生物化學(xué)與分子生物學(xué)教學(xué)大綱_第1頁
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文檔簡介

1、生物化學(xué)教學(xué)大綱(供臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)本科教學(xué)使用)蚌埠醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室制定二OO九年五月蚌埠醫(yī)學(xué)院 生物化學(xué) 課程(第7版)教學(xué)大綱課程編號:課程名稱: 生物化學(xué)英文名稱: Biochemistry課程類型: 學(xué)科基礎(chǔ)課程總 學(xué) 時: 93 理論課學(xué)時: 72 實驗學(xué)時:21適用對象: 臨床醫(yī)學(xué)本科課程簡介:生物化學(xué)是研究生物體內(nèi)化學(xué)分子與化學(xué)反應(yīng)的科學(xué),從分子水平探討生命的本質(zhì)。當(dāng)代生物化學(xué)主要研究生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能、物質(zhì)代謝與調(diào)節(jié)、遺傳信息傳遞及其調(diào)控。它與醫(yī)學(xué)的發(fā)展密切相關(guān)、相互促進。醫(yī)學(xué)生物化學(xué)主要研究人體的生物化學(xué),是醫(yī)學(xué)的重要組成部分。在臨床醫(yī)學(xué)中,運用生物化學(xué)的理

2、論和技術(shù)可對疾病進行預(yù)防、診斷和治療。作為醫(yī)學(xué)生,學(xué)好生物化學(xué)知識具有重要而深遠的意義。一、課程性質(zhì)、目的和任務(wù)生物化學(xué)是醫(yī)學(xué)教育中重要的基礎(chǔ)課程,其研究內(nèi)容已從五十年代的新陳代謝為中心轉(zhuǎn)移到分子生物學(xué)為重點。為了適應(yīng)當(dāng)今基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)各學(xué)科及臨床醫(yī)學(xué)的需要,除了解與醫(yī)學(xué)有關(guān)的物質(zhì)代謝,如糖代謝、脂代謝等能量代謝之外,更重要的是學(xué)好分子生物學(xué)的主要理論,如核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)和功能,代謝調(diào)節(jié)機制,基因表達及其調(diào)控等,同時聯(lián)系臨床的常見疾病,重點在分子水平上認(rèn)識其病因,加深對其治療原理的理解。生物化學(xué)分為理論教學(xué)和實驗教學(xué)。理論教學(xué)內(nèi)容包括:生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能、物質(zhì)代謝及其調(diào)節(jié)、基因信息

3、的傳遞和專題篇四部分。通過生物化學(xué)課程學(xué)習(xí),使學(xué)生掌握蛋白質(zhì)、核酸、酶等生物大分子的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及功能;物質(zhì)代謝途徑及其調(diào)控的規(guī)律;生物能量的產(chǎn)生及生物大分子前體的合成;遺傳信息的儲存、傳遞及表達等基本理論知識。學(xué)會初步運用生物化學(xué)知識論述或解釋與人類健康、疾病相關(guān)的醫(yī)學(xué)實踐問題;培養(yǎng)科學(xué)思維、觀察分析問題的能力;訓(xùn)練嚴(yán)謹(jǐn)、求實的科學(xué)態(tài)度。為學(xué)習(xí)其它基礎(chǔ)和臨床醫(yī)學(xué)課程、畢業(yè)后的醫(yī)學(xué)實踐工作及繼續(xù)教育、輔助醫(yī)學(xué)各學(xué)科的科研工作等奠定基礎(chǔ)。二、教學(xué)基本要求  大綱分三級要求:()重點掌握的內(nèi)容,要求學(xué)生深刻理解和記憶,并能融會貫通,舉一反三;()要求熟悉的內(nèi)容,要求在理解的基礎(chǔ)上適當(dāng)記憶;

