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文檔簡介
1、 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗 獸醫(yī)病理解剖學獸醫(yī)病理解剖學實驗實驗 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗 實驗內(nèi)容 實驗一 病理組織切片制作技術(shù)實驗二 局部血液循環(huán)障礙:充血、 淤血、缺血、梗死、出血 實驗三 局部血液循環(huán)障礙 血栓、 水腫實驗四 組織細胞的變性 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗實驗五 組織細胞壞死 實驗六 組織細胞病理性物質(zhì)沉著 及組織修復 實驗七 炎癥實驗八 腫瘤 實驗內(nèi)容 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗 實驗九 心臟血管系統(tǒng)病理實驗十 呼吸系統(tǒng)病理實驗十一 消化系統(tǒng)病理實驗十二 泌尿系統(tǒng)病理實驗十三 中樞神經(jīng)系統(tǒng)病理實驗內(nèi)容 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理
2、解剖學實驗 前言 獸醫(yī)病理解剖學實驗部分在本課程教學中占有特殊地位。學生通過觀察肉眼和切片標本印證課堂所講的理論,加強理解,取得感性知識的教學環(huán)節(jié)。在學習過程中,要求同學初步掌握觀察和描述器官組織病變的方法和認識病變。 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗實驗一實驗一 病理組織切片制作技術(shù)病理組織切片制作技術(shù) 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗目的要求:1、重點掌握病理組織切片的基本制作過程步驟。2、了解病理組織切片制作過程中的注意事項。 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗實驗內(nèi)容 掌握組織材料的取材、固定、脫水、
3、透明、包埋、切片、烤片、脫蠟、染色及封固的基本操作。 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗一、取材及固定(一)取材注意事項: 1、材料新鮮 2、組織塊力求小而薄 3、勿使組織塊受擠壓 4、盡量保持組織的原有形態(tài) 5、熟悉取材部位 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗(一)取材注意事項: 6、選好組織塊的切面 7、保持材料的清潔 8、切除不需要的部位 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗(二)固定及目的: 應用化學試劑使組織或細胞中的無機成分和有機成分凝固或沉淀,以保持其生活狀態(tài)的過程稱為固定。 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗 固定液是10%福爾馬林溶液(4%甲醛溶液),固定24小時以上。
4、 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗 固定的目的1、迅速阻止組織、細胞死后變化,防止自溶與腐敗,使之盡量保持生前的狀態(tài)與結(jié)構(gòu)。2、使細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖、酶等成分轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì),以保持其原有狀態(tài)。3、使組織內(nèi)各種物質(zhì)成分產(chǎn)生不同的折光率,以便染色后易于鑒別和觀察。4、使組織塊硬化,便于制作薄片。 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗固定的注意事項1、組織塊不宜大,厚度小于5mm,長寬也應小于1515mm。2、固定液與組織塊的比例應大于10:1。3、軟組織或較大組織塊可先經(jīng)2-3小時固定后再修整成小塊,重新投入新配制的固定液中繼續(xù)固定。4、腸道可在漿膜面貼上一層厚紙,以防固定組織變形。
5、主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗 二、固定后處理及切片(一)、洗滌與修切(二)、脫水與透明 脫水:將組織塊內(nèi)水分置換的過程。 透明:乙醇和石蠟不互溶,最常用的透明劑是二甲苯。既能溶于脫水劑又能溶于包埋劑(石蠟),透明必須適度 。 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗50%乙醇: 30-60min70%乙醇: 1-2小時或過夜80%乙醇: 1-2小時95%乙醇: 1-1.5小時100%乙醇: 30min100%乙醇: 20min1:1無水乙醇:二甲苯: 20min二甲苯: 10-30min 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗生物組織脫水機 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗(三)、浸蠟與
6、包埋 52-58石蠟,浸蠟的全過程在60的溫箱中進行。 1:1二甲苯:石蠟: 30min 石蠟: 30min 石蠟: 30min 石蠟: 30min 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗組織包埋機 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗(四)切片、粘片1、切片前處理及切片2、載玻片處理3、粘片(展片)4、烤片 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗輪轉(zhuǎn)式組織切片機 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗三、脫蠟和染色三、脫蠟和染色(一)、脫蠟1、二甲苯: 5-10min2、二甲苯: 5-10min3、1:1二甲苯:乙醇(冬20min): 5min4、無水乙醇、95%、80%、70% 、50%梯度乙醇
7、每級1-2min5、蒸餾水1-2min 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗(二)、染色(HE染色法)1、蘇木素染液: 515min2、蒸餾水(洗去多余的染液): 30s3、分色:1%鹽酸-70 %乙醇分色: 1-30s4、藍化:自來水沖洗(堿化,核藍色): 15-20min5、蒸餾水(洗去多余的堿) : 1-2min 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗6、逐級入50%、70%、85%乙醇,: 每級1-2min 7、伊紅- 95%乙醇染液: 15s2min8 、95%、無水乙醇、無水乙醇逐級 脫水,每級1-2min9、1:1無水乙醇:二甲苯 : 5min10、二甲苯 :5min11、二甲苯 :5min 主講:徐鑌蕊 教授獸醫(yī)病理解剖學實驗組織切片
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