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1、淡紫擬青霉建議書淡紫擬青霉建議書The Investigation and Analysis Report of Paecilomyces lilacinus生物化工研究院2012年04月17日淡紫擬青霉項(xiàng)目建議書1、 線蟲病線蟲,又稱蠕蟲,一種低等無脊椎動(dòng)物。在數(shù)量和種類上居動(dòng)物界第二位,僅次于昆蟲。到1990年已發(fā)現(xiàn)植物寄生線蟲207個(gè)屬,4832個(gè)種。分布很廣,多數(shù)腐生于水和土壤中,少數(shù)寄生于人、動(dòng)物和植物。植物線蟲是農(nóng)作物、蔬菜、果樹、林木、花卉及藥材上重要的病原生物,危害僅次于真菌,超過細(xì)菌和病毒。我國(guó)較為嚴(yán)重的植物線蟲病有根結(jié)線蟲病、大豆胞囊線蟲病、小麥粒線蟲病、甘薯莖線蟲病、水稻

2、干尖線蟲病、粟線蟲病、松材線蟲病等。其除單獨(dú)危害植株以外,還可以與真菌和細(xì)菌共同侵染植株形成復(fù)合病害。1994年,全球因線蟲危害給糧食和纖維作物造成的損失約12,經(jīng)濟(jì)損失800億美元。我國(guó)農(nóng)作物種植業(yè)因線蟲病每年約損失600多億元。多年的實(shí)踐證明植物線蟲病難防難治,目前仍無特效的化學(xué)農(nóng)藥,故應(yīng)遵循“預(yù)防為主,綜合防治”的方針,主要方法有:利用線蟲病被動(dòng)傳播為主的特點(diǎn)嚴(yán)格執(zhí)行檢疫措施;利用植物線蟲在不適宜的寄主上難以繁殖的特點(diǎn),選用抗病、耐病品種;利用大多數(shù)植物線蟲有在土壤中的生活史的特點(diǎn),用化學(xué)藥劑預(yù)處理土壤;進(jìn)行汰選和種苗的熱處理;通過秋季曬土等耕作措施破壞植物線蟲存活的適宜條件,以及利用生

3、物防治等。根據(jù)已有的報(bào)道,生防中使用較多的是生防真菌,最有效的是淡紫擬青霉。2、淡紫擬青霉淡紫擬青霉(Paecilomyces lilacinus)屬半知菌綱、絲孢菌目、絲孢菌科、擬青霉屬。已報(bào)道的有近50種,常見的有淡紫擬青霉、玫煙色擬青霉、宛氏擬青霉等。1979年首次報(bào)道淡紫擬青霉對(duì)根結(jié)線蟲的寄生作用。此后,有60多個(gè)國(guó)家進(jìn)行了研究。其具有功效高、寄主廣、易培養(yǎng)等優(yōu)點(diǎn),在控制植物線蟲病方面功效卓著?!?】其作用機(jī)理是與線蟲卵囊接觸后,在粘性基質(zhì)中其菌絲包圍整個(gè)卵,菌絲末端變粗,由外源性代謝物和其幾丁質(zhì)酶的作用使卵殼表層破裂,隨后其侵入并取而代之。同時(shí)也能分泌毒素對(duì)線蟲起毒殺作用。3、應(yīng)用與

4、效果【2,3】對(duì)線蟲:淡紫擬青霉是根結(jié)線蟲與胞囊線蟲卵的有效寄生菌,對(duì)根結(jié)線蟲的卵寄生率達(dá)60%70%,并具有明顯的增產(chǎn)效果。對(duì)其他多種線蟲也都有防治效能。對(duì)昆蟲:淡紫擬青霉可寄生半翅目的荔枝蝽蟓、稻黑蝽;同翅目的葉蟬、褐飛虱;等翅目的白蟻;鞘翅目的甘薯象鼻蟲以及鱗翅目的茶蠶、燈蛾等。對(duì)植物病原菌:在玉米小斑病、小麥赤霉病、黃瓜炭疽病菌、棉花枯萎病和水稻惡苗病上對(duì)致病菌均有拮抗作用。淡紫擬青霉次生代謝物也具有一定的生理功效:在培養(yǎng)過程中,特別是在特殊培養(yǎng)基與深層發(fā)酵中,能產(chǎn)生類似吲哚乙酸產(chǎn)物,它最顯著的生理功效是低濃度時(shí)促進(jìn)植物根系與植株的生長(zhǎng),同時(shí)對(duì)種子的萌發(fā)與生長(zhǎng)也有促進(jìn)作用。此外其還能產(chǎn)

