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文檔簡介
1、選修1基礎知識點背誦果酒和果醋和制作一、果酒制作1原理:菌種,屬于核生物,新陳代謝類型,有氧時,呼吸的反應式為: ;無氧時,呼吸的反應式為:。2條件:繁殖最適溫度,酒精發(fā)酵一般控制在。(傳統(tǒng)發(fā)酵技術所使用的酵母菌的來源)3菌種來源: 現(xiàn)在工廠化生產果酒,為提高果酒的品質,更好地抑制其它微生物的生長,采取的措施是 。4實驗設計流程圖挑選葡萄沖洗_果酒 果醋5根據(jù)教材P4操作提示設計實驗步驟及裝置。 充氣口作用 ; 排氣口作用 ;出料口作用 。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是 。使用該裝置制酒時,應該關閉 ;制醋時,應將充氣口 。6實驗結果分析與評價:可通過嗅覺和品嘗初步鑒定,并
2、用_檢驗酒精存在。可觀察到的現(xiàn)象為二、果醋的制作:1原理:菌種:_,屬于_核生物,新陳代謝類為_ 醋酸生成反應式是_。2條件:最適合溫度為_,需要充足的_。3菌種來源:到_或_購買。4設計實驗流程及操作步驟:果酒制成以后,在發(fā)酵液中加入_或醋曲,然后將裝置轉移至_0C條件下發(fā)酵,適時向發(fā)酵液中_。如果沒有充氣裝置,可以將瓶蓋打開,在瓶蓋上紗布,以減少空氣中塵土污染。三、操作過程應注意的問題(1)為防止發(fā)酵液被污染,發(fā)酵瓶要用 消毒。(2)葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時,要留出大約 的空間。(3)制作葡萄酒時將溫度嚴格控制在 ,時間控制在 d左右,可通過 對發(fā)酵的情況進行及時的監(jiān)測。(4)制葡萄醋的過程中,
3、將溫度嚴格控制在 ,時間控制在 d,并注意適時在 充氣?!疽呻y點撥】1、 認為應該先沖洗葡萄還是先除去枝梗?為什么?應該先沖洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗時引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機會。2、 認為應該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?需要從發(fā)酵制作的過程進行全面的考慮,因為操作的每一步都可能混入雜菌。例如:榨汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈;每次排氣時只需擰松瓶蓋、不要完全揭開瓶蓋等。3.制葡萄酒時,為什么要將溫度控制在1825 ?制葡萄醋時,為什么要將溫度控制在3035 ?答:溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。20 左右最適合酵母菌繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內。而醋酸菌是嗜溫菌,最
4、適生長溫度為3035 ,因此要將溫度控制在3035 。4.制葡萄醋時,為什么要適時通過充氣口充氣?答:醋酸菌是好氧菌,在將酒精變?yōu)榇姿釙r需要氧的參與,因此要適時向發(fā)酵液中充氣。腐乳的制作一、腐乳制作的原理1腐乳的發(fā)酵有多種微生物的協(xié)同作用,如 、 、 、 等,其中起主要作用的是 。它是一種絲狀 ,常見于 、 、 、 上。新陳代謝類型是。2等微生物產生的蛋白酶可以將豆腐中的分解成小分子的和;脂肪酶可以將水解成和 。3現(xiàn)代的腐乳生產是在嚴格的條件下,將優(yōu)良菌種直接接種在豆腐上,這樣可以避免,保證。二、腐乳制作的實驗流程:讓豆腐長出毛霉密封腌制。三、實驗材料含水量70%的豆腐,粽葉,盤子,鹽,黃酒,
5、米酒,糖,香辛料等,廣口玻璃瓶,高壓鍋。四、實驗步驟1將豆腐切實3cm3cm1cm若干塊2豆腐塊放在鋪有干粽葉的盤內,每塊豆腐等距離排放,豆腐上再鋪干凈粽葉,再用保鮮膜包裹。3將平盤放在溫度為的地方,毛霉逐漸生長,大約5d后,豆腐表面叢生直立菌絲。4當毛霉生長旺盛,呈淡黃色時,去除保鮮膜及粽葉,散熱及水分,同時散去霉味約36h。5豆腐涼透后,將豆腐間的菌絲拉斷,整齊排在容器內,準備腌制。6長滿毛霉的豆腐塊(以下稱毛坯)分層擺放,分層加鹽,并隨層高而增加,在瓶口表面鋪鹽,以防止,約腌制8d。7將黃酒、米酒和糖、香辛料等混合制成鹵湯。鹵湯酒精含量控制在為宜。8廣口玻璃瓶刷洗干凈,用高壓鍋在1000