4、()其余部分作為一般了解和自學(xué)內(nèi)容,要求能夠理解或結(jié)合其他相關(guān)課程理解。本教學(xué)大綱可作為教師備課和講課、學(xué)生學(xué)習(xí)、考試出題及檢查教學(xué)質(zhì)量的依據(jù)。教師應(yīng)根據(jù)學(xué)生層次、文理科同學(xué)兼顧及其它具體情況安排教學(xué)過程。本大綱未涉及的生物化學(xué)相關(guān)內(nèi)容,均為一般了解和自學(xué)內(nèi)容。三、教學(xué)內(nèi)容及要求 (一)   緒論【掌握】生物化學(xué)概念,當(dāng)代生物化學(xué)研究的主要內(nèi)容?!臼煜ぁ可锘瘜W(xué)與醫(yī)學(xué)之間的關(guān)系?!玖私狻可锘瘜W(xué)與分子生物學(xué)之間的關(guān)系,生物化學(xué)的發(fā)展史。(二)第一章     蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能 【掌握】蛋白質(zhì)的基本組成單位和平均含氮量。20種氨基酸的名

5、稱及三字母英文縮寫符號。氨基酸的理化性質(zhì)。蛋白質(zhì)一級、二級、三級和四級結(jié)構(gòu)的基本概念及維系其穩(wěn)定的化學(xué)鍵,肽單元和蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的主要類型,蛋白質(zhì)超二級結(jié)構(gòu)、模體、結(jié)構(gòu)域、亞基、蛋白質(zhì)等電點的概念,蛋白質(zhì)變性作用及影響因素,蛋白質(zhì)沉淀及維系蛋白質(zhì)膠體溶液的穩(wěn)定因素。【熟悉】氨基酸的分類,肽的概念和基本結(jié)構(gòu),生物活性肽,蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)功能之間的關(guān)系。蛋白質(zhì)的紫外吸收作用。【了解】蛋白質(zhì)組學(xué)基本概念。分子病的概念。蛋白質(zhì)分類,多肽鏈中氨基酸的序列分析,蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)測定。蛋白質(zhì)的分離和純化。(三)第二章     核酸的結(jié)構(gòu)與功能 【掌握】核

6、酸的基本組成單位和核酸的水解產(chǎn)物。核酸分子中核苷酸的連接方式。DNA和RNA的一級結(jié)構(gòu)和基本組成單位。DNA二級結(jié)構(gòu)雙螺旋結(jié)構(gòu)的概念和特點?;蚝突蚪M的概念。mRNA、tRNA、rRNA的結(jié)構(gòu)特點及功能。核酶的概念。核酸的紫外吸收作用。DNA的變性與復(fù)性。DNA的增色效應(yīng)和解鏈溫度的概念?!臼煜ぁ?DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)。核酸的分子雜交?!玖私狻?DNA結(jié)構(gòu)的多樣性。RNA組學(xué)、snmRNA的種類及功能。核酸酶的種類及作用。(四)  第三章     酶 【掌握】酶、單純酶及結(jié)合酶的概念,酶的分子組成,酶蛋白和輔因子的作用。必需基團和酶活性中心的概

7、念。同工酶的概念,乳酸脫氫酶同工酶的組成及組織器官分布。酶促反應(yīng)的特點,酶促反應(yīng)特異性的類型,影響酶促反應(yīng)速度的因素,米氏方程及Km的意義。酶的抑制作用:不可逆抑制作用和可逆性抑制作用(競爭性抑制作用、非競爭性抑制作用、反競爭性抑制作用)的基本概念、原理及意義,三種可逆性抑制作用的特征曲線及動力學(xué)參數(shù)的變化。變構(gòu)酶、酶共價修飾的概念和特點,酶原與酶原激活的概念、機理及意義。 【熟悉】輔因子與金屬離子和維生素之間的關(guān)系。酶促反應(yīng)的機理誘導(dǎo)契合學(xué)說?!玖私狻棵资戏匠痰耐茖?dǎo),Km值與Vmax值的測定。酶活性的測定,酶含量的調(diào)節(jié)。酶的分類與命名,酶與醫(yī)學(xué)的關(guān)系。(五)  第十八章 

