣檢查的相關(guān)文件和國內(nèi)、外有關(guān)文獻,結(jié)合在實驗室中按標準化的要求實施尿液分析規(guī)范化操作方面談?wù)剛€人的意見,供同道們參考。第七頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介1、標本收集(shuj)1.1實驗室工作人員、醫(yī)護人員必需要對病人留尿進行指導(dǎo),務(wù)必使尿道口保持清潔。第八頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介l清晨天然中段尿l隨機尿l時段尿(起點和終點,起始時先排空(pikn)膀胱的貯尿)l雙份尿l導(dǎo)管尿l穿刺尿1.2 在不同時間和方式(fngsh)收集尿液:第九頁,共六十五頁。尿
5、液分析檢查標準化簡介1.3尿量3050ml。1.4送檢單上應(yīng)注明(zhmn)留尿時間、送檢時間。須說明近期是否給服用對尿液分析有影響的藥物和其它物質(zhì)。第十頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介2.1尿液留取后盡快送實驗室、并應(yīng)在2小時內(nèi)完成檢驗。2.2如留尿后2小時內(nèi)無法完成分析,可置2-8冰箱冷藏,6小時內(nèi)完成檢驗。2.3如僅作尿沉渣檢查(jinch),需加40%甲醛0.5%1.0%防腐(應(yīng)注意甲醛過量時可與尿素產(chǎn)生沉淀物,干擾顯微鏡檢查(jinch))。第十一頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介l病人姓名l特定編碼(住院病人的病區(qū)、床號)l采集(cij)時間。 標本必須有標記,并貼于容器
6、(rngq)上,不可貼在蓋上。第十二頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介l標本容器是否符合要求l標記內(nèi)容與醫(yī)生所填寫化驗單是否一致l留尿到接收標本時間是否過長l標本是否被污染l尿量不少于30mll特殊病例(bngl)不能達到此要求時(如小兒、燒傷,腎衰無尿期等)應(yīng)在報告單上注明收到尿量及檢查方法(離心/未離心)。 實驗室應(yīng)建立嚴格的標本接收(jishu)制度,工作人員在接收(jishu)標本時,必須檢查:第十三頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介l潔凈、防漏、防滲,一次性使用l容積應(yīng)50mll園形開口的直徑4cml具有較寬的底部l盡可能使用具有安全、易于開啟的密封(mfng)裝置。1、 收
7、集標本(biobn)的容器 2.1 收集和運送尿液的容器應(yīng)由不與尿液成份發(fā)生反應(yīng)的惰性材料制成,應(yīng)具備以下條件:第十四頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介l潔凈,透明有足夠硬度的塑料管/玻璃管(最好是不易破碎的一次性管)l有體積刻度(刻度應(yīng)至少標明10ml、5ml、1ml、0.2ml)確保容積標準化l試管(shgun)底部呈錐形/縮窄形,以濃集沉淀物l有蓋,以減少因尿液濺出/離心形成氣霧的危險l無化學(xué)干擾物。注:不推薦重復(fù)使用離心管。適用于尿離心的試管(shgun)應(yīng)具備下列特點:第十五頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介l水平式離心機l有蓋,當轉(zhuǎn)子旋轉(zhuǎn)時具備鎖蓋子的功能l離心(lxn)時
8、,機內(nèi)溫度1525l離心機相對離心力(RCF)約400G左右 作尿沉渣時,應(yīng)使用(shyng)具下列特征的離心機:第十六頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介公式:RCF=1.11810-5RN2RCF:相對(xingdu)離心力(用G表示)R:半徑,單位:cm(從離心機軸中央到試管底部的距離)N:每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)第十七頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介尿沉渣的量和壓(涂)片厚度是標準化重要環(huán)節(jié),在普通玻片上隨意滴加沉渣液加蓋玻片,或不加(bji)蓋玻片,都不能提供標準化的結(jié)果。建議使用標準化的沉渣計數(shù)板。第十八頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介l雙目鏡筒l內(nèi)置光源(gungyun)l機械載
9、物臺,使玻片易于平穩(wěn)移動l基本的物鏡組(10X和40X)及目鏡組(10X/12.5X)l如使用多臺顯微鏡時,應(yīng)用相同的物鏡或目鏡。 在尿分析實驗室,應(yīng)使用(shyng)具有下列特點的高質(zhì)量顯微鏡:第十九頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介2.6有條件(tiojin)的實驗室,可配置多種類型顯微鏡(如:位相差顯微鏡、偏振光顯微鏡、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡等)。第二十頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介有條件的實驗室可使用各類自動(zdng),半自動(zdng)的尿沉渣分析儀作為尿沉渣分析,或用作過篩,但此類儀器必須經(jīng)權(quán)威機構(gòu)認可。第二十一頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介有條件的單位,可用