6、C蒸汽滅菌30min,將腐乳成坯擺入瓶中,加入鹵湯和輔料后,將瓶口用酒精燈加熱滅菌,用膠條密封,常溫下,六個月即可以成熟。【疑難點撥】1王致和為什么要撒許多鹽,將長毛的豆腐腌起來?鹽在該過程中起什么作用?鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。鹽能抑制多種微生物的生長。2配制鹵湯時,一般將酒精含量控制在12%左右,過高過低都不行,為什么?酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時間的長短有很大關系。酒精含量越高,對蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延長;酒精含量過低,蛋白酶的活性高,加快蛋白質的水解,雜菌繁殖快,豆腐易腐敗,難以成塊。3.豆腐坯用食鹽腌制,其作用是什么?滲透鹽分,析出水分 給腐乳以必要的咸味防止
7、毛霉繼續(xù)生長和污染的雜菌繁殖 浸提毛霉菌絲上的蛋白酶4.腐乳在釀造后期發(fā)酵中添加多量酒液的目的是什么?防止雜菌污染以防腐與有機酸結合形成酯,由于酒中特別是黃酒中含有酵母茼,經發(fā)酵可產生醇,并與有機酸結合形成酯,賦予腐乳風味利于后期發(fā)酵5.鹵湯中香辛料的作用是什么?調味促進發(fā)酵殺菌防腐解釋:(香辛料如花椒、大蒜、茴香中含有花椒酰胺、蒜辣素、茴香醚及茴香醛等,有極強的殺菌力;又有良好的調味功能;香辛料成分參與發(fā)酵過程,合成復雜的酯類,使腐乳形成特有色、香、味。)6.你能利用所學的生物學知識,解釋豆腐長白毛是怎么一回事?答:豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴格地說是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。
8、7.我們平常吃的豆腐,哪種適合用來做腐乳?答:含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過高的豆腐制腐乳,不易成形。8.吃腐乳時,你會發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢?它對人體有害嗎?它的作用是什么?答:“皮”是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長的菌絲(匍匐菌絲),它能形成腐乳的“體”,使腐乳成形?!捌ぁ睂θ梭w無害。探討加酶洗衣粉的洗滌效果一、基礎知識3在本課題中,我們主要探究有關加酶洗衣粉的三個問題:一是普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的 效果有什么不同;二是在什么溫度下使用加酶洗衣粉 最好,三是 的洗衣粉,其洗劑效果有哪些區(qū)別。二、實驗操作1探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣
9、物污漬的洗滌效果(1)實驗遵循的原則:實驗變量為洗滌劑,設計時應遵循 原則、 原則,有效地控制其他變量,如水的用量、污染物的量、所用實驗用布的質地大小、兩種洗衣粉的用量,攪拌及洗滌時間。(2)實驗過程取兩只大燒杯并,用量筒分別量500mL蒸餾水放入其中,放入400C的水浴鍋保溫。將制好的污染布和洗衣粉(一組為和,另一組為和)分別放入兩只燒杯中。用玻璃棒同時充分攪拌時間,一段時間后攪拌可重復進行。過相同的時間后觀察洗滌效果,探究加酶洗衣粉使用時的最適溫度。2不同種類的酶洗衣粉對同一污漬的洗滌效果(1)實驗原理:不同種類的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有,所以對不同污漬的洗滌效果不同。(2)實驗過