8、    維生素與微量元素 【掌握】維生素的概念和分類。B族維生素(B1、B2、PP、泛酸、生物素、B6、葉酸、B12)的生化作用。B族維生素、輔酶、酶三者之間的關(guān)系。維生素C的性質(zhì)與功能?!臼煜ぁ枯o酶在酶促反應(yīng)中的作用,脂溶性維生素的作用,維生素缺乏癥?!玖私狻烤S生素的化學(xué)結(jié)構(gòu)。鈣、磷代謝。微量元素的代謝與作用。(六)  第四章     糖代謝 【掌握】糖分解代謝的主要途徑。糖酵解(概念,反應(yīng)部位,反應(yīng)過程,關(guān)鍵酶及限速酶,主要反應(yīng)步驟,生理意義)。底物水平磷酸化的概念及有關(guān)反應(yīng)。糖有氧氧化(概念,反應(yīng)階段,進行部

9、位,關(guān)鍵酶,丙酮酸脫氫酶復(fù)合體的組成及作用,三羧酸循環(huán)的概念、反應(yīng)過程、關(guān)鍵酶及限速酶、生理意義,有氧氧化過程中ATP的生成)。磷酸戊糖途徑(概念,反應(yīng)部位,限速酶及生理意義)。糖原合成與分解(概念,反應(yīng)過程,限速酶,肌糖原與肝糖原分解的不同點)。糖異生(概念、原料、組織和細胞定位,反應(yīng)過程,關(guān)鍵酶,生理意義)。乳酸循環(huán)(概念及生理意義)。血糖及其調(diào)節(jié)(血糖的概念,正常人空腹血糖的水平,血糖的來源和去路,激素對血糖水平的調(diào)節(jié))?!臼煜ぁ刻堑纳砉δ埽墙徒獾恼{(diào)節(jié),巴斯德效應(yīng)。果糖、半乳糖和甘露糖的代謝?!玖私狻刻堑南?。糖醛酸途徑。多元醇途徑。磷酸戊糖途徑、有氧氧化、糖原合成與分解以及糖異

10、生的調(diào)節(jié)。底物循環(huán)的概念。血糖水平異常。(七)第五章     脂類代謝 【掌握】甘油三脂的合成代謝。脂肪動員(概念及過程,激素敏感性脂肪酶的概念和作用,脂解激素和抗脂解激素)。甘油的代謝。脂酸的-氧化。酮體(概念,酮體的生成、利用及意義)。脂酸的合成代謝(原料,部位,限速酶)。必需脂酸的概念及其種類。磷脂的種類、功能及組成特點,甘油磷脂中磷脂酰乙醇胺和磷脂酰膽堿的合成及降解。膽固醇的合成(部位、原料、限速酶、重要的反應(yīng)步驟及調(diào)節(jié)),膽固醇在體內(nèi)的轉(zhuǎn)化。血漿脂蛋白(分類及組成特點,合成部位及功能,載脂蛋白概念及功能)?!臼煜ぁ恐惖南臀占疤攸c,酮體生

11、成的調(diào)節(jié)。血漿脂蛋白代謝概況,血漿脂蛋白代謝異常。【了解】脂酸的其他氧化方式,不飽和脂酸的合成及脂酸合成的調(diào)節(jié),多不飽和脂酸的重要衍生物前列腺素、血栓噁烷及白三烯,鞘磷脂代謝。(八)第六章    生物氧化 【掌握】生物氧化的概念及特點。呼吸鏈(概念,組成呼吸鏈的復(fù)合體,呼吸鏈組成成分的作用及排列順序,人體重要的兩條呼吸鏈)。氧化磷酸化(概念,氧化磷酸化的偶聯(lián)部位,ATP合酶結(jié)構(gòu)和功能,影響氧化磷酸化的因素)。胞液中NADH的氧化。不需氧脫氫酶、需氧脫氫酶和氧化酶?!臼煜ぁ緼TP與其他高能化合物,能量與磷酸基的轉(zhuǎn)移,超氧物歧化酶,加單氧酶。【了解】化學(xué)滲透假說,過氧

