第八章儀器分析分光光度

1、第八章第八章 儀器分析法儀器分析法 依據(jù)物質(zhì)發(fā)射的電磁輻射或物質(zhì)與電磁輻射相互作用而建立起來的各種分析法的統(tǒng)稱光學(xué)分析法。2 .光學(xué)分析法的分類：光學(xué)分析法的分類：1）非光譜法：非光譜法：是指那些不以光的波長(zhǎng)為特征訊號(hào)，僅通過測(cè)量電磁輻射的某些基本性質(zhì)（反射、折射、干涉、衍射和偏振等）的變化的分析方法。 有：折射法、旋光法、射線衍射法等1 .定義：定義：儀器分析法儀器分析法 表9-1 電磁波譜范圍表光譜名稱波長(zhǎng)范圍 躍遷類型 分析方法X射線 10-1100nm K和L層電子 X射線光譜法遠(yuǎn)紫外光 10200nm 中層電子 真空紫外光度法近紫外光 200400nm 外層電子 紫外光度法可見光 4

2、00750nm 外層電子 比色及可見光度法近紅外光 0.752.5m 分子振動(dòng) 近紅外光譜法中紅外光 2.55.0m 分子振動(dòng) 中紅外光譜法遠(yuǎn)紅外光 5.01000m 分子轉(zhuǎn)動(dòng)和振動(dòng) 遠(yuǎn)紅外光譜法微波 0.1100cm 分子轉(zhuǎn)動(dòng) 微波光譜法無線電波 11000m 核的自旋 核磁共振光譜法2 2）光譜法光譜法：基于物質(zhì)與輻射能作用時(shí)，測(cè)量由物質(zhì)內(nèi)部發(fā)生量基于物質(zhì)與輻射能作用時(shí)，測(cè)量由物質(zhì)內(nèi)部發(fā)生量子化的子化的能級(jí)之間的躍遷能級(jí)之間的躍遷而產(chǎn)生的發(fā)射、吸收或散射輻射的波而產(chǎn)生的發(fā)射、吸收或散射輻射的波長(zhǎng)和強(qiáng)度進(jìn)行分析的方法長(zhǎng)和強(qiáng)度進(jìn)行分析的方法。丙酮丙酮3691 21 52 0 0 2 2 0 2

3、 6 0 2 8 0 3 2 0 3 4 0發(fā)射光譜發(fā)射光譜 吸收光譜吸收光譜 光基態(tài)激發(fā)態(tài)釋放能量發(fā)光hMM*激發(fā)態(tài)光基態(tài)吸收輻射能量*MhM例：原子吸收光譜；分子吸收光譜等例：原子吸收光譜；分子吸收光譜等發(fā)射光譜吸收光譜3）光譜法與非光譜法的區(qū)別光譜法與非光譜法的區(qū)別：第一節(jié)第一節(jié) 紫外可見吸收光譜法紫外可見吸收光譜法 （分光光度法）（分光光度法）一、概述一、概述 二、二、Lamber-BeerLamber-Beer定律定律 三、分光光度法的基本概念三、分光光度法的基本概念四、紫外可見分光光度計(jì)四、紫外可見分光光度計(jì)五、測(cè)量條件的選擇五、測(cè)量條件的選擇六、定性和定量分析六、定性和定量分析一

4、、概述一、概述（一）分光光度法（一）分光光度法（二）物質(zhì)的顏色與光的關(guān)系（二）物質(zhì)的顏色與光的關(guān)系（）是基于物質(zhì)分子對(duì)光的選擇性吸收而建立起來的分析方法。 按物質(zhì)吸收光的波長(zhǎng)不同，可分為紫外分光光度法、可見分光光度法及紅外分光光度法。波長(zhǎng)：波長(zhǎng)：紫外紫外(近紫外近紫外)： 200 400 nm；可見：可見：400 760 nm；紅外；紅外0.76 1000 m（一）（一） 分光光度法分光光度法特點(diǎn)特點(diǎn)（）*靈敏度較高，適用于微量組分的測(cè)定；*準(zhǔn)確度高；*應(yīng)用廣泛；*儀器設(shè)備簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、迅速。（二）物質(zhì)的顏色與光的關(guān)系（二）物質(zhì)的顏色與光的關(guān)系(monochromatic light)只具有

