實(shí)驗(yàn)一一葉萩堿的提取與鑒定

1、實(shí)驗(yàn)一：一葉萩堿的提取與鑒定實(shí)驗(yàn)一：一葉萩堿的提取與鑒定 （l）目的：通過一葉萩堿的提取分離，掌握用離子交換樹脂法提取分離）目的：通過一葉萩堿的提取分離，掌握用離子交換樹脂法提取分離生物堿的原理和方法。生物堿的原理和方法。（2）要求：分離得到純一葉萩堿，加以鑒定。）要求：分離得到純一葉萩堿，加以鑒定。（3 3）原理：）原理：ALK+H+/H2O ALKH+ RSO3-H+ALKH+ RSO3-ALKH+H+洗脫：吸堿樹脂用洗脫：吸堿樹脂用NH4+OH-堿化后，反應(yīng)如下：堿化后，反應(yīng)如下：RSO3-ALKH+NH4+OH- RSO3-NH4+ALK（游離生物堿）（游離生物堿）+ H2O一、實(shí)驗(yàn)?zāi)?/p>

2、的、要求、原理：一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒁?、原理?大戟科植物一葉萩（大戟科植物一葉萩（Securinega suffruticosa ( Pall ) Rehd）也稱葉底珠，別名狗杏條等，我國資源十分豐富。其根、葉和）也稱葉底珠，別名狗杏條等，我國資源十分豐富。其根、葉和嫩枝中均含有多種生物堿，結(jié)構(gòu)已經(jīng)清楚的有十幾種。其中一葉萩堿含嫩枝中均含有多種生物堿，結(jié)構(gòu)已經(jīng)清楚的有十幾種。其中一葉萩堿含量高，已用于臨床。該生物堿于量高，已用于臨床。該生物堿于1956年首先由蘇聯(lián)學(xué)者分離得到。年首先由蘇聯(lián)學(xué)者分離得到。1962 年完全確定了它的化學(xué)結(jié)構(gòu)。我國在一葉萩堿的研究方面作出年完全確定了它的化學(xué)結(jié)構(gòu)。我國

3、在一葉萩堿的研究方面作出較大貢獻(xiàn)，于較大貢獻(xiàn)，于1962年自國產(chǎn)的一葉萩中用活性炭吸附法提取分離一葉年自國產(chǎn)的一葉萩中用活性炭吸附法提取分離一葉萩堿，并測定了它的化學(xué)結(jié)構(gòu)。萩堿，并測定了它的化學(xué)結(jié)構(gòu)。 二、一葉獲簡介二、一葉獲簡介NOOHH 一葉堿獲和它的衍生物能興奮中樞一葉堿獲和它的衍生物能興奮中樞 X 神經(jīng)，增強(qiáng)心肌收縮、升高血神經(jīng)，增強(qiáng)心肌收縮、升高血壓，臨床用硝酸一葉獲堿治療面神經(jīng)麻痹，小兒麻痹骸神經(jīng)炎和股外側(cè)壓，臨床用硝酸一葉獲堿治療面神經(jīng)麻痹，小兒麻痹骸神經(jīng)炎和股外側(cè)神經(jīng)炎感染引起的多發(fā)性神經(jīng)炎，成為神經(jīng)科疾患的常用藥物。神經(jīng)炎感染引起的多發(fā)性神經(jīng)炎，成為神經(jīng)科疾患的常用藥物。 三

4、、實(shí)驗(yàn)操作及注意事項(xiàng)三、實(shí)驗(yàn)操作及注意事項(xiàng) （一）操作（一）操作置容器中，用 3 的H2SO4水溶液 300ml 充分浸潤,放置 20分鐘后，裝入滲流筒 ，再用 3 的H2SO4水溶液 1000ml,以68ml/分進(jìn)行滲漉通過731磺酸型陽離子交換柱（取50g陽離子交換樹脂，動(dòng)態(tài)裝柱），以68ml/分的流速進(jìn)行交換，測定交換液的pH值（0、1、2、3、5、10、15、20、30、60）畫出時(shí)間與pH值的曲線圖，待酸水液全部交換完畢后，將樹脂傾入燒杯中，水洗至橙明，抽干放置培養(yǎng)皿中，室溫風(fēng)干用NH4OH 1012 ml堿化，悶置20分鐘后揮散多余NH3，將樹脂裝入濾紙筒，放入沙氏提取器中，用石油

