廣州血液中心輸血探究所課件

1、1廣州血液中心輸血探究所廣州血液廣州血液(xuy)中心輸血研究所中心輸血研究所 田兆嵩田兆嵩第一頁，共六十九頁。2廣州血液中心輸血探究所n輸血前要做三項檢查：輸血前要做三項檢查：血型鑒定；血型鑒定； 抗體篩選；抗體篩選；交叉交叉(jioch)配血試驗。配血試驗。目的有二：目的有二：使輸入的血液成分有效存活；使輸入的血液成分有效存活；不會引起受血者的紅細胞發(fā)生破壞。不會引起受血者的紅細胞發(fā)生破壞。第二頁，共六十九頁。3廣州血液中心輸血探究所n在檢驗醫(yī)學中，沒有幾項檢驗像輸血前檢驗一樣，臨床在檢驗醫(yī)學中，沒有幾項檢驗像輸血前檢驗一樣，臨床醫(yī)生幾乎完全依賴其結果的正確性。醫(yī)生幾乎完全依賴其結果的正確

2、性。輸血前檢驗的每一個環(huán)節(jié)均可能發(fā)生差錯，標本搞錯輸血前檢驗的每一個環(huán)節(jié)均可能發(fā)生差錯，標本搞錯最為常見。最為常見。給患者輸入不相容的血液成分導致嚴重不良后果：給患者輸入不相容的血液成分導致嚴重不良后果：急性溶血反應：多由急性溶血反應：多由ABO血型不相容輸血引起，人為血型不相容輸血引起，人為差錯是其主要原因；差錯是其主要原因；遲發(fā)性溶血反應：多由遲發(fā)性溶血反應：多由ABO以外以外(ywi)血型不相容輸血血型不相容輸血所致，輸血前檢驗不規(guī)范是其主要原因。所致，輸血前檢驗不規(guī)范是其主要原因。第三頁，共六十九頁。4廣州血液中心輸血探究所安全輸血從源頭上抓起就應重視如何獲取安全輸血從源頭上抓起就應重

3、視如何獲取正確的血液標本；正確的血液標本；一旦受血者的血標本張冠李戴，安全輸血一旦受血者的血標本張冠李戴，安全輸血的所有的所有(suyu)防范措施都將化為泡影。防范措施都將化為泡影。減少這種錯誤的有效方法是給每一位住院減少這種錯誤的有效方法是給每一位住院患者手腕上系上一個腕帶（腕環(huán)）；患者手腕上系上一個腕帶（腕環(huán)）；各種各樣的塑料腕帶在國外已廣泛使用，各種各樣的塑料腕帶在國外已廣泛使用，國內(nèi)已有不少醫(yī)院開始使用。國內(nèi)已有不少醫(yī)院開始使用。第四頁，共六十九頁。5廣州血液中心輸血探究所應制定嚴格的應制定嚴格的“血標本的采集與送檢管理血標本的采集與送檢管理制度制度”，并做到醫(yī)、護、技人人皆知：，并做

4、到醫(yī)、護、技人人皆知：患者在采集血標本后又轉科或轉床，需要患者在采集血標本后又轉科或轉床，需要(xyo)輸血時應重新采集血標本（有腕帶可例輸血時應重新采集血標本（有腕帶可例外）；外）；未配戴腕帶而又不知血型的患者，應遵循未配戴腕帶而又不知血型的患者，應遵循兩次采集血標本的規(guī)定；兩次采集血標本的規(guī)定；第五頁，共六十九頁。6廣州血液中心輸血探究所檢驗科做血常規(guī)時做正定型，輸血檢驗科做血常規(guī)時做正定型，輸血(sh xu)時時由血庫復查正定型，加做反定型；由血庫復查正定型，加做反定型；或者備血時由血庫做血型鑒定，輸血時重或者備血時由血庫做血型鑒定，輸血時重新采集血標本做血型鑒定及交叉配血試驗。新采集血

5、標本做血型鑒定及交叉配血試驗。如果兩次血標本血型不一致，或血標本血如果兩次血標本血型不一致，或血標本血型與申請單上的血型不一致，則應重新采集型與申請單上的血型不一致，則應重新采集血標本。血標本。第六頁，共六十九頁。7廣州血液中心輸血探究所采集血標時必須認真核對受血者身份，只采集血標時必須認真核對受血者身份，只有申請單上的資料與患者腕帶的資料完全一有申請單上的資料與患者腕帶的資料完全一致才能采集血標本。致才能采集血標本。使用條形碼的醫(yī)院，應在采血后將標有患使用條形碼的醫(yī)院，應在采血后將標有患者信息的條形碼標簽者信息的條形碼標簽(bioqin)貼在試管上并與腕貼在試管上并與腕帶資料核對。帶資料核對

6、。第七頁，共六十九頁。8廣州血液中心輸血探究所采集血標本時應要求患者回答自己的姓名，意識不清應通采集血標本時應要求患者回答自己的姓名，意識不清應通過親屬確認患者身份。過親屬確認患者身份。不得使用來源不明或無人對其來源負責的血標本。不得使用來源不明或無人對其來源負責的血標本。血標本采集后必須在離開床邊之前在標本上標明患者姓血標本采集后必須在離開床邊之前在標本上標明患者姓名、住院號及標本采集日期（國外要求標明出生日期）。名、住院號及標本采集日期（國外要求標明出生日期）。專用試管上有兩個相同的號碼條，在采集標本后立即專用試管上有兩個相同的號碼條，在采集標本后立即(lj)將另一個號碼條貼在輸血申請單上

