免疫歸納全解

1、免疫學名詞解釋1 .免疫：機體免疫系統(tǒng)對“自己”和“非己”的識別、應(yīng)答過程中所產(chǎn)生的生物學效應(yīng)的總和，其作用是排除“非己”（抗原）物質(zhì)，以維持機體的生理平衡和穩(wěn)定。2 .免疫應(yīng)答：機體識別和清除抗原異物的生理反應(yīng)3 .固有免疫：機體在長期系統(tǒng)發(fā)育與進化過程中逐漸形成的一種天然免疫防御功能。4 .適應(yīng)性免疫：機體在長期與外源性病原微生物接觸過程中，對特定病原微生物（抗原）產(chǎn)生識別并將其清除體外的防御功能。5 .臨床免疫學：是將免疫學基礎(chǔ)理論、臨床醫(yī)學疾病與免疫學技術(shù)相結(jié)合，用于研究疾病的免疫病理機制、診斷與鑒別診斷、評價治療效果和判斷愈后的多個分支學科的總稱。6 .免疫學檢驗：是研究免疫學技術(shù)及

2、其在醫(yī)學檢驗領(lǐng)域的重要學科；7 .抗原：指能刺激機體產(chǎn)生（特異性）免疫應(yīng)答，并與免疫應(yīng)答產(chǎn)物抗體或致敏淋巴細胞結(jié)合，發(fā)生免疫效應(yīng)的物質(zhì)。8 .抗原決定基：決定抗原特異性的基本結(jié)構(gòu)或化學基團。又稱表位9 .抗原抗體反應(yīng)：指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。10 .親和力：抗體分子上一個抗原結(jié)合點與對應(yīng)的抗原決定簇之間相適應(yīng)而存在著的引力，是抗原抗體間固有的結(jié)合力11 .親合力：抗體結(jié)合部位與抗原表位之間結(jié)合的強度12 .交叉反應(yīng)：兩種不同的抗原分子具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原表位，可與彼此相應(yīng)的抗體發(fā)生反應(yīng)13 .標記免疫技術(shù)：用熒光物質(zhì)、放射性核素、酶或化學發(fā)光物質(zhì)等標記抗原或抗體，進

3、行抗原抗體反應(yīng)后，通過檢測標記物對抗原或抗體進行定性、定位或定量分析14 .免疫原：是指能刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性抗體或致敏淋巴細胞的抗原。15 .佐劑：某些物質(zhì)與抗原一起或先于抗原注入機體，可增強機體對該抗原的特異性免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答類型，此類物質(zhì)稱為免疫佐劑，簡稱佐劑。16 .弗氏不完全佐劑：由油劑（礦物油或花生油）和乳化劑（羊毛脂或吐溫-80）按1:11:5比例混合而成；17 .弗氏完全佐劑：由弗氏不完全佐劑加卡介苗組成。18 .多克隆抗體：是傳統(tǒng)的抗體制備方法即利用抗原免疫動物后獲得抗體19 .單克隆抗體：是由只識別單一抗原決定簇的B細胞克隆產(chǎn)生的同源抗體。20 .基因工程抗體：

4、是指應(yīng)用NDA重組及蛋白工程技術(shù)對編碼抗體的基因按不同的需要進行改造和裝配，經(jīng)導入適當?shù)氖荏w細胞后重新表達的抗體。21 .凝集反應(yīng)：指細菌和紅細胞等顆粒性抗原或表面包被抗原的顆粒性載體與相應(yīng)抗體結(jié)合后，可出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。22 .直接凝集反應(yīng)：顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。23 .間接凝集反應(yīng)：將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面，然后與相應(yīng)的抗體或抗原反應(yīng)，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象24 .沉淀反應(yīng)：是指可溶性抗原與相應(yīng)抗體在適當條件下發(fā)生特異性結(jié)合而出現(xiàn)的沉淀現(xiàn)象，其特性與經(jīng)典的抗原抗體反應(yīng)相同。25 .補體：具酶樣活性、不耐熱的

5、糖蛋白,在正常人血清中含量相對穩(wěn)定，某些疾病時，含量及其活性可發(fā)生改變26 .補體結(jié)合試驗（CFT）:將免疫溶血作為指示系統(tǒng)，用以檢測另一反應(yīng)系統(tǒng)中抗原或抗體的傳統(tǒng)方法。27 .放射免疫分析（RIA）:以標記抗原與反應(yīng)系統(tǒng)中未標記抗原競爭結(jié)合特異性抗體來測定待檢樣品中抗原量。28 .免疫放射分析（IRMA）:以過量標記抗體與抗原非競爭結(jié)合，采用固相免疫吸附載體分離游離和結(jié)合標記抗體。29 .熒光：熒光物質(zhì)吸收激發(fā)光的能量后，電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)，當其回復(fù)至基態(tài)時，以發(fā)射光形式釋放出能量，稱為熒光。30 .熒光效率：熒光物質(zhì)分子將光能轉(zhuǎn)變成熒光的百分率31 .熒光壽命：熒光物質(zhì)被激發(fā)后所產(chǎn)生的

6、熒光衰減到一定程度時所用的時間。32 .熒光淬滅：熒光物質(zhì)在某些理化因素作用下，發(fā)射熒光減弱甚至消退稱為熒光淬滅。32 .熒光免疫技術(shù)：是將抗原抗體反應(yīng)的特異性與熒光技術(shù)的敏感性相結(jié)合，對抗原或抗體進行定性、定位或定量檢測，包括熒光抗體技術(shù)和熒光免疫測定。33 .熒光抗體技術(shù)：是以熒光素標記抗體，與抗原反應(yīng)，在熒光顯微鏡下觀察呈現(xiàn)特異熒光的抗原抗體復(fù)合物，進行定性和定位檢測，分為直接法、間接法和雙標記法等。34 .熒光免疫測定：是將抗原抗體反應(yīng)與熒光物質(zhì)發(fā)光分析相結(jié)合，檢測抗原抗體復(fù)合物中特異性熒光強度，進行定量測定，分為均相和非均相。35 .熒光免疫顯微鏡技術(shù)：熒光素標記抗體與切片中組織細胞

