溶出度試驗國內(nèi)外-講課

1、 何笑榮何笑榮內(nèi)容內(nèi)容 1.中國藥典與國外藥典溶出度測定法的比較2.近年來溶出度測定的進(jìn)展 溶出度試驗是一種模擬口服固體制劑在胃腸道中的崩解和溶出的體外試驗方法,它作為控制藥物制劑質(zhì)量與評價藥物體內(nèi)生物利用度的重要手段,已越來越為世界各國藥物研究者所重視。 一般認(rèn)為必須測定溶出度的藥物 難溶或難吸收的藥物; 治療量與中毒量接近的藥物; 要求緩釋、控釋或長效的藥物; 用于治療嚴(yán)重疾病的藥物; 急救、搶救用藥物。 隨著生物藥劑學(xué)工作的開展, 近年研究證明,易溶性藥物也會因制劑配方和工藝不同而導(dǎo)致藥物的溶出度的差異,從而影響藥物生物利用度和療效。溶出度應(yīng)用范圍日趨廣泛,除在片劑應(yīng)用外,其他劑型也廣泛

2、應(yīng)用, 在原料藥、新藥的開發(fā)及藥物劑型改變。 6中國藥典中國藥典2005版版United States Pharmacopeia USP XXX (30)European Pharmacopoeia Ph. Eur. 5th Edition, Supplement 5.3British Pharmacopoeia BP 2007Japanese Pharmacopoeia JP XIV (14)一、國內(nèi)、外藥典溶出度測定方法7各國藥典溶出度測定收載的儀器方法各國藥典溶出度測定收載的儀器方法1. 轉(zhuǎn)籃法轉(zhuǎn)籃法Rotating Basket (ChP/USP/Ph.Eur./BP/JP)2. 漿法

3、漿法Paddle (ChP/USP/Ph.Eur./BP/JP)3. 往復(fù)筒法往復(fù)筒法Reciprocating Cylinder (USP/Ph.Eur.)4. 流室法流室法Through Cell (USP/Ph.Eur./BP/JP)5. 槳碟法槳碟法 Paddle Over Disk (USP/Ph.Eur.)6. 旋轉(zhuǎn)筒法旋轉(zhuǎn)筒法Rotating Cylinder (USP/Ph.Eur.)7. Reciprocating HolderReciprocating Holder(USP)8. 中國藥典小杯法中國藥典小杯法（ChP）中、美、英、日四國藥典溶出度方法使用情況中、美、英、日四

4、國藥典溶出度方法使用情況Rotating Basket Paddle Through Cell cannikinUSP2303973/BP41852/JP5460/ChP161146/33溶出介質(zhì)溶出介質(zhì)USP溶出介質(zhì)包括:稀鹽酸、緩沖溶液、人工胃液或腸液、水。不建議使用有機(jī)溶媒，除非進(jìn)行詳細(xì)論證。體積一般500 1000mL,常用900mL,最大可至2-4L 。BP溶出介質(zhì)與USP相似。對一些水溶性差的藥物，加入適當(dāng)表面活性劑，如SDS等。JP溶出介質(zhì)常用pH1.2的稀鹽酸與pH6.8的磷酸鹽緩沖液。日本國家藥品審評部門編制參比目錄需四種溶出介質(zhì)（ pH1.2的溶液， pH4.8醋酸鹽緩沖液

5、與pH6.8 磷酸鹽緩沖液和水）。ChP未對溶出介質(zhì)種類作特別要求，多參照外國藥典。轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)速USP速釋制劑轉(zhuǎn)籃轉(zhuǎn)速100r/min。槳為50 r/ min 或75 r/ min ,延長釋放制劑如用槳法可達(dá)100 r/ min ,過快或過慢的轉(zhuǎn)速(25 r/ min 或150 r/ min) 則需要進(jìn)行全面的方法學(xué)驗證或體內(nèi)釋放試驗。BP規(guī)定籃法的轉(zhuǎn)速最適為100 r/min ,槳法的轉(zhuǎn)速最適為50 r/ min ,這與美國和日本藥典相同。槳法的轉(zhuǎn)速最大不超過100 r/ min ,籃法的轉(zhuǎn)速最大不超過150 r/ min。JP未有轉(zhuǎn)速的相關(guān)規(guī)定 參比目錄提出溶出度試驗應(yīng)盡量選取弱條件(如槳法、

6、轉(zhuǎn)速50 r/ min) 進(jìn)行制劑處方篩選或兩制劑之間的對比試驗,而不應(yīng)選取強(qiáng)參數(shù)(如槳法、轉(zhuǎn)速100 r/min) 。ChP 未有特別說明,多小于或等于100 r/ min。藥典和文獻(xiàn)報道中有少數(shù)幾個品種藥物轉(zhuǎn)速過快,達(dá)到了150 r/ min 。中、美、英、日藥典轉(zhuǎn)速的選擇情況測定方法測定方法1.UV法（日本、英國和中國藥典仍然多用UV 法,約占70 %）2.HPLC法（美國藥典HPLC 法,約占40 %）自身對照法測定溶出度（取樣通常10 片或粒 混勻,稱取適量來替代對照品）1）中藥制劑,由于缺少明確的標(biāo)示量,可采用此法測定。2）部分抗生素類藥物。評判方法：評判方法： 美國與日本藥典對普