10、程:根據(jù)表格設計實驗步驟編號污漬類型洗滌效果蛋白酶脂肪酶淀粉酶復合酶普通洗衣酶1雞血2牛奶3菜油4番茄汁5墨水6染料【疑難點撥】1普通洗衣粉中包含哪些化學成分?提示:普通洗衣粉中通常包含有:表面活性劑、水軟化劑、堿劑、漂白劑等成分,有的洗衣粉中還含有增白劑、香精和色素,以及填充劑等。2在本課題中你打算使用什么方法和標準判斷洗滌效果?提示:可在洗滌后比較污物的殘留狀況,如:已消失、顏色變淺、面積縮小等,3含有蛋白酶的洗衣粉的洗劑效果好,可以用絲綢作為實驗材料嗎?不能。因為絲綢的主要成分是蛋白質,它會被加酶洗衣粉中的蛋白酶分解,損壞衣物。【典例解析】 下列不屬于酶制劑的是 A蛋白酶 B脂肪酶 C淀
11、粉酶 D麥芽糖酶解析:目前常用的酶制劑有四大類:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶。其中,應用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污跡從衣物上脫落。脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶也能分別將大分子的脂肪、淀粉和纖維素水解為小分子物質,使洗衣粉具有更強的去污能力。酵母細胞的固定化一、基礎知識酶:優(yōu)點:催化效率高,低耗能、低污染,大規(guī)模地應用于食品、化工等各個領域。 實際問題:對環(huán)境條件敏感,易失活;溶液中的酶很難回收,不能再次利用,提高了生產成本;反應后的酶會混合在產物中,如不除去,會影響產品質量。 設想: 固定化酶
12、:優(yōu)點 實際問題:一種酶只能催化一種化學反應,而在生產實踐中,很多產物的形成 都是通過一系列的酶促反應才能得到的 設想: 固定化細胞:優(yōu)點 二、固定化酶的應用實例高果糖漿是指 能將葡萄糖轉化為果糖的酶是 。使用固定化酶技術,將這種酶固定在一種 上,再將這些酶顆粒裝到一個反應柱內,柱子底端裝上分布著許多小孔的 。酶顆粒無法通過篩板的小孔,而反應溶液卻可以自由出入。生產過程中,將葡萄糖溶液從反應柱的上端注入,使葡萄糖溶液流過反應柱,與 接觸,轉化成果糖,從反應柱的下端流出。反應柱能連續(xù)使用半年,大大降低了生產成本,提高了果糖的產量和質量。三、固定化細胞技術固定化酶和固定化細胞是利用 或 方法將酶或
13、細胞固定在一定空間內的技術,包括 、 和 法。一般來說,酶更適合采用 和 法固定,而細胞多采用 法固定化。這是因為細胞個大,而酶分子很??;個大的細胞難以被 或 ,而個小的酶容易從 中漏出。包埋法法固定化細胞即將微生物細胞 包埋在不溶于水的 中。常用的載體有 、 、 、 和 等。四、實驗操作(一)制備固定化酵母細胞制備固定化酵母細胞需要的材料是 、 、 、 、 、 、 、 、 和 1.酵母菌的活化活化就是處于 狀態(tài)的微生物重新恢復正常的生活狀態(tài)。2.配制物質的量嘗試為0.05mol/L的CaCl2溶液3.配制海藻酸鈉溶液加熱溶化海藻酸鈉時要注意: 4.海藻酸鈉溶液與酵母菌細胞混合5.固定化酵母細
14、胞以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的 溶液中,并浸泡 (時間)。(二)用固定化酵母細胞發(fā)酵1.將固定好的酵母細胞用 沖洗2-3次。2.發(fā)酵時的溫度就為 ,時間 。五、結果分析與評價(一)觀察凝膠珠的顏色和形狀如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色,說明 ;如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形,則說明 ,制作失敗,需要再作嘗試。(二)觀察發(fā)酵的葡萄糖溶液利用固定的酵母細胞發(fā)酵產生酒精,可以看到產生了很多 ,同時會聞到 補充:直接使用酶、固定化酶和固定化細胞催化的優(yōu)缺點:類型優(yōu)點不足直接使用酶催化效率高,低耗能、低污染等。對環(huán)境條件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很難回收,不能被再次利用,提高了
15、生產成本;反應后酶會混在產物中,可能影響產品質量。固定化酶酶既能與反應物接觸,又能與產物分離,同時,固定在載體上的酶還可以被反復利用。一種酶只能催化一種化學反應,而在生產實踐中,很多產物的形成都通過一系列的酶促反應才能得到的。固定化細胞成本低,操作更容易。固定后的酶或細胞與反應物不容易接近,可能導致反應效果下降等。【疑難點撥】1細胞的活化。提示:在缺水的狀態(tài)下,微生物會處于休眠狀態(tài)?;罨褪亲屘幱谛菝郀顟B(tài)的微生物重新恢復正常的生活狀態(tài)。酵母細胞所需要的活化時間較短,一般需要0.51小時。2如何檢驗凝膠珠的質量是否合格。提示:檢驗凝膠珠的質量是否合格,可以采用以下方法。一是用鑷子夾起一個凝膠珠放
