項(xiàng)目二可見(jiàn)分光光度法測(cè)定鐵的含量3

1、1/9可可見(jiàn)見(jiàn)分分光光光光度度法法測(cè)測(cè)定定鐵鐵的的含含量量任務(wù) 可見(jiàn)分光光度法測(cè)定鐵的含量可見(jiàn)分光光度法測(cè)定鐵的含量 光分析法模塊之2/9可可見(jiàn)見(jiàn)分分光光光光度度法法測(cè)測(cè)定定鐵鐵的的含含量量 教學(xué)目標(biāo) 知識(shí)目標(biāo)知識(shí)目標(biāo)：掌握可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定鐵離子的原理；掌握優(yōu)化顯色條件的方法。 能力目標(biāo)能力目標(biāo)：能獨(dú)立測(cè)出鐵離子的最佳波長(zhǎng)；會(huì)使用可見(jiàn)光分光光度計(jì)、并能測(cè)定溶液中的離子濃度；會(huì)繪制曲線圖； 素質(zhì)目標(biāo)素質(zhì)目標(biāo)：養(yǎng)成節(jié)約衛(wèi)生意識(shí)；安全規(guī)范操作意識(shí)；具有較好的團(tuán)隊(duì)合作能力。3/9可可見(jiàn)見(jiàn)分分光光光光度度法法測(cè)測(cè)定定鐵鐵的的含含量量 課程引入1 1、課程回顧、課程回顧2、問(wèn)題問(wèn)題：鐵是人體不可缺少的礦

2、物質(zhì)元素，特別是嬰幼兒在生長(zhǎng)發(fā)育階，用光度法測(cè)定段是不可或缺的。鐵離子吸收波長(zhǎng)為538nm,鐵離子含量檢測(cè)我們可不可以用光度法呢？可以的話是用紫外分光光度計(jì)還是可見(jiàn)分光光度計(jì)呢？答案：答案：可以用光度法測(cè)定。選擇可見(jiàn)光分光光度計(jì)測(cè)定4/9可可見(jiàn)見(jiàn)分分光光光光度度法法測(cè)測(cè)定定鐵鐵的的含含量量實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn) 可見(jiàn)分光光度法測(cè)定鐵的含量可見(jiàn)分光光度法測(cè)定鐵的含量 1 1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?(1) (1) 掌握用鄰二氮菲顯色法測(cè)定鐵的原理和方法。掌握用鄰二氮菲顯色法測(cè)定鐵的原理和方法。 (2) (2) 學(xué)習(xí)吸收曲線的制作和適宜測(cè)量波長(zhǎng)的選擇。學(xué)習(xí)吸收曲線的制作和適宜測(cè)量波長(zhǎng)的選擇。 (3) (3) 進(jìn)一步熟

3、練掌握分光光度計(jì)的使用方法。進(jìn)一步熟練掌握分光光度計(jì)的使用方法。 5/9可可見(jiàn)見(jiàn)分分光光光光度度法法測(cè)測(cè)定定鐵鐵的的含含量量2 2 實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 在測(cè)定微量鐵時(shí)，通常以鹽酸羥胺或抗壞血酸還原在測(cè)定微量鐵時(shí)，通常以鹽酸羥胺或抗壞血酸還原FeFe3+3+為為FeFe2+2+，在，在pH=2pH=29 9范圍內(nèi)，使范圍內(nèi)，使FeFe2+2+與鄰二氮菲反應(yīng)與鄰二氮菲反應(yīng)生成穩(wěn)定的橙紅色配合物生成穩(wěn)定的橙紅色配合物Fe(CFe(C1212H H8 8N N2 2) )3 3 2+2+，其，其lglgK Kf f=21.3=21.3，maxmax=510 nm=510 nm。反應(yīng)式如下：。反應(yīng)式如下：

4、6/9可可見(jiàn)見(jiàn)分分光光光光度度法法測(cè)測(cè)定定鐵鐵的的含含量量試試 液液 V/mL標(biāo)準(zhǔn)鐵標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液溶液待測(cè)鐵待測(cè)鐵溶液溶液加去離加去離子水至子水至H2SO4溶液溶液抗壞血抗壞血酸溶液酸溶液HAc-NaAc溶液溶液鄰二氮鄰二氮菲溶液菲溶液定容定容體積體積標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)鐵測(cè)鐵測(cè)量液量液5.000205滴滴1.55.03.050.00參比參比溶液溶液00205滴滴1.55.03.050.00試樣試樣05.00205滴滴1.55.03.050.003 3 實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟 1 1測(cè)量溶液的配制測(cè)量溶液的配制按表按表1 1配制測(cè)量溶液，試劑按從左往右的順序加，每加一配制測(cè)量溶液，試劑按從左往右的順序加，每加一種試

5、劑之前都應(yīng)先搖勻種試劑之前都應(yīng)先搖勻( (不要加蓋不要加蓋) )容量瓶中的溶液。容量瓶中的溶液。 表表1 1 測(cè)量溶液的配制測(cè)量溶液的配制 7/9可可見(jiàn)見(jiàn)分分光光光光度度法法測(cè)測(cè)定定鐵鐵的的含含量量2. 2. 吸收曲線的測(cè)量吸收曲線的測(cè)量 用兩個(gè)用兩個(gè)1 cm1 cm比色皿分別盛標(biāo)準(zhǔn)鐵測(cè)量液和參比溶比色皿分別盛標(biāo)準(zhǔn)鐵測(cè)量液和參比溶液，在液，在440440560 nm560 nm之間，每隔之間，每隔10 nm10 nm測(cè)測(cè)1 1次吸光度。次吸光度。 3 3試樣溶液的測(cè)量試樣溶液的測(cè)量 根據(jù)前面的測(cè)量結(jié)果，選取最大吸光度所對(duì)應(yīng)的根據(jù)前面的測(cè)量結(jié)果，選取最大吸光度所對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)波長(zhǎng)maxmax為入射光