5、一種波長(zhǎng)的光。 由兩種以上波長(zhǎng)組成的光。是由紅、橙、黃、綠、青、藍(lán)、紫等各種色光按一定比例混合而成的。是由于物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光具有選擇性的吸是由于物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光具有選擇性的吸收作用而產(chǎn)生的。收作用而產(chǎn)生的。物質(zhì)呈現(xiàn)的顏色和吸收的光顏色之間是物質(zhì)呈現(xiàn)的顏色和吸收的光顏色之間是互補(bǔ)關(guān)系互補(bǔ)關(guān)系。 如果把兩種適當(dāng)顏色的光按一定的強(qiáng)度比例混合也可以得白光，這兩種光就叫。光的互補(bǔ)性與物質(zhì)的顏色/nm顏色互補(bǔ)光400-450紫黃綠450-480藍(lán)黃480-490綠藍(lán)橙490-500藍(lán)綠紅500-560綠紫紅560-580黃綠紫580-610黃藍(lán)610-650橙綠藍(lán)650-760紅藍(lán)綠表表8-1 物質(zhì)的

6、顏色與吸收光顏色的互補(bǔ)關(guān)系物質(zhì)的顏色與吸收光顏色的互補(bǔ)關(guān)系假設(shè)一束平行單色光垂直通過一個(gè)吸光物體假設(shè)一束平行單色光垂直通過一個(gè)吸光物體nlSII吸光質(zhì)點(diǎn)數(shù)為厚度為物體截面為透過光強(qiáng)為入射光強(qiáng)為0Lamber-Beer定律 cbaAAAA總Alg（I0/I)= a b c 式中：式中： A：吸光度；：吸光度；I0 ：入射光強(qiáng)度；：入射光強(qiáng)度； I：透射光強(qiáng)度；：透射光強(qiáng)度； b：液層厚度：液層厚度(光程長(zhǎng)度光程長(zhǎng)度)，通常以，通常以cm為單位；為單位；一般即為吸收池的厚度，一般即為吸收池的厚度，通常以通常以cm為單位；為單位；a：吸光系數(shù)，單位：吸光系數(shù)，單位Lg-1cm-1 ； 溶液的濃度溶液

7、的濃度c單位單位gL-1 。吸光度吸光度A A 與透光度與透光度T T 的關(guān)系的關(guān)系吸光度吸光度A A 描述溶液對(duì)光的吸收程度：描述溶液對(duì)光的吸收程度： A Alglg（I I0 0/ /I I) )透光度透光度T T 描述入射光透過溶液的程度描述入射光透過溶液的程度: : T T = = I/II/I0 0吸光度吸光度A A 與透光度與透光度T T 的關(guān)系的關(guān)系: : A A lg lg T T A A、T T、c c 三者的關(guān)系如右圖所示。三者的關(guān)系如右圖所示。ATATC圖圖8-3 A8-3 A，T T，C C關(guān)系曲線關(guān)系曲線討論討論：1 1Lamber-BeerLamber-Beer定律

8、的適用條件（前提）定律的適用條件（前提）()() 入射光為單色光入射光為單色光 溶液是稀溶液溶液是稀溶液 分布均勻分布均勻2 2該定律適用于固體、液體和氣體樣品該定律適用于固體、液體和氣體樣品3 3在同一波長(zhǎng)下，各組分吸光度具有加和性在同一波長(zhǎng)下，各組分吸光度具有加和性cbaAAAA總4.4.吸光系數(shù)吸光系數(shù)a a表示表示溶質(zhì)對(duì)光的吸收能力。溶質(zhì)對(duì)光的吸收能力。 a a值越大，表示吸光質(zhì)點(diǎn)對(duì)某波長(zhǎng)的光吸收能力愈強(qiáng)，故光度測(cè)定的靈敏度越高。：摩爾吸光系數(shù)，單位：摩爾吸光系數(shù)，單位L Lmolmol-1-1cmcm-1-1；溶液的濃度；溶液的濃度c c單位單位molmolL L-1-1 ；：百分吸