5、生多種功能酶并具有一定農(nóng)藥降解效應(yīng)。4、市場(chǎng)現(xiàn)狀4.1 生產(chǎn)廠家國(guó)際上最早產(chǎn)品出現(xiàn)在1983年,菲律賓、法國(guó)等國(guó)家也都有過產(chǎn)品。中國(guó)最早是在1993年申請(qǐng)的產(chǎn)品“大豆保根劑”。目前市場(chǎng)上該類產(chǎn)品眾多,作為農(nóng)藥和微生物肥料的都有。但是在國(guó)家注冊(cè)的很少,農(nóng)藥生產(chǎn)廠家有福建凱利和德強(qiáng)生物,微肥(臨時(shí)證)生產(chǎn)廠家有河南無道理、黑龍江三龍、濰坊華濱、德強(qiáng)生物。【4】國(guó)外在美國(guó)、歐盟均有產(chǎn)品,如美國(guó)產(chǎn)品淡紫擬青霉 菌株251(028826),但都沒有出口我國(guó)?!?】4.2 研發(fā)專家【5】國(guó)內(nèi)有多家單位進(jìn)行過較大規(guī)模的中試與生產(chǎn)并已制成相應(yīng)的菌劑,分別是:中科院微生物所及中國(guó)農(nóng)科院生防所劉杏忠:與黑龍江三龍

6、合作推出“利根生生物有機(jī)肥(大豆保根劑)”廈門大學(xué)潘滄桑:其稱福建凱立和德強(qiáng)生物均采用其技術(shù)。云南大學(xué)張克勤:其針對(duì)煙草開發(fā),經(jīng)過中試和試驗(yàn),最終放棄淡紫擬青霉選擇了厚孢輪枝菌,形成產(chǎn)品“線蟲必可”。華南熱帶作物研究院黃俊生:多位學(xué)生發(fā)表過關(guān)于淡紫擬青霉的研究論文,未見到過產(chǎn)品。4.3 價(jià)格由于廠家較多,價(jià)格也多樣,100億孢子/g產(chǎn)品(母藥)約50-100元/Kg。凱立生物6.6萬/噸(折合66元/Kg),德強(qiáng)生物10萬/噸(折合100元/Kg)。也有極便宜的,約1.6萬/噸,可靠性較低?!?】5. 生產(chǎn)工藝與引進(jìn)渠道5.1生長(zhǎng)條件【6】淡紫擬青霉8-38可以生長(zhǎng),15-30生長(zhǎng)良好,最佳生

7、長(zhǎng)和產(chǎn)孢溫度為25-30。完全黑暗條件下生長(zhǎng)最佳。生長(zhǎng)pH為2-12,最佳生長(zhǎng)pH為6-9,產(chǎn)孢最佳pH為4-6。5.2 培養(yǎng)基條件淡紫擬青霉?fàn)I養(yǎng)要求不高,碳水化合物、有機(jī)酸及低級(jí)醇類都可以作為其培養(yǎng)的碳源,其中以二糖為最佳;氮源可以是有機(jī)無機(jī)氮均可。它不僅能在多種常規(guī)培養(yǎng)基上生長(zhǎng),并能在多種自然基質(zhì)如農(nóng)副產(chǎn)品廢料、廢渣與植物葉片或植物浸提液中生長(zhǎng),而且可產(chǎn)生大量孢子,便于大規(guī)模工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)。5.3 發(fā)酵技術(shù)真菌生物農(nóng)藥的生產(chǎn)目前主要采用液固雙相發(fā)酵技術(shù)。發(fā)酵周期液體階段5天,固體階段7天。其它詳細(xì)發(fā)酵參數(shù)見附件【6,9】固體發(fā)酵設(shè)備視種類、大小、材質(zhì)等條件,價(jià)格從幾千到幾十萬不等。如采用不