12、化物酶體中的氧化酶類。加雙氧酶。線粒體內(nèi)膜的主要轉(zhuǎn)運載體。(九)第七章    氨基酸代謝 【掌握】蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值(必需氨基酸的概念及種類,食物蛋白質(zhì)的互補作用)。氨基酸脫氨基的主要方式(轉(zhuǎn)氨基作用及轉(zhuǎn)氨酶,氧化脫氨基作用,聯(lián)合脫氨基作用轉(zhuǎn)氨基與氧化脫氨基作用相偶聯(lián)、嘌呤核苷酸循環(huán)。)。氨的代謝(體內(nèi)氨的來源與去路,氨的轉(zhuǎn)運,氨的主要代謝去路尿素合成:鳥氨酸循環(huán)的概念及酶促反應(yīng)過程、尿素生成的意義)。一碳單位的概念、形式、轉(zhuǎn)運載體、生成及生理意義;甲硫氨酸循環(huán)的概念、過程及生理意義?!臼煜ぁ渴澄锏鞍踪|(zhì)消化及氨基酸的吸收。蛋白質(zhì)的腐敗作用。真核細胞內(nèi)蛋白質(zhì)降解的兩條途

13、徑。a酮酸的代謝。高血氨和氨中毒。氨基酸脫羧基生成的幾種胺類物質(zhì):-氨基丁酸、組胺、5-羥色胺、多胺的生成及生理作用。芳香族氨基酸代謝異常與遺傳性疾病的聯(lián)系?!玖私狻堪被岬拇x概況。尿素合成的調(diào)節(jié)。支鏈氨基酸的代謝。肌酸的合成。同型半胱氨酸與心血管疾病。半胱氨酸與胱氨酸的代謝。色氨酸的代謝。(十) 第八章    核苷酸代謝 【掌握】核苷酸合成的兩條途徑:從頭合成和補救合成。嘌呤核苷酸從頭合成的原料、能源、反應(yīng)階段,IMP的生成與轉(zhuǎn)變成AMP和GMP,補救合成的生理意義。嘌呤核苷酸分解代謝,尿酸與痛風(fēng)癥。嘧啶核苷酸從頭合成的原料、關(guān)鍵酶,UMP的生成及轉(zhuǎn)變成CMP

14、,脫氧核苷酸生成,TMP生成。【熟悉】核苷酸的生理功能,核苷酸補救合成的過程,抗代謝物及其作用,嘧啶核苷酸分解代謝。 【了解】食物核酸的消化吸收。嘌呤核苷酸、嘧啶核苷酸從頭合成、補救合成的調(diào)節(jié)。(十一) 第十章   DNA的生物合成(復(fù)制) 【掌握】DNA半保留復(fù)制概念。參與原核生物DNA復(fù)制的模板,底物,酶類(DNA聚合酶,解螺旋酶,DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶,引物酶及DNA連接酶)及單鏈DNA結(jié)合蛋白,復(fù)制的半不連續(xù)性和岡崎片段,領(lǐng)頭鏈和隨從鏈?!臼煜ぁ繌?fù)制叉、DNA生物合成過程。DNA損傷與修復(fù),逆轉(zhuǎn)錄現(xiàn)象和逆轉(zhuǎn)錄酶?!玖私狻繚L環(huán)復(fù)制,半保留復(fù)制的實驗依據(jù)。參與真核生物DNA復(fù)