7、抗原反應(yīng)，洗洗滌分離后，熒光顯微鏡下觀察呈現(xiàn)特異熒光的抗原抗體復(fù)合物及其部位，對組織細胞抗原進行定性和定位檢測，或?qū)ψ陨砜贵w進行定性和滴度測定。36 .酶免疫技術(shù)：以酶標記的抗原或抗體作為主要試劑的免疫檢測方法，在抗原與抗體的特異性反應(yīng)完成后，通過酶對底物的作用進一步提高敏感性。37 .膠體金免疫技術(shù)：以膠體金作為一種示蹤劑或者顯示劑，應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)的一種標記免疫測定技術(shù)。38 .膠體金：也稱金溶膠，是金鹽被還原成金原子后形成的金顆粒懸液。39 .免疫金：是指膠體金與抗原（抗體）等大分子物質(zhì)的結(jié)合物。在免疫組織化學染色技術(shù)中，也習慣上被稱為金探針。40 .化學發(fā)光免疫分析：是將發(fā)光分析與免

8、疫反應(yīng)相結(jié)合而建立起來的一種新的標記免疫分析技術(shù)。41 .發(fā)光：一種物質(zhì)由電子激發(fā)態(tài)回復(fù)到基態(tài)時，釋放出的能量表現(xiàn)為光的發(fā)射。42 .光照發(fā)光：指發(fā)光劑（熒光素）經(jīng)短波長的入射光照射后，電子吸收能量躍遷到激發(fā)態(tài)，在其回復(fù)至基態(tài)時，發(fā)射出較長波長的可見光（熒光）。43 .生物發(fā)光-螢火蟲發(fā)光：反應(yīng)底物在熒光素酶的催化下利用ATP產(chǎn)能，生成激發(fā)態(tài)的氧化熒光素，后者在回復(fù)到基態(tài)時多余的能量以光子形式放出。44 .化學發(fā)光：指物質(zhì)在化學反應(yīng)過程中，其物質(zhì)分子吸收化學能產(chǎn)生光的輻射現(xiàn)象。45 .免疫組織化學：用顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位，通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學的呈色反應(yīng)，對相應(yīng)抗原進行定性

9、、定位、定量測定的免疫學檢測技術(shù)。46 .免疫電鏡技術(shù)：免疫組化技術(shù)與電鏡技術(shù)結(jié)合的產(chǎn)物，將抗原抗體特異性與電子顯微鏡的高分辨力相結(jié)合，在亞細胞和超微結(jié)構(gòu)水平對抗原進行定位、定性及半定量分析的免疫組化技術(shù)。47 .親和組織化學：是以一種物質(zhì)對某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)，建立的組織細胞化學技術(shù)。48 .免疫芯片：將抗原抗體反應(yīng)的特異性與電子芯片高密度集成原理相結(jié)合產(chǎn)生的生物芯片檢測技術(shù)。49 .流式細胞術(shù)（FCM：是一種利用流式細胞儀對生物細胞的理化特性和生物學特性進行多參數(shù)定量分析，和對特定細胞群體分選的技術(shù)。50 .細胞因子：由非神經(jīng)一內(nèi)分泌細胞產(chǎn)生的一大類與免疫應(yīng)答活動密切相關(guān)的低分

10、子蛋白與多肽。51 .細胞因子的生物活性單位：指使相應(yīng)指示細胞達到最大程度增殖的50%時，所需細胞因子的含量為一個活性單位52 .CD來自不同實驗室的單克隆抗體所識別的同一種分化抗原歸為同一分化群。53 .黏附分子：是一類介導細胞間或細胞與細胞外基質(zhì)間互相接觸和結(jié)合的分子，多為跨膜型糖蛋白。54 .超敏反應(yīng)：機體對某些抗原初次應(yīng)答后，再次接受相同抗原刺激時，發(fā)生的一種以機體生理功能紊亂或組織損傷為主的特異性免疫應(yīng)答55 .變應(yīng)原：引起超敏反應(yīng)的抗原物質(zhì)56 .自身免疫：機體免疫系統(tǒng)對自身成分發(fā)生免疫應(yīng)答的現(xiàn)象。57 .自身免疫?。ˋID）:是指由于過度而持久的自身免疫反應(yīng)導致組織器官損傷并引起

11、相應(yīng)器官病變或臨床癥狀的一類疾病。58 .自身免疫耐受：是免疫系統(tǒng)對自身的組織和細胞不產(chǎn)生或僅產(chǎn)生微弱的免疫應(yīng)答。59 .分子模擬：許多病原微生物具有與宿主正常細胞或細胞外基質(zhì)相似的抗原決定簇，宿主針對病原體產(chǎn)生的抗體能與被模擬的宿主自身成分發(fā)生交叉反應(yīng)60 .表位擴展：APC攝取組織損傷碎片，并可能將自身抗原的隱蔽表位提呈給機體自身反應(yīng)性淋巴細胞克隆，此現(xiàn)象稱為“表位擴展”61 .免疫增生?。↖PD）:是指免疫器官、免疫組織或免疫細胞異常增生（良性/惡性）引起機體病理損傷的一組疾病。62 .免疫球蛋白?。簼{細胞異常增生所引起的免疫球蛋白異常增加的一組疾病。63 .重鏈?。℉CD）:重鏈病是突