7、。將另一個號碼條貼在輸血申請單上。第八頁，共六十九頁。9廣州血液中心輸血探究所一位醫(yī)護人員不得同時采集兩位或兩位以一位醫(yī)護人員不得同時采集兩位或兩位以上患者的血標本，以避免上患者的血標本，以避免(bmin)將血樣注入到將血樣注入到錯誤的試管中。錯誤的試管中。最好由采血者和患者在申請單上簽名，共最好由采血者和患者在申請單上簽名，共同確認血標本的正確性。同確認血標本的正確性。第九頁，共六十九頁。10廣州血液中心輸血探究所貼有標簽的血標本連同輸血申請單經(jīng)核對貼有標簽的血標本連同輸血申請單經(jīng)核對后由醫(yī)護人員送輸血科（血庫），雙方核對后由醫(yī)護人員送輸血科（血庫），雙方核對后簽名確認。不得由非醫(yī)護人員送標

8、本（護后簽名確認。不得由非醫(yī)護人員送標本（護工送標本必須經(jīng)過培訓、考核并授權）。工送標本必須經(jīng)過培訓、考核并授權）。輸血科（血庫）工作人員在檢驗前必須確輸血科（血庫）工作人員在檢驗前必須確認試管上的標簽與申請單上的資料認試管上的標簽與申請單上的資料(zlio)一致，一致，如有疑問，應重新采集血標本。不得電話詢?nèi)缬幸蓡?，應重新采集血標本。不得電話詢問后就擅自修改錯誤的標簽及申請單。問后就擅自修改錯誤的標簽及申請單。第十頁，共六十九頁。11廣州血液中心輸血探究所血標本要做到八不收：血標本要做到八不收：血標本無標簽或填寫不清不收；血標本無標簽或填寫不清不收；血標本與申請單所填項目不符不收；血標本與申

9、請單所填項目不符不收；血標本量少于血標本量少于3ml不收；不收；血標本被稀釋不收（如從輸液管獲取血標本，血標本被稀釋不收（如從輸液管獲取血標本，應以生理鹽水應以生理鹽水(shnglynshu)沖注，并將首先抽取的沖注，并將首先抽取的5ml血液棄去）；血液棄去）；第十一頁，共六十九頁。12廣州血液中心輸血探究所血標本溶血不收（溶血性疾病例外，為防止血標本溶血不收（溶血性疾病例外，為防止對溶血結果誤判為陰性，建議反定型及交叉配對溶血結果誤判為陰性，建議反定型及交叉配血的細胞中加入血的細胞中加入EDTA，以阻斷補體激活途，以阻斷補體激活途徑）；徑）；用肝素用肝素(n s)治療者的血標本未用魚精蛋白對

10、抗治療者的血標本未用魚精蛋白對抗使之凝結不收；使之凝結不收；第十二頁，共六十九頁。13廣州血液中心輸血探究所非醫(yī)護人員送標本不收；非醫(yī)護人員送標本不收；用右旋糖酐等大分子物質(zhì)治療用右旋糖酐等大分子物質(zhì)治療(zhlio)后采集的血后采集的血標本未作標記說明不收（如已標記說明應將紅標本未作標記說明不收（如已標記說明應將紅細胞洗滌）。細胞洗滌）。第十三頁，共六十九頁。14廣州血液中心輸血探究所獻血者的血標本必須從與血袋相連的塑料獻血者的血標本必須從與血袋相連的塑料管中獲得管中獲得(hud)。血清和血漿原則上均可用于輸血前檢驗，血清和血漿原則上均可用于輸血前檢驗，但血清更好。原因是血漿中有時可出現(xiàn)細小

11、但血清更好。原因是血漿中有時可出現(xiàn)細小纖維蛋白包裹紅細胞的凝塊，與凝集反應不纖維蛋白包裹紅細胞的凝塊，與凝集反應不易區(qū)分。易區(qū)分。第十四頁，共六十九頁。15廣州血液中心輸血探究所國外認為必須使用不抗凝或者國外認為必須使用不抗凝或者(huzh)EDTA抗抗凝的血標本。如果用血漿標本，必須通過檢凝的血標本。如果用血漿標本，必須通過檢測弱抗體來評估其有效性，確保臨床有意義測弱抗體來評估其有效性，確保臨床有意義的抗體不被漏檢。的抗體不被漏檢。配血用的血標本必須是輸血前配血用的血標本必須是輸血前3天之內(nèi)的天之內(nèi)的（我國規(guī)定），或血標本能代表患者當前免（我國規(guī)定），或血標本能代表患者當前免疫學狀態(tài)的。疫學

12、狀態(tài)的。第十五頁，共六十九頁。16廣州血液中心輸血探究所國外對有輸血國外對有輸血(sh xu)史患者的標本采集要求史患者的標本采集要求（見表（見表1）表表1 標本采集要求標本采集要求前次輸血時間采集血標本時間314天輸血前24h內(nèi)1528天輸血前72h內(nèi)29天3個月輸血前1周內(nèi)第十六頁，共六十九頁。17廣州血液中心輸血探究所當患者反復當患者反復(fnf)輸血，不需要每天采集血標輸血，不需要每天采集血標本，但要每隔本，但要每隔3天進行一次抗體篩選試驗，天進行一次抗體篩選試驗，隨時了解是否有新的不規(guī)則抗體產(chǎn)生。隨時了解是否有新的不規(guī)則抗體產(chǎn)生。不用溶血的血標本，因為血清中的游離血不用溶血的血標本，

