實驗室基本技能培訓(xùn)

1、實驗基礎(chǔ)知識實驗基礎(chǔ)知識/基本技能培訓(xùn)基本技能培訓(xùn)實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?謹記實驗室規(guī)程謹記實驗室規(guī)程 認識分子生物學(xué)實驗的主要儀器設(shè)備認識分子生物學(xué)實驗的主要儀器設(shè)備 掌握分子生物學(xué)實驗儀器設(shè)備基本技能掌握分子生物學(xué)實驗儀器設(shè)備基本技能目目 錄錄前言：分子生物學(xué)實驗規(guī)程前言：分子生物學(xué)實驗規(guī)程第一節(jié)：分子生物學(xué)實驗設(shè)備第一節(jié)：分子生物學(xué)實驗設(shè)備第二節(jié)：分子生物學(xué)基本技術(shù)第二節(jié)：分子生物學(xué)基本技術(shù)第三節(jié)：實驗安排第三節(jié)：實驗安排實驗規(guī)程實驗規(guī)程 嚴格遵守生命科學(xué)中心制定的安全規(guī)則。嚴格遵守生命科學(xué)中心制定的安全規(guī)則。 發(fā)現(xiàn)實驗室發(fā)現(xiàn)實驗室/樓內(nèi)任何地方有危害安全之人、事、樓內(nèi)任何地方有危害安全之人、

2、事、物等，必須立即向有關(guān)人員反映并作緊急處理。物等，必須立即向有關(guān)人員反映并作緊急處理。 1) 穿著規(guī)定穿著規(guī)定 必須按規(guī)定穿戴必須按規(guī)定穿戴工作服工作服。 進行危害物質(zhì)、揮發(fā)性有機溶機、特定化學(xué)物質(zhì)進行危害物質(zhì)、揮發(fā)性有機溶機、特定化學(xué)物質(zhì)等化學(xué)藥品操作實驗，必須要穿戴防護具（防護等化學(xué)藥品操作實驗，必須要穿戴防護具（防護口罩口罩、防護、防護手套手套、防護、防護眼鏡眼鏡）。）。 長發(fā)及松散衣服妥善長發(fā)及松散衣服妥善固定固定。實驗規(guī)程實驗規(guī)程2) 飲食規(guī)定飲食規(guī)定 禁止在實驗室禁止在實驗室吃喝吃喝食物且使用化學(xué)藥品后食物且使用化學(xué)藥品后需先洗凈雙手方能進食。需先洗凈雙手方能進食。 嚴禁在實驗室

3、內(nèi)吃嚴禁在實驗室內(nèi)吃口香糖口香糖。 禁止使用實驗室儀器冷藏禁止使用實驗室儀器冷藏/加熱食物。加熱食物。 實驗規(guī)程實驗規(guī)程3) 藥品操作相關(guān)規(guī)定：藥品操作相關(guān)規(guī)定： 操作危險性藥品請操作危險性藥品請務(wù)必遵守務(wù)必遵守操作守則或遵操作守則或遵照老師操作流程進行實驗，勿自行更換實照老師操作流程進行實驗，勿自行更換實驗流程。驗流程。 識記清楚藥品危害性，避免危害發(fā)生。識記清楚藥品危害性，避免危害發(fā)生。實驗規(guī)程實驗規(guī)程4) 用電安全相關(guān)規(guī)定：用電安全相關(guān)規(guī)定： 按照規(guī)定（電壓、功率）合理用電。按照規(guī)定（電壓、功率）合理用電。 手上有水或潮濕請勿接觸電器用品或電器設(shè)備。手上有水或潮濕請勿接觸電器用品或電器設(shè)

4、備。 掌握主要儀器、設(shè)備的性能和操作方法，嚴格按掌握主要儀器、設(shè)備的性能和操作方法，嚴格按操作操作規(guī)程規(guī)程操作。操作。 最后離開實驗室務(wù)必隨手將不用的水、電等開關(guān)最后離開實驗室務(wù)必隨手將不用的水、電等開關(guān)關(guān)閉。關(guān)閉。如：擦拭、維修過程中要關(guān)閉電源如：擦拭、維修過程中要關(guān)閉電源實驗規(guī)程實驗規(guī)程5) 環(huán)境衛(wèi)生相關(guān)規(guī)定：環(huán)境衛(wèi)生相關(guān)規(guī)定： 注重環(huán)境衛(wèi)生，并須保持整潔。注重環(huán)境衛(wèi)生，并須保持整潔。 化學(xué)物溢滿地面或工作臺時應(yīng)立即選用合適的方化學(xué)物溢滿地面或工作臺時應(yīng)立即選用合適的方法擦拭沖洗干凈。法擦拭沖洗干凈。 嚴格區(qū)分嚴格區(qū)分開污染區(qū)和潔凈區(qū)開污染區(qū)和潔凈區(qū)。 污染區(qū)：戴手套操作。污染區(qū)：戴手套操

5、作。潔凈區(qū)：徒手操作。潔凈區(qū)：徒手操作。實驗要求實驗要求 1) 詳細詳細記錄記錄和和分析分析實驗結(jié)果，并按時提交實驗結(jié)果，并按時提交實驗報告實驗報告； 2) 實驗中一定要處處用實驗中一定要處處用心心、勤動、勤動手手，多，多問問為什么；為什么； 3) 仔細仔細操作操作和和觀察；觀察； 4) 保留好每一步的保留好每一步的實驗樣品實驗樣品，在確準(zhǔn)的情，在確準(zhǔn)的情況下才能當(dāng)廢液扔掉。況下才能當(dāng)廢液扔掉。分子生物學(xué)實驗設(shè)備分子生物學(xué)實驗設(shè)備 1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 2) 實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng) 3) 消毒系統(tǒng)消毒系統(tǒng) 4) 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 6) 電泳裝置電泳裝