5、醚（3060）120ml，于水浴上，回流洗脫3小時(shí)左右，取出樹脂筒。醚回收至體積20ml左右轉(zhuǎn)移到干燥的小錐形瓶中，加蓋放置，結(jié)晶析出后抽濾。注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)： 1 裝滲滾筒：滲流筒底部，放一塊脫脂棉（先用水濕潤）然后將潤濕過的藥裝滲滾筒：滲流筒底部，放一塊脫脂棉（先用水濕潤）然后將潤濕過的藥料分次加入，分層填壓，頂部蓋一張濾紙壓上潔凈的鵝卵石。料分次加入，分層填壓，頂部蓋一張濾紙壓上潔凈的鵝卵石。2 樹脂處理：取新樹脂（已用水膨脹過的）置燒杯中，用五倍量的樹脂處理：取新樹脂（已用水膨脹過的）置燒杯中，用五倍量的 67 % HCI 浸泡過夜，先用離子水洗至浸泡過夜，先用離子水洗至 pH34

6、，改用蒸餾水洗至中性，再用，改用蒸餾水洗至中性，再用 5 % NaOH （約（約 2 倍）攪拌洗滌后，水洗至中性，最后用倍）攪拌洗滌后，水洗至中性，最后用 67 % HCl轉(zhuǎn)型，蒸餾水洗至近中性。轉(zhuǎn)型，蒸餾水洗至近中性。3 裝樹脂柱用蒸餾水將已處理好的樹脂懸浮起來加到底部墊有脫脂棉的交換裝樹脂柱用蒸餾水將已處理好的樹脂懸浮起來加到底部墊有脫脂棉的交換柱中，等樹脂顆粒下沉后，其上復(fù)蓋一層棉花或一張濾紙，以免加入液體柱中，等樹脂顆粒下沉后，其上復(fù)蓋一層棉花或一張濾紙，以免加入液體時(shí)，沖破樹脂表面，注意在整個(gè)操作過程中樹脂的上部是要覆蓋少量液體，時(shí)，沖破樹脂表面，注意在整個(gè)操作過程中樹脂的上部是要覆

7、蓋少量液體，以免進(jìn)入空氣，影響交換效果，將樹脂柱表層多余液體由底部活塞放出，以免進(jìn)入空氣，影響交換效果，將樹脂柱表層多余液體由底部活塞放出，待液層降至樹脂層表面時(shí)，關(guān)閉活塞，由柱的上部加入含一葉萩堿的酸水，待液層降至樹脂層表面時(shí)，關(guān)閉活塞，由柱的上部加入含一葉萩堿的酸水，打開底部活?yuàn)A。控制流速打開底部活?yuàn)A?？刂屏魉?1 取滲漉液取滲漉液 lml ，加硅鎢酸試劑數(shù)滴，產(chǎn)生淡黃色沉淀。，加硅鎢酸試劑數(shù)滴，產(chǎn)生淡黃色沉淀。2 取滲漉液取滲漉液 lml ，加碘碘化鉀，加碘碘化鉀 T . S 數(shù)滴，產(chǎn)生棕褐色沉淀。數(shù)滴，產(chǎn)生棕褐色沉淀。3 取滲漉液取滲漉液 lml ，加碘化鉀秘，加碘化鉀秘 T . S 數(shù)滴，產(chǎn)生棕紅色沉淀。數(shù)滴，產(chǎn)生棕紅色沉淀。（二）生物堿的定性試驗(yàn)（二）生物堿的定性試驗(yàn)（三）鑒定（三）鑒定 1原理：吸附層析2TLC： 吸附劑：Al2O3（中性） 展開劑： aCHC13 b石油醚：CHC13=1 cCHC13：EtOH=9：1 樣品：一葉萩堿/CHC13液 標(biāo)準(zhǔn)品：一葉萩堿/CHC13液 顯色劑：碘化秘鉀：EtOH= 9：1 3 顯微溶點(diǎn)測定 1為什么要用陽離子樹脂交換