7、通片劑的溶出度評判方法相同,最多可以采用3 次:取供試品6 片(個) ,每片(個) 溶出量按標(biāo)示量計算,均應(yīng)不低于規(guī)定限度Q+ 5 %。 若不符合,另取6 片(個) 測試,初復(fù)試的12片(個) 中應(yīng)無溶出量低于Q - 15 %者,且其平均溶出量應(yīng)不低于規(guī)定限度； 若不符合,則再另取12 片(個) 測試,初復(fù)試的24 片(個) 中應(yīng)無溶出量低于Q- 25 %者,且低于Q - 15 %者不多于2 片(個) ,其平均溶出量應(yīng)不低于規(guī)定限度Q。 中國藥典對普通片劑的溶出度評判方法,最多可采用2 次:取供試品6 片(個) ,每片(個) 的溶出量按標(biāo)示含量計算,均應(yīng)不低于規(guī)定限度Q ,如6 片(個) 中僅

8、有1片(個) 低于規(guī)定限度,但不低于Q - 10 % ,且其平均溶出度不低于規(guī)定限度時,仍可判為符合規(guī)定。 如6 片(個) 中有1 片(個) 低于Q - 10 % ,應(yīng)另取6 片(個) 復(fù)試,初復(fù)試的12 片(個) 中僅有2 片(個) 低于Q - 10 % ,且其平均溶出度不低于規(guī)定限度時,亦可判為符合規(guī)定。供試品的取用量如為2 片(個)或2 片(個) 以上時,計算每片(個) 的平均溶出量,均不得低于規(guī)定限度(Q) ,不再復(fù)試。例1卡馬西平片:中國藥典（2005 年版二部）規(guī)定為：槳法、150 r/min，以0.1mol/L鹽酸1000ml 為溶出介質(zhì)，60 min，限度為65%。日本橙皮書中

9、規(guī)定：槳法、75r/min、在以上四種溶出介質(zhì)中分別試驗，體積均為900ml，在5 min和30 min時分別取樣測定，限度要求分別為不得過60%和不得少于70%。例2 辛伐他汀片:國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-066)-2003Z 中擬定：以0.01mol/L NaH2PO3溶液（用HCl或NaOH液調(diào)pH 值為4.5）-正丙醇(2:1)900ml 為溶出介質(zhì)、槳法、50 r/min、30 min限度為80%； 美國藥典擬定為：以含0.5%十二烷基硫酸鈉的0.01mol/L NaH2PO3溶液（用50% NaOH溶液調(diào)pH 值為7.0）900ml 為溶出介質(zhì)、槳法、50 r/min、30 min

10、限度為80%。 日本企業(yè)（小林制藥株氏會社）內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)同美國藥典，且還增加了另外三個溶出介質(zhì)，且均要求要有一定的溶出量。三、近年來溶出度測定的進(jìn)展1.日本于1998 年推出的“藥品品質(zhì)再評價工程” 主要目的是保證口服固體制劑對于不同患者均能具有較高的生物利用度; 使同一制劑的不同產(chǎn)品均能具有相同的生物等效性。 采用的手段是“在嚴(yán)格的溶出度試驗條件下，在各種介質(zhì)中均具有較高的、一定的溶出曲線”來提高體內(nèi)外相關(guān)性,從而推動對藥品對制劑工藝的研究。依據(jù) 人體內(nèi)對藥物的吸收部位主要是消化道。體內(nèi)環(huán)境正常者或體質(zhì)強(qiáng)壯者，胃腸道內(nèi)存在有正常量和正常pH 值的胃酸和腸液；體內(nèi)環(huán)境非正常者或體質(zhì)虛弱者，胃酸和腸

11、液的量及pH 值會各種各樣。據(jù)文獻(xiàn)報道，隨年齡的增長，胃酸缺乏人群的比例會逐漸增多，50 歲人群中有約50%，60、70 歲人群中則有近70%，因此，人體內(nèi)環(huán)境各異，不能一概而論。同一制劑在不同患者體內(nèi)溶出度與生物利用度同一制劑在不同患者體內(nèi)溶出度與生物利用度的相關(guān)性的相關(guān)性兩制劑在不同轉(zhuǎn)速下的溶出曲線與年輕人和老年人的體內(nèi)相關(guān)性 優(yōu)質(zhì)藥品表現(xiàn)為：患有該疾病的任何人群服用都會有一定的療效和作用，即對任何人群均有較高的生物利用度； 劣質(zhì)藥品，可能只會對一部分人群有效（如體內(nèi)環(huán)境正常者），而對另一部分病人療效甚微（如胃酸缺乏者、年老體弱者），即生物利用度隨人體的差異而變化。 日本在進(jìn)行藥品質(zhì)量再評