15、制的物質(zhì)。真核生物的端粒和端粒酶。(十二) 第十一章   RNA的生物合成(轉(zhuǎn)錄) 【掌握】不對稱轉(zhuǎn)錄的概念。轉(zhuǎn)錄的模板,原料,RNA聚合酶(原核生物),轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的區(qū)別,模板鏈和編碼鏈,模板與酶的辨認(rèn)結(jié)合。真核生物的轉(zhuǎn)錄后修飾。【熟悉】轉(zhuǎn)錄過程(原核生物)。【了解】真核生物的RNA聚合酶。核酶的作用。(十三)第十二章 蛋白質(zhì)的生物合成(翻譯) 【掌握】翻譯的概念。參與蛋白質(zhì)生物合成的各種物質(zhì)(氨基酸,mRNA,核蛋白體,tRNA,蛋白質(zhì)因子)及其在蛋白質(zhì)生物合成中的作用。遺傳密碼的概念及特點。核蛋白體循環(huán)的概念及步驟?!臼煜ぁ吭松锏鞍踪|(zhì)的生物合成過程,S-D序列的含義

16、、RBS概念,翻譯后加工,信號肽?!玖私狻空婧松锏鞍踪|(zhì)的生物合成過程。蛋白質(zhì)合成后的靶向輸送。蛋白質(zhì)生物合成的干擾和抑制。 (十四) 第十三章   基因表達調(diào)控【掌握】基因表達的概念、時間性、空間性。原核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié):乳糖操縱子模式及調(diào)節(jié)機制。真核基因轉(zhuǎn)錄激活調(diào)節(jié)方式:順式作用元件和反式作用因子?!臼煜ぁ炕虮磉_的方式?;虮磉_調(diào)控的基本原理:基因轉(zhuǎn)錄激活受到轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白與啟動子相互作用的調(diào)節(jié)。原核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特點。真核基因組結(jié)構(gòu)特點。真核基因表達調(diào)節(jié)特點?!玖私狻吭松锓g水平調(diào)節(jié)。真核基因轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)節(jié)、翻譯水平的調(diào)節(jié)(十五) 第十六章   血

17、液的生物化學(xué) 【掌握】正常人血漿蛋白的總濃度,A/G比值。鹽析法、電泳法對血漿蛋白質(zhì)進行分類。血漿蛋白的主要功能。血紅素合成的基本原料、合成場所、限速酶?!臼煜ぁ垦旱慕M成,血漿的主要成分,非蛋白含氮化合物及非蛋白氮的概念。紅細胞的糖代謝特點,2,3-BPG對血紅蛋白運氧的調(diào)節(jié)功能。血紅素合成的反應(yīng)階段及調(diào)節(jié)?!玖私狻垦獫{蛋白的性質(zhì)。(十六) 第十七章  肝的生物化學(xué) 【掌握】肝臟生物轉(zhuǎn)化作用的概念、生物學(xué)意義,肝臟生物轉(zhuǎn)化的一般反應(yīng)過程(一相、二相反應(yīng))及其第一相反應(yīng)所需的酶類,重要的結(jié)合反應(yīng)和結(jié)合劑。膽汁酸的來源、種類,初級膽汁酸的生成,次級膽汁酸的生成和腸肝循環(huán)。膽色素的來源、

18、血中運輸、肝內(nèi)轉(zhuǎn)變、結(jié)合膽紅素在腸道中的變化及膽色素的腸肝循環(huán)?!臼煜ぁ可镛D(zhuǎn)化的影響因素。膽汁酸合成過程概要。血清膽紅素與黃疸?!玖私狻扛闻K在物質(zhì)代謝中的作用。黃疸的分型。四、教學(xué)方法與手段1理論教學(xué):教師在充分備課、書寫教案、集體備課的基礎(chǔ)上,利用精心制作的多媒體教學(xué)課件,配合動畫演示等加以講授,加強直觀教學(xué),以加深學(xué)生對有關(guān)內(nèi)容的理解和記憶。授課過程中采用啟發(fā)誘導(dǎo)、實例分析等多種形式,突出重點和難點,以調(diào)動學(xué)生的思維活動,培養(yǎng)分析、解決問題的能力。及時了解學(xué)生學(xué)習(xí)情況,針對存在的問題進行答疑。2實驗教學(xué):利用小班授課的有利條件,展開啟發(fā)式、討論式教學(xué),使學(xué)生能夠?qū)⒗碚撝R貫穿于實驗過程之

