5-6 其它類成分中藥制劑的分析

1、1第六節(jié)第六節(jié) 木脂素類成分分析木脂素類成分分析第七節(jié)第七節(jié) 其它類型成分分析其它類型成分分析熟悉熟悉木脂素類、木脂素類、有機酸類、環(huán)烯醚萜類、香有機酸類、環(huán)烯醚萜類、香豆素類、單萜類及二萜類成分、多糖的理化豆素類、單萜類及二萜類成分、多糖的理化性質(zhì)性質(zhì) 掌握掌握木脂素類、木脂素類、有有機酸類、機酸類、環(huán)環(huán)烯醚萜類、香烯醚萜類、香豆素類、單萜類及二萜類成分、多糖豆素類、單萜類及二萜類成分、多糖的中藥的中藥制劑定性鑒別、含量測定的原理和方法選擇制劑定性鑒別、含量測定的原理和方法選擇以及供試液的提取純化方法以及供試液的提取純化方法 2第六節(jié) 木脂素類成分分析（一）概述（了解）（一）概述（了解）l木

2、脂素：兩分子苯丙素衍生物（木脂素：兩分子苯丙素衍生物（C6-C3）聚合而）聚合而成的天然化合物。成的天然化合物。l分布：存在于植物的木部和樹脂中，如厚樸、五分布：存在于植物的木部和樹脂中，如厚樸、五味子、連翹、牛蒡子、細辛等的主要化學(xué)成分味子、連翹、牛蒡子、細辛等的主要化學(xué)成分l結(jié)構(gòu)：母核常具有醇基、酚羥基、亞甲二氧基、結(jié)構(gòu)：母核常具有醇基、酚羥基、亞甲二氧基、甲氧基、羧基和內(nèi)酯結(jié)構(gòu)甲氧基、羧基和內(nèi)酯結(jié)構(gòu) 1234567891234567893（二）理化性質(zhì)l功能團反應(yīng)功能團反應(yīng)l酚酚-OH：FeCl3試劑，重氮化試劑試劑，重氮化試劑l亞甲二氧基：亞甲二氧基：Labat試劑試劑-沒食子酸濃硫酸

3、沒食子酸濃硫酸lEcgrine試劑：變色酸試劑：變色酸-濃硫酸濃硫酸4（二）理化性質(zhì)性狀：木脂素多為無色結(jié)晶，少數(shù)能升華性狀：木脂素多為無色結(jié)晶，少數(shù)能升華溶解度：游離木脂素溶于乙醇、氯仿、苯等溶劑，溶解度：游離木脂素溶于乙醇、氯仿、苯等溶劑，難溶于水。木脂素苷水溶性增加。難溶于水。木脂素苷水溶性增加?；瘜W(xué)性質(zhì)：具光學(xué)活性，遇酸堿易發(fā)生異構(gòu)化作用化學(xué)性質(zhì)：具光學(xué)活性，遇酸堿易發(fā)生異構(gòu)化作用 5OOOOHOOCH3OCH3ABC山荷葉素（A）式山荷葉素（B）式OOHOH3COABCH3COOOKMnO4/KOH(1)KMnO4/Me2O(2)CH2N2OOCOOHH3COH3COOOCOOMeO

4、（二）理化性質(zhì)理化性質(zhì)：理化性質(zhì)：氧化反應(yīng)：劇烈氧化氧化反應(yīng)：劇烈氧化-堿性堿性KMnO4/H2O、NaBrO/H2O；緩和氧化緩和氧化-中性中性KMnO4/丙酮丙酮 6（二）理化性質(zhì)l提取與分離：提取與分離：l提?。河坞x木脂素提?。河坞x木脂素-石油醚、丙酮、乙醇等溶劑石油醚、丙酮、乙醇等溶劑l 木脂素苷木脂素苷-苷類提取方法苷類提取方法l 木脂內(nèi)酯木脂內(nèi)酯-堿溶酸沉法堿溶酸沉法l分離：溶劑萃取法、分級沉淀法、重結(jié)晶、色譜分離：溶劑萃取法、分級沉淀法、重結(jié)晶、色譜法等法等 7（三）定性鑒別l色譜檢識：薄層色譜色譜檢識：薄層色譜l 吸附劑：硅膠吸附劑：硅膠l 展開劑：氯仿、氯仿展開劑：氯仿、氯仿