10、帶計算機成像系統(tǒng)的顯微鏡、標準化的沉渣檢測系統(tǒng)和相關(guān)輔助軟件來自動(zdng)處理結(jié)果。但檢查方法和尿沉渣結(jié)果報告方法必須標準化。第二十二頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介干化學(xué)試劑帶結(jié)果,可用兩種方法判讀:2.9.1目測法將反應(yīng)的試劑帶與不同顏色強度的模塊標準圖比較而確定。2.9.2儀器判讀法用反射(fnsh)光度計檢測試條塊表面反射(fnsh)的光量。儀器可檢測試條塊反應(yīng)的強度,并消除由反應(yīng)時間和顏色判讀所引起的差異第二十三頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介l閱讀并按照操作手冊的要求進行操作l建立并遵守(znshu)執(zhí)行保養(yǎng)計劃l保持儀器清潔l需按儀器廠商的手冊中推薦方案進行校準。
11、使用這些儀器必須(bx)按下列要求進行:第二十四頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介1、外觀/物理學(xué)分析1.1顏色正常尿液應(yīng)為黃色和琥珀色。病理尿色應(yīng)圍繞紅色、黃色、綠色、棕色、乳白色報告1.2濁度(zhud)(透明度)正?;靹蚰驊?yīng)透明。其濁度可用透明、霧狀、云霧狀、渾濁報告。1.3氣味必要時應(yīng)報告。第二十五頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介建議用折射儀法作為參考方法。(當尿液含X光線反差介質(zhì)、葡萄糖、蛋白時可使結(jié)果增高(znggo),應(yīng)予校正。pro1G/dl時SG增高0.003,Glu1G/dlSG增高0.004)。第二十六頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介干化學(xué)試劑帶法是利用S
12、G與離子濃度呈正比原理作SG的估計,尿堿性標本會影響指示劑系統(tǒng),中量蛋白100750mg/dl也會增加(zngji)SG,因此,不能作為檢測和診斷腎功能的指標,更不宜用于新生兒SG測定。非離子性物質(zhì)不影響檢查結(jié)果。第二十七頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介尿比重計法用置換(zhhun)法測定SG,裝置,操作、標準化方面存在不少問題,不是尿比重測定方法。(也有用滲透壓計和諧波振蕩進行SG測定)。第二十八頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介濕化學(xué)分析至少應(yīng)包括糖和蛋白兩項。尿糖可用葡萄糖氧化酶法,條件較差者也可用班氏法:尿蛋白可用磺基水楊酸法或加熱加酸法。干化學(xué)分析是用尿“浸漬條”進行,是一
13、種簡單快速(kuis),對尿半定量的檢測方法。由于生產(chǎn)尿分析儀和使用的試劑帶廠商繁多,各廠對量級標準不一致,造成醫(yī)院間、醫(yī)院內(nèi)測定結(jié)果差異很大。第二十九頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介在使用干化學(xué)法分析時應(yīng)注意下列問題:2.1標本必須新鮮,要求在采樣(ciyn)后2小時內(nèi)完成。2.2使用儀器與試劑帶應(yīng)配套,若使用不同廠商生產(chǎn)的試劑帶,必須經(jīng)嚴格對照,確定無顯著性差異時方可代用。第三十頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介l試劑條貯放于原裝容器內(nèi),短暫暴露于直射光和室內(nèi)溫度都會使試劑條產(chǎn)生錯誤的結(jié)果。l參照廠商規(guī)定,要避光、防潮、干燥,并在一定溫度條件下妥善(tushn)保存。l使用時一次
14、只取出所需要的試劑帶,并立即蓋緊,多余的試劑帶不可再放回容器中。l不要合并各容器內(nèi)的試劑帶。l不可觸摸試劑帶上的化學(xué)檢測塊。2.3 所用試劑帶必須優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定,要具備(jbi)“三證”,要求:第三十一頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介2.4干化學(xué)法與濕化學(xué)法對尿液化學(xué)成份檢測原理(yunl)、靈敏度不同,兩者存在一定差異。如:葡萄糖膜塊用酶法僅能檢測葡萄糖,對乳糖、半乳糖、果糖、蔗糖均不起反應(yīng),而班氏法用還原法原理(yunl)能檢測所有的還原糖;。第三十二頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介蛋白質(zhì)膜塊用指示劑蛋白誤差(wch)法原理僅對白蛋白敏感,靈敏度100300mg/L,磺基水楊酸法用生