12、變的漿細胞所產(chǎn)生的重鏈異常增多或質(zhì)量異常不能與輕鏈裝配，導致血清重鏈過剩，致使血清和尿中出現(xiàn)大量游離的無免疫功能的免疫球蛋白重鏈所引起的疾病。64 .輕鏈?。狠p鏈病是由于漿細胞發(fā)生突變和異常增生，產(chǎn)生大量的異常輕鏈，致血漿中輕鏈異常增多，經(jīng)腎臟從尿中排出。65 .冷球蛋白血癥：冷球蛋白是指血漿溫度降至420C時發(fā)生沉淀或膠凍狀，溫度回升37c時又溶解的一類球蛋白，如冷免疫球蛋白、C-反應(yīng)蛋白。>0.1g/L,冷球蛋白血癥66 .淀粉樣變性：一種少見的新陳代謝紊亂疾病，由不同病因所致的淀粉樣蛋白纖維以不可溶的形式在細胞外沉積，導致多器官組織結(jié)構(gòu)與功能損害的全身性疾病。67 .免疫缺陷病（I

13、DD）由于先天遺傳因素或后天因素造成的免疫系統(tǒng)在發(fā)育、分化、代謝或相互調(diào)節(jié)的不同環(huán)節(jié)上發(fā)生障礙，導致免疫功能低下或缺失，臨床上表現(xiàn)為以感染為主的一組綜合征。68 .原發(fā)性免疫缺陷?。≒ID）:免疫系統(tǒng)的遺傳缺陷或先天性發(fā)育不全，相應(yīng)功能完全缺失，并伴有其他組織器官的發(fā)育畸形。69 .獲得性免疫缺B1綜合癥（AIDS）:又稱艾滋病，是由HIV感染引起的一組綜合征。病人以CD4+T細胞減少為主要特征，同時伴反復(fù)機會感染、惡性腫瘤及中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變。70 .TORCH:將數(shù)種孕婦患病后將引起胎兒感染，并引發(fā)流產(chǎn)、甚至造成先天缺陷或發(fā)育異常的病原體英文名詞的第一個字母組合而成71 .腫瘤抗原：泛

14、指腫瘤在發(fā)生、發(fā)展過程中新出現(xiàn)的或者過度表達的抗原物質(zhì)，其在腫瘤發(fā)生、發(fā)展及誘導機體產(chǎn)生抗瘤免疫應(yīng)答中起重要作用，并可作為腫瘤免疫診斷的標志物和治療的靶分子。72 .腫瘤特異性抗原（TSA）：腫瘤細胞特有的、僅表達于某種腫瘤細胞表面而不存在于正常細胞的新抗原。73 .腫瘤相關(guān)抗原（TAA）:非腫瘤細胞特有、正常細胞和其他組織上也存在的抗原，只是其含量在細胞癌變時明顯增高。74 .腫瘤免疫學：研究腫瘤免疫原性、機體免疫系統(tǒng)與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的相互關(guān)系及腫瘤免疫診斷和防治等內(nèi)容的學科。75 .分泌型抗原：腫瘤細胞產(chǎn)生和釋放，如甲胎蛋白AFP肝癌的早期篩查的重要指標。76 .膜結(jié)合型抗原：疏松結(jié)合在細

15、胞膜表面，易脫落，如癌胚抗原CEA消化道腫瘤。77 .分化抗原：機體組織細胞發(fā)育過程中正常的表達分子。惡性腫瘤細胞分化異常，停滯于細胞發(fā)育的某個幼稚階段。又稱為組織特異性抗原78 .腫瘤標志物（TM）:是指在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中，由惡性腫瘤細胞產(chǎn)生的，或是機體對腫瘤的刺激反應(yīng)而產(chǎn)生的物質(zhì)，并能反映腫瘤存在和生長的一類物質(zhì)。存在于腫瘤患者的組織、體液和排泄物中，能夠用免疫學、生物學及化學的方法檢測。79 .嗜異性抗體：可導致在無抗原的情況下，出現(xiàn)腫瘤：標志物濃度增高的假象。嗜異性抗體可出現(xiàn)在曾被鼠或?qū)櫸镆н^的人，以及使用過動物免疫劑（如單克隆抗體）治療過的人。80 .移植：將自體或異體的正常細胞

16、、組織或者器官置換病變或功能缺損的細胞、組織或者器官，以維持和重建機體生理功能的過程。81 .組織相容性：不同個體間進行組織或器官移植時，供者與受者雙方相互接受的程度。82 .移植排斥反應(yīng)：由于供受者間組織不相容，移植物與受者免疫系統(tǒng)相互作用引起免疫應(yīng)答，導致移植物或受者組織損傷。83 .同種異基因移植/同種異型移植：移植物來自同種，但是遺傳基因型有差異的另一個體，一般均會引起不同程度的排斥反應(yīng)，其排斥反應(yīng)強度與供受者之間的遺傳背景差異呈正相關(guān)。84 .直接識別：不需要抗原的加工過程，受者T細胞直接識別供者APC表面的抗原肽-同種異分子復(fù)合物。85.間接識別：同種異型MHO子作為常規(guī)白蛋白質(zhì)，

17、被受者APC加工遞呈，為T細胞識86.移植物抗宿主反應(yīng)(GVHR:移植物中淋E(主要是T細胞)識別宿主抗原而致敏、增攵直接或間接攻擊受者靶組織而發(fā)生的一種排斥反應(yīng)。里MHC光物質(zhì)最大吸收光語最大發(fā)射光譜異觴酸熒光素(FITC)490-495nm520530眄黃續(xù)&FAT.熒光偏振免疫測定哨叁羅丹明(儂00)別。570575nm595x600皿橙紅色FITC的襯比染色或雙尿記FAT喙牌異硫鼠酸羅丹朝籟ITG550run620rl叫橙紅色FITC的襯比染色或雙標ifiFAT掰峰白(PE)4905&0皿595皿紅色雙標記FAT、流式細胞術(shù)7-氨基4-甲基香豆素354師43所叱藍色雙標