6、置 7) 凝膠成像系統(tǒng)凝膠成像系統(tǒng) 8) PCR儀儀 9) 生物培養(yǎng)設(shè)施生物培養(yǎng)設(shè)施 10) 蛋白質(zhì)檢測設(shè)備蛋白質(zhì)檢測設(shè)備 11) 其他設(shè)備其他設(shè)備溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 環(huán)境溫控：大部分的分子生物學(xué)實驗都要求在環(huán)境溫控：大部分的分子生物學(xué)實驗都要求在一定的溫度下進行操作，為了保持這些條件，實驗一定的溫度下進行操作，為了保持這些條件，實驗室應(yīng)裝備室應(yīng)裝備空調(diào)空調(diào)等。等。 藥品、試劑、樣品等的保存：不同藥品、試劑、藥品、試劑、樣品等的保存：不同藥品、試劑、樣品要求在不同的溫度下保存，實驗室必須備有樣品要求在不同的溫度下保存，實驗室必須備有44、2020、8080的的冰柜冰柜/ /箱箱，需要在更

7、低溫度下保存，需要在更低溫度下保存的樣品，則須使用的樣品，則須使用液氮罐液氮罐。 藥品、試劑、藥品、試劑、樣品等的樣品等的取放取放溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 低溫操作可以用低溫操作可以用制冰機制冰機制冰塊降溫；制冰塊降溫； 對于需在較高溫度下進行的操作，則可對于需在較高溫度下進行的操作，則可使用使用烘箱烘箱、微波爐、恒溫水浴鍋、恒溫微波爐、恒溫水浴鍋、恒溫空氣搖床空氣搖床等。等。實驗用水實驗用水 一次蒸餾水：水經(jīng)過一次蒸餾，一次蒸餾水：水經(jīng)過一次蒸餾，不揮發(fā)的組分不揮發(fā)的組分殘殘留在容器中被除去，留在容器中被除去，揮發(fā)的組分揮發(fā)的組分（氨、二氧化碳、有（氨、二氧化碳、有機物）進入蒸餾水的初始餾分

8、中，通常只收集餾分的機物）進入蒸餾水的初始餾分中，通常只收集餾分的中間部分，約占中間部分，約占6060。 多次蒸餾水：在一次蒸餾水中加入堿性高錳酸鉀多次蒸餾水：在一次蒸餾水中加入堿性高錳酸鉀溶液，除去溶液，除去有機物和二氧化碳有機物和二氧化碳；加入非揮發(fā)性的酸；加入非揮發(fā)性的酸（硫酸或磷酸），使（硫酸或磷酸），使氨氨成為不揮發(fā)的銨鹽。成為不揮發(fā)的銨鹽。 無（去）離子水：指除去了呈離子形式雜質(zhì)后的無（去）離子水：指除去了呈離子形式雜質(zhì)后的純水。主要指采用離子交換樹脂處理方法，應(yīng)用離子純水。主要指采用離子交換樹脂處理方法，應(yīng)用離子交換樹脂去除水中的陰離子和陽離子，但水中仍然存交換樹脂去除水中的陰離

9、子和陽離子，但水中仍然存在可溶性的有機物。在可溶性的有機物。實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水實驗用水 超純水：既將水中的超純水：既將水中的導(dǎo)電介質(zhì)導(dǎo)電介質(zhì)幾乎完全去除，又將幾乎完全去除，又將水中不離解的水中不離解的膠體物質(zhì)膠體物質(zhì)、氣體氣體及及有機物有機物均去除均去除至很低程至很低程度度的水。的水。 超純水中除了水分子超純水中除了水分子(H(H2 20)0)外，幾乎沒有什么雜質(zhì)。外，幾乎沒有什么雜質(zhì)。 各種用水，在貯存中都會被污染：各種用水，在貯存中都會被污染： 塑料容器塑料容器會產(chǎn)生有紫外吸收的有機物；會產(chǎn)生有紫外吸收的有機物； 玻璃和金屬容器玻璃和金屬容器會產(chǎn)生金屬離子的污染；會產(chǎn)

10、生金屬離子的污染； 長時間放置長時間放置更會使水長菌，空氣中更會使水長菌，空氣中COCO2 2會溶入水中。會溶入水中。 所以貯存一定要隔絕空氣，密封蓋嚴，必要時貯存所以貯存一定要隔絕空氣，密封蓋嚴，必要時貯存在冰箱的冷藏室中；最好使用在冰箱的冷藏室中；最好使用“新鮮的水新鮮的水”。實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng)分子生物學(xué)實驗用水分子生物學(xué)實驗用水 普通蒸餾水、二次蒸餾水、無普通蒸餾水、二次蒸餾水、無/ /去離子水、超純水。去離子水、超純水。實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng) 常用的滅菌方法：高溫、高壓滅菌、紫外線常用的滅菌方法：高溫、高壓滅菌、紫外線照射、火焰焚燒、過濾除菌、酒精等試劑浸泡消照