16、在實驗桌上用手擠壓,如果凝膠珠不破裂,沒有液體流出,就表明凝膠珠的制作成功。二是在實驗桌上用力摔打凝膠珠,如果凝膠珠很容易彈起,也表明制備的凝膠珠是成功的。3酶和細胞分別適應哪種固定方法?提示:一般來說,酶更適合采用化學結合和物理吸附法固定,而細胞多采用包埋法固定化。這是因為細胞個大,而酶分子很?。粋€大的難以被吸附或結合,而個小的酶容易從包埋材料中漏出?!镜淅馕觥棵负图毎謩e適應哪種固定方法?提示:一般來說,酶更適合采用化學結合和物理吸附法固定,而細胞多采用包埋法 固定化。這是因為細胞個大,而酶分子很小;個大的難以被吸附或結合,而個小的酶容易從包埋材料中漏出。DNA的粗提取與鑒定一、提取DN
17、A的方法提取生物大分子的基本思路是 。對于DNA的粗提取而言,就是要利用 、 等在物理和化學性質方面的差異,提取DNA,去除其他成分。1)DNA的溶解性 DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的 中溶解度不同,利用這一特點,選擇適當?shù)柠}濃度就能使 充分溶解,而使雜質沉淀,或者相反,以達到分離目的。此外,DNA不溶于 溶液,但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質進一步的分離。2)DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性 蛋白酶能水解 ,但是對 沒有影響。大多數(shù)蛋白質不能忍受6080oC的高溫,而DNA在 以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解 ,但對DNA沒有影響。3)DNA的鑒定 在
18、條件下,DNA遇 會被染成 色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。二、實驗設計1)實驗材料的選取 凡是含有 的生物材料都可以考慮,但是使用 的生物組織,成功的可能性更大。在下面的生物材料中選取適合的實驗材料:魚卵、豬肝、菜花(花椰菜)、香蕉、雞血、哺乳動物的紅細胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養(yǎng)基的大腸桿菌2)破碎細胞,獲取含DNA的濾液 動物細胞的破碎比較容易,以雞血細胞為例,在雞血細胞液中加入一定量的 ,同時用 攪拌,過濾后收集濾液即可。如果實驗材料是植物細胞,需要先用 溶解細胞膜。例如,提取洋蔥的DNA時,在切碎的洋蔥中加入一定的 和 ,進行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。3
19、)去除濾液中的雜質 4)DNA的析出與鑒定 將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積 、冷卻的 ,靜置 ,溶液中會出現(xiàn) ,這就是粗提取的DNA。用玻璃棒 攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分。取兩支20ml的試管,各加入物質的量濃度為 的NaCl溶液5ml,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解。然后,向兩支試管中各加入4ml的 ?;旌暇鶆蚝螅瑢⒃嚬苤糜?中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是否變 。三、操作提示以血液為實驗材料時,每100ml血液中需要加入3g ,防止 。加入洗滌劑后,動作要 、 ,否則容易產生大量的泡沫,不利于后續(xù)步