5、- -甲醇、乙酸乙酯甲醇、乙酸乙酯- -甲醇甲醇等等l 顯色劑：茴香醛濃硫酸，顯色劑：茴香醛濃硫酸，110110加熱加熱5min5minl 5% 5%或或10%10%磷鉬酸，磷鉬酸，120120加熱至斑點出加熱至斑點出現(xiàn)現(xiàn)l 10%10%硫酸，硫酸，110110加熱加熱5min5minl 三氯化銻，三氯化銻，100100加熱加熱10min/UV10min/UVl 碘蒸氣，熏碘蒸氣，熏/UV/UV8（四）含量測定方法（四）含量測定方法總木脂素成分：總木脂素成分：1 1、比色法、比色法l酚類：三氯化鐵試劑反應(yīng)，重氮化試劑反應(yīng)酚類：三氯化鐵試劑反應(yīng)，重氮化試劑反應(yīng)lEcgrineEcgrine（變色

6、酸（變色酸濃硫酸）反應(yīng)濃硫酸）反應(yīng)lLabat（沒食子酸（沒食子酸/濃硫酸）反應(yīng)濃硫酸）反應(yīng)2 2、二階導(dǎo)數(shù)光譜法、二階導(dǎo)數(shù)光譜法 3 3、柱色譜比色法、柱色譜比色法9（四）含量測定方法（四）含量測定方法 單體木脂素成分：單體木脂素成分：1 1、薄層色譜掃描法、薄層色譜掃描法2 2、分光光度法、分光光度法3 3、高效液相色譜法、高效液相色譜法 10（五）應(yīng)用實例（五）應(yīng)用實例1、香砂養(yǎng)胃丸中厚樸酚、和厚樸酚的含量測、香砂養(yǎng)胃丸中厚樸酚、和厚樸酚的含量測定定11第七節(jié)第七節(jié) 其它類型成分分析其它類型成分分析 一、有機酸類成分分析一、有機酸類成分分析 （一）概述（一）概述l分布：廣泛分布于中藥中，

7、并參與機體的代謝，分布：廣泛分布于中藥中，并參與機體的代謝，具有多種生理活性，大多與鉀、鈉、鈣等陽離子或具有多種生理活性，大多與鉀、鈉、鈣等陽離子或生物堿結(jié)合成鹽或酯存在生物堿結(jié)合成鹽或酯存在l生理活性：生理活性：蜂王酸蜂王酸- - 王漿中提取，提高免疫力王漿中提取，提高免疫力阿魏酸阿魏酸- - 抑制血小板聚集抑制血小板聚集齊墩果酸齊墩果酸- - 防治脂肪肝，抗動脈硬化防治脂肪肝，抗動脈硬化綠原酸綠原酸- - 抑菌作用（茵陳）抑菌作用（茵陳）油酸油酸-具有抗癌作用，是鴉膽子有效成分之一具有抗癌作用，是鴉膽子有效成分之一12一、有機酸類成分分析一、有機酸類成分分析 （一）概述（一）概述l結(jié)構(gòu)特征

8、：含羧基結(jié)構(gòu)特征：含羧基- - 與顯色劑產(chǎn)生顏色反應(yīng)與顯色劑產(chǎn)生顏色反應(yīng)用于鑒別和含量測定用于鑒別和含量測定l溶解性：游離有機酸易溶于有機溶劑難溶于水，溶解性：游離有機酸易溶于有機溶劑難溶于水，低級脂肪酸一般易溶于水、乙醇等難溶于親脂性有低級脂肪酸一般易溶于水、乙醇等難溶于親脂性有機溶劑，高級脂肪酸及芳香酸較易溶于有機溶劑而機溶劑，高級脂肪酸及芳香酸較易溶于有機溶劑而難溶于水；有機酸鹽易溶于水難溶于有機溶劑。難溶于水；有機酸鹽易溶于水難溶于有機溶劑。l檢識方法：檢識方法：1.1.與氫氧化鋇、氫氧化鈣生成鋇鹽和鈣鹽沉淀；與與氫氧化鋇、氫氧化鈣生成鋇鹽和鈣鹽沉淀；與醋酸鉛與堿式醋酸鉛生成鉛鹽沉淀。