9、光系數(shù)百分吸光系數(shù) / 比吸光系數(shù)，單位比吸光系數(shù)，單位100mL100mLg g-1-1cmcm-1-1溶液的濃度溶液的濃度c c單位單位g g100mL100mL-1-1 ；%1110cmEM%11cmEA = b c意義：在一定意義：在一定下，下，C=1g/100mlC=1g/100ml，b=1cmb=1cm時(shí)的吸光度時(shí)的吸光度1%1cmE與的關(guān)系：5.吸光系數(shù)的兩種表示方法：吸光系數(shù)的兩種表示方法：（1 1）不隨）不隨濃度濃度c c和和光程長(zhǎng)度光程長(zhǎng)度b b的改變而改變。在溫度和波長(zhǎng)的改變而改變。在溫度和波長(zhǎng)等條件一定時(shí)，等條件一定時(shí)，僅與僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)有關(guān)吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)有

10、關(guān)，與待測(cè)，與待測(cè)物濃度無關(guān)；物濃度無關(guān)；（2 2）可作為）可作為定性鑒定的參數(shù)定性鑒定的參數(shù)；（3 3）同一吸收物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的）同一吸收物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的值是不同的。在最大值是不同的。在最大吸收處的摩爾吸光系數(shù)，常以吸收處的摩爾吸光系數(shù)，常以maxmax表示，對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)為最表示，對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)為最大吸收波長(zhǎng)大吸收波長(zhǎng)maxmax 。maxmax表明了該表明了該吸收物質(zhì)最大限度的吸光能力吸收物質(zhì)最大限度的吸光能力，也反映了光，也反映了光度法測(cè)定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度。度法測(cè)定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度。 maxmax越大表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)越大表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)，用光度法測(cè)定該，

11、用光度法測(cè)定該物質(zhì)的靈敏度越高。物質(zhì)的靈敏度越高。 10105 5：超高靈敏；：超高靈敏； =(6=(61010）10104 4 ：高靈敏；：高靈敏； =(2=(26 6）10104 4 ：中等靈敏；：中等靈敏； 2210104 4：不靈敏。：不靈敏。1%1cm1%1cm31%1cm24.3% A-lgTE-lgTlg0.243E307bc1.00 2.00 10323.15E30799201010TbcAbcM例例1 1 用用2.00mg2.00mg氯霉素純品配制氯霉素純品配制100Ml100Ml的溶液，以的溶液，以1.00cm1.00cm厚的吸收池厚的吸收池, ,在在278nm278nm處

12、處測(cè)的透光率是測(cè)的透光率是24.3%24.3%，求，求 和和（M=323.15 M=323.15 氯霉素）氯霉素）%11cmE()如果一個(gè)化合物的摩爾質(zhì)量未知，那么用百分吸光系數(shù)更方便一些例例2 2 某有色溶液，當(dāng)用某有色溶液，當(dāng)用1cm1cm比色皿測(cè)量時(shí)，比色皿測(cè)量時(shí)，T T50.0%50.0%，若改用，若改用2cm2cm比色皿，則比色皿，則T T及及A A各為多少？各為多少？解解: : 由由A A=-lg=-lgT T= =abcabc可得可得 T T=10=10- -abcabc 當(dāng)當(dāng)b b1 1=1cm=1cm時(shí)，時(shí)，T T1 1=10=10- -acac= =T T 當(dāng)當(dāng)b b2 2

