仔豬副傷寒活疫苗ppt課件

1、仔豬副傷寒活疫苗仔豬副傷寒活疫苗C500株株消費(fèi)操作細(xì)那么消費(fèi)操作細(xì)那么2019年11月 本品系運(yùn)用免疫原性良好的豬霍亂沙門氏菌弱毒株，接種適宜培育基培育，收獲培育物參與適當(dāng)穩(wěn)定劑，經(jīng)真空冷凍枯燥制成。本品用于預(yù)防仔豬副傷寒活疫苗。 1、菌種 1.1疫苗消費(fèi)用菌種為豬霍亂沙門氏菌C500弱毒株，原種購于中國獸藥檢查所，經(jīng)擴(kuò)繁后由質(zhì)檢部鑒定、保管、供應(yīng)。 1.2菌種規(guī)范 1.2.1 C500弱毒株應(yīng)符合以下規(guī)范 1.2.1.1 形狀和生化特性 本菌為革蘭氏陰性小桿菌，生化特性應(yīng)符合細(xì)菌分類學(xué)中本菌的特性。 1.2.1.2 培育特性 在普通瓊脂平板上，37培育18-22小時(shí)，菌落為圓形、邊緣整齊、

2、突起、半透明、略潮濕的光滑型。 1.2.1.3 血清學(xué)特性 普通瓊脂新穎培育物用玻片凝集檢查法，對(duì)沙門氏菌屬O7因子血清出現(xiàn)凝集反響。 1.2.1.4 特異性 在含1%的醋酸鉈的普通肉湯中呈均勻渾濁生長，用新穎普通瓊脂培育物與0.2%吖啶黃溶液做玻片凝集實(shí)驗(yàn)應(yīng)不出現(xiàn)凝集反響。 1.2.1.5 平安性 用pH7.4-7.6的普通肉湯或蛋白胨水，將培育24-48小時(shí)的普通瓊脂斜面培育物洗下并作活菌計(jì)數(shù)，注射以下動(dòng)物應(yīng)符合規(guī)范。 小白鼠 18-22g30-35日齡的小白鼠10只，各皮下注射0.2ml，含活菌數(shù)1億，察看21日，至少應(yīng)存活9只。 家兔 體重1.5-2.0kg的家兔5只，各皮下注射1ml

3、，含活菌數(shù)100億，察看21日應(yīng)存活。 仔豬 用體重15kg以上的安康易感斷奶仔豬4頭，各靜脈注射1ml，含活菌數(shù)30億，察看1個(gè)月應(yīng)存活。 1.3 凍干菌種2-8保管期為10年。 2、疫苗制造及半廢品檢驗(yàn) 2.1 消費(fèi)用菌種的制備 2.1.1 一級(jí)種子繁衍和鑒定 凍干種子用普通肉湯稀釋或經(jīng)普通肉湯后，接種普通瓊脂平板，37培育18-20小時(shí)，察看菌落形狀，菌落為圓形、邊緣整齊、突起、半透明、略潮濕的光滑型。 選取中等偏大的菌落5-10個(gè)，混合后接種于普通瓊脂斜面假設(shè)干只，37培育24小時(shí)，經(jīng)純粹檢驗(yàn)合格，并用0.2%吖啶黃溶液做玻片凝集實(shí)驗(yàn)應(yīng)合格，作為一級(jí)種子。在2-8保管期不超越1個(gè)月，在

4、此期間可以移植1-2次，在培育基上繼代不超越5代。 2.1.2 二級(jí)種子繁衍 取一級(jí)種子接種于普通瓊脂或普通肉湯，37培育24小時(shí)，經(jīng)純粹檢驗(yàn)合格后，即可作為消費(fèi)種子，在2-8保管期不超越2日。 2.2 制苗用培育基制備 2.2.1 資料 牛肉 要求應(yīng)采購新穎的精牛肉，3-5歲，前后腿、胸部，盡量少含脂肪、肌腱、筋膜等。 魚蛋白胨 1.5% 胰蛋白胨 0.5% 氯化鈉 0.5% 氫氧化鈉 水 2.2.2制備方法 將新穎的精牛肉去掉脂肪、筋膜等絞碎，純化水低溫浸泡24小時(shí)，100煮沸2小時(shí)，補(bǔ)足失去的水分，冷卻靜止沉淀24小時(shí)，抽取上清液，參與魚蛋白胨、胰蛋白胨、氯化鈉溶化，用氫氧化鈉溶液調(diào)整p