9、醋酸鉛與堿式醋酸鉛生成鉛鹽沉淀。2.2.薄層色譜薄層色譜13一一、有機酸類成分分析、有機酸類成分分析 （一）概述（一）概述l提取和分離：一般先酸化使有機酸游離，再選擇提取和分離：一般先酸化使有機酸游離，再選擇合適的有機溶劑提取合適的有機溶劑提取 14一一、有機酸類成分分析、有機酸類成分分析 （一）概述（一）概述l提取和分離：一般先酸化使有機酸游離，再選擇提取和分離：一般先酸化使有機酸游離，再選擇合適的有機溶劑提取合適的有機溶劑提取 15人參蜂王漿含蜂王酸人參蜂王漿含蜂王酸1.4%1.4%以上以上含量測定方法：薄層間接和直接定量法、高含量測定方法：薄層間接和直接定量法、高效液相色譜法和氣相色譜法

10、效液相色譜法和氣相色譜法例：例：（1 1）薄層間接定量法：樣品預(yù)處理）薄層間接定量法：樣品預(yù)處理有機有機溶劑提取溶劑提取聚酰胺薄膜上點樣聚酰胺薄膜上點樣展開展開羅丹明羅丹明B B染色染色深紅色（深紅色（10-HAD10-HAD）-吹干，剪下洗脫吹干，剪下洗脫在在=560nm=560nm處比色處比色（一） 人參蜂王漿中蜂王酸的測定16人參蜂王漿人參蜂王漿 水溶解水溶解 鹽酸鹽酸pH=3.0 pH=3.0 乙醚提取乙醚提取 回收乙醚回收乙醚 殘留物溶于氯仿聚殘留物溶于氯仿聚酰胺薄膜上點樣酰胺薄膜上點樣 石油醚石油醚- -乙醚乙醚- -冰醋酸（冰醋酸（3 3：2 2：0.50.5）展開）展開 涼干后

11、于醋酸中浸泡涼干后于醋酸中浸泡10-10-20min 20min 浸于羅丹明浸于羅丹明B 5-10min B 5-10min 吹干，剪吹干，剪下下- 95%- 95%乙醇乙醇- -冰醋酸冰醋酸- -水（水（4545：5 5：5050）洗脫）洗脫30min 30min 比色比色（一） 人參蜂王漿中蜂王酸的測定17（一） 人參蜂王漿中蜂王酸的測定 （2 2）薄層掃描法）薄層掃描法 樣品制備：精密取樣樣品制備：精密取樣加甲醇加甲醇冷凍離心冷凍離心取取上清液，沉淀甲醇洗上清液，沉淀甲醇洗3 3次，合并上清液次，合并上清液回收甲醇回收甲醇殘渣酸化殘渣酸化水飽和的二氯甲烷萃取水飽和的二氯甲烷萃取回收回收殘

12、渣氯仿殘渣氯仿定容定容測定測定 制備標準溶液、標準曲線制備標準溶液、標準曲線 （3 3）高效液相色譜法）高效液相色譜法 關(guān)鍵：樣品預(yù)處理（甲醇沉淀蛋白、超聲波提關(guān)鍵：樣品預(yù)處理（甲醇沉淀蛋白、超聲波提取或固相萃取柱凈化），保持酸度取或固相萃取柱凈化），保持酸度 （4 4）氣相色譜法：甲酯化后用）氣相色譜法：甲酯化后用GCGC18其它實例（二）桂皮浸膏中肉桂酸的測定（二）桂皮浸膏中肉桂酸的測定 桂皮：桂皮醛、桂皮酸（國外要求）桂皮：桂皮醛、桂皮酸（國外要求） 高效液相色譜法測定：樣品經(jīng)超微過濾器處理，高效液相色譜法測定：樣品經(jīng)超微過濾器處理，定容，進樣定容，進樣, ,以外標法、峰面積計算含量以外