13、因為血清中的游離血紅蛋白可蒙蔽抗體引發(fā)的溶血現(xiàn)象。紅蛋白可蒙蔽抗體引發(fā)的溶血現(xiàn)象。第十七頁，共六十九頁。18廣州血液中心輸血探究所標本保存不當標本保存不當(b dn)會溶血、細菌污染、補體會溶血、細菌污染、補體失活以及不規(guī)則抗體效價降低。保存要求見失活以及不規(guī)則抗體效價降低。保存要求見表表2表表2 標本保存要求標本保存要求18254-30EDTA抗凝全血48h7d不允許血清或血漿不允許7d6個月第十八頁，共六十九頁。19廣州血液中心輸血探究所常規(guī)常規(guī)ABO血型鑒定應包括血型鑒定應包括(boku)正反定型，正反定型，二者起到互相驗證和質(zhì)控的作用。我國已規(guī)二者起到互相驗證和質(zhì)控的作用。我國已規(guī)定常

14、規(guī)血型鑒定還應包括定常規(guī)血型鑒定還應包括(boku)Rh（D）定型。）定型。反定型要用試管法，不用玻片法。反定型要用試管法，不用玻片法。ABO正定型采用單克隆抗正定型采用單克隆抗-A、抗、抗-B血型試血型試劑，抗劑，抗-B試劑不應該與獲得性試劑不應該與獲得性B抗原反應?？乖磻?。二、堅持二、堅持(jinch)正反定型正反定型第十九頁，共六十九頁。20廣州血液中心輸血探究所采用采用A和和B試劑細胞進行反定型檢測。新生試劑細胞進行反定型檢測。新生兒和以前做過反定型可省略。依據(jù)記錄而省兒和以前做過反定型可省略。依據(jù)記錄而省略反定型存在一定風險，因為第一次標本有略反定型存在一定風險，因為第一次標本有可

15、能采錯?？赡懿慑e。只有正反定型結果相符才能正確只有正反定型結果相符才能正確(zhngqu)判定判定ABO血型。單純正定型血型。單純正定型O型不可靠，單純反型不可靠，單純反定型定型AB型也不可靠。型也不可靠。二、堅持二、堅持(jinch)正反定型正反定型第二十頁，共六十九頁。21廣州血液中心輸血探究所正反定型不一致，需進一步鑒定：正反定型不一致，需進一步鑒定：在正定型試劑中增加抗在正定型試劑中增加抗-A1、抗、抗-AB及抗及抗-H：抗抗-AB用來確認弱用來確認弱A和弱和弱B抗原抗原(kngyun)（這種（這種抗抗-A和抗和抗-B的混合物與弱的混合物與弱A和弱和弱B親和力強，親和力強，發(fā)生強烈反應

16、）；發(fā)生強烈反應）；二、堅持二、堅持(jinch)正反定型正反定型第二十一頁，共六十九頁。22廣州血液中心輸血探究所抗抗-A1用來用來(yn li)鑒定鑒定A亞型（亞型（A型中型中A1和和A2這兩種亞型占這兩種亞型占99.99%，A1約占約占80%，A2約約占占20%，抗，抗-A1與與A2不反應）；不反應）；抗抗-H用于鑒定亞型及孟買型（亞型細胞上用于鑒定亞型及孟買型（亞型細胞上有較多的有較多的H抗原，與抗抗原，與抗-H反應較強，而孟買反應較強，而孟買型紅細胞上無型紅細胞上無H抗原）。抗原）。二、堅持二、堅持(jinch)正反定型正反定型第二十二頁，共六十九頁。23廣州血液中心輸血探究所在血型

17、鑒定中有若干因素可導致錯誤結果：在血型鑒定中有若干因素可導致錯誤結果：人為因素有：人為因素有：試劑不標準、失效或污染；試劑不標準、失效或污染；操作中加錯樣本或試劑；操作中加錯樣本或試劑；離心速度不足或過度；離心速度不足或過度；細胞細胞(xbo)與血清比例不當，結果判斷錯誤等；與血清比例不當，結果判斷錯誤等；人工判讀結果有可能發(fā)生書寫錯誤。人工判讀結果有可能發(fā)生書寫錯誤。二、堅持二、堅持(jinch)正反定型正反定型第二十三頁，共六十九頁。24廣州血液中心輸血探究所客觀因素有：客觀因素有：因某種疾?。ㄈ绨籽。е驴乖瓬p弱；因某種疾?。ㄈ绨籽。е驴乖瓬p弱；紅細胞發(fā)生多凝集現(xiàn)象或產(chǎn)生類紅細胞發(fā)

18、生多凝集現(xiàn)象或產(chǎn)生類B物質(zhì)（如物質(zhì)（如細菌感染）；細菌感染）；抗體抗體(kngt)效價低（如嬰幼兒、老年人、低免效價低（如嬰幼兒、老年人、低免疫球蛋白血癥等）；疫球蛋白血癥等）；血清中有意外抗體，某些藥物干擾等。血清中有意外抗體，某些藥物干擾等。二、堅持二、堅持(jinch)正反定型正反定型第二十四頁，共六十九頁。25廣州血液中心輸血探究所n反定型對反定型對ABO亞型的發(fā)現(xiàn)特別有幫助。原因是亞型患者紅亞型的發(fā)現(xiàn)特別有幫助。原因是亞型患者紅細胞上細胞上A或或B抗原很弱，通過抗原很弱，通過(tnggu)正反定型易于發(fā)現(xiàn)二者結正反定型易于發(fā)現(xiàn)二者結果不一致，從而引起警惕。果不一致，從而引起警惕。n出