8、銹鋼發(fā)酵盤最便宜,約幾萬元;發(fā)酵池造價(jià)十幾萬;固態(tài)發(fā)酵罐則需要幾十萬?!?0】5.4 使用方法福建凱立,蔬菜主要采用穴施,配以苗床消毒、條施;大豆采用拌種。德強(qiáng)生物,蔬菜采用穴施或溝施。5.5 產(chǎn)業(yè)化問題主要問題:殺滅率較化學(xué)藥劑低、起效時(shí)間較慢、藥效不夠穩(wěn)定、制劑存放時(shí)間較短的問題。產(chǎn)業(yè)化中需要注意其生產(chǎn)培養(yǎng)基要求極其簡(jiǎn)單,所以生產(chǎn)成本是制約其工業(yè)化的一個(gè)主要因素。5.6 產(chǎn)值估算及毛利率產(chǎn)值估算:由于發(fā)酵工藝采用雙向發(fā)酵,液態(tài)發(fā)酵僅作為種子使用,現(xiàn)有設(shè)備完全可以滿足此步驟要求,生產(chǎn)規(guī)模完全取決于固態(tài)發(fā)酵設(shè)備的建設(shè)規(guī)模。按照液體發(fā)酵規(guī)模5噸,液體菌種接種比例約16.5%計(jì)算,可供約24.3噸

9、固體發(fā)酵使用,獲得孢子粉約166Kg,得到產(chǎn)品約3.3噸(孢子與輔料比例1:20),實(shí)現(xiàn)產(chǎn)值約26.5萬。毛利率:由于固體發(fā)酵培養(yǎng)基所選的發(fā)酵原材料直接制約生產(chǎn)成本,而不同技術(shù)方提供的技術(shù)所選發(fā)酵原材料也差異較大,本公司能夠利用的發(fā)酵原材料價(jià)格也不同,故無法直接推算毛利率。6、引進(jìn)渠道在國(guó)內(nèi)較有背景和歷史的研究者有3個(gè),廈門大學(xué)的潘滄桑,中科院的劉杏忠,云南大學(xué)的張克勤。其他還有華南熱帶作物研究院,黃俊生;福建農(nóng)林大學(xué),張紹升等。其中廈門大學(xué)潘滄桑教授較權(quán)威,經(jīng)前期接觸,其表示:淡紫擬青霉項(xiàng)目技術(shù)成熟,最大做到5噸罐,生產(chǎn)成本很低。目前有農(nóng)藥號(hào)的兩家公司,凱立生物私下拿的他的技術(shù),目前做的不好

10、;德強(qiáng)生物是買的他的技術(shù),但是不遵守合同,故現(xiàn)在生產(chǎn)效果不好。7、結(jié)論與建議a) 市場(chǎng)定位:淡紫擬青霉作為治療危害極大的植物線蟲病的最有效生防產(chǎn)品極具潛力:其綠色安全,獲得歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家肯定,是當(dāng)前利潤(rùn)較高的有機(jī)農(nóng)業(yè)的線蟲防治的首選產(chǎn)品;在非有機(jī)領(lǐng)域,雖不如大劑量的化學(xué)農(nóng)藥起效快、殺滅率高,但是具有獨(dú)特的持效期長(zhǎng)等特點(diǎn),也受到市場(chǎng)肯定。且項(xiàng)目銷售渠道與農(nóng)化產(chǎn)業(yè)一致,節(jié)約市場(chǎng)拓展成本; b) 技術(shù)引進(jìn):由于已經(jīng)開發(fā)多年,固體發(fā)酵工藝簡(jiǎn)單,技術(shù)渠道多;c) 生產(chǎn)技術(shù):主要依靠發(fā)酵技術(shù),是本公司優(yōu)勢(shì)所在,消化吸收和試生產(chǎn)階段成本易控制;d) 主要問題:生產(chǎn)后期需要固態(tài)發(fā)酵設(shè)備,該設(shè)備是淡紫擬青霉、白