15、物堿的陰離子與蛋白質(zhì)的陽離子結(jié)合成不溶性蛋白鹽沉淀的原理檢測白蛋白、球蛋白、本周氏蛋白等,靈敏度50100mg/L,加熱加酸法是通過加熱使蛋白質(zhì)變性凝固,再加酸使蛋白質(zhì)凝固的原理檢測各種蛋白質(zhì),靈敏度150mg/L;膽紅素膜塊檢測膽紅素的靈敏度為20mg40mg/L,而濕化學(xué)法靈敏度為5mg10mg/L。第三十三頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介2.5干擾(gnro)干化學(xué)法的理化,藥物因素很多,常導(dǎo)致假陽性,假陰性結(jié)果出現(xiàn),造成誤診及漏診,因此,對干化學(xué)結(jié)果,要結(jié)合臨床資料進行分析。第三十四頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介項目假陽性假陰性酸鹼度(PH)與食物及放置時間有關(guān)同左比重(
16、SG)隨尿量及尿液含固體物質(zhì)濃度、食物、藥物性質(zhì)及尿液放置時間有關(guān)。同左,堿性尿蛋白質(zhì)(PRO)尿液PH變化可影響實驗結(jié)果、藥物喹寧、喹寧丁、嘧啶等強鹼尿(PH=9.0)、季胺鹽類尿液PH值變化可致,高鹽濃度,本一周氏蛋白,球蛋白,粘蛋白,青霉素葡萄糖(GLU)尿液污染了葡萄糖、H2O2、漂白粉、氧化型清潔劑維 生 素 C750mg/L , 乙 酰 乙 酸400mg/L,5-羥吲哚乙酸,尿黑酸,阿司匹林,左旋多巴,酮體,高比重,低PH時。酮體(KET)苯丙酮和酚酞復(fù)合物含-SH基物質(zhì)(巰甲丙脯酸),BSP、L-DOPA,頭孢類抗菌素,高度著色尿細菌污染,尿放置時間長。膽紅素(BIL)大量氯丙嗪
17、治療,尿中含鹽酸偶氮吡啶,色素尿,尿藍母,硫酸吲哚酚陽 光 照 射 , 尿 中 含 維 生 素 C(250mg/L),亞硝酸鹽,陳舊尿。尿膽原(URO)膽色素原,吲哚,膽紅素,吩噻嗪,藥物色素,非那吡啶,對氨苯磺酸。陽光照射,偶氮基色素藥物,亞硝酸鹽,福爾馬林。亞硝酸鹽(NIT) 細菌污染,標本放置太久,色素尿,非那吡啶。尿在膀胱逗留時間短,非利用硝酸鹽微生物感染,NIT13umol/L,尿中維生素C1.42mmol/L,硝基呋喃。紅細胞(BLO)次氯酸鹽、易熱酶干擾,細菌過氧化物酶污染,肌紅蛋白,氧化型清潔劑。高濃度維生素C(100mg/L),高蛋白尿,高比重尿,PH100mg/l),PH5
18、.0,卡普托利,福爾馬林,樣品未混勻致RBC沉淀,試劑帶靈敏度達不到150mg/l時會出現(xiàn)“假陰性”。第四十頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介又如LEU是根據(jù)粒細胞酯酶與吲哚酚酯反應(yīng)生成吲哚酚,再與重氮鹽氧化縮合生成紫色化合物的原理進行,不與淋巴細胞反應(yīng),當尿中含有福爾馬林、呋喃坦啶、大量膽紅素、氧化型清潔劑時可出現(xiàn)“假陽性”,而當在高比重尿,尿含頭孢霉素VI、慶大霉素、四環(huán)素、硼酸、高濃度草酸時出現(xiàn)“假陰性(ynxng)”。顯微鏡檢查是基于細胞形態(tài)學(xué)觀察來判斷RBC和WBC,因此更為準確可靠。第四十一頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介2.7干化學(xué)法定位于“過篩試驗”,原則上對陽性結(jié)果
19、(jigu)應(yīng)用傳統(tǒng)濕化學(xué)法復(fù)核。按NCCLSLiterationGP16-A規(guī)定:尿蛋白用磺基水楊酸法確證;尿葡萄糖用葡萄糖氧化酶定量法確證;尿膽紅素用哈里遜(Harrison)法確證;尿紅細胞、白細胞用顯微鏡確證。第四十二頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介目前仍有相當一部分實驗室把干化學(xué)結(jié)果作為尿液分析結(jié)果不做顯微鏡檢查就發(fā)出報告(bogo)的做法,顯然是不對的,應(yīng)予糾正。第四十三頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介l醫(yī)生提出要求。l病人的疾病,病情或其他檢查要求。l尿液分析(fnx)中有任何一項理化檢查不正常。 尿液顯微鏡檢查是尿液有形成份確證的唯一方法。3.1 NCCLS對尿沉渣
20、鏡檢范圍(fnwi)提出三點要求:第四十四頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介3.2根據(jù)NCCLSLiteratureGP16-A要求,達到以下條件者可認為是標準化操作:3.2.1尿樣最佳(zuji)選擇是第一次晨尿,并在未冷藏情況下2小時內(nèi)完成檢查。3.2.2尿樣本量應(yīng)標準化,建議統(tǒng)一用10ml。第四十五頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介3.2.3離心(lxn)時間建議統(tǒng)一為5分鐘,以確保同等程度的沉積。3.2.4離心速度建議相對離心力(RCF)約為400G。3 . 2 . 5 留 置 尿 沉 渣 樣 本 為 0 . 2 m l(200ul)。第四十六頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化