13、=2cm=2cm時(shí)，時(shí)，T T2 2=10=10- -2ac2ac= =T T2 2用不同波長(zhǎng)的單色光照射，測(cè)吸光度用不同波長(zhǎng)的單色光照射，測(cè)吸光度吸收曲線與最大吸收波長(zhǎng)吸收曲線與最大吸收波長(zhǎng) maxmax基本概念基本概念()() 2）吸收谷min 峰和峰之間的部分，這個(gè)地方對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)叫最小吸收波長(zhǎng)。 3）肩峰 在一個(gè)吸收峰旁邊產(chǎn)生的一個(gè)小曲折，叫肩峰。 4）末端吸收 在圖譜短波端，只呈現(xiàn)強(qiáng)吸收而不成峰形的部分叫末端吸收。圖示3生色團(tuán)（發(fā)色團(tuán)）生色團(tuán)（發(fā)色團(tuán)）；有機(jī)化合物分子結(jié)構(gòu)中能夠在紫外有機(jī)化合物分子結(jié)構(gòu)中能夠在紫外- -可見可見 光范圍內(nèi)產(chǎn)生吸收的原子團(tuán)。光范圍內(nèi)產(chǎn)生吸收的原子團(tuán)。有機(jī)化

14、合物：具有不飽和鍵和非鍵電子的基團(tuán)有機(jī)化合物：具有不飽和鍵和非鍵電子的基團(tuán) 即含有即含有電子和電子和n 電子的基團(tuán)電子的基團(tuán)可產(chǎn)生可產(chǎn)生n *躍遷躍遷(通常通常max100)和和 *躍遷躍遷(max104) 躍遷躍遷E較低較低例：例： CC；CO；CN；NN 4 4助色團(tuán)：助色團(tuán)：本身無紫外吸收，但可以使生色團(tuán)吸收峰加強(qiáng)本身無紫外吸收，但可以使生色團(tuán)吸收峰加強(qiáng) 同時(shí)使吸收峰向同時(shí)使吸收峰向長(zhǎng)波長(zhǎng)波移動(dòng)的基團(tuán)移動(dòng)的基團(tuán) 有機(jī)物：連有雜原子的飽和基團(tuán)有機(jī)物：連有雜原子的飽和基團(tuán) 例：例：OH，OR，NH，NR2，X5.5.紅移和藍(lán)移紅移和藍(lán)移： 紅移：也叫長(zhǎng)移，即吸收峰位置向紅移：也叫長(zhǎng)移，即吸收

15、峰位置向長(zhǎng)波長(zhǎng)波方向的移動(dòng)方向的移動(dòng) 藍(lán)移（紫移）：也叫短移，即藍(lán)移（紫移）：也叫短移，即吸收峰位置向吸收峰位置向短波短波方向移動(dòng)方向移動(dòng)( (一）主要組成部件：五個(gè)部分組成一）主要組成部件：五個(gè)部分組成1光源光源 2單色器：?jiǎn)紊鳎菏怯晒庠摧椛涞膹?fù)合光中分出單色光的化學(xué)裝置是由光源輻射的復(fù)合光中分出單色光的化學(xué)裝置 鎢燈鎢燈可見光源可見光源 3501000nm 氫燈或氘燈氫燈或氘燈紫外光源紫外光源 200360nm包括入口狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件、聚焦元件、出口狹縫包括入口狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件、聚焦元件、出口狹縫 色散元件用棱鏡或光柵制成。分光光度計(jì)對(duì)光源的要求：分光光度計(jì)對(duì)光源的要求： （

16、1）所需光譜區(qū)域內(nèi)提供連續(xù)輻射光所需光譜區(qū)域內(nèi)提供連續(xù)輻射光 （2）足夠的光輻射強(qiáng)度足夠的光輻射強(qiáng)度 （3）良好的穩(wěn)定性良好的穩(wěn)定性 （4）使用壽命長(zhǎng)使用壽命長(zhǎng)棱鏡棱鏡對(duì)不同波長(zhǎng)的光折射率不同，對(duì)不同波長(zhǎng)的光折射率不同，分出光波長(zhǎng)不等距分出光波長(zhǎng)不等距光柵光柵衍射和干涉衍射和干涉 分出光波長(zhǎng)等距分出光波長(zhǎng)等距3吸收池吸收池 玻璃吸收池僅適用于可見光區(qū)僅適用于可見光區(qū) 石英吸收池適用于紫外和可見光適用于紫外和可見光區(qū)區(qū)4檢測(cè)器檢測(cè)器：將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)的裝置將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)的裝置 光電池、光電池、光電管、光電倍增管、光電管、光電倍增管、二極管陣列檢測(cè)器二極管陣列檢測(cè)器 等等5記錄裝置：記錄