20、驟地操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時,動作要 ,以免 ,導致DNA分子不能形成絮狀沉淀。二苯胺試劑要 ,否則會影響鑒定的效果。四、結果分析與評價【疑難點撥】1為什么加入蒸餾水能使雞血細胞破裂?答:蒸餾水對于雞血細胞來說是一種低滲液體,水分可以大量進入血細胞內,使血細胞脹裂,再加上攪拌的機械作用,就加速了雞血細胞的破裂(細胞膜和核膜的破裂),從而釋放出DNA。2加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?答:洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解細胞膜,有利于DNA的釋放;食鹽的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。3如果研磨不充分,會對實驗結果產生怎樣的影響?答:研磨不充分會使細胞核內的DNA釋放不完全,提取的
21、DNA量變少,影響實驗結果,導致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍色等。4此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細胞成分?答:可能含有核蛋白、多糖和RNA等雜質。5為什么反復地溶解與析出DNA,能夠去除雜質?答:用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質;用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質。因此,通過反復溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質。6方案二與方案三的原理有什么不同?答:方案二是利用蛋白酶分解雜質蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質分開;方案三利用的是DNA和蛋白質對高溫耐受性的不同,從而使蛋白質變性,與DNA分離。7. DNA的溶解度與Na
22、Cl溶液濃度的關系:當NaCl溶液濃度低于0.14mol/L時,隨濃度的升高,DNA的溶解度降低;當NaCl溶液濃度高于0.14mol/L時,隨濃度升高,DNA的溶解度升高。8. 制備雞血細胞液時,要在新鮮的雞血中加入檸檬酸鈉的原因制備雞血細胞液時,要在新鮮的雞血中加入抗凝劑檸檬酸鈉,防止血液凝固。其原理是檸檬酸鈉能與血漿中Ca2+發(fā)生反應,生成檸檬酸鈣絡合物,血漿中游離的Ca2+大大減少,血液便不會凝固,因為雞血紅細胞,白細胞都有細胞核,DNA主要存在于細胞核中,所以在離心或靜置沉淀后,要棄出上層清液血漿。9提取DNA的第一步是材料的選取,其目的是一定要選取DNA含量較高的生物材料,否則會由
23、于實驗過程中或多或少的損失而造成檢測的困難;第二步是DNA的釋放和溶解,這一步是實驗成功與否的關鍵,要盡可能使細胞內的DNA全部溶解;第三步是DNA的純化,即根據(jù)DNA的溶解特性、對酶及高溫的耐受性的不同等特性,最大限度地將DNA與雜質分開;最后一步是對DNA進行鑒定,這是對整個實驗的結果的檢測。10在DNA的析出的步驟中用到玻璃棒攪拌時,注意動作要輕緩,以免加劇DNA分子的斷裂,導致DNA分子不能形成絮狀沉淀。11盛放雞血細胞液的容器,最好是塑料容器。雞血細胞破碎以后釋放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于細胞內DNA的含量本來就比較少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就會更少。因此
24、,實驗過程中最好使用塑料的燒杯和試管,這樣可以減少提取過程的DNA的損失。典例解析本實驗中有三次過濾:過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細胞液過濾含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液過濾溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液以上三次過濾分別為了獲得( )A含核物質的濾液、紗布上的粘稠物、含DNA的濾液B含核物質的濾液、濾液中DNA粘稠物、含DNA的濾液C含核物質的濾液、濾液中DNA粘稠物、紗布上的DNAD含較純的DNA濾液、紗布上的粘稠物、含DNA的濾液答案:A解析:用蒸餾水稀釋雞血細胞液,使血細胞的細胞膜、核膜破裂,釋放出核物質,此時過濾只能得到含DNA和其他物質如蛋白質的濾液,這種濾液必須經過實