18、記或多標記FAT酸歲螫合物340m613nli1時間分辨熒光免疫覆定87 .衰老免疫：免疫功能隨著增齡而逐步發(fā)生減退與紊亂的現(xiàn)象，是由基因控制的免疫系統(tǒng)循序漸進的自然退化過程；88 .免疫性不孕：是由針對生殖系統(tǒng)抗原的自身免疫或同種異體免疫引起的不孕，例如針對精子、精漿、卵子透明帶等抗原產(chǎn)生的免疫應(yīng)答。RIAIRMA標記物抗原抗體原理競爭性結(jié)合非競爭結(jié)合反應(yīng)體系A(chǔ)g*、Ag、Ab固相Ab、Ab*、Ag反應(yīng)動力學慢快靈敏度相對低高檢測范圍窄寬12數(shù)量級特異性差(PcAb)優(yōu)(McAb)標準曲線結(jié)合率與測值成結(jié)合率與測值成反比正比待測抗原大小分子二抗原決定簇2.常用的熒光物質(zhì)有哪些?1.IRMA與

19、RIA比較3.熒光免疫技術(shù)有哪些類型？1 .熒光抗體技術(shù)：對抗原、抗體進行組織、細胞內(nèi)定位鑒定熒光顯微鏡技術(shù)激光共聚焦顯微鏡技術(shù)流式細胞術(shù)等2 .熒光免疫測定：對體液標本中抗原或抗體進行定量檢測時間分辨熒光免疫測定技術(shù)熒光偏振熒光免疫測定熒光酶免疫分析流式熒光技術(shù)等。4 .免疫熒光顯微鏡技術(shù)，技術(shù)類型(1)熒光素標記抗體與切片中組織細胞抗原反應(yīng)，洗洗滌分離后，熒光顯微鏡下觀察呈現(xiàn)特異熒光的抗原抗體復(fù)合物及其部位，對組織細胞抗原進行定性和定位檢測，或?qū)ψ陨砜贵w進行定性和滴度測定。(2)技術(shù)類型2.間接法：特異性抗體與相應(yīng)抗原反應(yīng)，熒光素標記的抗抗體再與第一抗體結(jié)合。1.直接法：熒光素標記的特異性

20、抗體直接與相應(yīng)抗原反應(yīng)3 .補體結(jié)合法：用熒光素標記抗補體抗體，待抗原與抗體結(jié)合后加入補體與抗原抗體復(fù)合物反應(yīng)，再加熒光素抗補體抗體，通過熒光現(xiàn)象檢查抗原或抗體4 .雙標記法：兩種熒光素分別標記的兩種不同的特異性抗體，與同一標本反應(yīng)，熒光顯微鏡觀察兩種顏色熒光。5 .時間分辨熒光免疫測定的原理是什么？有哪些方法類型？(1)原理1 .普通檢測樣品中仍然存在一定的背景熒光。系元素的激發(fā)光范圍較寬，發(fā)射范圍較窄，而且熒光壽命長。2 .用錦1系元素螯合物標記Ag或Ab,Ag與Ab反應(yīng)后，利用時間分辨熒光分析儀檢測標本中相應(yīng)的Ag或Abo(2)方法類型1 .雙抗體夾心法：固相抗體和Eu3+標記抗體與待檢

21、抗原結(jié)合，形成固相抗體-待檢抗原-Eu3+標記抗體復(fù)合物，酸性增強液下，Eu3+解離，340nm激發(fā)光下發(fā)射613nm熒光。2 .固相抗體競爭法3 .固相抗原競爭法4 .間接法5 .捕獲法6 .熒光偏振免疫測定(FPIA)的原理一種均相競爭熒光免疫分析方法。待測的小分子抗原和熒光標記的小分子抗原(恒量)與相應(yīng)抗體(恒量)競爭結(jié)合。1.AgF分子小，轉(zhuǎn)動速度快，偏振熒光弱3 .若待檢抗原多，則AgF-Ab少，AgF多，偏振熒光弱4 .待檢抗原含量與偏振熒光強度成反比7.熒光免疫測定有何應(yīng)用？1 .時間分辨熒光免疫測定：蛋白質(zhì)、激素、藥物、腫瘤標記物、病原體抗原/抗體等2 .熒光偏振免疫測定：(小

22、分子)藥物、維生素、激素、常規(guī)生化項目等3 .熒光酶免疫測定：病毒抗體、細菌和毒素抗原、激素、腫瘤標志物等8 .酶免疫技術(shù)的要點？(1)以酶標記物作為主要試劑，將抗原抗體反應(yīng)的特異性和酶催化底物的高效性相結(jié)合的一種免疫檢測技術(shù)。(2)酶免疫技術(shù)的分類1 .酶免疫組織化學技術(shù)EIH2 .酶免疫測定技術(shù)EIA均相酶免疫測定異相酶免疫測定，固相酶免疫測定-ELISA液相酶免疫測定9 .常用的標記酶和底物1 .辣根過氧化物酶HRP分子量小，標記簡單，穩(wěn)定，廉價相應(yīng)底物鄰苯二胺OPD產(chǎn)物黃色，不穩(wěn)定四甲基聯(lián)苯胺TMB產(chǎn)物藍色，加酸后變藍色；2 .AgF-Ab分子大，轉(zhuǎn)動速度慢，偏振熒光強ELISA中應(yīng)用

