廈門大學(xué)附屬實(shí)驗(yàn)中學(xué)2021-2021學(xué)年生物必修三公開課課件：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù) (共40張PPT)

1、12021/4/1922021/4/1932021/4/1942021/4/1952021/4/19一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1 1、概念：、概念： 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物有機(jī)體中取出相關(guān)的組動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物有機(jī)體中取出相關(guān)的組織織, ,將它分散成將它分散成單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞, ,然后然后, ,放在放在適宜的培養(yǎng)基適宜的培養(yǎng)基中中, ,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖. .怎樣進(jìn)行動(dòng)物怎樣進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)？細(xì)胞培養(yǎng)？什么是動(dòng)物細(xì)什么是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)？胞培養(yǎng)？該技術(shù)實(shí)該技術(shù)實(shí)施的原理施的原理是什么？是什么？細(xì)胞增殖原理細(xì)胞增殖原理62021/4/19 注意關(guān)鍵詞: 細(xì)胞貼壁細(xì)胞貼

2、壁 接觸抑制接觸抑制 原代培養(yǎng)原代培養(yǎng) 傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)閱讀課文閱讀課文44-4644-46面相關(guān)內(nèi)容面相關(guān)內(nèi)容72021/4/19一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)2 2、過程：、過程：取什么樣的材料好？取什么樣的材料好？幼齡幼齡與老齡動(dòng)物的組織細(xì)胞比與老齡動(dòng)物的組織細(xì)胞比較，分化程度低的與分化較，分化程度低的與分化程度高的組織細(xì)胞比較，程度高的組織細(xì)胞比較，哪一種更易于培養(yǎng)？哪一種更易于培養(yǎng)？為什么動(dòng)物細(xì)為什么動(dòng)物細(xì)胞要分散成單胞要分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)? ?用胰蛋白酶分散細(xì)用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說明細(xì)胞間的胞，說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成物質(zhì)主要是什么成分？用胃蛋白酶行分？用胃蛋白酶行

3、嗎？嗎？ 什么叫原什么叫原代培養(yǎng)？代培養(yǎng)？什么是傳什么是傳代培養(yǎng)？代培養(yǎng)？用概念圖的方用概念圖的方式完成細(xì)胞培式完成細(xì)胞培養(yǎng)的流程圖養(yǎng)的流程圖動(dòng)物細(xì)胞培動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中會(huì)出現(xiàn)養(yǎng)中會(huì)出現(xiàn)什么特點(diǎn)？什么特點(diǎn)？82021/4/1992021/4/19 19571957年，科學(xué)家采用胰蛋白酶消化處年，科學(xué)家采用胰蛋白酶消化處理和應(yīng)用液體培養(yǎng)基的方法，獲得了理和應(yīng)用液體培養(yǎng)基的方法，獲得了單層單層細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)。單層培養(yǎng)法的出現(xiàn)，對(duì)細(xì)胞培。單層培養(yǎng)法的出現(xiàn)，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展起了很大的推動(dòng)作用。此后單層養(yǎng)的發(fā)展起了很大的推動(dòng)作用。此后單層培養(yǎng)成為細(xì)胞培養(yǎng)普遍應(yīng)用的技術(shù)。培養(yǎng)成為細(xì)胞培養(yǎng)普遍應(yīng)用的技術(shù)。10

4、2021/4/19一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)112021/4/19一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)4 4、應(yīng)用：應(yīng)用：閱讀課本閱讀課本P4647P4647122021/4/19應(yīng)用一：應(yīng)用一：132021/4/19142021/4/19152021/4/19應(yīng)用二：應(yīng)用二：162021/4/19人工關(guān)節(jié)人工關(guān)節(jié)軟骨再生軟骨再生1.1.第一次手第一次手術(shù)術(shù): : 從從病人病人關(guān)節(jié)軟骨關(guān)節(jié)軟骨中未受力中未受力的部分，取出一片的部分，取出一片約為約為葡萄葡萄干干大小的健康大小的健康軟軟骨骨組織組織。2.2.分分離軟離軟骨骨細(xì)胞并經(jīng)細(xì)胞并經(jīng)三星期的三星期的體體外外 培培養(yǎng)養(yǎng)，使，使細(xì)胞數(shù)細(xì)胞數(shù)增