25、驗中其他步驟得相繼處理,方能得到較純的DNA。DNA在0.13mol/LNaCl溶液中溶解度最低,成絲狀粘稠物,可經過濾留在紗布上。血紅蛋白的提取和分離基礎知識1凝膠色譜法凝膠色譜法也稱做 ,是根據(jù) 分離蛋白質的有效方法。凝膠實際上是一些由 構成的多孔球體,在小球體內部有許多貫穿的通道,相對分子質量不同的蛋白質分子通過凝膠時速度不同,相對分子質量較小的蛋白質 進入凝膠內部的通道,路程 ,移動速度 ;而相對分子質量 的蛋白質無法進入凝膠內部的通道,只能在 移動,路程 ,移動速度 。相對分子質量不同的蛋白質分子因此得以分離。2緩沖溶液緩沖溶液的作用是 。緩沖溶液通常由 溶解于水中配制而成的。生物體
26、內進行的各種生物化學反應都是在一定的pH下進行的,例如:血漿的pH是 ,要在實驗條件下準確模擬生物體內的過程,必須保持體外的pH與體內的基本一致。3電泳電泳是指 。許多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有可解離的基團,在一定的pH下,這些基團會帶上 。在電場的作用下,這些帶電分子會向著與其所帶電荷 的電極移動。電泳利用了待分離樣品中各分子 以及分子本身的 、 的不同,使帶電分子產生不同的 ,從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。兩種常用的電泳方法是 和 ,在測定蛋白質分子量時通常使用 。蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于 以及 等因素。4蛋白質的提取和分離蛋白質的提取和分離一般分為四步: 、 、
27、 和 。5樣品處理血液由 和 組成,其中紅細胞最多。紅細胞具有 的特點。紅細胞中有一種非常重要的蛋白質 ,其作用是 ,血紅蛋白有 個肽鏈組成,包括 ,其中每條肽鏈環(huán)繞一個 ,磁基團可攜帶 。血紅蛋白因含有 呈現(xiàn)紅色。紅細胞的洗滌 洗滌紅細胞的目的是 ,采集的血樣要及時采用 分離紅細胞,然后用膠頭吸管吸出上層透明的 ,將下層暗紅色的 倒入燒杯,再加入 ,緩慢攪拌 ,低速短時間離心,如此重復洗滌三次,直至 ,表明紅細胞已洗滌干凈。血紅蛋白的釋放 在 和 作用下,紅細胞破裂釋放出血紅蛋白。分離血紅蛋白溶液 將攪拌好的混合溶液離心后,試管中的溶液分為4層。第一層為無色透明的 ,第2層為白色薄層固體,是
28、 ,第3層是紅色透明液體,這是 ,第4層是其他雜質的暗紅色沉淀物。將試管中的液體用濾紙過濾,除去之溶性沉淀層,于分液漏斗中靜置片刻后,分出下層的紅色透明液體。透析 取1mL的血紅蛋白溶液裝入 中,將透析袋放入盛有300mL的物質的量的濃度為20mmol/L的 中,透析12h。透析可以去除樣品中 的雜質,或用于更換樣品的 。6凝膠色譜操作第一步要制作 ,第二步要 ,因為 ,所以裝柱前需要根據(jù)色譜柱的內體積計算所需要的凝膠量。在裝填凝膠柱時,不得有 存在。因為氣泡會 ,降低分離效果。第三步是 。疑難點撥1凝膠色譜法分離蛋白質的原理凝膠色譜法也稱為分配色譜法,它是根據(jù)分子量的大小分離蛋白質的方法之一
29、。所用的凝膠實際上是一些微小的多孔球體,這些小球體大多數(shù)是由多糖類化合物構成,小球體內部有許多貫穿的通道,當一個含有各種分子的樣品溶液緩慢流經時,各分子在色譜柱內進行兩種不同的運動,即垂直向下的運動和無規(guī)則的擴散運動,相對分子質量較大的蛋白質分子不能進入凝膠顆粒內部,只能分布在顆粒之間,通過的路程較短,移動速度較快;相對分子質量較小的蛋白質分子比較容易進入凝膠內的通道,通過的路程較長,移動速度較慢。因此,樣品中相對分子質量較大的蛋白質先流出,相對分子質量中等的分子后流出,相對分子質量最小的分子最后流出,這種現(xiàn)象又叫分子篩現(xiàn)象。此外,凝膠本身具有三維網狀結構,相對分子質量大的分子通過這種網狀結構
30、上的空襲時阻力大,而相對分子質量小的分子通過時阻力小,因此不同分子量的蛋白質分子可以獲得分離。2與其他真核細胞相比,紅細胞的特點及這一特點對進行蛋白質的分離的意義哺乳動物及人的成熟的紅細胞是雙面凹圓餅狀,沒有細胞核和細胞器。其含有的血紅蛋白是有色蛋白,因此在凝膠色譜分離時可以通過觀察顏色來判斷什么時候應該收集脫液。這使血紅蛋白的分離過程非常直觀,大大簡化了實驗操作。3電泳的作用及其原理電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程。許多重要的生物大分子,如氨基酸、多肽、蛋白質、核苷酸、核酸等都具有可解離基團,它們在某個特定的pH下會帶上正電或負電;在電場的作用下,這些帶電分子會向著與其所帶電荷相