13、標法、峰面積計算含量 （三）益心口服液中阿魏酸與桂皮酸的分析（三）益心口服液中阿魏酸與桂皮酸的分析益心口服液：肉桂、川芎、丹參、三七等益心口服液：肉桂、川芎、丹參、三七等阿魏酸阿魏酸 、桂皮酸、桂皮酸（四）含綠原酸中藥制劑的分析（四）含綠原酸中藥制劑的分析薄層層析薄層層析-舒肝消積丸中舒肝消積丸中綠原酸綠原酸的測定的測定高效液相色譜法高效液相色譜法-感冒舒中綠原酸的測定感冒舒中綠原酸的測定（五）抗病毒較囊中齊墩果酸的測定（五）抗病毒較囊中齊墩果酸的測定-薄層色譜掃薄層色譜掃描法描法19二、二、含環(huán)烯醚萜類制劑的分析含環(huán)烯醚萜類制劑的分析 （一）（一） 概述概述 環(huán)烯醚萜：一類特殊的單萜。環(huán)烯醚

14、萜：一類特殊的單萜。 生源途徑：焦磷酸牻牛兒酯生源途徑：焦磷酸牻牛兒酯(GPP)(GPP)為前體。為前體。 生理活性：多種多樣。生理活性：多種多樣。 分布：多科植物分布：多科植物-梔子、地黃、龍膽，梔子、地黃、龍膽， 制劑制劑-黃連解毒湯、溫清癮、六味地黃丸、龍黃連解毒湯、溫清癮、六味地黃丸、龍膽瀉肝丸膽瀉肝丸20二、二、含環(huán)烯醚萜類制劑的分析含環(huán)烯醚萜類制劑的分析 結(jié)構(gòu)類型：結(jié)構(gòu)類型： 特點：特點：C1C1多有官能團，多有官能團，-OH(-OH(成苷成苷) )、-OCH3 -OCH3 、C=OC=O等；等； C3C3、C4C4多為雙鍵，多為雙鍵，C4-CH3C4-CH3易為氧化物；易為氧化物

15、； C8-CH3C8-CH3易為氧化物；易為氧化物；環(huán)戊烷呈不同氧化態(tài)，如雙鍵、環(huán)氧、環(huán)酮等。環(huán)戊烷呈不同氧化態(tài)，如雙鍵、環(huán)氧、環(huán)酮等。分類：環(huán)烯醚萜及其苷分類：環(huán)烯醚萜及其苷,裂環(huán)環(huán)烯醚萜及其苷裂環(huán)環(huán)烯醚萜及其苷OO-glc12345678921二、二、含環(huán)烯醚萜類制劑的分析含環(huán)烯醚萜類制劑的分析 溶解性：易溶于水和甲醇，成苷后苷鍵易被酸溶解性：易溶于水和甲醇，成苷后苷鍵易被酸水解斷裂水解斷裂 顯色反應(yīng)：環(huán)烯醚萜類遇氨基酸并在加熱下顯顯色反應(yīng)：環(huán)烯醚萜類遇氨基酸并在加熱下顯藍色藍色-初步鑒定初步鑒定22（二）含梔子中藥制劑的分析（二）含梔子中藥制劑的分析梔子：茜草科，苦寒清降、涼血解毒梔子：

16、茜草科，苦寒清降、涼血解毒 化學(xué)成分化學(xué)成分-梔子苷（梔子苷（geniposide）、梔子苷酸）、梔子苷酸（geniposidic acid）等）等 梔子苷是致瀉有效成分，常作為評價制劑質(zhì)量的梔子苷是致瀉有效成分，常作為評價制劑質(zhì)量的指標性成分指標性成分1.定性鑒別：薄層色譜法定性鑒別：薄層色譜法例：清胃黃連丸：例：清胃黃連丸：梔子、黃芩、黃柏、知母等組成梔子、黃芩、黃柏、知母等組成對照溶液制備對照溶液制備:梔子苷、梔子苷、黃芩苷對照品黃芩苷對照品-加甲醇加甲醇23（二）含梔子中藥制劑的分析（二）含梔子中藥制劑的分析 樣品溶液制備：樣品研細樣品溶液制備：樣品研細-加甲醇加甲醇-超聲震超聲震蕩提