5、加增加約約10102020倍。倍。3.3.第二次手第二次手術(shù)術(shù): : 清理清理軟軟骨受骨受損損的部分，的部分，從從下方骨下方骨頭頭部位取出一片部位取出一片約與傷約與傷口口大大小相同小相同的骨膜，的骨膜，縫縫在在傷傷口上方，再口上方，再將軟將軟骨骨細(xì)胞細(xì)胞注注射到骨膜下方。射到骨膜下方。應(yīng)用三：應(yīng)用三：結(jié)果結(jié)果: : 經(jīng)過復(fù)健經(jīng)過復(fù)健一年一年后后即可即可恢復(fù)恢復(fù)正常的生活。正常的生活。172021/4/19182021/4/19192021/4/1919971997年，美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭名叫年，美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭名叫盧辛達(dá)（盧辛達(dá)（LucindaLucinda）的奶牛

6、，年產(chǎn)奶量為）的奶牛，年產(chǎn)奶量為30.8 t30.8 t，創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高新紀(jì)錄。目前世界各國(guó)創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高新紀(jì)錄。目前世界各國(guó)高產(chǎn)奶牛場(chǎng)奶牛，年平均產(chǎn)奶量一般為十幾噸，而高產(chǎn)奶牛場(chǎng)奶牛，年平均產(chǎn)奶量一般為十幾噸，而我國(guó)奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為我國(guó)奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為3 34 t4 t。能不能用。能不能用高產(chǎn)奶牛的一個(gè)體細(xì)胞，培養(yǎng)出一頭高產(chǎn)奶牛呢？高產(chǎn)奶牛的一個(gè)體細(xì)胞，培養(yǎng)出一頭高產(chǎn)奶牛呢？ 高度分化的植物組織仍保持著全能性，動(dòng)物細(xì)高度分化的植物組織仍保持著全能性，動(dòng)物細(xì)胞的全能性會(huì)隨著動(dòng)物細(xì)胞分化程度的提高而逐漸胞的全能性會(huì)隨著動(dòng)物細(xì)胞分化程度的提高而逐漸變?nèi)?。目前還變

7、弱。目前還不能不能用類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得用類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得完整動(dòng)物個(gè)體，用動(dòng)物體細(xì)胞克隆的動(dòng)物，實(shí)際是完整動(dòng)物個(gè)體，用動(dòng)物體細(xì)胞克隆的動(dòng)物，實(shí)際是通過通過核移植核移植來實(shí)現(xiàn)的。來實(shí)現(xiàn)的。202021/4/19二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1 1、概念：、概念： 動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核, ,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中. .使其重使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎, ,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體育為動(dòng)物個(gè)體. . 用

8、核移植的方法得到的動(dòng)物稱為用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物克隆動(dòng)物核移植核移植胚胎細(xì)胞核移植胚胎細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性容易細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性容易細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)全能性不容易細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)全能性不容易212021/4/19閱讀課本閱讀課本P48P48的流程圖的流程圖MIIMII期的卵母細(xì)胞做受體細(xì)胞期的卵母細(xì)胞做受體細(xì)胞 ，卵細(xì)胞，卵細(xì)胞體積大體積大，易于操作易于操作，含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條件。和營(yíng)養(yǎng)條件。將體細(xì)胞核移植入去核卵細(xì)胞內(nèi)，將體細(xì)胞核移植入去核卵細(xì)胞內(nèi)，既保證了重組細(xì)胞的完整性，

9、又能刺激體細(xì)胞既保證了重組細(xì)胞的完整性，又能刺激體細(xì)胞核表達(dá)其全能性，發(fā)展成為一個(gè)新的個(gè)體。核表達(dá)其全能性，發(fā)展成為一個(gè)新的個(gè)體。 在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前，為什么必體卵母細(xì)胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核？須先去掉受體卵母細(xì)胞的核？ 為使核移植的胚胎或動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來自有為使核移植的胚胎或動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來自有重要利用價(jià)值的動(dòng)物提供的體細(xì)胞，在供體細(xì)胞重要利用價(jià)值的動(dòng)物提供的體細(xì)胞，在供體細(xì)胞的細(xì)胞核移至受體細(xì)胞之前，必須將受體細(xì)胞的的細(xì)胞核移至受體細(xì)胞之前，必須將受體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐?。遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐摹?用于核移植的供體