31、反的電極方向移動。電泳技術就是在電場的作用下,利用待分離樣品中各種分子帶電性質以及分子本身大小、形狀等性質的差異,使帶電分子產生不同的遷移速度,從而達到對樣品進行分離、鑒定或提純的目的。4.你能從凝膠色譜的分離原理分析為什么凝膠的裝填要緊密、均勻嗎?答:凝膠實際上是一些微小的多孔球體,小球體內部有許多貫穿的通道。相對分子質量較大的蛋白質分子不能進入凝膠顆粒內部,只能分布在顆粒之間,通過的路程較短,移動速度較快;相對分子質量較小的蛋白質分子比較容易進入凝膠內的通道,通過的路程較長,移動速度較慢。因此,樣品中相對分子質量較大的蛋白質先流出,相對分子質量中等的分子后流出,相對分子質量最小的分子最后流
32、出,從而使各種相對分子質量不同的分子得以分離。如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻,就會在色譜柱內形成無效的空隙,使本該進入凝膠內部的樣品分子從這些空隙中通過,攪亂洗脫液的流動次序,影響分離的效果。典例解析用凝膠色譜法分離蛋白質時,分子量大的蛋白質( D )A路程較長,移動速度較慢 B路程較長,移動速度較快C路程較短,移動速度較慢 D路程較短,移動速度較快解析:在小球體內部有許多貫穿的通道,當相對分子質量不同的蛋白質通過凝膠時,相對分子質量較小的蛋白質容易進入凝膠內部的通道,路程較長,移動速度較慢;而相對分子質量較大的蛋白質無法進入凝膠內部的通道,只能在凝膠外部移動,路程較短,移動速度較快。經典例題剖
33、析例題1、關于果酒制作過程中的敘述正確的是( B )A先去爛子粒和枝梗,再用清水沖洗污物 B發(fā)酵的溫度維持在20最好C發(fā)酵過程中需要適時打開瓶蓋放氣,以防發(fā)酵瓶破裂 D需要不斷的充入氧氣解析:為防雜菌污染,爛子粒應該沖洗之前去除,而去枝梗應在沖洗之后;酵母菌酒精發(fā)酵需在無氧條件下進行,通氣時只能擰松瓶蓋不可打開瓶蓋;最適宜溫度為20。例題2、關于果醋制作過程中的敘述正確的是( C )A打開發(fā)酵瓶是因為全過程需要通入氧氣,排出二氧化碳B醋酸菌在糖源和氧氣充足時,能將葡萄糖分解成醋酸和二氧化碳C當糖源不足時,醋酸菌可將酒精分解成醋酸D要使果酒變成果醋只需通入氧氣,加入醋酸菌就可以了解析:醋酸菌和酵
34、母菌發(fā)酵的區(qū)別在于前者需氧,不產生二氧化碳,而且發(fā)酵的最適溫度也不同。例題3、腐乳制作過程中影響其風味和品質的因素有哪些?( A )鹽的用量 酒的種類和用量 發(fā)酵溫度 發(fā)酵時間 辛香料的用量A B C D 解析:鹽、酒、辛香料不僅用來調味,還可抑菌,防腐乳變質。適宜的鹽的用量和酒的濃度還影響發(fā)酵中蛋白酶的作用發(fā)揮;發(fā)酵時間和溫度都會影響腐乳的風味。例題4、將10毫升酵母菌液放在適宜的溫度下培養(yǎng),并且于不同時間內等量均勻取樣4次,分別測定樣品中酵母菌的數(shù)量和PH,結果如下表。請分析回答:樣品酵母菌的數(shù)量(個/mm3)PH112104.828205.4312103.7410005.0 表中樣品取樣
35、先后次序是 對酵母菌而言,10毫升該培養(yǎng)液的環(huán)境負荷量為 個。若第五次均勻取樣時,樣品中的酵母菌數(shù)量為760(個/mm3),產生這一結果的原因是 。 解析:(1)由于酵母菌進行有氧呼吸和無氧呼吸都產生二氧化碳,使發(fā)酵液的酸性增強。根據(jù)樣品PH大小,越早取樣PH越大,由此取樣順序為2、4、1、3。(2)經過培養(yǎng)10mL培養(yǎng)液中有菌數(shù)1210個/mm3,環(huán)境負荷量應為1.21107。(3)培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質不斷被消耗,pH值減小,部分酵母菌因營養(yǎng)缺乏不適應而死亡并解體。答案: 2、4、1、3;1.21107;培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質不斷被消耗,pH值減小,部分酵母菌因營養(yǎng)缺乏不適應而死亡并解體。例題5、
