康欣口服液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的改進(一)

1、康欣口服液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的改進(一)【關(guān)鍵詞】 康欣口服液；,丹參；,地骨皮；,高效液相法；,淫羊藿苷摘要：目的建立改進康欣口服液標(biāo)準(zhǔn)的方法。方法采用薄層色譜（TLC）法對康欣口服液中的丹參、地骨皮進行定性鑒別；采用高效液相色譜（HPLC）法測定淫羊藿苷的含量。結(jié)果定性鑒別方法專屬性強。在5.3626.8 g范圍內(nèi)淫羊藿苷峰面積與濃度線性關(guān)系良好，r=0.999 8；樣品平均加樣回收率為100.4%(n=9)，RSD為1.84%。結(jié)論該法簡便、快速、結(jié)果準(zhǔn)確，可有效控制康欣口服液的質(zhì)量。關(guān)鍵詞：康欣口服液； 丹參； 地骨皮； 高效液相法； 淫羊藿苷Improvement of the Quality

2、 Standard of Kangxin Oral LiquidAbstract：ObjectiveTo improve the standard for quality of Kangxin Oral Liquid.MethodsThin layer chromatography (TLC)was used for qualitive identification of Salvia miltiorrrhiza and Lycium chinese.The icariin was determined by HPLC.ResultsThe TLC identification was hig

3、hly specific.The icariin area and content showed a good linear relationship at the range of 5.3626.8 g and correlation coeffcient was 0.999 8. The average recovery of the added sample was 100.4%(n=9), RSD was 1.84%.ConclusionThe method is simple,quick,accurate for the quality control of Kangxin Oral

4、 Liquid.Key words：Kangxin Oral; Salvia miltiorrhiza; Lycium chinensis; HPLC ; Icariin康欣口服液由何首烏、淫羊藿、丹參、地骨皮、黃芪等13味中藥組成，具有補腎填精、健脾益氣、養(yǎng)血活血、抗老防衰的功能。用于脾腎虛衰，氣血不足，早衰神疲，腰膝酸軟，失眠健忘等癥其療效確切。為了提高產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量，保證其臨床療效，在原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上增加了對方中丹參、地骨皮的 TLC鑒別，原定量指標(biāo)是測定何首烏中大黃素，我們根據(jù)本品作用和用途，現(xiàn)改為測定淫羊藿中的淫羊藿苷作為定量指標(biāo)，采用 HPLC法，并優(yōu)選了提取、測定條件，建立了本

5、品的含量測定方法。1 儀器與試藥1.1 儀器Waters-600高效液相色譜儀；Waters2996DAD檢測器；Waters Millennum32色譜工作站； Sartorius BP211D型電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；電熱恒溫干燥箱（上海市實驗儀器廠）；KQ-500DE型醫(yī)用數(shù)控超聲清洗儀（昆明市超聲儀器有限公司）；TDL-408型臺式離心機（上海安亭科學(xué)儀器廠）。1.2 試藥薄層色譜用硅膠G、硅膠H、羧甲基纖維素鈉（青島海洋化工廠）；原兒茶醛對照品（中國藥品生物制品鑒定所）；淫羊藿苷對照品（中國藥品生物制品檢定所）；康欣口服液（福州屏山制藥廠提供）；乙腈（色譜純 Mer

6、ck）；水為重蒸餾水；其它試劑均為分析純。2 方法與結(jié)果2.1 薄層色譜鑒別-醋酸乙酯-冰醋酸（1272）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈（UV365）下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同著色斑點，陰性對照無干擾。結(jié)果見圖2。圖2 康欣口服液中地骨皮的TLC（熒光）（略）2.2 含量測定表1 不同時間超聲處理的比較（略）以上結(jié)果表明，超聲20 min含量不再增加，為提取完全，故確定超聲處理時間為20 min。表2 不同提取方法的比較（略）以上結(jié)果表明，超聲提取含量的同時超聲簡便，故確定提取方法為超聲提取。表3 不同溶劑提取的比較（略）以上結(jié)果表明，50%乙醇提取最完全，故