5、H值至7.8，煮沸20分鐘，降溫靜止沉淀。 3.1條件預(yù)備 3.1.1 根據(jù)菌液制備所需物品及設(shè)備條件，進(jìn)展全面預(yù)備。 3.1.2 按運(yùn)用時(shí)間，提早做好對(duì)發(fā)酵罐空消任務(wù)，包括罐體、空氣過濾系統(tǒng)、各個(gè)進(jìn)出料口，確保滅菌無死角。將預(yù)備好的各種物品提早移入干凈任務(wù)間待用。 3.1.3在任務(wù)開場(chǎng)前3040min，按凈化級(jí)別要求調(diào)整送風(fēng)量，到達(dá)干凈級(jí)別要求。 3.1.4提早一天對(duì)發(fā)酵罐進(jìn)展全面滅菌，并堅(jiān)持發(fā)酵罐正壓。 3.2 進(jìn)料及培育基滅菌進(jìn)料及培育基滅菌 將配制好的培育基經(jīng)過管道打入發(fā)酵將配制好的培育基經(jīng)過管道打入發(fā)酵罐，參與消泡劑豬油，然后對(duì)進(jìn)罐，參與消泡劑豬油，然后對(duì)進(jìn)料管道進(jìn)展清洗、滅菌，封鎖

6、進(jìn)料閥料管道進(jìn)展清洗、滅菌，封鎖進(jìn)料閥門，對(duì)培育基及一切的進(jìn)出口、空氣門，對(duì)培育基及一切的進(jìn)出口、空氣過濾系統(tǒng)進(jìn)展滅菌，當(dāng)溫度到達(dá)過濾系統(tǒng)進(jìn)展滅菌，當(dāng)溫度到達(dá)90和和100時(shí)，分別經(jīng)上面空氣進(jìn)管和下時(shí)，分別經(jīng)上面空氣進(jìn)管和下面放料口向罐內(nèi)通入蒸汽面放料口向罐內(nèi)通入蒸汽1分鐘左右，分鐘左右，罐內(nèi)罐內(nèi)116堅(jiān)持堅(jiān)持40分鐘，其他位置分鐘，其他位置121堅(jiān)持堅(jiān)持40分鐘。分鐘。 滅菌終了后馬上夾層通冷水進(jìn)展降溫并及時(shí)補(bǔ)充無菌空氣堅(jiān)持罐內(nèi)正壓。當(dāng)溫度降至40時(shí)，封鎖冷水管道停頓降溫，通無菌空氣堅(jiān)持罐內(nèi)正壓，翻開自動(dòng)控溫系統(tǒng)的閥門和開關(guān)，溫度控制在37。 3.3 接種 在火焰維護(hù)下，銜接種子瓶和發(fā)酵罐接

7、種口，翻開發(fā)酵罐出氣閥關(guān)小發(fā)酵罐進(jìn)氣閥使罐內(nèi)壓力接近于0，確認(rèn)無誤后翻開接種閥門，利用正壓空氣將二級(jí)種子按1%-2%的接種量接種于普通肉湯中，然后按2.5%參與40%滅菌葡萄糖溶液。 3.4 發(fā)酵培育發(fā)酵培育 接種后先小氣量通入無菌空氣接種后先小氣量通入無菌空氣2h，然，然后逐漸加大通氣量，每后逐漸加大通氣量，每2h添加通氣量，添加通氣量，培育后期每小時(shí)測(cè)定一次培育后期每小時(shí)測(cè)定一次pH，當(dāng)，當(dāng)pH上上升到升到7.8時(shí)參與時(shí)參與40%葡萄糖溶液葡萄糖溶液2000ml調(diào)整調(diào)整pH，培育，培育1820小時(shí)，當(dāng)菌數(shù)將小時(shí)，當(dāng)菌數(shù)將要到達(dá)最頂峰時(shí)停頓培育收獲菌液，要到達(dá)最頂峰時(shí)停頓培育收獲菌液，將菌液

8、放入滅菌大玻璃瓶中。將菌液放入滅菌大玻璃瓶中。 4、配苗 將事先預(yù)備好的凍干維護(hù)劑參與收苗瓶中搖勻，維護(hù)劑和菌液的比例是1:7，明膠和蔗糖的最終含量分別是1.3%和5%。 配苗完成后馬上進(jìn)展分裝和凍干。 本卷須知：本卷須知： 1、培育基是菌苗消費(fèi)的關(guān)鍵，一定要把握好原、培育基是菌苗消費(fèi)的關(guān)鍵，一定要把握好原資料的質(zhì)量。資料的質(zhì)量。 2、發(fā)酵罐滅菌時(shí)，應(yīng)留意千萬不要留有死角，、發(fā)酵罐滅菌時(shí)，應(yīng)留意千萬不要留有死角，通氣管道壓力應(yīng)高于罐內(nèi)壓力，不要呵斥培育基通氣管道壓力應(yīng)高于罐內(nèi)壓力，不要呵斥培育基倒吸入空氣過濾器。倒吸入空氣過濾器。 3、通氣培育時(shí)應(yīng)仔細(xì)仔細(xì)，、通氣培育時(shí)應(yīng)仔細(xì)仔細(xì)，10小時(shí)后每小時(shí)要小時(shí)后每小時(shí)要測(cè)定測(cè)定pH值，根據(jù)值，根據(jù)pH值的變化參與適量的葡萄糖值的變化參與適量的葡萄糖溶液。溶液。 4、留意