11、僵菌、綠僵菌等生物防治真菌的必須設(shè)備,且設(shè)備投資低、見效快。如配套該設(shè)備,將為農(nóng)化產(chǎn)業(yè)的產(chǎn)品線打開新的思路,并可充分發(fā)揮生物產(chǎn)業(yè)的技術(shù)和產(chǎn)能優(yōu)勢(shì),為提高利潤(rùn)打開突破口。根據(jù)2011年公司提出的“一體兩翼”策略,生物產(chǎn)業(yè)和農(nóng)化產(chǎn)業(yè)的一體化進(jìn)程仍有待加強(qiáng)。淡紫擬青霉項(xiàng)目具有明確的作用對(duì)象、合理的市場(chǎng)空間、持續(xù)的發(fā)展?jié)摿?。推行此產(chǎn)品可以充分利用生物產(chǎn)業(yè)生產(chǎn)資源優(yōu)勢(shì),結(jié)合農(nóng)化產(chǎn)業(yè)銷售渠道優(yōu)勢(shì),實(shí)現(xiàn)兩個(gè)產(chǎn)業(yè)的強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合。并一舉打開綠色農(nóng)業(yè)、有機(jī)食品這個(gè)新興市場(chǎng),開拓一條具有競(jìng)爭(zhēng)力的發(fā)展之路。同時(shí)可以為農(nóng)化產(chǎn)業(yè)增加有機(jī)農(nóng)業(yè)產(chǎn)品,實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品線的補(bǔ)全,有助于樹立全面、專業(yè)、綠色的農(nóng)化龍頭企業(yè)形象。針對(duì)唯一的固態(tài)發(fā)

12、酵設(shè)備問題,如購置則可以以低廉的成本為農(nóng)化產(chǎn)業(yè)開辟新的市場(chǎng)道路;如暫不購置,也可以作為技術(shù)儲(chǔ)備,為今后的綠色發(fā)展奠定基礎(chǔ)。附錄:【1】 淡紫擬青霉對(duì)根結(jié)線蟲的寄生作用是秘魯國(guó)際馬鈴薯研究中心的P.Jatala首先發(fā)現(xiàn)的,并在1979年首次報(bào)道。此后,有60多個(gè)國(guó)家的科學(xué)工作者對(duì)此菌進(jìn)行了研究。此菌廣泛分布于世界各地,具有功效高、寄主廣、易培養(yǎng)等優(yōu)點(diǎn),特別在控制植物病原線蟲方面功效卓著。半個(gè)多世紀(jì)以來,國(guó)內(nèi)外許多專家學(xué)者對(duì)此菌進(jìn)行了廣泛而深入的研究,在生物學(xué)、生態(tài)學(xué)、大量培養(yǎng)、控害效能與田間應(yīng)用等方面取得了一系列研究成果。淡紫擬青霉主要針對(duì)根結(jié)線蟲。根據(jù)估計(jì),全世界每年因線蟲危害給糧食和纖維作物

13、造成的損失大約為10%。我國(guó)農(nóng)作物種植業(yè)因線蟲病每年約損失600多億元。甜菜胞囊線蟲、馬鈴薯金線蟲,溫暖地區(qū)的根結(jié)線蟲等是世界上引起嚴(yán)重植物線蟲病害的主要線蟲種類之一。在我國(guó),東北和黃淮地區(qū)的大豆胞囊線蟲、甘薯莖線蟲、粟線蟲和水稻干尖線蟲一直造成生產(chǎn)上的嚴(yán)重?fù)p失。【2】淡紫擬青霉的作用對(duì)象對(duì)植物病原線蟲淡紫擬青霉是南方根結(jié)線蟲與白色胞囊線蟲卵的有效寄生菌,對(duì)南方根結(jié)線蟲的卵寄生率高達(dá)60%70%。對(duì)多種線蟲都有防治效能,其寄主有根結(jié)線蟲、胞囊線蟲、金色線蟲、異皮線蟲、甚至人畜腸道蛔蟲,是防治根結(jié)線蟲最有前途的生防制劑。淡紫擬青霉菌對(duì)根結(jié)線蟲的抑制機(jī)理是淡紫擬青霉與線蟲卵囊接觸后,在粘性基質(zhì)中,