23、最廣泛2.堿性磷酸酶AP檢測大分子抗原：乙型肝炎表面抗原、甲胎蛋白、分子量大，靈敏度高相應(yīng)底物對硝基苯磷酸鹽PNP產(chǎn)物黃色，較穩(wěn)定3 .3半乳糖昔酶不易受內(nèi)源性酶的干擾，常用于均相酶免疫測定。相應(yīng)底物4-MUG常用于化學發(fā)光測定10.均相酶免疫測定和異相酶免疫測定的區(qū)別？（1）均相酶免疫測定1 .結(jié)合標記物的酶活性失活2 .不需分離結(jié)合標記物和游離標記物3 .測定游離標記物的酶活性（檢測信號與待測抗原含量成反比）（2）異相酶免疫測定1 .結(jié)合標記物的酶活性沒有發(fā)生變化2 .需要分離結(jié)合標記物和游離標記物3 .測定結(jié)合標記物的酶活性（檢測信號與待測抗原含量成正比）11.酶聯(lián)免疫吸附試驗的原理（E

24、LISA）?（1）基本原理：1 .使抗體或者抗原結(jié)合到酶蛋白分子上，制備成酶標記抗體或抗原（酶聯(lián)）；2 .在不損傷抗原或抗體免疫活性的條件下，預(yù)先將其結(jié)合到固相載體表面（吸附）。（2）必要試劑：1 .吸附于固相的抗原或抗體；2 .酶聯(lián)形成的標記物；3 .顯色的底物。12.ELISA的分類有哪些？1 .雙抗體夾心法HC的2 .間接法常用于HCM體、HIV抗體和梅毒螺旋體抗體等測定3 .競爭法用于抗原和半抗原的定量檢測，以及抗體的檢測eg.藥物、激素等4 .捕獲法用于測定血清中IgM類抗病原體抗體eg.病原體急性感染診斷中的IgM型抗體甲型肝炎HAV-IgM抗體乙型肝炎病毒核心HBc-IgM抗體1

25、3.ELISA的檢驗流程（雙抗體夾心法）1 .已知抗體包被固相載體2 .加入待測抗原或標準品（抗原抗體復(fù)合物）3 .洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)4 .加入酶標抗體，與固相中抗原結(jié)合，形成包被抗體-抗原-酶標抗體（雙抗體夾心）5洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)6加入底物顯色，確定抗原的含量14間接法1 .已知抗原包被固相載體2 .加入待測抗體（包被抗原-待檢抗體復(fù)合物）3 .洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)4 .加入酶標二抗，與固相中待測抗體結(jié)合形成包被抗原-待測抗體-酶標二抗復(fù)合物5 .洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)6 .加入底物顯色，確定抗體的含量15.（電轉(zhuǎn)移）免疫印跡試驗（westernblot）1 .蛋白樣品的提取2 .蛋白樣品的定量

26、3 .蛋白樣品的變性4 .SDS-PAGE電泳分離蛋白質(zhì)5 .蛋白質(zhì)區(qū)帶轉(zhuǎn)印（電轉(zhuǎn)移到膜載體上）6 .免疫反應(yīng)與顯色（ECD16 .生物素-親合素放大系統(tǒng)（BAS（1）基本類型及原理1：以游離親和素為橋聯(lián)，分別連接生物素化大分子反應(yīng)體系和標記生物素BAB法：橋聯(lián)親和素-生物素法ABC法：親和素-生物素化復(fù)合物法2:以標記親和素聯(lián)接生物素化大分子反應(yīng)體系BA法：標記親和素-生物素法方法反應(yīng)層次直接法BAAg-(Ab-B)-A*BABABCAg-(Ab-B)-A-B*Ag-(Ab-B)-AB*C間接法BAAg-Ab1-(Ab2-B)-A*BABAg-Abh(Ab2-B)-A-B*ABCAg-Ab1

27、-(Ab2-B)-ABX17 .均相酶免疫測定1 .酶放大免疫測定技術(shù)EMIT半抗原與酶結(jié)合成酶標半抗原，保留半抗原和酶的生物活性。當酶標半抗原與抗體結(jié)合后，半抗原分子上的酶蛋白與抗體密切接觸，使酶的活性中心受到影響，酶的活性受到抑制。測定時標本中的半抗原、酶標半抗原與抗體競爭性結(jié)合，標本中的半抗原含量越高，加底物后其OD©越高。2 .克隆酶供體免疫分析CEDIA標本中的抗原和ED標記的抗原與特異性抗體競爭結(jié)合18.膠體金免疫檢測技術(shù)1 .斑點免疫金滲濾試驗在以硝酸纖維素膜為載體并包被了抗原或抗體的滲濾裝置中，依次滴加標本、免疫金及洗滌液后進行檢測，陽性反應(yīng)在膜上呈現(xiàn)紅色斑點。2 .

28、斑點免疫金層析試驗將膠體金標記技術(shù)和蛋白質(zhì)層析技術(shù)相結(jié)合的以硝酸纖維素膜為載體的快速的固相膜免疫分析技術(shù)。19.膠體金免疫組織化學技術(shù)1 .免疫金電鏡染色技術(shù)膠體金標記物與饃網(wǎng)上待檢標本的相應(yīng)蛋白質(zhì)發(fā)生結(jié)合反應(yīng)，從而對細胞膜上或細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)進行定性與定位。2 .免疫金（銀）光鏡染色技術(shù)先進行免疫膠體金染色,一便巧體金顆粒沉積在組織細胞抗原所在位置上，達后進行銀顯色。20 .化學發(fā)光劑或發(fā)光底物：1 .在化學發(fā)光反應(yīng)中參與能量轉(zhuǎn)移，并最終以發(fā)射光子的形式釋放能量的化合物。分類常用的酶發(fā)光底物酶促反應(yīng)發(fā)光劑HRP魯米諾HPAAPAMPPD4-MUP2 .化學發(fā)光劑的：B與F分離反應(yīng)化學發(fā)光酶免疫