10、用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳細(xì)胞一般都選用傳代代1010代以內(nèi)的細(xì)胞，代以內(nèi)的細(xì)胞，這是為什么？這是為什么？ 培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般當(dāng)傳代至培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般當(dāng)傳代至10105050代左右時(shí)，部分代左右時(shí)，部分細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化，其細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化，其細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生突變，而生突變，而1010代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型。因此，在體細(xì)胞核移植中，為了核型。因此，在體細(xì)胞核移植中，為了保證供體細(xì)胞保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)，正常的遺傳基礎(chǔ)，通常采用傳代通常采用傳代1010代以內(nèi)的細(xì)胞。代以內(nèi)的細(xì)胞。 （以克隆高產(chǎn)奶牛

11、為例）（以克隆高產(chǎn)奶牛為例）核移植的受體核移植的受體細(xì)胞是什么？細(xì)胞是什么？處在什么時(shí)期？處在什么時(shí)期？為什么選用該為什么選用該細(xì)胞？細(xì)胞？222021/4/19你認(rèn)為用上述體細(xì)胞你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，是對(duì)體細(xì)胞隆動(dòng)物，是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了供體動(dòng)物進(jìn)行了100%100%的復(fù)制嗎？為什么？的復(fù)制嗎？為什么？克隆牛的遺傳物質(zhì)主克隆牛的遺傳物質(zhì)主要來自誰？要來自誰？ 克隆動(dòng)物絕大部分克隆動(dòng)物絕大部分DNADNA來自于供體細(xì)胞核，來自于供體細(xì)胞核，但其核外還有少量的但其核外還有少量的DNADNA，即線粒體中的，即線粒體中的DNADNA是來自于受體卵母是來自于

12、受體卵母細(xì)胞。所以，用教材細(xì)胞。所以，用教材中所述的方法克隆的中所述的方法克隆的動(dòng)物不是供核動(dòng)物完動(dòng)物不是供核動(dòng)物完全相同的復(fù)制。全相同的復(fù)制。 動(dòng)物體細(xì)胞核移植產(chǎn)生的新個(gè)動(dòng)物體細(xì)胞核移植產(chǎn)生的新個(gè)體的親本有三個(gè)：體細(xì)胞核供體的親本有三個(gè)：體細(xì)胞核供體、卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體、代孕體、卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體、代孕母體。新個(gè)體細(xì)胞核基因型與母體。新個(gè)體細(xì)胞核基因型與體細(xì)胞核供體完全一樣，因此體細(xì)胞核供體完全一樣，因此新個(gè)體性狀與體細(xì)胞核供體基新個(gè)體性狀與體細(xì)胞核供體基本相同。卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中也有本相同。卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中也有少量的少量的DNADNA，新個(gè)體性狀與卵細(xì)，新個(gè)體性狀與卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體有一些地方相同。胞

13、細(xì)胞質(zhì)供體有一些地方相同。代孕母體沒有為新個(gè)體提供遺代孕母體沒有為新個(gè)體提供遺傳物質(zhì)，新個(gè)體性狀與代孕母?jìng)魑镔|(zhì)，新個(gè)體性狀與代孕母體基本沒有聯(lián)系。體基本沒有聯(lián)系。動(dòng)物體細(xì)胞核移植產(chǎn)動(dòng)物體細(xì)胞核移植產(chǎn)生的新個(gè)體涉及的親生的新個(gè)體涉及的親本有幾個(gè)？與克隆動(dòng)本有幾個(gè)？與克隆動(dòng)物在遺傳上是什么關(guān)物在遺傳上是什么關(guān)系？系？ 232021/4/19 目前核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯目前核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作去核法。還有人采用其他方法，如梯度離微操作去核法。還有人采用其他方法，如梯度離心、紫外光短時(shí)間照射、化學(xué)物質(zhì)處理等。這些心、紫外光短時(shí)間照射、化學(xué)物質(zhì)處理等。這些方法是在沒有刺破

14、透明帶或卵母細(xì)胞質(zhì)膜的情況方法是在沒有刺破透明帶或卵母細(xì)胞質(zhì)膜的情況下下, ,去除細(xì)胞核或使卵細(xì)胞核去除細(xì)胞核或使卵細(xì)胞核DNADNA變性，從而達(dá)到變性，從而達(dá)到去核目的。去核目的。242021/4/19以概念圖的形以概念圖的形式表示體細(xì)胞式表示體細(xì)胞核移植過程核移植過程？取供體細(xì)胞取供體細(xì)胞取卵母細(xì)胞取卵母細(xì)胞 供體細(xì)胞培養(yǎng)供體細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)到培養(yǎng)到 MM中期中期 卵母細(xì)胞去核卵母細(xì)胞去核 供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞 供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞 重組細(xì)胞重組細(xì)胞 代孕母牛代孕母牛 生出與核供體遺傳物質(zhì)基本相同的個(gè)體生出與核供體遺傳物質(zhì)基本相同的個(gè)體早