19、現(xiàn)異常結果的處理辦法：出現(xiàn)異常結果的處理辦法：正反定型不一致應重新檢測；正反定型不一致應重新檢測；重新檢測時應使用洗滌紅細胞。為預防差錯事故發(fā)生，重新檢測時應使用洗滌紅細胞。為預防差錯事故發(fā)生，建議使用原始標本重新配制紅細胞懸液而不用以前配好的建議使用原始標本重新配制紅細胞懸液而不用以前配好的紅細胞，同時應做自身對照。紅細胞，同時應做自身對照。二、堅持二、堅持(jinch)正反定型正反定型第二十五頁，共六十九頁。26廣州血液中心輸血探究所如果重新檢測如果重新檢測(jin c)結果仍然異常，請資深工作結果仍然異常，請資深工作人員協(xié)助。人員協(xié)助。當檢測結果與以往記錄不一致時，應重新采當檢測結果與以

20、往記錄不一致時，應重新采集血標本再一次檢測。集血標本再一次檢測。如果一時無法找到正反定型結果不一致的原如果一時無法找到正反定型結果不一致的原因，患者又需緊急輸血，此時可輸注因，患者又需緊急輸血，此時可輸注Rh（D）同型的同型的O型紅細胞（正反定型相符）。型紅細胞（正反定型相符）。二、堅持二、堅持(jinch)正反定型正反定型第二十六頁，共六十九頁。27廣州血液中心輸血探究所nRh（D）血型鑒定原則：）血型鑒定原則：對受血者常規(guī)只測對受血者常規(guī)只測Rh（D）抗原；）抗原；對獻血者不僅要檢測對獻血者不僅要檢測Rh（D）抗原，在初篩）抗原，在初篩為陰性時必須進一步確定是否為弱為陰性時必須進一步確定是

21、否為弱D；弱弱D針對針對(zhndu)受血者而言為受血者而言為Rh（D）陰性，而）陰性，而對獻血者而言則為對獻血者而言則為Rh（D）陽性；）陽性；二、堅持二、堅持(jinch)正反定型正反定型第二十七頁，共六十九頁。28廣州血液中心輸血探究所當當Rh（D）定型結果有疑問時，在確認之前）定型結果有疑問時，在確認之前應當作陰性應當作陰性(ynxng)對待；對待；目前各種單克隆抗目前各種單克隆抗-D檢測部分檢測部分D或弱或弱D時差異時差異較大，建議使用兩種以上不同廠家的試劑有助較大，建議使用兩種以上不同廠家的試劑有助于弱于弱D的定型。的定型。二、堅持二、堅持(jinch)正反定型正反定型第二十八頁，

22、共六十九頁。29廣州血液中心輸血探究所n緊急情況下血型鑒定緊急情況下血型鑒定(jindng)時，必須做正定型時，必須做正定型及陰陽性對照（見表及陰陽性對照（見表3），或者正反定型。），或者正反定型。表表3 陰性陰性/陽性對照表陽性對照表二、堅持二、堅持(jinch)正反定型正反定型試劑試劑陽性對照細胞陽性對照細胞陰性對照細胞陰性對照細胞抗抗-AAB抗抗-BBA抗抗-DD陽性陽性D陰性陰性第二十九頁，共六十九頁。30廣州血液中心輸血探究所n當患者體內(nèi)含有高效價的冷自身抗體或冷凝當患者體內(nèi)含有高效價的冷自身抗體或冷凝集素時。采用溫的鹽水洗滌細胞有助于血型鑒集素時。采用溫的鹽水洗滌細胞有助于血型鑒定

23、。定。n日常工作中需要定期做陽性日常工作中需要定期做陽性/陰性對照，使用陰性對照，使用自動化檢測設備時，應在常規(guī)檢測中加入自動化檢測設備時，應在常規(guī)檢測中加入(jir)對照標本；采用手工操作時應每一批次做陽性對照標本；采用手工操作時應每一批次做陽性/陰性對照。陰性對照。二、堅持二、堅持(jinch)正反定型正反定型第三十頁，共六十九頁。31廣州血液中心輸血探究所n在可能的情況下，最好每天在使用定型試劑在可能的情況下，最好每天在使用定型試劑前作陽性前作陽性/陰性對照，以檢測其活性。陰性對照，以檢測其活性。n在觀察在觀察(gunch)定型結果時，既要觀察定型結果時，既要觀察(gunch)有無有無凝

24、集，也要觀察凝集，也要觀察(gunch)凝集強度，這有助于凝集強度，這有助于A、B亞型、類亞型、類B等的發(fā)現(xiàn)。等的發(fā)現(xiàn)。二、堅持二、堅持(jinch)正反定型正反定型第三十一頁，共六十九頁。32廣州血液中心輸血探究所n對受血者作抗體篩選的目的是檢出有臨床意對受血者作抗體篩選的目的是檢出有臨床意義的抗體，并可在配血前有足夠的時間來選擇義的抗體，并可在配血前有足夠的時間來選擇缺乏相應抗原的相配合的血液，避免盲目配血。缺乏相應抗原的相配合的血液，避免盲目配血。n方法是用受檢者血清與試劑方法是用受檢者血清與試劑(shj)紅細胞起反應，紅細胞起反應，以發(fā)現(xiàn)在以發(fā)現(xiàn)在37有臨床意義的抗體。有臨床意義的抗體