29、1.磁顆粒分魯米諾、HQ分析離法和化學發(fā)光2.微粒子捕增強劑獲法3.包被珠分離法直接化學發(fā)光免磁顆粒分離加入H2Q和疫分析NaOH使成堿性環(huán)境，電磁場中洗滌電化學發(fā)光免疫磁顆粒分離弓1人TPA緩分析法沖液直接化學發(fā)光劑口丫咤酯電化學發(fā)光劑電子供體為：二丙胺（TPQ三聯(lián)毗咤釘21.化學發(fā)光免疫分析的類型1 .化學發(fā)光酶免疫分析用參與催化某一發(fā)光反應(yīng)的酶來標記抗原或者抗體，在抗原抗體反應(yīng)后，加入底物，通過酶催化底物發(fā)光反應(yīng)。（熒光酶免疫測定技術(shù)，化學發(fā)光酶免疫測定技術(shù)）2 .直接化學發(fā)光免疫分析直接化學發(fā)光使用口丫咤酯作為標記物，無需附加催化齊JoAE氧化直接發(fā)光，3 .電化學發(fā)光免疫分析三聯(lián)毗咤

30、釘標記抗體（抗原），以三丙胺（TPA）為電子供體，在電場中因電子轉(zhuǎn)移而發(fā)生特異性化學發(fā)光反應(yīng)，22 .化學發(fā)光免疫分析23 .免疫組織化學1 .酶免疫組化2 .非標記抗體酶免疫組化3 .親合組織化學技術(shù)4 .免疫電鏡技術(shù)24 .酶免疫組化1 .直接染色法熒光素直接標記在特異性抗體（Ab1）2 .間接染色法熒光素直接標記在特異性抗體（Ab2）第二抗體針對第一抗體種屬特異性的表位（如羊抗鼠Ig或羊抗人Ig）25 .非標記抗體酶免疫組化1 .酶橋法2 .過氧化物酶-抗過氧化物酶（PAP法3 .雙橋PAP法4 .堿性磷酸酶-抗堿性磷酸酶（APAAP法26 .親合組織化學技術(shù)1 .親合素一生物素一過氧化

31、物酶復(fù)合物技術(shù)（ABC）2 .葡萄球菌蛋白A技術(shù)3 .凝集素組織化學技術(shù)27 .免疫電鏡技術(shù)鐵蛋白標記酶標記膠體金標記28 .免疫細胞的分離與純化1 .白細胞的分離自然沉降法（血漿、白細胞、紅細胞）聚合物加速沉降法：明膠、右旋糖酊2 .外周血單個核細胞（PBMC的分離聚蔗糖（Ficoll）泛影葡胺分層液法3.淋巴細胞和單核細胞的分離與純化4 .淋巴細胞亞群的分離5 .細胞活力的檢測29 .淋巴細胞和單核細胞的分離1 .紅細胞的去除：低滲0.83%NH4Cl處理2 .血小板的去除：離心洗滌；FCS3 .單核細胞的去除：黏附去除法（培養(yǎng)；凝膠柱）；默基鐵粉吞噬法（Ficoll離心；磁鐵）4 .Pe

32、rcoll離心法純化淋巴細胞與單核細胞30.淋巴細胞亞群的分離1 .E花環(huán)分離法2 .尼龍棉柱分離法3 .補體細胞毒法4 .親和板結(jié)合分離法5 .免疫磁珠分離法6 .細胞分選術(shù)31 .T細胞數(shù)量檢測（一）根據(jù)T細胞表面CD分子檢測1 .間接熒光免疫法2 .免疫組織化學法：酶標、金標法3 .微量細胞毒試驗4 .花環(huán)技術(shù)：E花環(huán)、葡萄球菌花環(huán)法、抗體致敏細胞花環(huán)法（二）根據(jù)T細胞受體檢測可溶性抗原肽-MHC四聚體復(fù)合法：Tetramer5 2.B細胞數(shù)量檢測1 .mIg的檢測：酶免疫法、熒光免疫法2 .CD抗原檢測酶免疫組織化學法間接熒光免疫法流式細胞術(shù)3 .受體檢測（FcRCR-）EA花環(huán)EAC

33、花環(huán)小鼠紅細胞花環(huán)33 .T細胞功能檢測試驗T細胞增殖試驗形態(tài)學法3H-TdR摻入法MTT比色法CFSE標記染色法CTL介導的細胞毒試驗形態(tài)學檢查法51Cr釋放法CTL分泌酶類檢測細胞凋亡檢測法T細胞分泌功能檢測檢測T細胞功能的體內(nèi)試驗34 .B細胞功能檢測B細胞增殖試驗（同T）ELISPOT檢測抗體分泌細胞溶血空斑試驗體內(nèi)檢測（抗體）35.流式細胞術(shù)的應(yīng)用1 .淋巴細胞及其亞群的分析1 .體液中細胞因子檢測2 .白血病免疫分型3 .AIDS:CD4數(shù)目<200個/uL%、于14%4 .自身免疫性疾?。篐LA-B27抗原的表達與強直性脊椎炎有著高度相關(guān)性，超過90%勺強直性脊椎炎患者其H