19、中。具體要求詳見生物化學(xué)實驗大綱。五、各教學(xué)環(huán)節(jié)學(xué)時分配 內(nèi) 容課堂講授實驗課小計(一)緒論1(二)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能6(三)核酸的結(jié)構(gòu)與功能4(四)酶7(五)維生素與微量元素2(六)糖代謝8(七)脂類代謝7(八)生物氧化5(九)氨基酸代謝5(十)核苷酸代謝3(十一)DNA生物合成5(十二)RNA生物合成4(十三)蛋白質(zhì)的生物合成5(十四)基因表達調(diào)控4(十五)血液的生物化學(xué)2.5(十六)肝的生物化學(xué)3.5(十七)生化實驗基本操作 3(十八)肝組織中核酸的提取 3(十九)核酸組分的鑒定 3(二十)琥珀酸脫氫酶的作用及競爭性抑制 1.5(二十一)酪氨酸酶的催化作用 1.5(二十二)鄰甲苯胺法測定血

20、糖 3(二十三)血清蛋白質(zhì)乙酸纖維素薄膜電泳 3(二十三)雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量3總 計722193六、考核方式 本課程采用實驗成績與理論考試相結(jié)合的考核方法。理論考試采用筆試、閉卷;實驗成績包括實驗報告及平時成績、實驗考試等環(huán)節(jié)。各教學(xué)環(huán)節(jié)占總分的比例:期末考試:70% 實驗報告及平時成績:20% 實驗考試:10%七、推薦教材和教學(xué)參考書  教 材:生物化學(xué)(第7版),查錫良主編,人民衛(wèi)生出版社,2008。參考書:生物化學(xué)(第3版),王鏡巖編著,高等教育出版社,2002。 普通生物化學(xué)(第3版),鄭集編著,高等教育出版社,1998。生物化學(xué)應(yīng)試指南周愛儒編著,北京醫(yī)科大學(xué)出版社,2

21、000。生物化學(xué)解題精粹戴余軍編著,崇文書局,武漢,2002。八、本大綱主要起草人、審閱人主要起草人:陳治文、段巧玲、夏 俊、朱光能、張玉心、馬 佳 2009年 5 月 20 日審閱人:陳治文2009年 5 月 21 日 醫(yī)學(xué)檢驗系 院(系)、部 生物化學(xué)與分子生物學(xué) 教研室 附生物化學(xué)實驗教學(xué)大綱生物化學(xué)實驗(第3版)教學(xué)大綱課程名稱:生物化學(xué) 英文名稱:biochemistry課程性質(zhì): 學(xué)科基礎(chǔ)課程(非獨立開課)適用專業(yè):臨床醫(yī)學(xué)本科考核方式:操作考核并提交實驗結(jié)果占 10%、實驗報告及平時成績占 20 %,實驗占總成績的30%。課程簡介: 生物化學(xué)實驗是一門重要的實驗性基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)課程,也

22、是臨床醫(yī)學(xué)本科教學(xué)的必修課程。與理論教學(xué)既有聯(lián)系又相對獨立,有自身的規(guī)律和系統(tǒng),是生物化學(xué)教學(xué)的重要組成部分。實驗課教學(xué)注重學(xué)生的基本知識,基本技能的培養(yǎng),促進學(xué)生綜合能力的提高,培養(yǎng)學(xué)生初步的科研能力??倢W(xué)時:93 理論教學(xué)學(xué)時:72 實驗學(xué)時:21 實驗類別:綜合性及驗證性實驗實驗個數(shù):7 實驗教材及參考書:醫(yī)用生物化學(xué)實驗(第3版),自編教材,2007年。生物化學(xué)實驗教程黃汝彬、丁昌玉主編,世界圖書出版公司,1999。生物化學(xué)方法和技術(shù)(第2版),張龍翔編著,高等教育出版社,1997。生物化學(xué)實驗技術(shù)原理及應(yīng)用(第3版)趙永芳編著,科學(xué)出版社,2003。實驗一 生化實驗基本操作一、類別:

23、驗證性實驗。二、實驗?zāi)康暮鸵螅哼M行正規(guī)的實驗基本操作訓(xùn)練,使學(xué)生熟悉各種吸量管, 并能熟練、正確地使用之。了解分光光度計的各個部件的作用,掌握比色原理,正確使用比色計。培養(yǎng)學(xué)生仔細觀查實驗變化,如實做好實驗記錄,認(rèn)真書寫實驗報告的習(xí)慣。三、實驗內(nèi)容:1介紹吸量管的種類和使用方法2講解分光光度法和721-分光光度計的使用3Cu2+比色測定四、學(xué)時:3五、主要儀器設(shè)備:多種類型吸量管、721-分光光度計六、實驗中注意事項:1使用吸量管前,先根據(jù)需要選擇適當(dāng)?shù)奈抗? 其總?cè)萘孔詈玫扔诨蛏源笥谌∫毫?臨用前須看清刻度。 2使用比色計前須熟悉其型號及性能,嚴(yán)格按規(guī)程進行操作, 準(zhǔn)確記錄比色讀數(shù)。3掌

24、握Cu2+比色測定的原理、操作過程及結(jié)果計算。 實驗二 肝組織中核酸的提取一、類別:驗證性實驗。二、實驗?zāi)康暮鸵螅和ㄟ^實驗掌握動物肝臟中核酸的提取原理及方法、核酸的種類及在細胞內(nèi)的存在形式、離心機的使用方法。熟悉核酸提取的操作過程。三、實驗內(nèi)容:1動物肝臟中核酸的提?。河盟崛『说鞍?,苯酚破壞核酸與蛋白質(zhì)之間的結(jié)合鍵,乙醚抽提除去蛋白質(zhì)及其雜質(zhì),最后用乙醇沉淀核酸。2介紹離心機的使用方法。四、學(xué)時:3五、主要儀器設(shè)備:離心機、研缽六、實驗中注意事項:1用新鮮肝組織(可取自小鼠、兔和豬等)制備肝勻漿時,必須充分研磨肝組織。2苯酚有腐蝕性,切勿與皮膚接觸,注意安全。3使用離心機時,離心管須對稱放

25、置和配平重量,正確調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速及離心時間,以防損壞離心機。實驗三 核酸組分的鑒定一、類別:驗證性實驗。二、實驗?zāi)康暮鸵螅赫莆砧b定嘌呤堿、磷酸、核糖與脫氧核糖的原理及方法。熟悉組成核酸(DNA和RNA)的基本單位是核苷酸,后者進一步水解可得到基本產(chǎn)物磷酸,戊糖(核糖或脫氧核糖)及堿基(嘌呤或嘧啶),驗證這些水解產(chǎn)物以證實動物組織中DNA和RNA的存在。三、實驗內(nèi)容:1核酸的水解: 核酸沉淀在酸性條件下(5H2SO4)水解。2核酸水解產(chǎn)物的鑒定:(1)磷酸的鑒定: 磷酸能與鉬酸試劑作用生成磷鉬酸,后者在還原劑氨基萘酚磺酸鈉的作用下還原成藍色的鉬藍。(2)嘌呤堿的鑒定: 嘌呤堿能與苦味酸作用形成針狀結(jié)