11、射、火焰焚燒、過濾除菌、酒精等試劑浸泡消毒等，因此實驗室必須配備各種無菌處理設(shè)備。毒等，因此實驗室必須配備各種無菌處理設(shè)備。 常用的滅菌儀器設(shè)備：常用的滅菌儀器設(shè)備：高壓滅菌鍋高壓滅菌鍋、紫外燈紫外燈、酒精燈酒精燈、濾膜濾膜等。等。消毒系統(tǒng)消毒系統(tǒng) 常用的定量系統(tǒng)有：稱量系統(tǒng)、液體體積度常用的定量系統(tǒng)有：稱量系統(tǒng)、液體體積度量系統(tǒng)、量系統(tǒng)、pHpH測定系統(tǒng)、液體溶質(zhì)定量系統(tǒng)等。測定系統(tǒng)、液體溶質(zhì)定量系統(tǒng)等。 稱量儀器：最常用的是稱量儀器：最常用的是電子天平電子天平。 酸堿度酸堿度pHpH測量儀器：最常用的是測量儀器：最常用的是pHpH試紙試紙和和pHpH計計。計量系統(tǒng)計量系統(tǒng)液體體積度量儀器：

12、常用的有各種液體體積度量儀器：常用的有各種量筒量筒、移液移液管管、容量瓶容量瓶、移液器移液器。計量系統(tǒng)計量系統(tǒng) 液體溶質(zhì)定量儀器：主要有液體溶質(zhì)定量儀器：主要有紫外紫外分光光度分光光度計和計和可見可見分光光度計等。分光光度計等。 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng)實驗用離心機分為實驗用離心機分為制備性制備性離心機和離心機和分析性分析性離心機。離心機。制備性離心機主要用于制備性離心機主要用于分離分離各種生物材料。各種生物材料。離心方法是分離和制備生物大分子最常用的手段。離心方法是分離和制備生物大分子最常用的手段。制備性離心機可分為三類制備性離心機可分為三類: :低速低速、高速（冷凍）高速（冷凍）、超速超速離心機。

13、離心機。離心設(shè)備離心設(shè)備 電泳是生化實驗中最常用最重要的實驗技術(shù)電泳是生化實驗中最常用最重要的實驗技術(shù)之一，主要用于分析、鑒定，也可用于制備。之一，主要用于分析、鑒定，也可用于制備。 電泳裝置由電泳裝置由電泳儀電泳儀和和電泳槽電泳槽兩部分組成。兩部分組成。 電泳儀：電泳時提供一定的電壓和電流電泳儀：電泳時提供一定的電壓和電流 電泳槽：電泳槽：凝膠電泳系統(tǒng)的核心部分，根據(jù)電凝膠電泳系統(tǒng)的核心部分，根據(jù)電泳的原理，凝膠都是放在兩個緩沖腔之間，電場泳的原理，凝膠都是放在兩個緩沖腔之間，電場通過凝膠連接兩個緩沖腔。通過凝膠連接兩個緩沖腔。電泳裝置電泳裝置 電泳槽：核酸或蛋白質(zhì)的電泳定性電泳槽：核酸或蛋

14、白質(zhì)的電泳定性/ /定量分析定量分析時的凝膠支架。時的凝膠支架。 電泳槽又分為電泳槽又分為水平水平電泳槽和電泳槽和垂直垂直電泳槽。電泳槽。電泳裝置電泳裝置 是分子生物學(xué)實驗中的重要是分子生物學(xué)實驗中的重要觀測儀器觀測儀器，幾乎全幾乎全部的實驗結(jié)果部的實驗結(jié)果都需要經(jīng)由凝膠成像系統(tǒng)來觀察。都需要經(jīng)由凝膠成像系統(tǒng)來觀察。 可用于觀察分析各種透明或不透明的電泳圖像，可用于觀察分析各種透明或不透明的電泳圖像，包括包括瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳檢測檢測DNADNA結(jié)果的觀察、結(jié)果的觀察、PCRPCR產(chǎn)物產(chǎn)物的檢測觀察，的檢測觀察，垂直板凝膠電泳垂直板凝膠電泳檢測基因多態(tài)性的銀檢測基因多態(tài)性的銀染膠、染

15、膠、蛋白膠蛋白膠、斑點印跡斑點印跡（RNA/RNA/蛋白質(zhì)檢測）結(jié)果蛋白質(zhì)檢測）結(jié)果的觀察等。的觀察等。凝膠成像系統(tǒng)凝膠成像系統(tǒng)紫外分析儀紫外分析儀 用于檢測許多主要生物大分子物質(zhì)如蛋用于檢測許多主要生物大分子物質(zhì)如蛋白質(zhì)、核苷酸等。白質(zhì)、核苷酸等。 PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR(Polymerase Chain Reaction)是指聚合是指聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。其反應(yīng)是用酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。其反應(yīng)是用DNADNA聚合酶在聚合酶在體外大量擴體外大量擴增增DNADNA片段的一種方法。片段的一種方法。 PCRPCR儀就是將此方法實現(xiàn)了儀就是將此方法實現(xiàn)了自動化操作自動化