14、生防菌菌絲包圍整個(gè)卵,菌絲末端變粗,由于外源性代謝物和真菌幾丁質(zhì)酶的活動(dòng)使卵殼表層破裂,隨后真菌侵入并取而代之。也能分泌毒素對(duì)線蟲起毒殺作用。對(duì)昆蟲據(jù)文獻(xiàn)資料,淡紫擬青霉可寄生半翅目的荔枝蝽蟓、稻黑蝽;同翅目的葉蟬、褐飛虱;等翅目的白蟻;鞘翅目的甘薯象鼻蟲以及鱗翅目的茶蠶、燈蛾等。對(duì)植物病原菌淡紫擬青霉36-1菌株對(duì)植物病原菌具有拮抗效能。在玉米小斑病、小麥赤霉病、黃瓜炭疽病菌、棉花枯萎病和水稻惡苗病上試驗(yàn),淡紫擬青霉菌株活菌體液對(duì)其菌絲生長(zhǎng)抑制率分別為80.22%、80.50%、77.71%、75.30%和61.36%;處理柑桔果面,青、綠霉擴(kuò)展抑制率為65.97%。批量處理柑桔,好果率為7

15、8.44%,比對(duì)照高54.44%?!?】淡紫擬青霉次生代謝物的生理功效促進(jìn)植物生長(zhǎng)在擬青霉的培養(yǎng)過程中,特別是在特殊培養(yǎng)基與深層發(fā)酵培養(yǎng)過程中,該菌能產(chǎn)生豐富的衍生物,其一是類似吲哚乙酸產(chǎn)物,它最顯著的生理功效是低濃度時(shí)促進(jìn)植物根系與植株的生長(zhǎng),因此在植物根系施菌不僅能明顯抑制線蟲侵染,而且能促進(jìn)植株?duì)I養(yǎng)器官的生長(zhǎng),同時(shí)對(duì)種子的萌發(fā)與生長(zhǎng)也有促進(jìn)作用。產(chǎn)生多種功能酶此菌能產(chǎn)生豐富的幾丁質(zhì)酶,幾丁質(zhì)酶對(duì)幾丁質(zhì)有降解作用,它能促進(jìn)線蟲卵的孵化,提高擬青霉菌對(duì)線蟲的寄生率,此外還能產(chǎn)生細(xì)胞裂解酶、葡聚糖酶與絲蛋白酶,Galvez-Mariscal研究表明:在高效菌株中蛋白酶和葡聚糖酶、淀粉酶活性高出

16、1.24.2倍和20120倍,這些酶促進(jìn)細(xì)胞分裂。降解效應(yīng)Somaseknar研究發(fā)現(xiàn),淡紫擬青霉能促進(jìn)難溶磷酸鹽的溶解,實(shí)驗(yàn)室研究證實(shí):擬青霉菌的增溶效果達(dá)到30%,其它線蟲拮抗菌達(dá)到20%40%。同類研究還表明,擬青霉還能促進(jìn)許多化學(xué)聚合物(如農(nóng)藥,制革廢水等)的分解,這證明淡紫擬青霉具有一定的環(huán)保效應(yīng)。防效 Lara et al.用淡紫擬青霉防治番茄根結(jié)線蟲病的結(jié)果表明,淡紫擬青霉可以寄生根結(jié)線蟲的卵,減少根結(jié)線蟲的蟲口密度和作物的根結(jié)數(shù)量,同時(shí)增加作物的產(chǎn)量。Benjamin Dube用淡紫擬青霉和穿刺巴氏桿菌(Pasteuria penetrans)混合施用來防治冬碗豆南方根結(jié)線蟲(