34、LA-B27抗原表達為陽性。5 .移植免疫36 .細胞因子在作用特點1、旁分泌、自分泌性2、多源與同源性3、高效性4、多效性5、豐余性6、協(xié)同性7、拮抗性8、網(wǎng)絡(luò)性37 .細胞因子檢測的特點免疫原性較弱樣品含量低樣品具有時效性生物效應(yīng)特異性差38 .細胞因子的檢測方法(1)生物學檢測法：將細胞因子與指示系統(tǒng)如(細胞)相互作用，指示細胞發(fā)生增殖、死亡或分泌蛋白等變化來顯示細胞因子的功能。細胞增殖法(IL-2、IL-6)靶細胞殺傷或抑制法(TNF細胞病變抑制法(IFN)趨化活性測定法(趨化因子)(2)免疫學檢測法雙抗體夾心ELISA放射免疫分析法抗體芯片酶聯(lián)免疫斑點實驗(ELISPOT)2.細胞內(nèi)

35、細胞因子的檢測(3)分子生物學檢測1 .DNA水平的檢測Southern印跡雜交：不常用、DNA/DNAPC濟口原位PCR熒光定量PCRDN際列測定2 .mRNA表達水平的測定Northernblot原位雜交Realtime-PCR(4)細胞因子受體檢測技術(shù)一、膜結(jié)合受體的測定1、免疫組化2、FCM3、活細胞吸收試驗二、可溶性細胞因子受體的檢測1、ELISA2、RIA39.白細胞分化抗原測定1 .熒光免疫技術(shù)免疫電鏡共聚焦顯微鏡流式細胞儀2 .免疫細胞化學法APAAPW免疫橋聯(lián)法ABC染色法3 .抗體致敏細胞花環(huán)法40.粘附分子的測定(1)細胞表面粘附分子的測定1 .酶免疫組織化學方法2 .熒

36、光免疫組織化學方法3 .酶免疫測定4 .時間分辨熒光免疫測定法5 .流式細胞術(shù)(2)可溶性黏附分子的測定方法1、ELISA2、RIA3、化學發(fā)光法、時間分辨熒光測定法40.免疫檢驗檢測標本的質(zhì)量控制1 .標本類型及采集容器2 .標本采集時間及患者準備3 .內(nèi)源性干擾因素類風濕因子、補體、異嗜性抗體、治療性抗體、自身抗體、溶菌酶、磷脂、藥物小分子、總蛋白濃度等4 .外源性干擾因素溶血、細菌污染、標本貯存時間過長、凝固不全、反復(fù)凍融41.1 型超敏反應(yīng)(1)1型超敏反應(yīng)發(fā)生機制1 .特異性igE2 .肥大細胞、嗜堿性粒細胞、嗜酸性粒細胞3 .組胺、白三烯、前列腺素、血小板活化因子(2)常見I型超敏

37、反應(yīng)性疾病1 .全身性超敏反應(yīng)藥物過敏性休克血清過敏性休克2 .局部性超敏反應(yīng)呼吸道過敏反應(yīng)(過敏性鼻炎、支氣管哮喘)消化道過敏反應(yīng)皮膚過敏反應(yīng)3 3)I型超敏反應(yīng)免疫學檢測1 .過敏原皮膚試驗2 .血清總IgE的測定：放射免疫吸附試驗(RIST)ELISA化學發(fā)光免疫分析3 .特異性IgE的測定放射免疫吸附試驗(RIST) ELISA ImmunoCap原理：在CAP上加待測血清，加入3-Gal標記的抗人IgE(與IgE結(jié)合)，酶作用于隨后加入的底物4-MUG使之產(chǎn)生熒光。4 .吸入變應(yīng)原過篩實驗(phadiatop)5嗜酸、嗜堿性粒細胞計數(shù)42.II型超敏反應(yīng)(1) II型超敏反應(yīng)發(fā)生機制

38、1 .靶細胞抗原，IgG和IgM類抗體2 .細胞溶解(補體-細胞毒作用)3 .吞噬作用(抗體、補體調(diào)理)4 .ADCC作用5 .刺激或抑制靶細胞(2)常見II型超敏反應(yīng)性疾病1 .輸血反應(yīng)2 .新生兒溶血癥3 .藥物過敏性血細胞減少癥4 .自身免疫性溶血性貧血5 .甲狀腺功能亢進6 .重癥肌無力7.肺出血腎炎綜合征(3)II型超敏反應(yīng)免疫學檢測1 .Rh抗體的檢測一酶介質(zhì)法2 .抗球蛋白檢測(Coombs試驗)3 .熒光免疫I43.m型超敏反應(yīng)(1)III型超敏反應(yīng)發(fā)生機制1 .免疫復(fù)合物2 .中性粒細胞、堿性粒細胞、肥大細胞、血小板(2)常見III型超敏反應(yīng)性疾病1 .局部免疫復(fù)合物病Art

39、hus反應(yīng)吸入性III型(農(nóng)民肺)2 .全身免疫復(fù)合物病血清病鏈球菌感染后腎小球腎炎類風濕關(guān)節(jié)炎系統(tǒng)性紅斑狼瘡3 3)III型超敏反應(yīng)免疫學檢測1 .循環(huán)免疫復(fù)合物2 .抗原特異性3 .非抗原特異性物理法PEG去分子受體法C1q結(jié)合試驗，C3抗球蛋白法一mRF固相抑制試驗細胞法Raji細胞試驗44.IV型超敏反應(yīng)(1)IV型超敏反應(yīng)發(fā)生機制1 .CD4+Th1(TDTH)細胞2 .CD8+Tc(CTL)細胞(2)常見IV型超敏反應(yīng)性疾病1 .感染性超敏反應(yīng)2 .接觸性皮炎3 .移植排斥反應(yīng)4 .自身免疫病(3)IV型超敏反應(yīng)免疫學檢測1 .體內(nèi)：結(jié)核菌素皮膚試驗斑貼試驗斑貼試驗2 .體外：淋巴