6、波長(zhǎng)。再取為入射光波長(zhǎng)。再取1 1個(gè)個(gè)1 cm1 cm比色皿裝入試樣比色皿裝入試樣測(cè)量液，在測(cè)量液，在maxmax下用參比溶液調(diào)零后，分別測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)下用參比溶液調(diào)零后，分別測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)鐵測(cè)量液的吸光度鐵測(cè)量液的吸光度A A：和試樣測(cè)量液的吸光度：和試樣測(cè)量液的吸光度A Ax x，讀數(shù)，讀數(shù)準(zhǔn)確至準(zhǔn)確至0.0010.001。 8/9可可見(jiàn)見(jiàn)分分光光光光度度法法測(cè)測(cè)定定鐵鐵的的含含量量4 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果 （1 1）填寫表）填寫表2 2 表表2 2Fe(CFe(C1212H H8 8N N2 2) )3 3 2+2+ 溶液吸收曲線的測(cè)定溶液吸收曲線的測(cè)定/nm44045046047048049150

7、0510520530540550560A （2 2）根據(jù)測(cè)量數(shù)據(jù)）根據(jù)測(cè)量數(shù)據(jù)A As s，A Ax x及溶液的稀釋情況，用比較及溶液的稀釋情況，用比較法算出待測(cè)鐵溶液中鐵的含量法算出待測(cè)鐵溶液中鐵的含量 9/9可可見(jiàn)見(jiàn)分分光光光光度度法法測(cè)測(cè)定定鐵鐵的的含含量量 (1) (1) 認(rèn)真讀懂儀器使用說(shuō)明，方可操作儀器；認(rèn)真讀懂儀器使用說(shuō)明，方可操作儀器； (2) (2) 配置溶液時(shí)，加入試劑的順序不能隨意改變。配置溶液時(shí)，加入試劑的順序不能隨意改變。每加入一種試劑之前都應(yīng)先搖勻每加入一種試劑之前都應(yīng)先搖勻( (不要加蓋不要加蓋) )容量瓶中的容量瓶中的溶液；溶液； (3) (3) 用刻度吸管取標(biāo)

8、液時(shí)，應(yīng)從滿刻度處開(kāi)始，放用刻度吸管取標(biāo)液時(shí)，應(yīng)從滿刻度處開(kāi)始，放出所需體積，以減小體積誤差；出所需體積，以減小體積誤差； (4) (4) 每改變一次波長(zhǎng)每改變一次波長(zhǎng), ,都要用參比溶液調(diào)都要用參比溶液調(diào)“0”0”和和“100%”100%”。5 5 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)10/9可可見(jiàn)見(jiàn)分分光光光光度度法法測(cè)測(cè)定定鐵鐵的的含含量量6 6 問(wèn)題討論問(wèn)題討論 （1 1）顯色時(shí)，還原劑、緩沖溶液、顯色劑的加入順）顯色時(shí)，還原劑、緩沖溶液、顯色劑的加入順序可否顛倒？為什么？序可否顛倒？為什么？ （2 2）制作吸收曲線時(shí)，為什么每改變一次入射光波）制作吸收曲線時(shí)，為什么每改變一次入射光波后，都必須用參比溶液

9、調(diào)零？后，都必須用參比溶液調(diào)零？11/9可可見(jiàn)見(jiàn)分分光光光光度度法法測(cè)測(cè)定定鐵鐵的的含含量量 （1 1）顯色時(shí)，還原劑、緩沖溶液、顯色劑的加入順）顯色時(shí)，還原劑、緩沖溶液、顯色劑的加入順序可否顛倒？為什么？序可否顛倒？為什么？ 答：順序不能顛倒，因?yàn)轱@色反應(yīng)必須在一定的條答：順序不能顛倒，因?yàn)轱@色反應(yīng)必須在一定的條件下進(jìn)行，才能取得較好的顯色效果。被測(cè)物質(zhì)和各種件下進(jìn)行，才能取得較好的顯色效果。被測(cè)物質(zhì)和各種試劑的加入順序往往需經(jīng)反復(fù)試驗(yàn)才能確定，所以對(duì)已試劑的加入順序往往需經(jīng)反復(fù)試驗(yàn)才能確定，所以對(duì)已經(jīng)確定了的試劑加入順序不能隨意改動(dòng)。經(jīng)確定了的試劑加入順序不能隨意改動(dòng)。7 7 參考答案參考答案12/9可可見(jiàn)見(jiàn)分分光光光光度度法法測(cè)測(cè)定定鐵鐵的的含含量量 （2 2）制作吸收曲線時(shí)，為什么每改變一次入射光波）制作吸收曲線時(shí)，為什么每改變一次入射光波后，都必須用參比溶液調(diào)零？后，都必須用參比溶液調(diào)零？ 答：由于比色皿和參比溶液對(duì)不同波長(zhǎng)的入射光有答：由于比色皿和參比溶液對(duì)不同波長(zhǎng)的入射光有不同的反射和吸收，所以當(dāng)測(cè)量波長(zhǎng)改變時(shí)，都要用參不同的反射和吸收，所以當(dāng)測(cè)量波長(zhǎng)改變時(shí)，都要用參比溶液進(jìn)行調(diào)零，這樣才能測(cè)出有色物質(zhì)在該波長(zhǎng)下的比溶液進(jìn)行調(diào)零，這樣才能測(cè)