15、期胚胎早期胚胎此過程用到了此過程用到了哪些生物學(xué)技哪些生物學(xué)技術(shù)？繁殖方式術(shù)？繁殖方式是什么類型？是什么類型？細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)核移植技術(shù)核移植技術(shù)胚胎移植胚胎移植細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)生殖方式生殖方式遺傳物質(zhì)來源遺傳物質(zhì)來源后代性狀表現(xiàn)后代性狀表現(xiàn)電激處理電激處理細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)無性生殖無性生殖主要來自供體細(xì)胞核，主要來自供體細(xì)胞核，少量來自卵細(xì)胞質(zhì)少量來自卵細(xì)胞質(zhì)主要與核供體相似，主要與核供體相似，少量性狀與卵供體相似少量性狀與卵供體相似252021/4/19 美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭名叫盧辛達(dá)美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭名叫盧辛達(dá)（LucindaLucinda）的奶牛，年產(chǎn)奶量為）的

16、奶牛，年產(chǎn)奶量為30.8 t30.8 t，創(chuàng)造了世界奶牛，創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高新紀(jì)錄。能利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛產(chǎn)奶量最高新紀(jì)錄。能利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)嗎？請(qǐng)說明理由。盧辛達(dá)嗎？請(qǐng)說明理由。 思考與探究：思考與探究： 可以用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)。盧辛達(dá)的可以用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)。盧辛達(dá)的產(chǎn)奶量很高，說明它有高產(chǎn)奶的遺傳基礎(chǔ)，利用盧辛達(dá)的體細(xì)產(chǎn)奶量很高，說明它有高產(chǎn)奶的遺傳基礎(chǔ)，利用盧辛達(dá)的體細(xì)胞克隆的奶牛其遺傳物質(zhì)基本上全部來自該奶牛，其克隆牛具胞克隆的奶牛其遺傳物質(zhì)基本上全部來自該奶牛，其克隆牛具有高產(chǎn)的遺傳基礎(chǔ)，如果精心培育和飼養(yǎng)

17、，有可能在世界范圍有高產(chǎn)的遺傳基礎(chǔ)，如果精心培育和飼養(yǎng)，有可能在世界范圍內(nèi)推廣，克隆牛再與高產(chǎn)的公牛自然繁殖，可得到很多高產(chǎn)的內(nèi)推廣，克隆牛再與高產(chǎn)的公牛自然繁殖，可得到很多高產(chǎn)的后代，從而加快奶牛改良進(jìn)程。后代，從而加快奶牛改良進(jìn)程。 但同時(shí)需注意，該克隆牛不能無限制地推廣，其數(shù)量不宜但同時(shí)需注意，該克隆牛不能無限制地推廣，其數(shù)量不宜過多，尤其是在小范圍內(nèi)不能無限的繁殖，以避免奶牛群出現(xiàn)過多，尤其是在小范圍內(nèi)不能無限的繁殖，以避免奶牛群出現(xiàn)近親繁殖而引起種質(zhì)衰退。近親繁殖而引起種質(zhì)衰退。 如果將克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)的任務(wù)交給你，你將如何如果將克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)的任務(wù)交給你，你將如何對(duì)它進(jìn)行克隆

18、？對(duì)它進(jìn)行克?。?首先從盧辛達(dá)耳朵（也可用別的組織、器官，耳朵在活首先從盧辛達(dá)耳朵（也可用別的組織、器官，耳朵在活體上容易?。┥霞羧∫恍K組織，在體外培養(yǎng)獲得該組織體上容易取）上剪取一小塊組織，在體外培養(yǎng)獲得該組織（如軟骨組織）的細(xì)胞。從屠宰場(chǎng)取廢棄的牛卵巢，抽取卵（如軟骨組織）的細(xì)胞。從屠宰場(chǎng)取廢棄的牛卵巢，抽取卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟。用顯微針去除卵母細(xì)胞的核，再將耳母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟。用顯微針去除卵母細(xì)胞的核，再將耳細(xì)胞注入卵母細(xì)胞，用電刺激方法使卵母細(xì)胞與體細(xì)胞融合，細(xì)胞注入卵母細(xì)胞，用電刺激方法使卵母細(xì)胞與體細(xì)胞融合，這時(shí)供體核就進(jìn)入了受體卵母細(xì)胞，再用電刺激或化學(xué)物質(zhì)這時(shí)供體核就進(jìn)入了