26、晶。(3)核糖的鑒定: 核糖與強酸共熱生成糠醛,后者與苔黑酚(3,5,-二羥甲苯,orcinol)反應(yīng),縮合成綠色化合物。(4)脫氧核糖的鑒定: 脫氧核糖在強酸中加熱可生成-羥基-酮基戊醛,后者與二苯胺作用生成藍色化合物。四、學(xué)時:3五、主要儀器設(shè)備:離心機、沸水浴、研缽六、實驗中注意事項:1嘌呤堿鑒定時,混勻后即靜置,不要反復(fù)振搖試管。2該實驗為定性實驗,需記錄實驗結(jié)果并加以解釋。實驗四 琥珀酸脫氫酶的作用及競爭性抑制一、類別:驗證性實驗。二、實驗?zāi)康暮鸵螅和ㄟ^實驗加深對競爭性抑制作用的理解,掌握競爭性抑制作用的概念、特點,熟悉丙二酸對琥珀酸脫氫酶的競爭性抑制作用。三、實驗內(nèi)容:1心肌提取

27、液的制備2琥珀酸脫氫酶的催化作用及競爭性抑制:心肌組織中含有琥珀酸脫氫酶,能催化琥珀酸脫氫轉(zhuǎn)變成延胡索酸。以甲烯藍為人工受氫體,在隔絕空氣的條件下,通過甲烯藍的褪色程度來判斷琥珀酸脫氫酶的活性,并籍此觀察丙二酸對琥珀酸脫氫酶活性的抑制作用。3仔細觀察各管甲烯藍褪色情況,記錄各管褪色順序,認(rèn)真分析、解釋實驗結(jié)果。4討論本實驗的設(shè)計思路。四、學(xué)時:1.5五、主要儀器設(shè)備:1玻璃研缽2漏斗3恒溫水浴箱六、實驗中注意事項:1充分研磨肌肉組織,使肌細胞膜破裂,釋放出足量的琥珀酸脫氫酶。 2加入液體石臘后,在觀察結(jié)果的過程中,不要振搖試管,以免溶液與空氣接觸,甲烯白重新變藍。 實驗五 酪氨酸酶的催化作用一

28、、類別:驗證性實驗。二、實驗?zāi)康暮鸵螅和ㄟ^實驗掌握氧化酶的概念,酪氨酸酶的催化作用及黑色素的形成。熟悉酪氨酸酶在植物中的分布。了解人體缺乏該酶可導(dǎo)致白化病發(fā)生。三、實驗內(nèi)容:1馬鈴薯抽提液的制備: 2酪氨酸酶的催化作用:馬鈴薯中富含酪氨酸酶,該酶可直接作用于底物多巴生成多巴醌,然后經(jīng)過一系列的反應(yīng),最終生成黑色素。從而驗證酪氨酸酶對酪氨酸的催化作用。四、學(xué)時:1.5五、主要儀器設(shè)備:1玻璃研缽2漏斗3恒溫水浴箱六、實驗中注意事項:1煮沸馬鈴薯液時,小心勿使液體濺出。2加液體石蠟時宜斜執(zhí)試管,沿管壁緩緩加入,不要產(chǎn)生氣泡;加入的液體石蠟必需完全覆蓋液面,以隔絕空氣。實驗六 鄰甲苯胺法測定血糖一、類別:驗證性實驗。二、實驗?zāi)康暮鸵螅赫莆锗徏妆桨贩y定血糖的原理和方法,了解血糖測定的臨床意義。三、實驗內(nèi)容:1在熱的醋酸溶液中,葡萄糖醛基與鄰甲苯胺縮合、脫水,生成希夫氏堿(Schiff base),經(jīng)分子重排生成藍綠色化合物,其顏色深淺在一定范圍內(nèi)與血糖濃度成正比。2根據(jù)上述原理,用比色法測定血清中葡萄糖的含量。四、學(xué)時:3五、主要儀器設(shè)備:1刻度吸量管2721型分光光度計六、實驗中注意事項:1在各管中準(zhǔn)確加入各種試劑,特別是血漿吸取量務(wù)必準(zhǔn)確。2熟練使用721型分光光度計,讀取各管

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