40、細胞增生45 .自身免疫病的基本特征1 .病因不明，部分多發(fā)于女性，且具遺傳性。2 .高效價的自身抗體和(或)自身應(yīng)答性T細胞。3 .反復(fù)發(fā)作和慢性遷延，與自身免疫應(yīng)答強度密切相關(guān)4 .腎上腺皮質(zhì)激素等免疫抑制可緩解5 .其他自身免疫病同時存在。6 .可復(fù)制出相似的動物模型，用患者血清或致敏淋巴細胞可使疾病被動轉(zhuǎn)移等。46.自身免疫病的發(fā)生機制(1)自身抗原方面的因素1 .隱蔽抗原的釋放(腦、眼晶體、精子等)2 .自身抗原的改變(RF)3 .共同抗原一一分子模擬4 .表位擴展(2)免疫調(diào)節(jié)機制紊亂1 .多克隆刺激劑的旁路活化2 .Th1/Th2細胞功能失調(diào)3 .MHCII分子表達異常1.淋巴細

41、胞的檢測4 .淋巴細胞逃避“克隆丟失”5 .淋巴細胞突變6 .Fas/FasL表達異常(3)生理因素：年齡、性別(4)遺傳因素:AID與MH盅因型相關(guān)47 .自身免疫病的免疫損傷機制(1)自身抗體一II型超敏反應(yīng)1 .細胞表面抗原的自身抗體血小板減少性紫瘢溶血性貧血2 .細胞表面受體的自身抗體模擬配體：甲狀腺功能亢進癥競爭性阻斷：胰島素耐受型糖尿病介導受體內(nèi)化與降解：重癥肌無力(2)免疫復(fù)合物一III型超敏反應(yīng)1 .系統(tǒng)性紅斑狼瘡(3)自身反應(yīng)性T細胞一IV型超敏反應(yīng)1 .胰島素依賴性糖尿病(IDDMD2 .腦脊髓炎(EAE48 .自身免疫病的檢驗(1)自身抗體檢測1 .抗核抗體(ANA：間接

42、免疫熒光法抗DNAbt體：抗Sm抗體一SLE抗ENAfet體：抗dsDNAfet體一SLE,免疫印跡/斑點酶免疫法抗組蛋白抗體2 .類風濕因子(RF):IgM-RF,抗角蛋白抗體，RIA,ELISA,免疫濁度自身抗體3 .抗中性粒細胞胞漿抗體：間接免疫熒光法4 .其它自身抗體(2)其它檢測2 .狼瘡細胞試驗3 .免疫球蛋白、補體和免疫復(fù)合物的檢測4 .細胞因子的檢測49 .單克隆免疫球蛋白病的免疫學檢驗1 .血清蛋白區(qū)帶電泳2 .免疫電泳3 .免疫固定電泳4 .血清免疫球蛋白定量5 .本-周蛋白的檢測6 .冷球蛋白的檢測50 .MM主要免疫學特征血清中出現(xiàn)大量的M蛋白；血清中正常免疫球蛋白減少

43、50%以上；骨髓中不成熟漿細胞增多或組織活檢證實有漿細胞瘤；原發(fā)性溶骨損害或廣泛性骨質(zhì)疏松。51 .原發(fā)性巨球蛋白血癥免疫學特征血清中單克隆IgM明顯增高，主要為19S五聚體,含量一般大于10g/L;尿中有本-周蛋白，常為K;血清中黏度增加4,發(fā)生高黏滯綜合癥；正細胞正色素性貧血，ESR增快；血清呈膠凍狀難以分離，電泳時難以泳動，集中于原點是該病的電泳特征；骨髓中漿細胞樣淋巴細胞浸潤。52 .AIDS的致病機制1 .侵入的宿主細胞，主要CD4+T細胞。2 .HIV通過gp120與細胞表面的CD4分子高親和性結(jié)合，同時也與表達在靶細胞表面的趨化因子受體(CXCR東口CXCR5結(jié)合，再由gp41介

44、導病毒包膜與細胞膜融合，使病毒得以進入細胞，并在細胞內(nèi)大量復(fù)制，最終導致細胞死亡。53.AIDS的免疫學特征1 .CD4+T細胞數(shù)量顯著減少、功能嚴重障礙，CD4+/CD8+比例倒置，彳氐于0.5以下；2 .T細胞功能障礙，Th1細胞與Th2細胞平衡失調(diào)3 .抗原提呈細胞功能降低4 .B細胞功能異常，表現(xiàn)為多克隆激活和產(chǎn)生多種自身抗體。54.機體抗感染免疫的機制1 .抗病毒的體液免疫中和作用：局部sIgA、循環(huán)中和抗體促進病毒被吞噬或裂解裂解病毒感染細胞：ADCCCDC2 .抗病毒的細胞免疫NK細胞CTLTDTHIFN-丫、IL-2等155.感染的類型1 .胞內(nèi)和胞外感染與免疫學檢測胞外感染：

45、體液免疫胞內(nèi)感染：細胞免疫(病毒、衣原體、立克次體)2 .微生物感染的模式與免疫學檢測急性感染：IgM及病原檢測慢性感染:IgG隱伏感染：IgG(HSV、EBV-)56 .乙肝病毒的檢測指標1 .HBsAg：判斷HBV感染的指標之一，刺激機體產(chǎn)生保護性抗體即抗-HBs2 .HBsAb:是一種保護性抗體，是機體感染或接種3 .HBeAg：是乙肝傳染性的標志之一4 .HBeAb：非中和抗體，無保護作用5 .HBcAg：是乙肝病毒復(fù)制的標志6 .HBcAb:非中和抗體，無保護作用，IgM、IgA和IgG三型，過去感染，但無法檢出抗HBs；低水平慢性感染7 .pre-S1及其抗體：提示復(fù)制活躍，具有較強的傳染性，抗-Pre-S1為中和性