12、價中擬定以下四種基本溶出介質(zhì)來涵蓋消化道內(nèi)的體液，且要求在以下四種溶出介質(zhì)中均應(yīng)有“一定弧度”的溶出曲線，以便能保證該藥品用于任何患者時，均有一定的療效。(1) pH = 1.2 溶液（取氯化鈉2.0g，加水適量使溶解，加HCl7ml，再加水稀釋至1000ml，即得）。Chp通常采用的0.1mol/L HCl液。(2) pH = 4.0 醋酸鹽緩沖液（0.05mol/L 醋酸-0.05mol/L 醋酸鈉16.4:3.6；且若參比制劑在6 h內(nèi)仍未能達(dá)到85%以上的溶出，則可追加其他pH 值的緩沖液）。該介質(zhì)的離子濃度較我國藥典附錄中記載得低，且在該介質(zhì)里的溶出度試驗研究，我國目前還進(jìn)行得比較少

13、。(3) pH = 6.8 磷酸鹽緩沖液。(取磷酸二氫鉀3.4g 和無水磷酸氫二鈉3.55g，加水適量使溶解后，定容至1000ml，再稀釋一倍，即得。離子濃度較Chp附錄中記載的低）。(4) 水 日本將該思路引伸至仿制藥的質(zhì)量評價日本將該思路引伸至仿制藥的質(zhì)量評價, 要求要求仿制藥必須達(dá)到以下仿制藥必須達(dá)到以下3 項要求項要求:(1) 生產(chǎn)規(guī)模不少于生產(chǎn)規(guī)模不少于10 萬單位、個別昂貴品萬單位、個別昂貴品種可適當(dāng)降低生產(chǎn)規(guī)模。種可適當(dāng)降低生產(chǎn)規(guī)模。(2) 在至少在至少4 種種p H 值溶出介質(zhì)中與原研制劑值溶出介質(zhì)中與原研制劑的溶出曲線進(jìn)行比較的溶出曲線進(jìn)行比較, 均應(yīng)一致、亦均應(yīng)一致、亦f2

14、 因子大于因子大于50 ; 且溶出度試驗條件應(yīng)盡可能選用嚴(yán)格的參數(shù)。且溶出度試驗條件應(yīng)盡可能選用嚴(yán)格的參數(shù)。(3) 產(chǎn)品上市后的市場抽查、處方在一定范圍產(chǎn)品上市后的市場抽查、處方在一定范圍內(nèi)的變更、生產(chǎn)產(chǎn)地的變更等內(nèi)的變更、生產(chǎn)產(chǎn)地的變更等, 均采用溶出曲線的一致均采用溶出曲線的一致性來評價。性來評價。2.美國藥典所收載的溶出度標(biāo)準(zhǔn)在世界范圍內(nèi)有很大影響,在化學(xué)藥方面已發(fā)展得較為完善, 溶出度檢測有很多值得我們借鑒。 美國美國FDA 藥品審評中心的仿制藥辦公室藥品審評中心的仿制藥辦公室屬下的生物等效部于屬下的生物等效部于2004 年年1 月起月起, 推出了采推出了采用溶出曲用溶出曲線來評價藥品

15、內(nèi)在質(zhì)量, 即延伸至仿制藥與原研藥是否生物等效的情況; 其中詳細(xì)羅列了溶出度試驗各參數(shù)以及取樣時間點, 并規(guī)定采用f2 因子對溶出曲線的一致性進(jìn)行評估(f2 因子需大于50) ; 在FDA 和WHO 都有關(guān)于可免除進(jìn)行人體生物等效性試驗的條件規(guī)定, 其思路基本相同, 主要基于藥物分子的生物藥劑學(xué)性質(zhì)分類，或處方比例相似的多規(guī)格產(chǎn)品,都需進(jìn)行制劑的溶出曲線相似性比較。按BCS藥物的分類：Class 1: High Solubility High Permeability Class 2: Low Solubility High Permeability Class 3: High Solubil

16、ity Low Permeability Class 4: Low Solubility Low Permeability Dissolution Testing in the 21st Century: USP PerspectiveWHO EXPANDS APPLICATION OF BCS BCS Class 1: HS/HPRapid/Very Rapid dissolution (VRD) in pH 1.2, 4.5 and 6.8 BCS Class 2: LS/HP/Weak AcidsRapid dissolution in pH 6.8 and similar dissol

17、ution profile in pH 1.2, 4.5 and 6.8AAPS Hot TopicRole of Dissolution Test in the 21st Century Nov 1, 2006FDA BCS Guidance Criteria: Class I Only Dissolution Testing CriticalRapidly dissolving: 85% or greater by USP I at 100 rpm or USP II at 50 rpm in 900 ml in pH 1.2, 4.5 and 6.8 For a waiver of BE

18、, T and R products should exhibit similar dissolution profile (f2 50)AAPS Hot TopicRole of Dissolution Test in the 21st CenturyComparative dissolution testingSimilarity factor f2n = number of time pointsR(t) = mean % API dissolved of reference product at time point xT(t) = mean % API dissolved of test product at time point xMinimum of 3 time points (zero excluded) 12 units (each in own dissolution vessel) for each product (for “official” purposes)Only one measurement should be considered after both products have reached 85 % dissolutionRSD at higher time points 10%我國的溶出度現(xiàn)狀