17、裝置： 訊號(hào)處理和顯示系統(tǒng)訊號(hào)處理和顯示系統(tǒng)硒光電池硒光電池檢測(cè)器檢測(cè)器光電管光電管紅敏管紅敏管 625-1000 nm藍(lán)敏管藍(lán)敏管 200-625 nm光電倍增管光電倍增管 二極管陣列分光光度計(jì)比較：樣品和色散元件的相對(duì)位置次序相反，稱為反向光路（二）分光光度計(jì)的類型：（二）分光光度計(jì)的類型：0.575光源光源單色器單色器吸收池吸收池檢測(cè)器檢測(cè)器顯示顯示特點(diǎn)：對(duì)光源要求高；比色池配對(duì)特點(diǎn)：對(duì)光源要求高；比色池配對(duì)1.單光束分光光度計(jì)單光束分光光度計(jì)：2.雙光束分光光度計(jì)雙光束分光光度計(jì)差差值值光源光源單色器單色器吸收池吸收池檢測(cè)器檢測(cè)器顯示顯示光束分裂器光束分裂器特點(diǎn)：可以消除光強(qiáng)變化帶來的

18、誤差特點(diǎn)：可以消除光強(qiáng)變化帶來的誤差3.雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)：雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)：特點(diǎn)：特點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確度高；消除干擾和吸收池不匹配引起的誤差操作簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確度高；消除干擾和吸收池不匹配引起的誤差光光源源單色器單色器檢測(cè)器檢測(cè)器斬?cái)夭úㄆ髌魑帐粘爻貑紊鲉紊?2儀器儀器儀器儀器儀器儀器 可見分光光度計(jì)可見分光光度計(jì)儀器儀器儀器儀器儀器儀器 紫外紫外-可見分光光度計(jì)可見分光光度計(jì)測(cè)量條件的選擇測(cè)量條件的選擇（一）測(cè)量誤差（一）測(cè)量誤差方法誤差方法誤差1)2)光度測(cè)量誤差光度測(cè)量誤差 一般來說透光率為一般來說透光率為2065（吸光度（吸光度為為0.20.7）時(shí)，濃度測(cè)量的相對(duì)誤差都不太大。時(shí)，濃

19、度測(cè)量的相對(duì)誤差都不太大。2.儀器誤差儀器誤差3.操作誤差等操作誤差等1.1.入射波長(zhǎng)的選擇：入射波長(zhǎng)的選擇： 最大吸收原則最大吸收原則 入射光入射光maxmax 吸收吸收( () ) 最大，干擾最小原則最大，干擾最小原則2.控制適當(dāng)?shù)目刂七m當(dāng)?shù)模ǘy(cè)量條件的選擇（二）測(cè)量條件的選擇A T%3.樣參調(diào)節(jié)光路光學(xué)性質(zhì)和厚度相同樣品池樣品溶液，參比池空白溶液樣品池參比池ATA%1000 利用來調(diào)節(jié)儀器的零點(diǎn)，消除因溶劑或器皿對(duì)入射光反射和吸收帶來的誤差。 當(dāng)溶液的吸光度不在此范圍時(shí)，可以通過當(dāng)溶液的吸光度不在此范圍時(shí)，可以通過改變稱樣量、改變稱樣量、稀釋溶液稀釋溶液以及以及選擇不同厚度的吸收池選