17、M. incognito),與對(duì)照相比,產(chǎn)量顯著增加。Zaki et al.通過盆栽試驗(yàn)確定田間施用淡紫擬青霉防治番茄根結(jié)線蟲病害的最適劑量,結(jié)果顯示,每kg土壤中混合4g菌劑較為適宜,處理的根結(jié)指數(shù)和2齡幼蟲數(shù)量分別下降了69%和86%,根結(jié)線蟲的卵囊有58%被侵染,66%的卵遭到破壞。我國(guó),吳家琴等通過盆栽和大田試驗(yàn)證明淡紫擬青霉對(duì)紅麻根結(jié)線蟲病有明顯控制作用。施用淡紫擬青霉制劑后,可顯著減輕紅麻根結(jié)線蟲病害,增產(chǎn)達(dá)11.9%。李芳等利用淡紫擬青霉防治煙草根結(jié)線蟲病試驗(yàn)及結(jié)果表明:該菌能有效地抑制煙草根結(jié)線蟲的發(fā)生并促進(jìn)植物的生長(zhǎng),病情指數(shù)下降43.6%,植株鮮重增加96.3%。劉杏忠等研

18、制的淡紫擬青霉菌劑在我國(guó)東北、黃淮等地區(qū)地進(jìn)行了大面積防治大豆胞囊線蟲試驗(yàn),防效一般在60%以上,增產(chǎn)效果明顯。【4】農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥注冊(cè)產(chǎn)品生產(chǎn)廠家登記證號(hào)總含量劑型有效起始有效截止福建凱立生物制品有限公司PD20096840200億活孢子/克母藥2009.09.212014.09.21福建凱立生物制品有限公司PD200968412億活孢子/克粉劑2009.09.212014.09.21德強(qiáng)生物股份有限公司PD20110980100億孢子/克母藥2011.09.152016.09.15德強(qiáng)生物股份有限公司PD201109515億活孢子/克顆粒劑2011.09.082016.09.08序號(hào)企業(yè)名稱產(chǎn)

19、品通用名產(chǎn)品商品名產(chǎn)品形態(tài)技術(shù)指標(biāo)(有效成分及含量)適用作物登記證號(hào)1河南無道理生物技術(shù)股份有限公司生物有機(jī)肥無道理生物有機(jī)肥料粉劑有效活菌數(shù)0.20億/g有機(jī)質(zhì)30.0%芹菜微生物肥(2010)臨字(1066)號(hào)2黑龍江農(nóng)墾三龍生物科技有限公司生物有機(jī)肥利根生生物有機(jī)肥顆粒有效活菌數(shù)0.20億/g有機(jī)質(zhì)25.0%大豆微生物肥(2010)臨字(1119)號(hào)3濰坊市華濱生物科技有限公司微生物菌劑DB微生物菌劑粉劑有效活菌數(shù)2.0億/g番茄微生物肥(2010)臨字(1237)號(hào)4德強(qiáng)生物股份有限公司微生物菌劑微生物菌劑液體有效活菌數(shù)2.0億/mL煙草番茄微生物肥(2011)臨字(1465)號(hào)濰坊市

20、華濱生物科技有限公司引進(jìn)世界微生物尖端技術(shù),以淡紫擬青霉為主18億/g(菌種歷史為:日本東京大學(xué)應(yīng)用微生物研究所,中國(guó)科學(xué)院菌種保藏中心編號(hào)為:CGMCC3.829),枯草芽孢桿菌和側(cè)孢芽孢桿菌2億/g,配以中藥提取物,經(jīng)特殊培養(yǎng)基和發(fā)酵技術(shù),于2009年底推出“克線靈淡紫擬青霉”產(chǎn)品。主要功效為防治線蟲和促進(jìn)植物生長(zhǎng)。經(jīng)過一年多的田間使用,收到了很好的效果?!?】專家介紹劉杏忠劉杏忠研制成以食線蟲真菌淡紫擬青霉為主,添加有機(jī)質(zhì)等多種組分的生防菌劑-大豆保根菌劑,在我國(guó)東北及黃淮海地區(qū)推廣示范累積達(dá)35萬畝,對(duì)大豆胞囊線蟲病防效達(dá)60%-70%。2011年9月8日,由我院農(nóng)畜產(chǎn)品綜合利用研究所