16、操作的一的一種儀器，是分子生物學(xué)實驗種儀器，是分子生物學(xué)實驗常用和必備常用和必備的設(shè)備。的設(shè)備。 PCRPCR儀包括普通儀包括普通PCRPCR儀、儀、梯度梯度PCRPCR儀儀、熒光定、熒光定量量PCRPCR儀。儀。PCR儀儀 超凈工作臺超凈工作臺 恒溫培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)箱生物培養(yǎng)設(shè)施生物培養(yǎng)設(shè)施 蛋白電泳槽和轉(zhuǎn)印槽蛋白電泳槽和轉(zhuǎn)印槽- -用于用于western-blottingwestern-blotting實驗實驗蛋白質(zhì)檢測設(shè)備蛋白質(zhì)檢測設(shè)備 酶標(biāo)儀酶標(biāo)儀- -用于用于ELISA ELISA （酶聯(lián)免疫吸附實驗）實驗。（酶聯(lián)免疫吸附實驗）實驗。蛋白質(zhì)檢測設(shè)備蛋白質(zhì)檢測設(shè)備 實驗室除以上常規(guī)設(shè)備和

17、設(shè)施外，還必須裝實驗室除以上常規(guī)設(shè)備和設(shè)施外，還必須裝備下列一些常用設(shè)備：備下列一些常用設(shè)備：A.A.通風(fēng)柜通風(fēng)柜：用于有害和有毒氣體的操作。：用于有害和有毒氣體的操作。 B.B.組織打碎機和勻漿器：用于各種生物材料、動組織打碎機和勻漿器：用于各種生物材料、動植物組織和細胞的破碎。（植物組織和細胞的破碎。（研缽研缽）C. C. 超聲清洗機超聲清洗機：用于各種器皿、移液管和自動?。河糜诟鞣N器皿、移液管和自動取液器吸頭的清洗和高效液相色譜儀所用流動相的脫液器吸頭的清洗和高效液相色譜儀所用流動相的脫氣等。氣等。其它設(shè)備其它設(shè)備 其它設(shè)備其它設(shè)備 D.D.冰凍干燥機冰凍干燥機：用于生物大分子水溶液的冰

18、凍干燥，：用于生物大分子水溶液的冰凍干燥，可由其水溶液直接制得固體干粉?？捎善渌芤褐苯又频霉腆w干粉。E.E.機械和水環(huán)式機械和水環(huán)式真空泵真空泵：用于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器和各種真：用于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器和各種真空抽氣操作?？粘闅獠僮鳌.F.冷室冷室: 4-10: 4-10的冷室，工作人員可以在其中進的冷室，工作人員可以在其中進行各種柱層析、各種電泳、生物大分子的提取和分離、行各種柱層析、各種電泳、生物大分子的提取和分離、透析等操作，并可以貯存各種生物制品和生化試劑。透析等操作，并可以貯存各種生物制品和生化試劑。G.G.暗室暗室: :主要用于一些避光的實驗，如顯影。主要用于一些避光的實驗，如顯影。H.H.基因

19、導(dǎo)入儀基因?qū)雰x：用于向受體生物細胞中導(dǎo)入基：用于向受體生物細胞中導(dǎo)入基因。常用的導(dǎo)入儀有：電導(dǎo)入儀、基因槍、激因。常用的導(dǎo)入儀有：電導(dǎo)入儀、基因槍、激光和超聲導(dǎo)入儀、原生質(zhì)體融合儀等。光和超聲導(dǎo)入儀、原生質(zhì)體融合儀等。I.I.高效液相色譜儀高效液相色譜儀和和毛細管電泳儀毛細管電泳儀：用于各種：用于各種生物大分子的分析與鑒定。生物大分子的分析與鑒定。其它設(shè)備其它設(shè)備 分子生物學(xué)基本技術(shù)分子生物學(xué)基本技術(shù)-使用方法及注意事項使用方法及注意事項 1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 2) 實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng) 3) 消毒系統(tǒng)消毒系統(tǒng) 4) 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 6) 電泳

20、裝置電泳裝置 7) 凝膠成像系統(tǒng)凝膠成像系統(tǒng)1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 冰箱冰箱/柜的使用：柜的使用： 門（隨手關(guān)，關(guān)嚴）門（隨手關(guān)，關(guān)嚴） 電源（防止不小心關(guān)閉）電源（防止不小心關(guān)閉） 微波爐：微波爐： 要用微波爐專用要用微波爐專用容器容器（不能加熱金屬、（不能加熱金屬、密封密封物）；物）； 不要讓微波爐不要讓微波爐空轉(zhuǎn)空轉(zhuǎn)； 微波爐微波爐工作時工作時不要將不要將眼睛眼睛緊靠微波爐緊靠微波爐5厘米之內(nèi)去觀看微厘米之內(nèi)去觀看微波爐工作波爐工作-眼睛對微波最敏感，以免受到不必要的傷害；眼睛對微波最敏感，以免受到不必要的傷害； 防灼傷！不要徒手拿容器、不要把容器口沖著人！防灼傷！不要徒手拿容器

21、、不要把容器口沖著人！1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 制冰機的使用制冰機的使用：（水（水-進水、排水；電）進水、排水；電） 1不論何種原因停機時，不得連續(xù)不論何種原因停機時，不得連續(xù)啟動啟動，要每隔，要每隔5分鐘分鐘再啟動，以免損壞壓縮機！再啟動，以免損壞壓縮機！ 2定時定時檢查檢查進、出水管接頭，以便處理可能泄露的少量進、出水管接頭，以便處理可能泄露的少量余水！余水！ 3不用時，應(yīng)不用時，應(yīng)排排掉內(nèi)膽內(nèi)余水，用干凈的布掉內(nèi)膽內(nèi)余水，用干凈的布擦擦干儲冰箱干儲冰箱內(nèi)膽！內(nèi)膽！ 5在對制冰機進行在對制冰機進行清潔清潔、檢查及一周以上不用時，請拔、檢查及一周以上不用時，請拔掉掉電源電源插頭。插頭。