7、確定提取溶劑為50%乙醇（即稀乙醇）。2.3 空白對照溶液的制備取按處方量及制法工藝要求制成的不含羊藿的陰性對照品，按供試品溶液的制備方法制成陰性對照溶液。2.4 色譜條件色譜柱為Diamonsil C18(4.6 mm250mm,5.0m)柱；檢測波長270 nm；流動相為乙腈-水（3070）；流速1.0 ml/min；進樣量20 l。按上述條件，吸取供試品溶液、對照品溶液、空白對照溶液各20 l，分別注入液相色譜儀測定，測定結(jié)果見圖3、圖4、圖5。從色譜圖可見，其他成分對淫羊藿苷的測定無干擾，符合測定要求。2.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備分別精密吸取對照品溶液0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，1

8、0.0置10 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。各進樣20 l，以峰面積Y與濃度X（g/ml）進行線性回歸，得回歸方程：Y=98 857.5X-11 467.8，r=0.999 8。以上結(jié)果表明：在5.3626.8 g/ml范圍內(nèi)淫羊藿苷峰面積與進樣量有良好的線性關(guān)系。結(jié)果見表4。圖3 淫羊藿苷對照品色譜圖（略）圖4 康欣口服液樣品色譜圖（略）圖5 空白對照色譜圖（略）表4 淫羊藿苷對照品測定結(jié)果（略）2.6 精密度實驗精密吸取上述對照品溶液20 l，重復(fù)進樣5次，淫羊藿苷峰面積的RSD為0.459%。2.7 穩(wěn)定性實驗取供試品溶液在0，4，8，12，16 h，分別進樣20 l，測得樣品中淫

9、羊藿苷峰面積的RSD為0.726%。2.8 重現(xiàn)性實驗按擬定的含量測定方法，對同一批樣品（批號031011）分別制備5份供試品溶液，測得峰面積并計算含量，RSD為1.59%。2.9 回收率實驗采用加樣回收法，取同一批號樣品9份，每份10.0 ml，分別按樣品中淫羊藿苷含量的80%，100%，120%加入淫羊藿苷對照品，按供試品溶液的制備方法制備，按上述色譜條件測定。結(jié)果見表5。表5 回收率實驗結(jié)果（略）n=6，實驗結(jié)果表明，此方法可靠性良好。2.10 樣品測定分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20 l，按上述色譜條件測定(n=3)。結(jié)果見表6。表6 樣品測定結(jié)果（略）3 討論3.1 在鑒別丹

10、參時，供試液的制備方法，曾比較了加醋酸乙酯和乙醚萃取，相比較乙醚萃取提取效率較高；在選擇展開劑時，比較了文獻報道的十幾種展開系統(tǒng)并改變相應(yīng)的比例2，3，發(fā)現(xiàn)以苯-醋酸乙酯-甲酸（12：5：0.8）為展開系統(tǒng)適合本方鑒別。3.2 在鑒別地骨皮時，曾用環(huán)已烷醋酸乙酯冰醋酸（1082）、環(huán)已烷醋酸乙酯冰醋酸（1282）、苯-醋酸乙酯冰醋酸（1272）、環(huán)已烷丙酮（103）、環(huán)已烷氯仿醋酸乙酯甲酸（12.51.572）為展開劑3，分離效果不理想，且陰性有干擾；經(jīng)不斷調(diào)整后改為以環(huán)已烷醋酸乙酯甲酸（1272）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈365 nm下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上，

11、顯相同顏色斑點，陰性對照色譜中無此斑點。分離結(jié)果較理想。3.3 原標(biāo)準(zhǔn)中含量測定以何首烏中的2，3，5，4四羥基二苯乙烯2OD葡萄糖苷作為定量指標(biāo)控制制劑的質(zhì)量，但2，3，4，5，4四羥基二苯乙烯2OD葡萄苷在水溶液中的穩(wěn)定性不好，故改測淫羊藿中的淫羊藿苷含量為制劑的質(zhì)量控制指標(biāo)，以淫羊藿苷為定量指標(biāo)較原標(biāo)準(zhǔn)方法準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性及重現(xiàn)性均更好，可更有效控制康欣口服液的質(zhì)量。3.4 目前，中成藥中淫羊藿含量測定多以數(shù)是采用 HPLC法測定淫羊藿苷。在流動相的選擇方面，曾采用甲醇0.025 mol/L磷酸二氫鈉、乙腈水（73）、乙腈水（32）4，最終確定乙腈水（73）為本品含量測定的流動相。參考文獻