25、。三、做好抗體三、做好抗體(kngt)篩選篩選第三十二頁，共六十九頁。33廣州血液中心輸血探究所n抗體篩選試驗用的篩選細胞抗體篩選試驗用的篩選細胞(xbo)(xbo)通常以通常以2 23 3個個單人份的單人份的O O型紅細胞型紅細胞(xbo)(xbo)組成一套篩選細胞組成一套篩選細胞(xbo)(xbo)試劑。試劑。n抗體篩選用試劑紅細胞必須含有抗體篩選用試劑紅細胞必須含有1818種抗原，種抗原，所表達的抗原以純合子基因所表達的抗原為佳，所表達的抗原以純合子基因所表達的抗原為佳，隨機獲得的隨機獲得的O O型紅細胞易造成抗體漏檢。型紅細胞易造成抗體漏檢。三、做好抗體三、做好抗體(kngt)篩選篩選

26、第三十三頁，共六十九頁。34廣州血液中心輸血探究所n抗體篩選試驗的方法很多，國外以間接抗球抗體篩選試驗的方法很多，國外以間接抗球蛋白法為金標準，國內(nèi)中小醫(yī)院多采用凝聚胺蛋白法為金標準，國內(nèi)中小醫(yī)院多采用凝聚胺法，大醫(yī)院多采用微柱凝膠技術。法，大醫(yī)院多采用微柱凝膠技術。n微柱凝膠法是簡單、有效檢測不規(guī)則抗體的微柱凝膠法是簡單、有效檢測不規(guī)則抗體的方法，但無法排除無臨床意義抗體的干擾。方法，但無法排除無臨床意義抗體的干擾。n抗體篩選用的紅細胞一定要保存在抗體篩選用的紅細胞一定要保存在44環(huán)境環(huán)境(hunjng)(hunjng)中，以防紅細胞上抗原丟失。中，以防紅細胞上抗原丟失。三、做好抗體三、做好

27、抗體(kngt)篩選篩選第三十四頁，共六十九頁。35廣州血液中心輸血探究所n抗體篩選抗體篩選(shixun)(shixun)試驗并非能檢出所有有臨床意試驗并非能檢出所有有臨床意義的抗體。原因有二：義的抗體。原因有二：一是低頻抗原的抗體可能被忽略；一是低頻抗原的抗體可能被忽略；二是以往所產(chǎn)生的抗體已降至難以檢出的水二是以往所產(chǎn)生的抗體已降至難以檢出的水平。平。n以往的抗體鑒定記錄有重要參考價值。以往的抗體鑒定記錄有重要參考價值。三、做好抗體三、做好抗體(kngt)篩選篩選第三十五頁，共六十九頁。36廣州血液中心輸血探究所n國外對所有受血者常規(guī)國外對所有受血者常規(guī)(chnggu)(chnggu)作

28、抗體篩選試驗，作抗體篩選試驗，并認為抗體篩選是檢測不規(guī)則抗體最可靠、最并認為抗體篩選是檢測不規(guī)則抗體最可靠、最敏感的方法。敏感的方法。n我國規(guī)定凡遇下列情況之一必須做抗體篩選我國規(guī)定凡遇下列情況之一必須做抗體篩選試驗：試驗：交叉配血不合時；交叉配血不合時；對有輸血史、妊娠史或短期內(nèi)需要接受多次對有輸血史、妊娠史或短期內(nèi)需要接受多次輸血者。輸血者。三、做好抗體三、做好抗體(kngt)篩選篩選第三十六頁，共六十九頁。37廣州血液中心輸血探究所n如抗體篩選試驗陽性，缺乏譜細胞鑒定其特異如抗體篩選試驗陽性，缺乏譜細胞鑒定其特異性時，可送有條件的單位鑒定。性時，可送有條件的單位鑒定。n抗體鑒定試驗包括：

29、抗體鑒定試驗包括：自身細胞檢查自身細胞檢查(jinch)(jinch)：確定患者血清內(nèi)是否有自：確定患者血清內(nèi)是否有自身抗體或自身抗體與同種抗體并存；身抗體或自身抗體與同種抗體并存；三、做好抗體三、做好抗體(kngt)篩選篩選第三十七頁，共六十九頁。38廣州血液中心輸血探究所使用試劑譜細胞：譜細胞一般是由使用試劑譜細胞：譜細胞一般是由8 81616單人單人份的已知血型表型的份的已知血型表型的O O型紅細胞配套組成，具有型紅細胞配套組成，具有(jyu)(jyu)各種不同的抗原成分；各種不同的抗原成分；根據(jù)譜細胞的反應格局一般可以鑒定常見的抗根據(jù)譜細胞的反應格局一般可以鑒定常見的抗體。體。n國外認

30、為采用一組譜細胞進行抗體鑒定有一定國外認為采用一組譜細胞進行抗體鑒定有一定的局限性，有可能漏檢常見的組合抗體。采用的局限性，有可能漏檢常見的組合抗體。采用兩組譜細胞可以提高檢出組合抗體的能力。兩組譜細胞可以提高檢出組合抗體的能力。三、做好抗體三、做好抗體(kngt)篩選篩選第三十八頁，共六十九頁。39廣州血液中心輸血探究所n輸血前必須嚴格輸血前必須嚴格(yng)(yng)交叉配血，這是防止輸血交叉配血，這是防止輸血前檢驗程序中發(fā)生差錯的最后一道前檢驗程序中發(fā)生差錯的最后一道“安全崗安全崗”。n所謂所謂“嚴格嚴格”是指所采用的方法必須能檢出是指所采用的方法必須能檢出ABOABO不相容及不相容及A