22、1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 液氮罐（液氮生物容器液氮罐（液氮生物容器 ）的使用：）的使用： 液氮是一種超低溫液體液氮是一種超低溫液體(-196)，如濺到皮膚上會引起類，如濺到皮膚上會引起類似燒傷一樣的凍傷，在灌充和取出液氮時應(yīng)特別似燒傷一樣的凍傷，在灌充和取出液氮時應(yīng)特別注意注意。 液氮罐主要結(jié)構(gòu)：內(nèi)膽、真空夾層（液氮罐主要結(jié)構(gòu)：內(nèi)膽、真空夾層（容器真空封口接頭容器真空封口接頭）、）、外殼、頸管、專用罐蓋。外殼、頸管、專用罐蓋。 注意：注意：1、液氮罐只用于盛裝液氮，不允許盛裝其他液體；、液氮罐只用于盛裝液氮，不允許盛裝其他液體； 2、嚴防沖擊和碰撞；、嚴防沖擊和碰撞； 3、操作及取放冷凍

23、物品時，請注意要輕拿輕放；、操作及取放冷凍物品時，請注意要輕拿輕放； 4、長期貯存時，需要定期補充液氮。、長期貯存時，需要定期補充液氮。保持容器夾層真空的保持容器夾層真空的關(guān)鍵部件關(guān)鍵部件，用戶用戶不得不得擅自擅自打開打開容器真空封容器真空封口接頭口接頭 1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 烘箱的使用：烘箱的使用： 是利用電熱絲隔層加熱使物體干燥的設(shè)備。是利用電熱絲隔層加熱使物體干燥的設(shè)備。 適用于比室適用于比室溫度溫度高高5300（有的高（有的高200）范圍的烘培、干）范圍的烘培、干燥、熱處理等，靈敏度通常為燥、熱處理等，靈敏度通常為1。 基本結(jié)構(gòu)基本結(jié)構(gòu)一般由箱體、電熱系統(tǒng)和自動控溫系統(tǒng)三部分

24、組成。一般由箱體、電熱系統(tǒng)和自動控溫系統(tǒng)三部分組成。 注意：注意：1、每次每次使用前要根據(jù)烘干物品要求使用前要根據(jù)烘干物品要求確定合適確定合適的溫度；的溫度； 2、物品不能、物品不能排列排列太密，以免影響熱氣流動、散熱；太密，以免影響熱氣流動、散熱； 3、保證鼓風(fēng)機正常運轉(zhuǎn)；、保證鼓風(fēng)機正常運轉(zhuǎn)； 4、需要、需要觀察觀察工作室內(nèi)樣品情況時，可透過工作室內(nèi)樣品情況時，可透過玻璃門玻璃門觀察。觀察。但但箱門箱門以少開為好，以免影響恒溫。特別是以少開為好，以免影響恒溫。特別是200以上時，開以上時，開箱門可能使玻璃門驟冷而破裂。箱門可能使玻璃門驟冷而破裂。不允許整夜使用！不允許整夜使用！1) 溫度控

25、制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 恒溫水浴鍋、恒溫空氣搖床：恒溫水浴鍋、恒溫空氣搖床： 根據(jù)需要設(shè)置根據(jù)需要設(shè)置溫度溫度； 恒溫水浴鍋中要保持足夠的水量。恒溫水浴鍋中要保持足夠的水量。分子生物學(xué)基本技術(shù)分子生物學(xué)基本技術(shù) 1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 2) 實驗用水實驗用水處理系統(tǒng)處理系統(tǒng) 3) 消毒系統(tǒng)消毒系統(tǒng) 4) 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 6) 電泳裝置電泳裝置 7) 凝膠成像系統(tǒng)凝膠成像系統(tǒng)防污染防污染3) 消毒系統(tǒng)消毒系統(tǒng) 高壓滅菌鍋高壓滅菌鍋 1 在主體腔內(nèi)加入在主體腔內(nèi)加入適量適量的清水，將滅菌物品放入滅菌器內(nèi)；的清水，將滅菌物品放入滅菌器內(nèi)； 2 蓋好蓋好（注意密封膠圈）頂

26、蓋后必須（注意密封膠圈）頂蓋后必須擰緊擰緊頂蓋；頂蓋； 3 打開滅菌器的熱源，開啟打開滅菌器的熱源，開啟排氣閥排氣閥排完空氣后（約在水沸騰排完空氣后（約在水沸騰后后10 min15 min ）關(guān)閉排氣閥；）關(guān)閉排氣閥； 4 將壓力升至將壓力升至102.9 kPa(1.05 kg/),溫度要求達溫度要求達121,維維持到規(guī)定時間（根據(jù)物品性質(zhì)以及有關(guān)情況確定持到規(guī)定時間（根據(jù)物品性質(zhì)以及有關(guān)情況確定,一般一般20 min30 min）; 5 滅菌結(jié)束后滅菌結(jié)束后,要待要待壓力壓力恢復(fù)到恢復(fù)到零位零位后開蓋取物。后開蓋取物。 對對液體液體進行滅菌，容器不能密封、進行滅菌，容器不能密封、體積體積不能