21、簡介3.2.6用統(tǒng)一述語,報告格式,參考范圍對尿有形成(xngchng)份以單位體積定量報告。建議用XX細胞(或管型)/ul的報告方式。(有利于臨床醫(yī)師對患者進行動態(tài)觀察)。*在報告結(jié)果前,必須重審所有結(jié)果(包括生化結(jié)果)是否與鏡檢結(jié)果一致,不符合的結(jié)果應(yīng)再次檢測。第四十七頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介中華醫(yī)學(xué)檢驗分會“血液學(xué)和體液(ty)學(xué)專家委員會”全體會議上通過尿沉渣標準化的建議文件中明確規(guī)定操作步驟如下:3.3.1離心離心管中倒入充分混勻的尿液至10ml刻度處,RCF400g,離心5分鐘。離心后傾倒或吸去上清液,離心管底部殘留尿液的量應(yīng)在0.2ml處,使之濃縮50倍。第四十八頁
22、,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介3.3.2鏡檢沉渣液混勻后,取1滴(約15-20l)充液到標準尿沉渣計數(shù)板里(按說明書操作),先用低倍鏡觀察,后用高倍鏡。計數(shù)細胞數(shù)或管型,按XX/l報告。尿結(jié)晶、細菌(xjn)、真菌、寄生蟲等以+、+、+、+或者1+、2+、3+、4+形式報告。第四十九頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介尿結(jié)晶、鹽類的報告(bogo)方法(各實驗室根據(jù)具體情況而定)。3.3.3尿沉渣的檢查內(nèi)容應(yīng)包括:3.3.3.1細胞:紅細胞、白細胞、吞噬細胞、上皮細胞(包括腎小管上皮細胞、移行上皮細胞、鱗狀上皮細胞)、異型細胞等。第五十頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介3.3.3.
23、2管型:透明(tumng)管型、細胞管型、顆粒管型、蠟樣管型、脂肪管型、混合管型、寬形管型等。3.3.3.3結(jié)晶:磷酸鹽、草酸鈣、尿酸結(jié)晶和藥物結(jié)晶等。3.3.3.4細菌、寄生蟲(或蟲卵)、真菌、精子、粘液等。3.3.3.5臨床醫(yī)生特殊要求的其他成分第五十一頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介3.4有條件的實驗室應(yīng)開展各種(zhn)尿液有形成分的染色檢查,配置多種類型顯微鏡,以便于有形成分的進一步鑒別。第五十二頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介尿液沉渣檢查僅為尿液分析的一部分,應(yīng)結(jié)合尿液理學(xué)(lxu)、化學(xué)檢查及臨床資料綜合分析,再發(fā)出報告。尿沉渣檢查應(yīng)建立質(zhì)量保證體系,同時應(yīng)進行尿沉渣
24、檢查的專業(yè)培訓(xùn),技術(shù)未達到熟練要求者,不得上崗第五十三頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介尿液分析應(yīng)在分析前、分析中、分析后實行全過程的質(zhì)量(zhling)控制。包括:檢查方法規(guī)范化、室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)控、交流學(xué)習。第五十四頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介l標本采集規(guī)范l使用(shyng)器材、儀器,試劑帶及其它試劑的規(guī)范。l檢查方法規(guī)范l判斷標準規(guī)范l報告方式規(guī)范1、 檢查(jinch)方法規(guī)范化:第五十五頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介l質(zhì)控尿l陽性率,陰性率l結(jié)果相互矛盾的復(fù)核了解病人情況了解上一次檢查結(jié)果與其它有關(guān)檢查結(jié)合的分析排除產(chǎn)生假陽性,假陰性的原因l復(fù)核制度(zhd)l數(shù)據(jù)貯存第五十六頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介l參加室間評價活動l尿沉渣涂片調(diào)查l交叉(jioch)檢查,現(xiàn)場檢查交流學(xué)習l定期或不定期l規(guī)模可大可小第五十七頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介可自行配制(pizh)或選用商品化質(zhì)控尿,如BayerCHEKSTIXTM,BIO_RADLiquichekTM、JapanQC12。第五十八頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡介5.1做好試劑帶的質(zhì)量管理。5.2每天用高、低值兩種質(zhì)控尿與常規(guī)標本進行平行試驗(shyn),結(jié)果用質(zhì)控管理圖記錄。第五十九頁,共六十五頁。尿液分析檢查標準化簡
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