31、BOABO系統(tǒng)之外的有臨床意義的抗體系統(tǒng)之外的有臨床意義的抗體（IgGIgG抗體）。抗體）。四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第三十九頁，共六十九頁。40廣州血液中心輸血探究所n交叉配血的方法有：交叉配血的方法有：主側交叉：由患者血清和供者紅細胞組成；主側交叉：由患者血清和供者紅細胞組成；次側交叉：由患者紅細胞和供者血清（漿）次側交叉：由患者紅細胞和供者血清（漿）組成（由于我國尚未對供者進行抗體篩選，故組成（由于我國尚未對供者進行抗體篩選，故次側交叉是有必要的，尤其是輸全血時）；次側交叉是有必要的，尤其是輸全血時）；自身對照：由患者自身血清和患者自身紅細自身對照：由患者自身血清和患者自

32、身紅細胞組成（自身對照有助于分析胞組成（自身對照有助于分析(fnx)(fnx)解釋交叉配解釋交叉配血試驗中出現(xiàn)的陽性結果）。血試驗中出現(xiàn)的陽性結果）。四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第四十頁，共六十九頁。41廣州血液中心輸血探究所n交叉配血的方法有鹽水法、酶法、抗球蛋白交叉配血的方法有鹽水法、酶法、抗球蛋白法、凝聚胺法等，各有優(yōu)缺點：法、凝聚胺法等，各有優(yōu)缺點：鹽水法：簡便、快捷、價廉，但有局限性：鹽水法：簡便、快捷、價廉，但有局限性：鹽水法只能檢出鹽水法只能檢出ABOABO、P P、LewisLewis、MNMN等系統(tǒng)等系統(tǒng)的抗體的抗體(kngt)(kngt)，此類抗體，此類抗體(

33、kngt)(kngt)屬天然抗體屬天然抗體(kngt)(kngt)，屬屬IgMIgM球蛋白。球蛋白。IgMIgM是五聚體，分子量大，分子是五聚體，分子量大，分子長度長，能在鹽水中出現(xiàn)可見的凝集反應；長度長，能在鹽水中出現(xiàn)可見的凝集反應；四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第四十一頁，共六十九頁。42廣州血液中心輸血探究所鹽水法不能檢出鹽水法不能檢出RhRh、KellKell、KiddKidd、DuffyDuffy等等系統(tǒng)的抗體，此類抗體由免疫系統(tǒng)的抗體，此類抗體由免疫(miny)(miny)產(chǎn)生，屬產(chǎn)生，屬IgGIgG球蛋白。球蛋白。IgGIgG是單聚體，分子量小，分子長是單聚體，分子量

34、小，分子長度短，不能在鹽水中起凝集反應。度短，不能在鹽水中起凝集反應。四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第四十二頁，共六十九頁。43廣州血液中心輸血探究所交叉配血不能只用鹽水法，還要選用能有效交叉配血不能只用鹽水法，還要選用能有效檢出檢出IgGIgG抗體的方法，這些方法有：抗體的方法，這些方法有：酶法：對酶法：對RhRh系統(tǒng)較為敏感，但會改變某些血系統(tǒng)較為敏感，但會改變某些血型系統(tǒng)的抗原構型，加之不易型系統(tǒng)的抗原構型，加之不易(b y)(b y)保存，應用保存，應用受限；受限；抗球蛋白法是檢測抗球蛋白法是檢測IgGIgG抗體最可靠的方法，抗體最可靠的方法，但操作繁瑣。但操作繁瑣。四、嚴

35、格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第四十三頁，共六十九頁。44廣州血液中心輸血探究所凝聚胺法對凝聚胺法對KellKell系統(tǒng)之外的大多數(shù)血型系統(tǒng)系統(tǒng)之外的大多數(shù)血型系統(tǒng)敏感度高，且操作簡便，快速。敏感度高，且操作簡便，快速。微柱凝膠試驗（卡式配血）靈敏度高，特異微柱凝膠試驗（卡式配血）靈敏度高，特異性強，結果直觀，能自動化操作，還能保存，性強，結果直觀，能自動化操作，還能保存，缺點是價格昂貴、耗時長、可出現(xiàn)假陽性，有缺點是價格昂貴、耗時長、可出現(xiàn)假陽性，有條件的醫(yī)院條件的醫(yī)院(yyun)(yyun)可采用?？刹捎?。四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第四十四頁，共六十九頁。45廣州血液

36、中心輸血探究所歐美國家常用抗體球蛋白法或微柱凝膠法，歐美國家常用抗體球蛋白法或微柱凝膠法，因為白種人中約有因為白種人中約有9%9%是是KellKell（K K）陽性，而凝）陽性，而凝聚胺對聚胺對KellKell系統(tǒng)不敏感。系統(tǒng)不敏感。我國中小醫(yī)院適合我國中小醫(yī)院適合(shh)(shh)用凝聚胺法，因為凝用凝聚胺法，因為凝聚胺對聚胺對RhRh系統(tǒng)特別敏感，在我國以系統(tǒng)特別敏感，在我國以RhRh系統(tǒng)引起系統(tǒng)引起的遲發(fā)性溶血性輸血反應最為常見，而漢族人的遲發(fā)性溶血性輸血反應最為常見，而漢族人幾乎幾乎100%100%為為K K抗原陰性，通常不考慮抗抗原陰性，通常不考慮抗-K-K。四、嚴格四、嚴格(yn