27、超過容積的不能超過容積的2/3；滅菌結(jié)束后不能打開滅菌結(jié)束后不能打開排氣排氣閥（尤其是上排氣閥）。閥（尤其是上排氣閥）。分子生物學(xué)基本技術(shù)分子生物學(xué)基本技術(shù) 1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 2) 實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng) 3) 消毒系統(tǒng)消毒系統(tǒng) 4) 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 6) 電泳裝置電泳裝置 7) 凝膠成像系統(tǒng)凝膠成像系統(tǒng)4) 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng)-質(zhì)量質(zhì)量電子天平電子天平 對對環(huán)境環(huán)境高度敏感的精密電子測量儀器高度敏感的精密電子測量儀器, 使用時應(yīng)小心操作使用時應(yīng)小心操作, 臺臺面應(yīng)無明顯振動面應(yīng)無明顯振動, 不要放在空調(diào)口。不要放在空調(diào)口。注意：注意：1 調(diào)整調(diào)

28、整底角螺絲底角螺絲使水平指示器的氣泡居中。使水平指示器的氣泡居中。 2 使用精密電子天平前最好使用精密電子天平前最好熱機熱機1520分鐘，以確保正分鐘，以確保正確讀取電子天平的數(shù)值。確讀取電子天平的數(shù)值。 3 稱量物品前先按（稱量物品前先按（歸零歸零）鍵；稱樣時關(guān)上天平小門。）鍵；稱樣時關(guān)上天平小門。 4 稱物品時，勿超過精密電子天平的稱物品時，勿超過精密電子天平的最大稱量最大稱量，且需將物，且需將物品放于品放于稱盤中心稱盤中心，需，需輕拿輕放輕拿輕放，不要沖擊稱盤。，不要沖擊稱盤。 5 嚴禁有腐蝕性的稱物嚴禁有腐蝕性的稱物直接接觸直接接觸稱盤與天平面板。稱盤與天平面板。 6 使用完畢后，要使

29、用完畢后，要清理清理稱盤、面板，保持儀器清潔。稱盤、面板，保持儀器清潔。4) 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng)-體積體積 依稱量需要選擇合適的器皿依稱量需要選擇合適的器皿-各種量筒、移液管、容量瓶。各種量筒、移液管、容量瓶。 移液器：移液器：量程包括：量程包括：0.1-2.5 ul，0.5-10 ul，10-100 ul，20-200ul，100-1000 ul，500-5000 ul。單道可調(diào)移液器、多道可調(diào)移液器、單道可調(diào)移液器、多道可調(diào)移液器、 電子調(diào)節(jié)電子調(diào)節(jié)/顯示移液器。顯示移液器。 Tip頭頭/吸頭吸頭/槍頭：槍頭：10 ul（白），（白），200 ul（黃），（黃）， 1 000 ul（藍），（

30、藍）， 5 000 ul（白）。（白）。移液器使用方法及注意事項移液器使用方法及注意事項:1.設(shè)定移液體積設(shè)定移液體積 從小量程調(diào)節(jié)至大量程時，逆時針旋轉(zhuǎn)刻度；從小量程調(diào)節(jié)至大量程時，逆時針旋轉(zhuǎn)刻度； 應(yīng)先調(diào)至超過設(shè)定體積刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積，這樣可以應(yīng)先調(diào)至超過設(shè)定體積刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積，這樣可以保證移液器的精確度。保證移液器的精確度。2裝配移液槍頭裝配移液槍頭 將移液槍垂直插入吸頭，左右旋轉(zhuǎn)半圈，上緊即可。將移液槍垂直插入吸頭，左右旋轉(zhuǎn)半圈，上緊即可。 忌用忌用移液器撞擊吸頭的方法是非常不可取的，長期這樣移液器撞擊吸頭的方法是非常不可取的，長期這樣 操作會導(dǎo)致移液器的零件因撞擊而松散

31、。操作會導(dǎo)致移液器的零件因撞擊而松散。移液器使用方法及注意事項移液器使用方法及注意事項:3吸液及放液吸液及放液 垂直垂直吸液：吸液吸液：吸液前前排空氣體，吸頭排空氣體，吸頭尖端尖端浸入液面浸入液面3mm以下以下慢吸慢放慢吸慢放； 放液放液時如果量很小則應(yīng)吸頭尖端可靠容器內(nèi)壁。時如果量很小則應(yīng)吸頭尖端可靠容器內(nèi)壁。 絕不允許絕不允許突然松開，以防溶液吸入過快而沖入移液器內(nèi)腐蝕突然松開，以防溶液吸入過快而沖入移液器內(nèi)腐蝕柱塞。柱塞。4吸有液體的移液槍吸有液體的移液槍不應(yīng)平放不應(yīng)平放，槍頭內(nèi)的液體很容易污染槍，槍頭內(nèi)的液體很容易污染槍內(nèi)部而可能導(dǎo)致槍的彈簧生銹。內(nèi)部而可能導(dǎo)致槍的彈簧生銹。5移液槍在

32、每次實驗后應(yīng)將刻度調(diào)至移液槍在每次實驗后應(yīng)將刻度調(diào)至最大最大，讓彈簧回復(fù)原型，讓彈簧回復(fù)原型以延長移液槍的使用壽命。以延長移液槍的使用壽命。移液器使用方法及注意事項移液器使用方法及注意事項:6切忌切忌 吸液時吸液時突然松開；突然松開； 吸有液體的移液槍吸有液體的移液槍平放；平放； 所設(shè)量程不在移液器所設(shè)量程不在移液器量程范圍量程范圍內(nèi)（會卡住機械裝置，內(nèi)（會卡住機械裝置，損壞了移液器）；損壞了移液器）； 嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體（如濃酸、嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體（如濃酸、濃堿、有機物等）；濃堿、有機物等）； 使用完沒有將刻度調(diào)至最大量程。使用完沒有將刻度調(diào)至最大量程。分子生