19、受體卵母細(xì)胞，再用電刺激或化學(xué)物質(zhì)激活注入了體細(xì)胞核的卵母細(xì)胞，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育激活注入了體細(xì)胞核的卵母細(xì)胞，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育過程。核移植胚胎在體外短時(shí)間培養(yǎng)后，挑選正常卵裂的胚過程。核移植胚胎在體外短時(shí)間培養(yǎng)后，挑選正常卵裂的胚胎植入經(jīng)同期發(fā)情處理的受體母牛體內(nèi)。胎植入經(jīng)同期發(fā)情處理的受體母牛體內(nèi)。 262021/4/19二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物物3 3、應(yīng)用前景：、應(yīng)用前景：閱讀課本閱讀課本P49P49272021/4/19 20012001年我國(guó)科學(xué)家將牛耳細(xì)胞克隆年我國(guó)科學(xué)家將牛耳細(xì)胞克隆的胚胎移入的胚胎移入135135頭牛體內(nèi)，每

20、頭牛移植了頭牛體內(nèi)，每頭牛移植了兩枚克隆胚。從兩枚克隆胚。從20022002年年1 1月月8 8日起，陸續(xù)日起，陸續(xù)獲取了獲取了1414頭克隆牛犢。至頭克隆牛犢。至20032003年年1111月，月，這批被克隆的牛，存活的只有這批被克隆的牛，存活的只有5 5頭。頭。282021/4/19二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物4 4、存在的問題：、存在的問題：閱讀課本閱讀課本P50P50 體細(xì)胞核移植技術(shù)在研究和應(yīng)用上還存在什么問題？體細(xì)胞核移植技術(shù)在研究和應(yīng)用上還存在什么問題？請(qǐng)你查閱資料，了解這方面的前沿動(dòng)態(tài)。請(qǐng)你查閱資料，了解這方面的前沿動(dòng)態(tài)。 研究方面：克隆

21、動(dòng)物基因組重新編程的機(jī)制尚不清楚，研究方面：克隆動(dòng)物基因組重新編程的機(jī)制尚不清楚，克隆技術(shù)效率低，克隆動(dòng)物畸形率高、死亡率高、易克隆技術(shù)效率低，克隆動(dòng)物畸形率高、死亡率高、易出現(xiàn)早衰等問題。這些問題尚在研究中。出現(xiàn)早衰等問題。這些問題尚在研究中。 應(yīng)用上：生產(chǎn)克隆動(dòng)物費(fèi)用昂貴，距大規(guī)模應(yīng)用還有應(yīng)用上：生產(chǎn)克隆動(dòng)物費(fèi)用昂貴，距大規(guī)模應(yīng)用還有一定距離。一定距離。292021/4/19小結(jié)：小結(jié)：二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物 動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核, ,移入一個(gè)已經(jīng)去掉移入一個(gè)已經(jīng)去掉 細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中細(xì)胞核

22、的卵母細(xì)胞中. .使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎, ,這個(gè)新的胚胎最這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體. .2、過程：3、應(yīng)用：4、問題：1、概念：302021/4/19課后請(qǐng)閱讀課本課后請(qǐng)閱讀課本P51P51拓展視野拓展視野 核移植技術(shù)發(fā)展簡(jiǎn)史核移植技術(shù)發(fā)展簡(jiǎn)史P55 P55 拓展視野拓展視野 多利羊猜想多利羊猜想312021/4/19322021/4/19332021/4/19342021/4/19352021/4/19 細(xì)胞的衰老與動(dòng)物機(jī)體的衰老有著密切的細(xì)胞的衰老與動(dòng)物機(jī)體的衰老有著密切的關(guān)系，細(xì)胞的增殖能力與供體的年齡有關(guān)，關(guān)系，細(xì)胞的增殖能力與

23、供體的年齡有關(guān)，幼幼齡動(dòng)物細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，有絲分裂旺盛，齡動(dòng)物細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，有絲分裂旺盛，老齡老齡動(dòng)物則相反。所以，一般來說幼年動(dòng)物的組織動(dòng)物則相反。所以，一般來說幼年動(dòng)物的組織細(xì)胞比老年動(dòng)物的組織細(xì)胞易于培養(yǎng)。同樣，細(xì)胞比老年動(dòng)物的組織細(xì)胞易于培養(yǎng)。同樣，組織細(xì)胞的分化程度越低，則增殖能力越強(qiáng)，組織細(xì)胞的分化程度越低，則增殖能力越強(qiáng)，所以更容易培養(yǎng)。一般取胚胎細(xì)胞或幼齡動(dòng)物所以更容易培養(yǎng)。一般取胚胎細(xì)胞或幼齡動(dòng)物的器官組織進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。的器官組織進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。 362021/4/19 成塊的組織中細(xì)胞與細(xì)胞靠在一起，彼此限制成塊的組織中細(xì)胞與細(xì)胞靠在一起，彼此限制了細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，分散成