20、擇不同厚度的吸收池來控制吸光度。來控制吸光度。顯色劑：顯色劑： 常見的顯色反應(yīng)大多數(shù)是生成配合物的反應(yīng)。曲線曲線A A為為鈷絡(luò)合物鈷絡(luò)合物的吸收曲線的吸收曲線, ,曲線曲線B B為為顯色劑顯色劑的吸收曲線的吸收曲線原則原則:使試液的吸光度能真正反映待測(cè)物的濃度。使試液的吸光度能真正反映待測(cè)物的濃度。純?nèi)軇┛瞻准內(nèi)軇┛瞻?當(dāng)試液、試劑、顯色劑均為無色時(shí)，用純?nèi)軇ɑ蛘麴s水）作參比溶液。試劑空白試劑空白 試液無色，而試劑或顯色劑有色時(shí)，加入相同量的顯色劑和試劑,作為參比溶液。試液空白試液空白 試劑和顯色劑均無色，試液中其它離子有色時(shí)，用不加顯色劑的溶液作為參比溶液。 1. 定性鑒別定性鑒別定性鑒別

21、的依據(jù)定性鑒別的依據(jù)吸收光譜的特征吸收光譜的特征 吸收光譜的形狀吸收光譜的形狀 吸收峰的數(shù)目吸收峰的數(shù)目 最大吸收波長(zhǎng)的位置最大吸收波長(zhǎng)的位置 max 相應(yīng)的摩爾吸光系數(shù)相應(yīng)的摩爾吸光系數(shù)max2. 純度檢查和雜質(zhì)限量測(cè)定純度檢查和雜質(zhì)限量測(cè)定（1）純度檢查（雜質(zhì)檢查）純度檢查（雜質(zhì)檢查）（1 1）吸光系數(shù)法）吸光系數(shù)法 查表代入查表代入（2 2）標(biāo)準(zhǔn)曲線法）標(biāo)準(zhǔn)曲線法 （3）標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法）標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法 該法是標(biāo)準(zhǔn)曲線法的簡(jiǎn)化，即只配制一個(gè)濃度為該法是標(biāo)準(zhǔn)曲線法的簡(jiǎn)化，即只配制一個(gè)濃度為cs的標(biāo)準(zhǔn)溶液，的標(biāo)準(zhǔn)溶液，并測(cè)量其吸光度，求出吸收系數(shù)并測(cè)量其吸光度，求出吸收系數(shù)k，然后由，然后由Ax=kc

22、x求出求出cx 該法只有在測(cè)定濃度范圍內(nèi)遵守該法只有在測(cè)定濃度范圍內(nèi)遵守L-B定律，且定律，且cx與與cs大致相當(dāng)時(shí)，大致相當(dāng)時(shí)，才可得到準(zhǔn)確結(jié)果才可得到準(zhǔn)確結(jié)果 1、單組分的定量方法、單組分的定量方法定量依據(jù)：定量依據(jù)：A a b cv配制一系列不同含量的待測(cè)組分的標(biāo)準(zhǔn)溶液，以不含待測(cè)組分的空白溶液為參比，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度。并繪制吸光度濃度曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線（工作曲線），然后再在相同條件下測(cè)定試樣溶液的吸光度。由測(cè)得的吸光度在曲線上查得試樣溶液中待測(cè)組分的濃度，最后計(jì)算得到試樣中待測(cè)組分的含量。2. 2. 多組分定量方法多組分定量方法 由于吸光度具有加合性，因此可以在同一試樣中測(cè)定多個(gè)組

23、份。由于吸光度具有加合性，因此可以在同一試樣中測(cè)定多個(gè)組份。 設(shè)試樣中有兩組份設(shè)試樣中有兩組份 X 和和 Y，將其顯色后，分別繪制吸收曲線，會(huì)出現(xiàn)如圖所，將其顯色后，分別繪制吸收曲線，會(huì)出現(xiàn)如圖所示的三種情況：示的三種情況： 圖圖a)：X,Y 組份最大吸收波長(zhǎng)不重迭，相互不干擾，可以按兩個(gè)單一組份處理。組份最大吸收波長(zhǎng)不重迭，相互不干擾，可以按兩個(gè)單一組份處理。圖圖b)和和c) ：X,Y 相互干擾，此時(shí)可通過解聯(lián)立方程組求得相互干擾，此時(shí)可通過解聯(lián)立方程組求得X和和Y的濃度：的濃度：其中，其中，X,Y 組份在波長(zhǎng)組份在波長(zhǎng) 1 和和 2 處的摩爾吸光系數(shù)處的摩爾吸光系數(shù) 可由已知濃度的可由已知