33、物學(xué)基本技術(shù)分子生物學(xué)基本技術(shù) 1) 溫度控制系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng) 2) 實驗用水處理系統(tǒng)實驗用水處理系統(tǒng) 3) 消毒系統(tǒng)消毒系統(tǒng) 4) 計量系統(tǒng)計量系統(tǒng) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 6) 電泳裝置電泳裝置 7) 凝膠成像系統(tǒng)凝膠成像系統(tǒng) 一般在低速離心時（轉(zhuǎn)一般在低速離心時（轉(zhuǎn)速小于速小于5000 r/min5000 r/min），離心），離心力的大小常用力的大小常用轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)速r/minr/min（rpmrpm）來表示，而超速離心來表示，而超速離心時則用時則用離心力離心力g g或或g g來表示。來表示。 由于離心管從管口到旋由于離心管從管口到旋轉(zhuǎn)中心的距離是不同的，所轉(zhuǎn)中心的距離是不同的，所以在同樣轉(zhuǎn)

34、速時，管口和管以在同樣轉(zhuǎn)速時，管口和管底所受到的離心力也有差別。底所受到的離心力也有差別。 科技文獻中離心力的數(shù)科技文獻中離心力的數(shù)據(jù)通常是指其據(jù)通常是指其平均值，平均值，即離即離心管中點的離心力。心管中點的離心力。旋轉(zhuǎn)軸旋轉(zhuǎn)軸34340 0rminravrmax5) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 低速低速離心機離心機: :最大轉(zhuǎn)速最大轉(zhuǎn)速6000 rpm6000 rpm左右，最大相對左右，最大相對離心力近離心力近60006000g g，通常不帶冷凍系統(tǒng)。，通常不帶冷凍系統(tǒng)。 超速超速離心機：大于離心機：大于303010 000 r/min10 000 r/min，最大離心，最大離心力力600,00

35、0g600,000g，有，有驅(qū)動驅(qū)動和和速度控制速度控制系統(tǒng)，系統(tǒng)，溫度溫度控制系控制系統(tǒng)，統(tǒng)，真空真空系統(tǒng)（減少摩擦）。系統(tǒng)（減少摩擦）。 超速離心機的出現(xiàn)，使生物科學(xué)的研究領(lǐng)域有了超速離心機的出現(xiàn)，使生物科學(xué)的研究領(lǐng)域有了新的擴展，它能使過去僅僅在電子顯微鏡觀察到的新的擴展，它能使過去僅僅在電子顯微鏡觀察到的亞細胞器亞細胞器得到分級分離，還可以分離病毒、核酸、得到分級分離，還可以分離病毒、核酸、蛋白質(zhì)和多糖等。蛋白質(zhì)和多糖等。5) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 高速（冷凍）高速（冷凍）離心機：最大轉(zhuǎn)速為離心機：最大轉(zhuǎn)速為20 000-25 20 000-25 000rpm000rpm（r/min

36、r/min），最大相對離心力為），最大相對離心力為89 00089 000g g。 通常配有各種通常配有各種角式角式轉(zhuǎn)頭、轉(zhuǎn)頭、蕩平式蕩平式轉(zhuǎn)頭、轉(zhuǎn)頭、微孔板微孔板轉(zhuǎn)頭等，一般都有轉(zhuǎn)頭等，一般都有制冷制冷系統(tǒng)，以消除高速旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭系統(tǒng)，以消除高速旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭與空氣之間摩擦而產(chǎn)生的熱量，轉(zhuǎn)速、溫度和時間與空氣之間摩擦而產(chǎn)生的熱量，轉(zhuǎn)速、溫度和時間都可以嚴格準(zhǔn)確地控制，并有都可以嚴格準(zhǔn)確地控制，并有數(shù)字顯示數(shù)字顯示。 一般分子實驗室一般分子實驗室必備必備的設(shè)備。的設(shè)備。5) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備 角式轉(zhuǎn)頭是指角式轉(zhuǎn)頭是指離心管腔離心管腔與與轉(zhuǎn)軸轉(zhuǎn)軸成一定傾角的轉(zhuǎn)頭。離心管成一定傾角的轉(zhuǎn)頭。離心管腔的中

37、心軸與旋轉(zhuǎn)軸之間的角度在腔的中心軸與旋轉(zhuǎn)軸之間的角度在20-4020-40度度之間，角度越大分之間，角度越大分離效果越好。離效果越好。 離心過程中，重心低，運轉(zhuǎn)平衡，顆粒在沉降時先沿離心離心過程中，重心低，運轉(zhuǎn)平衡，顆粒在沉降時先沿離心力方向撞向離心管壁，然后再沿管壁滑向管底，因此管的一側(cè)力方向撞向離心管壁，然后再沿管壁滑向管底，因此管的一側(cè)就會出現(xiàn)顆粒沉積，此現(xiàn)象稱為就會出現(xiàn)顆粒沉積，此現(xiàn)象稱為“壁效應(yīng)壁效應(yīng)”。 壁效應(yīng)容易使沉降顆粒受突然變速所產(chǎn)生的對流擾亂，影壁效應(yīng)容易使沉降顆粒受突然變速所產(chǎn)生的對流擾亂，影響分離效果。響分離效果。角式轉(zhuǎn)頭角式轉(zhuǎn)頭蕩平式轉(zhuǎn)頭蕩平式轉(zhuǎn)頭： 這種轉(zhuǎn)頭有這種轉(zhuǎn)