24、單個(gè)細(xì)胞后培養(yǎng)，了細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，分散成單個(gè)細(xì)胞后培養(yǎng)，細(xì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)容易供應(yīng)，其代謝廢物容易排出；胞所需的營(yíng)養(yǎng)容易供應(yīng)，其代謝廢物容易排出；而而用用大塊組織培養(yǎng)時(shí)，內(nèi)部細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)和代謝廢大塊組織培養(yǎng)時(shí)，內(nèi)部細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)和代謝廢物的排出都較困難，物的排出都較困難，因此，這些細(xì)胞在體外長(zhǎng)時(shí)間因此，這些細(xì)胞在體外長(zhǎng)時(shí)間的生存和生長(zhǎng)就較困難。同時(shí)，分散成單個(gè)細(xì)胞養(yǎng)，的生存和生長(zhǎng)就較困難。同時(shí)，分散成單個(gè)細(xì)胞養(yǎng)，可使得在細(xì)胞水平操作的其他技術(shù)得以實(shí)現(xiàn)?？墒沟迷诩?xì)胞水平操作的其他技術(shù)得以實(shí)現(xiàn)。 372021/4/19 用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說明細(xì)胞間的

25、物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。胃蛋白酶作用的適宜白質(zhì)。胃蛋白酶作用的適宜pHpH約為約為2 2，當(dāng)，當(dāng)pHpH大于大于6 6時(shí)，胃時(shí)，胃蛋白酶就會(huì)失去活性。胰蛋白酶作用的適宜環(huán)境蛋白酶就會(huì)失去活性。胰蛋白酶作用的適宜環(huán)境pHpH為為7.27.28.48.4。多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜。多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pHpH為為7.27.27.47.4，胃，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，而胰蛋白酶在此環(huán)境中活蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，而胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高，因此胰蛋白酶適宜用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的消化。性較高，因此胰蛋白酶適宜用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的消化。 胰蛋白酶不會(huì)把細(xì)胞消化掉嗎？為什么？胰蛋白酶不會(huì)把細(xì)胞消化掉嗎？為什么？

26、胰蛋白酶除了可以消化細(xì)胞間的蛋白外，長(zhǎng)時(shí)間的胰蛋白酶除了可以消化細(xì)胞間的蛋白外，長(zhǎng)時(shí)間的作用也會(huì)消化細(xì)胞膜蛋白，對(duì)細(xì)胞有損傷作用，因此必作用也會(huì)消化細(xì)胞膜蛋白，對(duì)細(xì)胞有損傷作用，因此必須控制好胰蛋白酶的消化時(shí)間。須控制好胰蛋白酶的消化時(shí)間。 382021/4/19有關(guān)概念有關(guān)概念原代培養(yǎng)：（即將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)）原代培養(yǎng)：（即將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)）從機(jī)體從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞原代細(xì)胞。培養(yǎng)的。培養(yǎng)的第第1 1代代細(xì)胞與細(xì)胞與傳傳1010代以內(nèi)代以內(nèi)的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)：將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成

27、細(xì)胞懸液，將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細(xì)胞懸液，分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。細(xì)胞株細(xì)胞株：原代細(xì)胞一般傳至原代細(xì)胞一般傳至1010代左右細(xì)胞生長(zhǎng)停滯，大部代左右細(xì)胞生長(zhǎng)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存活到分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存活到40-5040-50代，這種傳代細(xì)胞代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。（細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生改變）為細(xì)胞株。（細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生改變）細(xì)胞系細(xì)胞系：細(xì)胞株傳代至細(xì)胞株傳代至5050代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)停滯狀態(tài)，只代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。細(xì)胞株和細(xì)細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別？胞系的區(qū)別？細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別：細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別： 細(xì)胞系的細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變遺傳物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。392021/4/19動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)特性動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)特性：細(xì)胞貼壁細(xì)胞貼壁： 懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。（要求：培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。）（要求：培養(yǎng)瓶或培