17、取蕩提取30min-過濾、濃縮過濾、濃縮-加甲醇加甲醇-供試液供試液 薄層鑒別：吸取對照液、供試液薄層鑒別：吸取對照液、供試液-硅膠硅膠G板點板點樣樣-正丁醇正丁醇-冰醋酸冰醋酸-水（水（7：2：1）展開）展開-吹干吹干 5%香草醛硫酸香草醛硫酸-梔子梔子 2%三氯化鐵乙醇三氯化鐵乙醇-黃芩黃芩2. 含量測定：色譜、紫外分光光度法、高效液相色含量測定：色譜、紫外分光光度法、高效液相色譜法譜法24（三）含龍膽中藥制劑的分析（三）含龍膽中藥制劑的分析龍膽：主要有效成分為龍膽苦苷龍膽：主要有效成分為龍膽苦苷（gentiopicroside）、當(dāng)藥苦苷和當(dāng)藥苷等水溶性）、當(dāng)藥苦苷和當(dāng)藥苷等水溶性苷，均

18、為裂環(huán)烯醚萜類，性質(zhì)不穩(wěn)定，對光、熱、苷，均為裂環(huán)烯醚萜類，性質(zhì)不穩(wěn)定，對光、熱、酸、空氣較為敏感。提取過程中如遇氨會轉(zhuǎn)化為含酸、空氣較為敏感。提取過程中如遇氨會轉(zhuǎn)化為含N的化合物的化合物 1. 含龍膽中藥制劑的鑒別：薄層色譜含龍膽中藥制劑的鑒別：薄層色譜 2. 含龍膽中藥制劑的含量測定：根據(jù)標準品的含龍膽中藥制劑的含量測定：根據(jù)標準品的種類，結(jié)合劑型，進行樣品的預(yù)處理，設(shè)定方法：種類，結(jié)合劑型，進行樣品的預(yù)處理，設(shè)定方法：環(huán)糊精單分子膠束熒光法、高效液相色譜環(huán)糊精單分子膠束熒光法、高效液相色譜25（一）（一） 概述概述 香豆素：一類鄰羥基桂皮酸的內(nèi)酯。香豆素：一類鄰羥基桂皮酸的內(nèi)酯。 生理活

19、性：抗菌消炎、擴張冠脈、抗凝血。生理活性：抗菌消炎、擴張冠脈、抗凝血。 分布：多科植物分布：多科植物白芷素、蛇床子素、白芷素、蛇床子素、秦皮中七葉內(nèi)酯和七葉苷等秦皮中七葉內(nèi)酯和七葉苷等三、含香豆素類制劑的分析三、含香豆素類制劑的分析26結(jié)構(gòu)類型：鄰羥基桂皮酸的內(nèi)酯，由苯環(huán)和吡喃酮結(jié)構(gòu)類型：鄰羥基桂皮酸的內(nèi)酯，由苯環(huán)和吡喃酮環(huán)組成。環(huán)組成。分類：簡單香豆素類、呋喃香豆素類、吡喃香豆素分類：簡單香豆素類、呋喃香豆素類、吡喃香豆素類、其它香豆素類類、其它香豆素類溶解性：苷元分子量小的隨水蒸氣蒸發(fā)，可升華；溶解性：苷元分子量小的隨水蒸氣蒸發(fā)，可升華；易溶于乙醇、甲醇、氯仿和乙醚，可溶于熱水，難易溶于乙

20、醇、甲醇、氯仿和乙醚，可溶于熱水，難溶于冷水。溶于冷水。 苷能溶于水、乙醇、甲醇，難溶于氯仿和乙醚等苷能溶于水、乙醇、甲醇，難溶于氯仿和乙醚等三三、含含香豆素香豆素類制劑的分析類制劑的分析 27三、含香豆素類制劑的分析三、含香豆素類制劑的分析顯色反應(yīng)：顯色反應(yīng)：1 1、異羥肟酸鐵反應(yīng)：紅色、異羥肟酸鐵反應(yīng)：紅色2 2、與酚羥基反應(yīng)：、與酚羥基反應(yīng)：FeCl3FeCl3試劑、試劑、GibbsGibbs試劑、重氮試劑、重氮化試劑化試劑光譜特征：光譜特征：uv300nmuv300nm，多有藍色熒光，多有藍色熒光28（二）定性分析（二）定性分析1、化學(xué)反應(yīng)法、化學(xué)反應(yīng)法例：青葉膽片的鑒別例：青葉膽片的