21、三龍生物科技有限公司生產(chǎn)的大豆孢囊線蟲生防菌劑-利根生生物有機(jī)肥(大豆保根菌劑)應(yīng)用技術(shù)現(xiàn)場(chǎng)交流會(huì)在黑河市遜克縣召開。會(huì)議由黑龍江省土肥站主辦,黑河市遜克縣農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心和哈爾濱彤洲農(nóng)資經(jīng)銷處協(xié)辦,黑龍江省農(nóng)墾科學(xué)院農(nóng)畜產(chǎn)品綜合利用研究所、植保所、黑龍江農(nóng)墾三龍生物科技有限公司做為技術(shù)依托單位和生產(chǎn)廠家參加了會(huì)議。潘滄桑潘教授表示“殺線1號(hào)”技術(shù)成熟,最大做到5噸罐,生產(chǎn)成本很低。菌株為淡紫擬青霉。目前有藥號(hào)的兩家公司,凱立生物制品有限公司(福建)也通過特殊渠道拿的他的技術(shù),目前做的不好,老板去了美國(guó);德強(qiáng)生物股份有限公司(哈爾濱)是買的他的技術(shù),但是不遵守合同,故現(xiàn)在生產(chǎn)效果不好。2001

22、年2月15日德強(qiáng)生物股份有限公司與廈門大學(xué)成立了廈強(qiáng)線蟲生防研究中心,完成淡紫擬青霉項(xiàng)目的中試、年產(chǎn)500噸5淡紫擬青霉顆粒劑的中試,取得了成功,很好地完成了研究?jī)?nèi)容,并在全國(guó)各地進(jìn)行了藥效試驗(yàn),取得了良好效果。張克勤我國(guó)在上世紀(jì)90年代初,由云南大學(xué)微生物發(fā)酵工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和中科院微生物所聯(lián)合云南煙草科學(xué)研究院農(nóng)業(yè)研究所開始了煙草根結(jié)線蟲生物防治的研究工作,經(jīng)過十多年的努力,從菌株篩選、劑型研制、生產(chǎn)技術(shù)、大田應(yīng)用及土壤生態(tài)等方面進(jìn)行大量研究。篩選出以厚孢輪枝菌(Pochonia chlamydospora)和淡紫擬青霉(Paecilomyces lilacinus)為生產(chǎn)菌株的生防菌劑兩種

23、,經(jīng)過80000余畝的大田應(yīng)用,最終厚孢輪枝菌效果較為突出,形成線蟲必克產(chǎn)品,該產(chǎn)品的成分是厚壁輪枝菌,生產(chǎn)廠家是云南陸良酶制劑有限責(zé)任公司。【6】生產(chǎn)技術(shù)生長(zhǎng)條件溫度、光照和pH是影響生長(zhǎng)發(fā)育的重要因子。淡紫擬青霉生長(zhǎng)溫度范圍很寬,從8到38都可以生長(zhǎng),在1530生長(zhǎng)良好,最佳生長(zhǎng)和產(chǎn)孢溫度為2530,6和40時(shí)停止生長(zhǎng),35時(shí)停止產(chǎn)孢。由于該菌是土壤習(xí)居菌,光照對(duì)其生長(zhǎng)和產(chǎn)孢有一定的抑制作用,所以在完全黑暗條件下生長(zhǎng)最佳,其次是黑暗和光亮交替,在光亮中也能生長(zhǎng)。pH在212均能生長(zhǎng),菌絲生長(zhǎng)最佳pH為6-9,產(chǎn)孢最佳pH為4-6,這樣的廣譜適宜溫度和pH范圍使其在農(nóng)業(yè)土壤中成為有競(jìng)爭(zhēng)力的生