36、水果罐頭蓋上印有“如發(fā)現(xiàn)蓋子鼓起,請勿選購”的字樣,引起蓋子鼓起的最可能原因是( B )A、好氧型細菌呼吸,產生CO2和H2O B、酵母菌呼吸,產生CO2和C2H5OHC、乳酸菌呼吸,產生 CO2和 C3H6O3 D、酵母菌呼吸,產生CO2和 H2O解析 罐頭是密封、殺菌的,但不排除有微生物的孢子等存活下來,只有進行無氧呼吸的微生物可以生存;罐頭鼓脹是過期后微生物生活產氣的結果,乳酸菌無氧呼吸產生乳酸,無氣體產生;酵母菌既可以在有氧條件下生活,也可以在無氧條件下發(fā)酵產生酒精和二氧化碳。例題6、有人測定了A、B、C、D四種植物體內多種酶的活性與溫度的關系,結果如下圖所示。根據(jù)圖中的信息,你認為在
37、25攝氏度條件下,競爭能力最強的生物和對溫度適應范圍最廣的生物分別是( A )A B和D B B和C C B和A D A和C 催 C D 化 100 A B 效 率 50( %) 0 5 10 15 20 25 30 35 40解析 酶活性具有一定的溫度范圍和適宜溫度,溫度過高酶會失活,低溫對酶活性抑制;在一定溫度下,最適宜該溫度的酶活性最強,該生物生活的也最好,競爭力就強;酶有活性的范圍最大,生物的生存溫度范圍就越廣。例題7、(05年杭州高三第一次檢測)下圖是人體內某個化學反應的示意圖,圖中代表酶的英文字母是( A )解析 酶是起催化作用的,它在反應前后的性質保持不變,據(jù)圖可以解釋A 所代表
38、的物質是酶。所以在特定條件和一定的時間內,酶的催化作用可以一直保持。例題8、(04年北京東城區(qū)綜合檢測) 實驗研究pH對酶活性的影響,準備5支含有等量胃蛋白酶溶液但pH各不相同的試管,每支試管加1塊1 cm3的正方體凝固蛋白塊,試管均置于25 室溫條件下,將各試管蛋白塊消失的時間記錄于下表:酶溶液的pH蛋白塊消失的時間(min)12345139114560(1)酶活性最強時的pH是_。(2)蛋白塊消失的時間與酶活性強弱的關系是_。(3)請以2種方法改進實驗,使實驗在更短的時間內完成。(4)在人體消化道中,能分泌本實驗中酶的部位是_。(5)為確認蛋白塊的消失是由于酶的作用,還應對實驗進行什么設計
39、 答案 (1)2(2)酶活性越大,蛋白質分解越快,蛋白塊消失的時間越短(3)方法:將題給溫度由25提高至大約37。方法:將原題中正方體蛋白塊處理得更?。ㄈ缜谐?.50.50.5=0.125 cm3),這相當于消化道內進行的物理性消化(4)胃(答小腸不給分,因pH與題意不符)(5)另增加一個試管,放入等量的蛋白塊并將pH調得適當,但不加酶溶液例題9、現(xiàn)有相同容積的玻璃缸幾只,利用自然的清水、同齡且發(fā)育狀態(tài)相同的小蝌蚪60只、飼喂蝌蚪的飼料、未經處理的具有生物活性的甲狀腺激素,并把具有生物活性的甲狀腺激素放在50的溫水中處理10 min。根據(jù)這些現(xiàn)有的條件,請你設計一個實驗,驗證甲狀腺激素經過處理
40、以后,是否還有生物活性。(1) 實驗方案的設計第一步,取玻璃缸3只,分別標記為甲、乙、丙;第二步, ;第三步,如果甲缸每天飼喂飼料,丙缸每天飼喂用具有生物活性的甲狀腺激素相拌的飼料,則乙缸怎樣飼喂? ; 最后經過一定時間的飼喂,觀察現(xiàn)象,得出結果和結論。(2) 結果分析若乙、丙缸的蝌蚪發(fā)育同步,迅速變態(tài)為小青蛙,而甲缸還是蝌蚪狀態(tài),說明 ;若甲、乙缸的蝌蚪發(fā)育同步,而丙缸發(fā)育變態(tài)迅速,說明了 。若乙缸的蝌蚪發(fā)育比甲缸快,比丙缸慢,則說明了 。(3)該實驗設置甲、丙兩組實驗的目的是 。 答案(1)分別加入等量的清水和20只蝌蚪 每天飼喂用經過處理過的甲狀腺激素相拌的飼料(2)甲狀腺激素經過50的溫水處理后,對其生物活性沒有影響 甲狀腺激素經過50的溫水處理后,完全喪失了生物活性 甲狀腺激素經過50的溫水處理后,使生物活性有所降低(3)起對照作用例10、 在DNA分子的粗提取實驗中,兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用是( )A. 稀釋血液、沖洗樣品B. 使血細胞破裂,降低NaCl濃度使DNA析出C. 使血細胞破裂,增大DNA溶解度D. 使血細胞破裂,提取含雜質較少的D
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