21、鑒別2、熒光法、熒光法例：白芷的鑒別例：白芷的鑒別3、TLC法法例：七寶美髯顆粒的鑒別例：七寶美髯顆粒的鑒別29（三）定量分析（三）定量分析1、分光光度法、分光光度法利用顏色反應(yīng)、如利用顏色反應(yīng)、如重氮化試劑重氮化試劑本身有紫外吸收本身有紫外吸收例：消痔液的補骨脂素例：消痔液的補骨脂素2、TLCS法法例：千金止帶丸中補骨脂素、異補骨脂素的汗測例：千金止帶丸中補骨脂素、異補骨脂素的汗測3、HPLC法法例：辛芩沖劑的歐前胡素例：辛芩沖劑的歐前胡素4、GC法法例：烏蛇止癢丸的蛇床子素例：烏蛇止癢丸的蛇床子素30四、含四、含單單萜萜及二萜及二萜類制劑的分析類制劑的分析 （一）（一） 概述概述單萜：單萜

22、：2 2個異戊二烯單位的萜烯及其衍生物個異戊二烯單位的萜烯及其衍生物 二萜：二萜：4 4個分子異戊二烯單位聚合而成。個分子異戊二烯單位聚合而成。 生源途徑：生源途徑： 二萜以牻牛兒醇基牻牛兒醇為前體；二萜以牻牛兒醇基牻牛兒醇為前體； 分布：單萜分布：單萜廣泛存在于高等植物中廣泛存在于高等植物中 二萜多以樹脂、內(nèi)酯或苷等存在于多科植物中；二萜多以樹脂、內(nèi)酯或苷等存在于多科植物中； 含氧衍生物具有多方面的顯著生理活性，如：含氧衍生物具有多方面的顯著生理活性，如：芫花、雷公藤、穿心蓮、冬凌草含二萜內(nèi)酯類化合芫花、雷公藤、穿心蓮、冬凌草含二萜內(nèi)酯類化合物。物。31分類：分類：單萜種類較多單萜種類較多二

23、萜分為鏈狀二萜、單環(huán)二萜、雙環(huán)二萜、三環(huán)二二萜分為鏈狀二萜、單環(huán)二萜、雙環(huán)二萜、三環(huán)二萜、四環(huán)二萜萜、四環(huán)二萜四、含四、含單單萜萜及二萜及二萜類制劑的分析類制劑的分析 32 單萜類：單萜類：芍藥苷：芍藥的主要活性成分，為單萜的衍生物，芍藥苷：芍藥的主要活性成分，為單萜的衍生物，水溶性大，具易吸濕性，不穩(wěn)定水溶性大，具易吸濕性，不穩(wěn)定制劑分析：制劑分析： 例：臟連丸的分析、化毒丸的分析、復(fù)方白芍片例：臟連丸的分析、化毒丸的分析、復(fù)方白芍片的含量測定的含量測定含含單單萜萜及二萜及二萜類制劑的分析類制劑的分析 33五、五、含含多糖多糖類制劑的分析類制劑的分析 （一）（一） 概述概述多糖多糖類類：單糖等通過苷鍵連接而成，如常見的菊糖、：單糖等通過苷鍵連接而成，如常見的菊糖、淀粉、樹膠、粘液質(zhì)等。淀粉、樹膠、粘液質(zhì)等。生理活性：抗腫瘤、提高免疫、降糖等。生理活性：抗腫瘤、提高免疫、降糖等。分布：多科植物分布：多科植物靈芝多糖、茯苓多糖、南瓜多糖、靈芝多糖、茯苓多糖、南瓜多糖、大黃多糖、當(dāng)歸多糖、黨參多糖等大黃多糖、當(dāng)歸多糖、黨參多糖等34結(jié)構(gòu)類型：單糖等通過苷鍵連接而