24、物。培養(yǎng)基條件淡紫擬青霉?fàn)I養(yǎng)要求不高,碳水化合物、有機(jī)酸及低級(jí)醇類都可以作為其培養(yǎng)的碳源,其中以二糖為最佳;氮源可以是有機(jī)氮,也可以是NaNO3,NH4NO3等無機(jī)氮化合物。它不僅能在多種常規(guī)培養(yǎng)基上生長(zhǎng),并能在多種自然基質(zhì)如農(nóng)副產(chǎn)品廢料、廢渣與植物葉片或植物浸提液中生長(zhǎng),而且可以產(chǎn)生大量孢子,這就便于對(duì)其進(jìn)行大規(guī)模工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn),可以制成固體或液體菌劑,用于根施、拌種或噴施。雖然淡紫擬青霉等食線蟲菌物均可以在麥粒、大米、小米、馬鈴薯、綠豆及各種農(nóng)副產(chǎn)品如玉米渣、鼓皮,甚至樹葉等基質(zhì)上培養(yǎng),這方面的報(bào)道很多,但是為了能使生產(chǎn)出的菌劑有市場(chǎng)前景,各研究者都在努力嘗試用價(jià)格低廉的物質(zhì)來培養(yǎng)食線蟲菌

25、物,在選材方面都盡可能的利用當(dāng)?shù)匾撰@得的材料,比較有代表性的如Brand et al. ( 2004 )利用當(dāng)?shù)刎S富的咖啡豆殼、木薯根渣、脫脂豆、甘蔗渣作載體來培養(yǎng)淡紫擬青霉。發(fā)酵技術(shù)真菌生物農(nóng)藥的生產(chǎn)目前主要采用液固雙相發(fā)酵技術(shù)。這一技術(shù)體系中,液相發(fā)酵水平相對(duì)較高,固相發(fā)酵基質(zhì)包括了大米、麥粒等谷物及稻殼、谷糠、麥鼓等副產(chǎn)物甚至某些植物廢棄物如樹葉、種子及鋸末、菜園土、塘泥土等。但是傳統(tǒng)的固相發(fā)酵常存在發(fā)酵周期長(zhǎng)、產(chǎn)孢率低等缺點(diǎn)。因此,建立新型的固相發(fā)酵技術(shù)是真菌農(nóng)藥孢子生產(chǎn)的關(guān)鍵技術(shù)之一。在淡紫擬青霉的液體發(fā)酵方面,夏振遠(yuǎn)等(2002)研究了淡紫擬青霉IPC菌株的最適培養(yǎng)基復(fù)合配方,探明

26、了該菌株的液體深層發(fā)酵條件。李芳等(2005)研究表明搖床轉(zhuǎn)速不僅影響淡紫擬青霉菌絲生長(zhǎng)與孢子生成,而且影響淡紫擬青霉次生代謝物的毒力。孫漫紅和劉杏忠(2004)應(yīng)用多級(jí)液體發(fā)酵,液生孢子含量已達(dá)5×l08mL-1以上,菌絲干重在1.8%以上。雙相發(fā)酵流程質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)淡紫擬青霉PL89可濕性粉劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)福建農(nóng)林大學(xué),張紹升的專利2010.3轉(zhuǎn)讓給了漳州三炬生物科技有限公司,但是沒有農(nóng)藥登記。 孢子原粉及可濕性粉劑的含孢量 孢子原粉的含孢子量120億個(gè)·g-1,合格 可濕性粉劑的含孢子量20億個(gè)·g-1,合格 孢子萌發(fā)率 孢子原粉萌發(fā)率95.0%,合格 可濕性粉劑萌發(fā)率90.0%,合格 干燥減量的要求 孢子原粉的干燥減量(質(zhì)量分?jǐn)?shù))12.0%,合格 可濕性粉劑的干燥減量(質(zhì)量分?jǐn)?shù)) 5.0%,合格 潤(rùn)濕時(shí)間 可濕性粉劑的潤(rùn)濕時(shí)間12.0 min,合格 懸浮率 可濕性粉劑的懸浮率(質(zhì)量分?jǐn)?shù)) 70%,合格 真菌雜菌率 孢子原粉在10-8、10-7和10-6三個(gè)稀釋度內(nèi)不得檢出,可濕性粉劑在稀釋度10-6不得檢出。 細(xì)度 通過74 m篩質(zhì)量分?jǐn)?shù)96.0%,合格 毒力測(cè)定 暫無另外文獻(xiàn)中提到淡紫擬青霉的毒性淡紫擬青霉制劑對(duì)哺乳動(dòng)物、鳥類、魚類和家蠶低毒。雌雄大鼠經(jīng)口LD50>10000 mg/kg;雌雄大鼠涂皮處

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