儀分實(shí)驗(yàn)-熒光法測定維生素B2藥物中核黃素含量解析

1、2022-4-23實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模ê唵危?、?shí)驗(yàn)?zāi)康模ê唵危?、實(shí)驗(yàn)原理（詳細(xì)）、實(shí)驗(yàn)原理（詳細(xì)）3、試劑儀器（簡單）、試劑儀器（簡單）4、實(shí)驗(yàn)步驟（簡單）、實(shí)驗(yàn)步驟（簡單）5、數(shù)據(jù)處理（詳細(xì)，表格，圖）數(shù)據(jù)處理（詳細(xì)，表格，圖）6、結(jié)果討論、結(jié)果討論（重點(diǎn)）（重點(diǎn)） 、回答思考題的問題、回答思考題的問題 、討論引入誤差的原因、討論引入誤差的原因 、實(shí)驗(yàn)操作中的注意事項(xiàng)及減小誤差的方法、實(shí)驗(yàn)操作中的注意事項(xiàng)及減小誤差的方法熒光法測定維生素?zé)晒夥y定維生素B2藥物中核黃素含量藥物中核黃素含量實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二維生素維生素B22022-4-23維生素B2易溶于水而不溶于乙醚等有機(jī)溶劑

2、，在中性或酸性溶液中穩(wěn)定，光照易分解，對熱穩(wěn)定。稀釋后稀釋后有強(qiáng)烈熒光，有強(qiáng)烈熒光，維生素維生素B2溶液在溶液在430440 nm藍(lán)光的照藍(lán)光的照射下，發(fā)出綠色熒光，其峰值波長為射下，發(fā)出綠色熒光，其峰值波長為525 nm。一、實(shí)驗(yàn)原理一、實(shí)驗(yàn)原理 2022-4-23（1）定量依據(jù)：維生素B2在水中是強(qiáng)的熒光物質(zhì)，并且在在低濃度低濃度時(shí)，熒光強(qiáng)度與維生素B2濃度呈正比： If = kc （2）定量方法（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）：測定一系列已如濃度的維生素B2的熒光強(qiáng)度，然后以熒光強(qiáng)度對維生素B2濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線，再測定未知濃度維生素B2的熒光強(qiáng)度，把它代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程求出其濃度。 If = kc 熒光強(qiáng)度熒

3、光強(qiáng)度 vs.vs.濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線熒光強(qiáng)度熒光強(qiáng)度核黃素濃度核黃素濃度樣本樣本二、實(shí)驗(yàn)儀器二、實(shí)驗(yàn)儀器2022-4-23 測量熒光的測量熒光的儀器主要由儀器主要由四個(gè)四個(gè)部分部分組成：激發(fā)組成：激發(fā)光源、樣品池、光源、樣品池、雙單色器系統(tǒng)、雙單色器系統(tǒng)、檢測器。檢測器。 特殊點(diǎn)特殊點(diǎn)：有兩個(gè)單色器，光源與檢測器通常成直角。三、實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng)三、實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng)吸量管的使用，吸量管的使用，溶液轉(zhuǎn)移，定容溶液轉(zhuǎn)移，定容同樣條件下測定同樣條件下測定讀取熒光數(shù)據(jù)讀取熒光數(shù)據(jù)熒光儀的操作，發(fā)射光譜熒光儀的操作，發(fā)射光譜和激發(fā)光譜繪制和激發(fā)光譜繪制I If f對濃度對濃度C C擬合擬合標(biāo)準(zhǔn)

4、曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線4.4.數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)處理處理2.2.標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)溶液熒溶液熒光測定光測定3.3.未知未知樣品熒樣品熒光測定光測定1.1.配制標(biāo)配制標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)溶液移液管的使用移液管的使用 常見移液管：標(biāo)有常見移液管：標(biāo)有溫度和容量溫度和容量(注意是注意是否標(biāo)有否標(biāo)有吹吹) 用途：用途：準(zhǔn)確移取一準(zhǔn)確移取一定體積的液體定體積的液體 操作：操作：洗滌洗滌(蒸餾水蒸餾水)、潤洗、潤洗(3次次)、移液、移液、洗滌干凈、洗滌干凈注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：1、整個(gè)操作過程中，保持移液管的垂直；、整個(gè)操作過程中，保持移液管的垂直；2、讀數(shù)、讀數(shù)時(shí)視線與凹液面平齊時(shí)視線與凹液面平齊溶液下端溶液下端1-2cm四、數(shù)據(jù)處理四、數(shù)據(jù)處理2022-4-23濃度（濃度（10-1 g.mL-1）012345X熒光強(qiáng)度熒光強(qiáng)度扣除空白扣除空白1.原始數(shù)據(jù)2.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制和未知樣品的濃度計(jì)算五、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)五、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1.實(shí)驗(yàn)過程中，注意使用石英比色池時(shí)必須保持四面干凈，拿穩(wěn)棱角注意不要摔落;2.實(shí)驗(yàn)完畢，注意檢查儀器是否運(yùn)行正常，關(guān)閉程序是否正確。3.試劑取后，得放回原處，保持試驗(yàn)臺整潔。2022-4-231.為什么熒光光度法較吸收光度法靈敏度高？2.維生素B2在pH = 67