24、濃度的 X, Y 純?nèi)芤杭內(nèi)芤簻y(cè)得。解上述方程組可求得測(cè)得。解上述方程組可求得 cx 及及 cy。 yyxxyxyyxxyxlclcAlclcA222111( (三三) )導(dǎo)數(shù)分光光度法導(dǎo)數(shù)分光光度法 利用吸光度利用吸光度( (或透光度或透光度) )對(duì)波長(zhǎng)的導(dǎo)數(shù)曲線來進(jìn)行分析：對(duì)波長(zhǎng)的導(dǎo)數(shù)曲線來進(jìn)行分析： 0 0 e e-bcbc假定入射光強(qiáng)度假定入射光強(qiáng)度0 0 在整個(gè)波長(zhǎng)范圍內(nèi)保持恒在整個(gè)波長(zhǎng)范圍內(nèi)保持恒定：定： d dI I 0 0 /d /d0 0則：則：d dI I/d/d d(0 0bcbc e e bcbc) )/d d d/d/d0 0 bcbc d d/d/d d dI I/

25、d/d 0 0 bcbc d d/d/d 一階導(dǎo)數(shù)信號(hào)與試樣濃度呈一階導(dǎo)數(shù)信號(hào)與試樣濃度呈線性關(guān)系；線性關(guān)系； 測(cè)定靈敏度依賴于摩爾吸光測(cè)定靈敏度依賴于摩爾吸光系數(shù)對(duì)波長(zhǎng)的變化率系數(shù)對(duì)波長(zhǎng)的變化率d d/d/d。吸。吸收曲線的拐點(diǎn)處收曲線的拐點(diǎn)處d d/d/d最大，故最大，故其靈敏度最高其靈敏度最高( (見圖）。見圖）。 同理可以導(dǎo)出其二階和三階導(dǎo)同理可以導(dǎo)出其二階和三階導(dǎo)數(shù)光譜（略）數(shù)光譜（略） A 圖圖01234A 圖圖導(dǎo)數(shù)分光光度法導(dǎo)數(shù)分光光度法混合物導(dǎo)數(shù)光譜混合物導(dǎo)數(shù)光譜練習(xí)練習(xí)-23553553023-30223302355-231.NO35523.3/2.50NO3557.24NO

26、NO11.010,0.730NONOnmnmcmAA離子在處的，而。離子在處的吸收可以忽略，在波長(zhǎng)302nm處的。今有一含有和的試液，用吸收池測(cè)得。計(jì)算試液中和的濃度。2.2.在在1.00cm1.00cm比色皿中測(cè)得下列數(shù)據(jù)，求比色皿中測(cè)得下列數(shù)據(jù)，求A+BA+B未知混合液中未知混合液中A A和和B B 的濃度。的濃度。溶液濃度吸光度（450nm）吸光度（700nm）ABA+B5.010-4mol/L2.010-4mol/L未知0.8000.1000.6000.1000.6001.003. 以分光光度法測(cè)定某合金鋼中錳和鉻。稱取以分光光度法測(cè)定某合金鋼中錳和鉻。稱取1.000g1.000g鋼樣

27、，溶解后稀釋鋼樣，溶解后稀釋至至50.00ml50.00ml，將其中的，將其中的CrCr氧化成氧化成CrCr2 2O O7 72-2-，MnMn氧化成氧化成MnOMnO4 4- -，然后在，然后在440nm440nm和和545nm545nm用用1.0cm1.0cm吸收池測(cè)得吸光度分別為吸收池測(cè)得吸光度分別為0.2040.204和和0.8600.860。111131111440nmMnCr95.0369.05452.35 1011.0MnCrMnCrL molcmL molcmnmL molcmL molcm已知在時(shí)和的，在時(shí)，。求此合金鋼中的求此合金鋼中的MnMn和和CrCr的質(zhì)量分?jǐn)?shù)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。MMn=54.94,MCr=52.004.4.有一有一A A和和B B的化合物混合