38、頭有4 4或或6 6個個自由活動的吊桶自由活動的吊桶（離心（離心套管），當(dāng)轉(zhuǎn)頭靜止時，吊桶垂直懸掛，當(dāng)轉(zhuǎn)套管），當(dāng)轉(zhuǎn)頭靜止時，吊桶垂直懸掛，當(dāng)轉(zhuǎn)頭轉(zhuǎn)速達到每分鐘頭轉(zhuǎn)速達到每分鐘200200到到800800轉(zhuǎn)時，吊桶蕩至水轉(zhuǎn)時，吊桶蕩至水平位置。平位置。微孔板轉(zhuǎn)頭微孔板轉(zhuǎn)頭： 這種轉(zhuǎn)頭可離心高達這種轉(zhuǎn)頭可離心高達 9696孔微孔板、標(biāo)準(zhǔn)酶孔微孔板、標(biāo)準(zhǔn)酶標(biāo)板、標(biāo)板、PCRPCR板等。板等。 離心管主要用離心管主要用塑料塑料和和不銹鋼不銹鋼制成：制成： 塑料離心管常用材料有塑料離心管常用材料有聚乙烯（聚乙烯（PEPE），），聚碳酸酯聚碳酸酯（PCPC），聚丙烯（），聚丙烯（PPPP）等，其中）等，

39、其中PPPP管性能較好。管性能較好。 塑料離心管的優(yōu)點是透明（或半透明），硬度小，塑料離心管的優(yōu)點是透明（或半透明），硬度小，可用穿刺法取出梯度。缺點是易變形，抗有機溶劑腐可用穿刺法取出梯度。缺點是易變形，抗有機溶劑腐蝕性差，使用壽命短。蝕性差，使用壽命短。 塑料離心管都有管蓋，離心前塑料離心管都有管蓋，離心前管蓋管蓋必須蓋嚴，倒必須蓋嚴，倒置不漏液。管蓋有三種作用：置不漏液。管蓋有三種作用：防止樣品外泄。用于防止樣品外泄。用于有放射性或強腐蝕性的樣品時，這點尤其重要。有放射性或強腐蝕性的樣品時，這點尤其重要。防防止樣品揮發(fā)。止樣品揮發(fā)。支持離心管，防止離心管變形。支持離心管，防止離心管變形。

40、5) 5) 離心設(shè)備（耗材）離心設(shè)備（耗材）- -離心管離心管5) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備- -使用注意事項使用注意事項 1. 1.離心機應(yīng)離心機應(yīng)放置放置在穩(wěn)定的臺面上，以防離心機在穩(wěn)定的臺面上，以防離心機滑動或振動，出現(xiàn)事故；滑動或振動，出現(xiàn)事故； 2.2.離心前必須仔細離心前必須仔細檢查檢查轉(zhuǎn)頭各孔內(nèi)有無異物、轉(zhuǎn)頭各孔內(nèi)有無異物、轉(zhuǎn)頭安裝是否緊固。轉(zhuǎn)頭安裝是否緊固。 3.3.樣品的樣品的裝載裝載和和平衡平衡：使用離心機時，必須事：使用離心機時，必須事先在天平上精密地先在天平上精密地平衡平衡離心管和其內(nèi)容物；當(dāng)轉(zhuǎn)頭離心管和其內(nèi)容物；當(dāng)轉(zhuǎn)頭只是部分裝載時，管子必須互相只是部分裝載時，管子必須

41、互相對稱（保證平衡）對稱（保證平衡）地放在轉(zhuǎn)頭中，以便使負載均勻地分布在轉(zhuǎn)頭的周地放在轉(zhuǎn)頭中，以便使負載均勻地分布在轉(zhuǎn)頭的周圍。圍。5) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備- -使用注意事項使用注意事項 4. 4.低溫低溫離心時，轉(zhuǎn)頭及離心機要預(yù)冷后再使用。離心時，轉(zhuǎn)頭及離心機要預(yù)冷后再使用。 5.5.裝載裝載溶液溶液時，要根據(jù)待離心液體的時，要根據(jù)待離心液體的性質(zhì)性質(zhì)及及體體積積選用適合的離心管，液體不得裝得過多，以防離選用適合的離心管，液體不得裝得過多，以防離心時甩出，造成轉(zhuǎn)頭不平衡、生銹或被腐蝕。心時甩出，造成轉(zhuǎn)頭不平衡、生銹或被腐蝕。 6.6.開始離心后請不要立即走開，需等待離心機開始離心后請不要立即走開，需等待離心機達到設(shè)定轉(zhuǎn)速后再離開，達到設(shè)定轉(zhuǎn)速后再離開，注意觀察注意觀察期間是否有聲音期間是否有聲音異常；發(fā)現(xiàn)聲音不正常時，要停機檢查，排除故障異常；發(fā)現(xiàn)聲音不正常時，要停機檢查，排除故障（如離心管不對稱、質(zhì)量不等、離心機位置不水平（如離心管不對稱、質(zhì)量不等、離心機位置不水平或螺帽松動等）后再工作?；蚵菝彼蓜拥龋┖笤俟ぷ鳌?) 5) 離心設(shè)備離心設(shè)備- -