37、g)交叉配血交叉配血第四十五頁，共六十九頁。46廣州血液中心輸血探究所n凝聚胺試驗原理凝聚胺試驗原理凝聚胺（凝聚胺（PolybrenePolybrene）是一種陽離子聚合物，）是一種陽離子聚合物，溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可中和紅細胞表面溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可中和紅細胞表面(biomin)(biomin)負電荷，引起紅細胞非特異性凝聚，這負電荷，引起紅細胞非特異性凝聚，這種凝聚是可逆的；種凝聚是可逆的；如果是抗體致敏的紅細胞在凝聚胺作用下發(fā)如果是抗體致敏的紅細胞在凝聚胺作用下發(fā)生凝集，這種凝集是不可逆的；生凝集，這種凝集是不可逆的；四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第四十六頁，共六十

38、九頁。47廣州血液中心輸血探究所在凝聚胺試驗中，首先讓紅細胞和血清在低離子介質(zhì)中孵在凝聚胺試驗中，首先讓紅細胞和血清在低離子介質(zhì)中孵育，促進抗體與紅細胞抗原結合，然后加入育，促進抗體與紅細胞抗原結合，然后加入(jir)(jir)凝聚胺使紅凝聚胺使紅細胞凝聚，再加入細胞凝聚，再加入(jir)(jir)枸櫞酸鈉重懸液（枸櫞酸根帶負電荷）枸櫞酸鈉重懸液（枸櫞酸根帶負電荷）中和凝聚胺正電荷，恢復紅細胞表面的負電荷；中和凝聚胺正電荷，恢復紅細胞表面的負電荷；重懸后如果是非特異性凝聚，則由于紅細胞表面負電荷的重懸后如果是非特異性凝聚，則由于紅細胞表面負電荷的排斥作用，紅細胞散開，結果為陰性；若是由于抗原抗

39、體引排斥作用，紅細胞散開，結果為陰性；若是由于抗原抗體引起的特異性凝集則不會散開，結果為陽性。起的特異性凝集則不會散開，結果為陽性。四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第四十七頁，共六十九頁。48廣州血液中心輸血探究所n凝聚胺試驗的注意事項凝聚胺試驗的注意事項加入重懸液后，應盡快觀察結果，最好在加入重懸液后，應盡快觀察結果，最好在1min1min內(nèi)，最內(nèi)，最長不要超過長不要超過3min3min，以免弱反應消失；，以免弱反應消失；凝聚胺溶液若放玻璃瓶中太久作用會變?nèi)?，所以凝聚胺溶液若放玻璃瓶中太久作用會變?nèi)?，所?suy)(suy)必必須保存在黑色塑料瓶中；須保存在黑色塑料瓶中；凝聚胺是一

40、種抗肝素藥物，所以使用含肝素的血標本要稍凝聚胺是一種抗肝素藥物，所以使用含肝素的血標本要稍稍多加一些凝聚胺來中和肝素。稍多加一些凝聚胺來中和肝素。四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第四十八頁，共六十九頁。49廣州血液中心輸血探究所n主側交叉配血不相合的原因：主側交叉配血不相合的原因：患者或供者患者或供者ABOABO血型定型不正確；血型定型不正確；患者血清中存在同種抗體與供者紅細胞上的患者血清中存在同種抗體與供者紅細胞上的相應相應(xingyng)(xingyng)抗原起反應；抗原起反應；四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第四十九頁，共六十九頁。50廣州血液中心輸血探究所患者血清

41、中存在自身抗體，與供者紅細胞上患者血清中存在自身抗體，與供者紅細胞上的相應抗原起反應；的相應抗原起反應；患者血清中白蛋白與球蛋白比例不正常引起患者血清中白蛋白與球蛋白比例不正常引起的緡錢狀假凝集的緡錢狀假凝集(nngj)(nngj)；血漿擴容劑的影響或試劑被污染等。血漿擴容劑的影響或試劑被污染等。四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第五十頁，共六十九頁。51廣州血液中心輸血探究所n主側（主側（+ +）、自身（）、自身（- -）、抗體篩選（）、抗體篩選（- -），可能原因是：），可能原因是：患者或供者患者或供者ABOABO血型錯誤；血型錯誤；（重新定型，檢查患者亞型、輸血史及移植史）（重新

42、定型，檢查患者亞型、輸血史及移植史）患者血清中有抗體，但篩選細胞上無相應抗原患者血清中有抗體，但篩選細胞上無相應抗原(kngyun)(kngyun)；（對患者進行抗體鑒定）（對患者進行抗體鑒定）供者紅細胞已被致敏。供者紅細胞已被致敏。（對供者做直接抗球蛋白試驗）（對供者做直接抗球蛋白試驗）四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第五十一頁，共六十九頁。52廣州血液中心輸血探究所n主側（主側（+ +）、自身（）、自身（- -）、抗體篩選（）、抗體篩選（+ +），可），可能原因是：能原因是：患者血清中的同種抗體與供者紅細胞上相應患者血清中的同種抗體與供者紅細胞上相應抗原起反應抗原起反應(fnyn

43、g)(fnyng)。（對患者進行抗體鑒定，選擇無對應抗原的血（對患者進行抗體鑒定，選擇無對應抗原的血液輸注。）液輸注。）四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第五十二頁，共六十九頁。53廣州血液中心輸血探究所n主側（主側（+ +）、自身（）、自身（+ +）、抗體篩選（）、抗體篩選（+ +），可能原因是：），可能原因是：患者血清中可能同時存在自身抗體和同種抗體；患者血清中可能同時存在自身抗體和同種抗體；（對患者血清自身吸收及抗體鑒定，用吸收后血清配血）（對患者血清自身吸收及抗體鑒定，用吸收后血清配血）白蛋白白蛋白/ /球蛋白比值不正常球蛋白比值不正常（鹽水添加試驗解決緡錢狀假凝集）（鹽水添加

44、試驗解決緡錢狀假凝集）血漿擴容劑（如右旋糖酐）的影響血漿擴容劑（如右旋糖酐）的影響(yngxing)(yngxing)；（洗滌細胞，或等待擴容劑消失后重新抽取標本）（洗滌細胞，或等待擴容劑消失后重新抽取標本）污染污染（使用潔凈的器具和符合要求的試劑）（使用潔凈的器具和符合要求的試劑）四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第五十三頁，共六十九頁。54廣州血液中心輸血探究所n交叉配血實驗中，離心力、離心時間不當，交叉配血實驗中，離心力、離心時間不當，可造成假陰性或假陽性結果?？稍斐杉訇幮曰蚣訇栃越Y果。n恒溫水浴箱溫度不正確也會造成錯誤結果。恒溫水浴箱溫度不正確也會造成錯誤結果。n對于高效價對于

45、高效價O O型血清出現(xiàn)前帶現(xiàn)象時，應當用型血清出現(xiàn)前帶現(xiàn)象時，應當用EDTAEDTA鹽水適當稀釋，以阻止補體鹽水適當稀釋，以阻止補體C C1 1引起的凝集。引起的凝集。n出現(xiàn)溶血或部分溶血應判為陽性結果（標本出現(xiàn)溶血或部分溶血應判為陽性結果（標本(biobn)(biobn)本身溶血例外）。本身溶血例外）。四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第五十四頁，共六十九頁。55廣州血液中心輸血探究所n含有冷凝集素的患者交叉配血時可采用含有冷凝集素的患者交叉配血時可采用3737生理鹽水洗滌生理鹽水洗滌3 3次，如還顯弱凝集，再用次，如還顯弱凝集，再用4242或或4545鹽水洗鹽水洗1 1次再配血。次

46、再配血。n溫抗體型的自身免疫性溶血性貧血患者血清溫抗體型的自身免疫性溶血性貧血患者血清中的游離抗體有時很難吸收完全，導致配血困中的游離抗體有時很難吸收完全，導致配血困難。在排除同種抗體的情況難。在排除同種抗體的情況(qngkung)(qngkung)下可選擇凝下可選擇凝集反應弱的同型血液輸注，亦可輸注集反應弱的同型血液輸注，亦可輸注O O型洗滌型洗滌紅細胞。紅細胞。四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第五十五頁，共六十九頁。56廣州血液中心輸血探究所n某些緊急情況下需要快速某些緊急情況下需要快速(kui s)(kui s)配血，建議血配血，建議血清（血漿）與細胞比例為清（血漿）與細胞比例

47、為2:12:1，細胞懸液濃度，細胞懸液濃度為為2%2%3%3%。同時離心前孵育。同時離心前孵育2 25min5min，有利于，有利于檢測弱的檢測弱的ABOABO抗體?？贵w。n嬰兒輸注嬰兒輸注O O型血或型血或ABOABO同型血，應當采用母親同型血，應當采用母親的血清（血漿）進行交叉配血。的血清（血漿）進行交叉配血。四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第五十六頁，共六十九頁。57廣州血液中心輸血探究所n在任何在任何(rnh)(rnh)情況下，一定要選擇情況下，一定要選擇ABOABO和和RhRh（D D）同型的血液。如果同型血不夠用，可以輸注同型的血液。如果同型血不夠用，可以輸注O O型相合

48、的添加劑紅細胞（紅細胞懸液、懸浮紅型相合的添加劑紅細胞（紅細胞懸液、懸浮紅細胞），這種紅細胞所含血漿量很少。細胞），這種紅細胞所含血漿量很少。nABAB型血液不能滿足供應，可選擇型血液不能滿足供應，可選擇A A型或型或B B型紅型紅細胞，盡量不用細胞，盡量不用O O型，型，O O型紅細胞以備它用。型紅細胞以備它用。四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第五十七頁，共六十九頁。58廣州血液中心輸血探究所nRhRh（D D）陰性）陰性(ynxng)(ynxng)血不夠用，可以選擇血不夠用，可以選擇RhRh（D D）陽性血，但有生育能力的婦女不能用。陽性血，但有生育能力的婦女不能用。n在大量輸血

49、時如果輸?shù)氖峭拖嗪系奶砑觿┰诖罅枯斞獣r如果輸?shù)氖峭拖嗪系奶砑觿┘t細胞（未輸全血），供者之間可以不做交叉紅細胞（未輸全血），供者之間可以不做交叉配血試驗。若是輸了配血試驗。若是輸了ABOABO不同型的相合紅細胞，不同型的相合紅細胞，以后要盡快輸注與患者同型的紅細胞，不要堅以后要盡快輸注與患者同型的紅細胞，不要堅持一直應用持一直應用ABOABO不同型的相合紅細胞。不同型的相合紅細胞。四、嚴格四、嚴格(yng)交叉配血交叉配血第五十八頁，共六十九頁。廣州血液中心輸血探究所59病例討論病例討論例例1： 王某，女，王某，女，44歲，因乳腺癌歲，因乳腺癌1年前作根治術。手術年前作根治術。手術(shush)期間患者輸期間患者輸A型全血型全血400ml，無不良反應。術后曾化療，無不良反應。術后曾化療8次。此次入院進行第次。此次入院進行第9次化療。血常規(guī)：紅細胞次化療。血常規(guī)：紅細胞 4.121012/L，血